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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

COMPUESTOS BIOACTIVOS Y CAPACIDAD ANTIOXIDANTE EN LOS EXTRACTOS DE HOJAS Y


TALLO DE AJOS SACHA (Mansoa alliacea), EFECTO DE LA TEMPERATURA Y PH EN SU
ESTABILIDAD
Autor: QUIROGA JULCA, Pablo César

Docente : Dra. ORDOÑEZ GOMEZ, Elizabeth S


Curso: Transferencia de tecnología.
Integrantes : DAVILA BUENDIA, Delia Zully.
MILLA AGUIRRE, Bruno.

ROSAS CONDEZO, Dalila.

TRUJILLO SALDAÑA, Joel.


TINGO MARIA - 2022
I. INTRODUCCIÓN

Hábitat Beneficios

Aliviar dolores musculares.


Mitigar el reumatismos, artritis,
Es una planta que crece en los refriados, fertilidad, inflamación.
bosques secos o húmedos.
Crece en las regiones de Loreto,
San Martín, Huánuco y Amazonas.

Ajos Sacha
(Mansoa alliacea) Se realizará análisis enfocándonos en
También se puede emplear
Usa como condimento, por su olor a sus compuestos bioactivos de las hojas
ajo y cebolla y también y tallos la cual será de gran ayuda para
infusiones.
curar los males ya mencionados
Perteneciente a la familia
anteriormente.
Bignoniaceae.

- Determinar la capacidad de polifenoles totales y antocianinas en hojas y tallos de ajos sacha.


Objetivos - Determinar la magnitud antioxidante mediante los radicales libres ABT y DPPH en hojas y tallos de ajos sacha.
- Determinar el efecto de la temperatura y pH en la estabilidad del extracto.
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
Origen
Composición fisicoquímica Metabolitos
Ajos sacha (Mansoa alliacea) .

Esteroides como el beta- Metabolitos primarios


Antiinflamatori
ay sitosterol, estrigmasterol,
antibacteriana duocosterol y fucosterol
(DOMÍNGUEZ ,2014). Compuestos químicos básicos, que se
consiguen básicamente en metabolismo
iniciales que tiene procesos químicos que la
LATINOAMERICA planta realiza (PALACIOS, 2000).
Responsable del Compuestos de azufre como
aroma y gusto aliina y la alicina (CALERO,
2012).

También contiene “carbohidratos, proteínas, alcaloides, Metabolitos secundarios:


flavonas, saponinas, sulfuro de dialil, sulfuro de dimetil,
ácido ascórbico y vitamina E, microelementos como
selenio y cromo” (CALERO, 2012). Procesos químicos muy específicos de cada
planta, que vienen a ser un conjunto de
reacciones que da como resultado la
formación de precursores químicos
(PALACIOS, 2000).
se encuentran en Huá nuco,
Amazonas, Loreto y San PERÚ
Martín RENGIFO (2007)
Extracción soxhlet Polifenoles totales Prueba de actividad antioxidante sobre
Para la cuantificación el radical 2,2-difenil-2-picrilhidrazil
utilizado es el método
espectrofotométrico de
(DPPH)
Se utilizan para
fitoquímicos no Folin-Ciocalteu evalua
volátiles que tienen fenoles totales en productos Se fundamenta en la medida de la
solubilidad limitada, naturales (SUÁREZ, 2015). eliminación de radicales libres presentes en
se intensifica la el DPPH por parte de los compuestos
reacción con el
antioxidantes; el reactivo es de color
disolvente a través del
calor (GONZÁLEZ y púrpura (SUÁREZ, 2015).
VALENCIA, 2014). Factores que determinan el color y la
estabilidad Ensayo de actividad antioxidante sobre
el radical 2,2’-azinobis(3-
La estabilidad del color es afectado por factores como:
estructura química, existencia de oxígeno y concentración de etilbenzotiazoline-6-ácido sulfónico)
Cromatografía en capa fina ácido ascórbico y actividad de agua (GARZÓN ,2008). (ABTS0+)
Método muy utilizado para el análisis de
muestras biológicas, extractos de plantas con
Una fase estacionaria y Capacidad antioxidante naturaleza hidrófila o lipófila o para compuestos
está formado por una
capa absorbente puros (SUÁREZ, 2015).
mantenido sobre una
placa o soporte Una molécula que tiene la capacidad de retardar o prevenir la
oxidación de otra molécula (CASTAÑEDA et al.,2008).
(VALENCIA, 2014).
III. MATERIALES Y
MaterialesMÉTODOS
Lugar de ejecución Metodología experimental
• Obtención de las muestras de hojas y tallo de ajos
 Laboratorio de nutrición animal.
sacha.
- Matraces Erlenmeyer. - Ajos Sacha
 CIDBAM Crisoles.
- Vasos de precipitación. -
-
Pipetas (Mansoa alliacea).
Probeta graduada. graduadas.
- Papel filtro. - Tubos de ensayo.
- Bolsas de. Recolección Hojas y tallos.
Polipropileno.
Secado 40°C/ 24 h.
Equipos
Molido - 10 g muestra.
- Espectrofotómetro Geneys56.
UNAS – Tingo María - Agitador magnético 625. - 250 mL hexano.
- Potenciómetro. Desengrasado - 5 a 6 h.
- Aparato Soxhlet. - 45°C/15 min.
Materia prima - Refractómetro. Envasado
- Bureta automática.
Refrigeración.
Almacenamiento
- Hojas y tallos de ajos sacha
5 g muestra.
(Mansoa alliacea).
Extracto hidroalcohólico 50 mL solución hidroalcohólica,
Reactivos y solventes macerado (72 h), filtrado y refrigerado.

- 1,1 diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) 90%. Figura 1. Diagrama para la obtención de las hojas y tallo de ajos sacha.
- (3-etilbenzotiazoline6ácido sulfónico) (ABTS), 98%
- Persulfato de Potasio (K2S2O8). Caracterización químico proximal
- Carbonato de sodio (Na2CO3).
- Ácido gálico (C7H6O5) al 98,1%. (AOAC – 1997)
- Hexano (C6H14). Humedad, proteína, grasa, fibra, ceniza y
- Silicagel (60-200 Mesh), etc. carbohidratos.
Comité Brisas del Huallaga
Metodología experimental
Caracterización fitoquímica de Cuantificación de polifenoles totales Determinación de la capacidad antioxidante
las hojas y tallo de ajos sacha en hojas y tallo de ajos sacha en las hojas y tallo de ajos sacha
• Ensayo de solubilidad Lectura en espectrofotómetro UV/VIS a 700 nm.
• Capacidad de inhibir radical 1,1-difenil-2-
LOCK DE UGAS ( 1994). FOLIN (1994).
Preparación de la curva estándar picrilhidrazil (DPPH).
Utilizando solventes de polaridad (Espectrofotómetro de UV/VIS a 517 nm cada 30 s/ 10 min).
(hexano, acetona, etc). Expresados en equivalente de
ácido gálico (g EAG/100 g). %Inhibición DPPH =( ) x 100
• Ensayos cromatográficos
Utilizando efluente metanol y como fase estacionaria
Análisis estadístico Análisis estadístico:
una placa de silica. (UV/V 254 y 365 nm).
Se utilizó (DCA), la diferencia estadística significativa
Se uso (DCA) propuesto por MENDIBURU (2005); los
tratamientos que presentaron diferencia estadística fue calculado mediante la prueba de Tukey p<0,05.
Hojas y tallos 10 g cada muestra
fueron sometidos al ensayo de Tukey p<0,05.
Maceración metanólica/
3 días.
• Capacidad de inhibir radical libre 2,2-azinobis(3-
Solución metanólica etilbenzotiazoline-6-ácido sulfónico) (ABTS0+)
Cuantificación de antocianinas en las
(Espectrofotómetro UV/VIS a 734 nm cada 30 s/ 5 min).
Concentrar
hojas y tallo de ajos sacha
Extracto metanólico Método de pH-diferencial con una lectura UV/VIS a 700
nm ZAPATA et al.,(2014). %Inhibición ABTS°+=( ) x 100

Marcha de Marcha La aglomeración de las antocianinas se manifestó como


Técnicas mg cianidina3-glucósido/L de esencia considerando la
solubilidad fitoquímica cromatográficas Análisis estadístico:
ecuación:
Se utilizo (DCA) MENDIBURU (2005), para los tratamientos que
Solventes de
Buffer pH = 1: presentaron desigualdad significativa se usó el ensayo de Tukey
polaridad
creciente
Metabolitos
secundarios
Cantidad y tipo de
metabolitos Buffer pH = 4,5:
𝐴𝑇 ( 𝑚𝑔𝐿 )= (Δ 𝐴)(𝑃𝑀(𝜀)(𝑙)
)(𝐹𝐷)(1000)
p<0,05.
secundarios
Figura 2. Esquema para la marcha fitoquímica en hojas y tallos Análisis estadístico: (DCA), la cual tuvo desigualdad
de ajos sacha. estadística se fijó en el ensayo Tukey p.
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Caracterización fitoquímica
Ensayo fitoquímico TSAI Y ELMASTAS
Caracterización químico proximal (2007), López y
Ajos sacha Padro (2003),
Solventes
Hojas Tallo Metanol =
Éter de petróleo ++ + Extracción de
Benceno ++ + compuestos
Parte de la planta analizada Cloroformo ++ + antioxidantes.
Análisis químico proximal Hoja Tallo Acetona - -
Etanol ++ ++ (-) Ausente
BH1 BS2 BH1 BS2 Metanol +++ +++ (+) Poca cantidad
Agua destilada  +++ ++  (++) Regular cantidad
Humedad 62,79 0,48ª - 51,50 0,49b -
(+++) Abundante
Proteína (%) (N x 6,25) 2,04 0,00ª 5,47 0,08ª 0,92 0,01b 1,90 0,04b cantidad

Grasa (%) 3,36 0,04ª 9,02 0,16ª 0,67 0,02b 1,94 0,03b Marcha fitoquímica
Fibra (%) 9,08 0,12 b
24,42 0,45 b
20,94 0,58 ª
43,20 ª
Ajos sacha
Tipo de reacción Compuestos
Ceniza (%) 1,49 0,04 b
4,01 0,06 b
4,87 0,03 ª
10,05 0,05 ª Hojas Tallo
Gelatina ++ + Taninos
Carbohidratos (%) 21,24 0,48ª  57,07 0,66ª  21,10 0,94ª  43,48 ,56b
Cloruro férrico + + Fenoles
Mayer - - Alcaloides
CALERO (2012), obtuvo un 75,60% de humedad en la hoja de ajo sacha.
NaOH - - Quinonas
Molish +++ ++ Glicósidos
CALERO (2012), contenido de grasa 0,53% en raíces de ajo sacha.
Dragendorf ++ + Alcaloides
Ninhidrina  - -  Aa libres
La fibra y las cenizas desigualdad estadística relevante.
LÓPEZ Y PADRO (2003), taninos (++ y +) respectivamente, MONSERRATE
CALERO (2012), raíces de ajo de monte, CHO = 25.47%. (2014), alcaloides, quinonas y aa libres (-), Chang et al. (2013), taninos
(+) y alcaloides, quinonas y aa libres (-).
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Cuantificación de polifenoles Polifenoles totales Cuantificación de antocianinas
Curva estándar Polifenoles totales (g
Muestras Tratamientos Muestras Tratamientos Antocianinas (g
EAG/100g) EAG/100g)
Hojas ASH 18,57 0,64b Hojas ASH 0,30 0,06ª
Tallo AST 8,73 0,12a  Tallo AST 0,27 0,04b 

Polifenoles totales, curva patrón 0,8 – 0,01 mg/mL ac.


gálico.

PATEL et al. (2013), ajos sacha 1,58 – 16,2 mg EAG/g en


la planta, Raíces ++ Hojas +. GARZÓN (2008), en la hoja y tallo (verde),
JURADO et al. (2016), fruto aguaymanto 149 1,62 mg/Eq Antocianinas (Entre rojo - garzo) pigmento
hidrosoluble.
ac. gálico/100g.
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Capacidad antioxidante
Coeficiente de inhibición (IC50) ABTS0+
Coeficiente de inhibición (IC50) DPPH.
Muestras Tratamientos IC50 (mg/mL)
Muestras Tratamientos IC50 (mg/mL) Hojas ASH 0,45 0,13ª
Hojas ASH 1,21 0,09 ª
Tallo AST 0,51 0,04a 
Tallo AST 1,17 0,15a 
DOROTEO et al. (2013), uña de gato peruana IC 50 0,47 0,02
DOROTEO et al. (2013), uña de gato peruana IC 50 12,05 mg/mL .
0,47 g extracto/mL .
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Efecto temperatura y pH estabilidad

En función DPPH En función Polifenoles

DPPH IC50 Polifenoles totales


Extracto Temperatura pH Extracto Temperatura pH
(mg/mL) (g EAG/100g)

Hoja 40 3,5 1,87 0,02ab Hoja 40 3,5 9,40 ef


Hoja 40 4,0 1,85 0,01ab Hoja 40 4,0 12,32 0,89e
Hoja 40 4,5 1,82 0,09bc Hoja 40 4,5 13,60 0,65e
Hoja 50 3,5 1,64 0,07de Hoja 50 3,5 19,33 ,74d
Hoja 50 4,0 1,40 0,01gh Hoja 50 4,0 21,63 ,52cd
Hoja 50 4,5 1,40 0,03gh Hoja 50 4,5 24,62 ,48bc
Hoja 60 3,5 1,33 0,03h Hoja 60 3,5 28,25 0,97b
Hoja 60 4,0 1,13 0,00i Hoja 60 4,0 34,57 ,25ª
Hoja 60 4,5 0,95 0,07j Hoja 60 4,5 37,76 ,16ª
Tallo 40 3,5 1,97 0,00a Tallo 40 3,5 8,60 0,62f
Tallo 40 4,0 1,72 0,01cd Tallo 40 4,0 9,70 ,19ef
Tallo 40 4,5 1,53 0,01ef Tallo 40 4,5 10,68 ,88ef
Tallo 50 3,5 1,47 0,01fg Tallo 50 3,5 11,60 0,39ef
Tallo 50 4,0 1,40 0,30gh Tallo 50 4,0 20,52 0,20cd
Tallo 50 4,5 0,90 0,02j Tallo 50 4,5 19,55 0,42d
Tallo 60 3,5 0,87 0,05j Tallo 60 3,5 27,23 0,92b
Tallo 60 4,0 0,64 0,05k Tallo 60 4,0 21,52 ,23cd
Tallo 60 4,5  0,62 0,07k Tallo 60 4,5  26,26 ,20b
V. CONCLUSIÓNES

En la capacidad de polifenoles totales en Mansoa alliacea fue de 18,57 ±


0,64g EAG/100g para las hojas y 8,73 ± 0,12g EAG/100g para el tallo, con
un contenido de antocianinas de 0,30 ± 0,06 EAG/100g en las hojas y 0,27
± 0,04g EAG/100g en el tallo.

La capacidad antioxidante en las hojas y tallo de Mansoa alliacea


mediante los radicales libres DPPH fueron 121 ± 0,09 I(mg/mL) y 1,17 ±
0,15 I(mg/mL) respectivamente y con el radical ABT fueron 0,45 ± 0,13
I(mg/mL) y 0,51 ± 0,04 I (mg/mL) respectivamente.

Existió mayor capacidad antioxidante en el tallo con un valor de


0,62 ± 0,07 I(mg/mL) a una temperatura de 60°C a un pH de 4,5 por
otro lado se encontró mayor contenido de polifenoles con un valor de
37,76 ± 1,16g EAG/100g a una temperatura de 60°C a un pH de 4,5 en
hojas.

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