1

ISSN 2127 – 5471 (Version Impresa)

ISSN 2231 – D154 (Version Electronica)

UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

VOLUMEN N°1
HUANCAYO - PERÚ
DICIEMBRE 2021
Revista Científica de la
Facultad de Ciencias de la
Salud - Escuela Académica
Profesional de Farmacia y
Bioquímica
UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

VOLUMEN Nº 1 DICIEMBRE 2021 NÚMERO 1

AUTORIDADES

Dr. José Castillo Custodio

RECTOR

Dr. Wilber G. Vásquez Vásquez Dr. Rubén Dario Tapia Silguera

VICERRECTOR DE INVESTIGACIÓN VICERRECTOR ACADÉMICO

Dr. Williams Olivera Acuña

DECANO

COMITÉ EDITOR
Mg. Patricia Palacios Simeón
ESPECIALISTA QUÍMICO FARMACÉUTICA
3

Vol. 1 Nº 1 diciembre 2021

REVISTA CIENTÍFICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

Rev. Univer. FyB.

ISSN 2127-5471 (Versión Impresa)
ISSN 2231-0154 (Versión Electrónica)
Comité Editorial Director
Dr. Pedro Rengifo Gratelli

Miembro
Est. Esther, Santamaría Miraval

Editor Principal
Mg. Patricia Palacios Simeón

Dirección:
Av. Calmell del Solar Cda. 20 S/N Urb. Chorrillos Huancayo
Teléfono: (0051) 064201662

Correspondencia:
farmacia@mail.upla.edu.pe

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Imprenta Digicolor Jos Impresores SAC Jr. Cuzco No 414 Huancayo
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Tiraje, Frecuencia y distribución:

1 por semestre

Reserva de derechos:
Prohibida la reproducción total o parcial de los artículos publicados en esta revista sin autorización.

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El contenido de cada artículo es de responsabilidad exclusiva del autor o autores y no compromete la
opinión de la revista.

Revista arbitrada:
Sistema por pares

Revista indizada en:

FASPEX
 Rev. Univer FyB. 2021; 1(1): 4-9

ESTUDIO FARMACOGNÓSTICO Y CUANTIFICACIÓN DE

FLAVONOIDES TOTALES DE LAS HOJAS DE Bixa orellana (ACHIOTE)
PROCEDENTE DE HUANUCO-2021.

PHARMACOGNOSTIC STUDY AND QUANTIFICATION OF TOTAL

FLAVONOIDS FROM Bixa orellana (ACHIOTE) LEAVES FROM HUANUCO-
2021
1
Santamaría- Miraval E.
2
Palacios –simeon P.
1
Estudiante de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Peruana Los Andes-Perú.
2
Docente de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Peruana Los Andes de Taller de
Investigación II-Perú.

Resumen

El presente trabajo de investigación estuvo orientado a la determinación preliminar de los Fito

constituyentes mediante reacción de coloración, precipitación y cuantificación espectrofotométrica de
flavonoides totales presentes en las hojas de Bixa orellana (achiote). La especie fue recolectada en
Huánuco. Los métodos utilizados son los que describen la Norma Ramal para drogas crudas del MINSAP.
La muestra estuvo constituida por 2kg de la hoja del bixa orellana (achiote).como resultados se encuentran
dentro de los rangos permisibles de ésta. Se preparó el extracto por reflujo, al cual se le determinó: tamizaje
fotoquímico propuesta por Olga Look (alcaloides, triterpernos/esteroides, antocianinas, flavonoides,
saponinas y taninos.), así mismo se cuantificó los flavonoides totales expresados como quercetina mediante
espectrofotometría UV/Visible a 256 nm (longitud de onda de máxima absorción), encontrándose en un
porcentaje promedio de 18.25%. Los resultados obtenidos fueron evaluados en el programa Microsoft
Excel 2010 de Microsoft Office para la realización del análisis estadístico correspondiente. Concluyéndose
Se encontró metabolitos activos tales como, flavonoides, taninos, triterpernos y esteroides y se determinó la
cantidad de flavonoides en 2 kg de las hojas secas de bixa de Orellana (Achiote) con el método
ESPECTROFOTOMETRIA UV VISIBLE nos dio como resultado 14.8mg/ml de flavonoides totales
expresados en quercetina.
Palabras clave: identificación preliminar, extractos, Bixa orellana, flavonoides, cuantificación,
espectrofotometría.

SUMMARY
The present research work was oriented to the preliminary determination of the phytoconstituents by means
of a coloration reaction, precipitation and spectrophotometric quantification of total flavonoids present in the
leaves of Bixa orellana (achiote). The species was collected in Huanuco. The methods used are those
described in the MINSAP Ramal Standard for crude drugs. The sample consisted of 2kg of the leaf of the
bixa orellana (achiote). As results are within the permissible ranges of this. The extract was prepared by
reflux, which was determined: phytochemical screening proposed by Olga Loock (alkaloids, triterpernes /
steroids, anthocyanidins, flavonoids, saponins and tannins.), Likewise the total flavonoids expressed as
quercetin were quantified by UV / spectrophotometry. Visible at 256 nm (wavelength of maximum
absorption), being at an average percentage of 18.25%. The results obtained were evaluated in the Microsoft
Office program Microsoft Excel 2010 to carry out the corresponding statistical analysis, concluding that
active metabolites were found such as flavonoids, tannins, triterpin and steroids and the amount of flavonoids
in 2 kg of the leaves was determined. Dried bixa de Orellana (Achiote) with the VISIBLE UV
SPECTROPHOTOMETRY method gave us as a result 14.8mg / ml of total flavonoids expressed in
quercetin.
Keywords: preliminary identification, extracts, Bixa orellana, flavonoids, quantification, spectrophotometry.
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I estrecha relación con la tierra y el medio

N ecológico, contienen sustancias químicas
T terapéuticas funcionales y nutritivas
R capaces de complementar la alimentación
O con efecto purificador y regenerador que
D requiere ser validado y demostrado como
U virtudes de plantas funcionales y
C medicinales que deben ser clasificados en
C base al contenido de sus principios activos
I como: alcaloides, saponinas, hormonas,
O ácidos orgánicos, componentes
N nitrogenados, vitaminas, sales, minerales
Las plantas con propiedades medicinales etc., localizados obviamente en diferentes
fueron las primeras medicinas utilizadas en partes anatómicas y específicas de la planta
forma empírica para la cura de como ocurre con la quinina que
enfermedades que padecía el hombre; así prioritariamente se concentra en la corteza
diferenciaron las medicinales de las que son de la quina y es responsable de la actividad
tóxicas, eran conocimientos transmitidos terapéutica 6.
oralmente por la carencia de escritura. Al Para el análisis del contenido de
desarrollarse la escritura, y con la aparición metabolitos secundarios en drogas
del papiro como soporte de la misma, se vegetales se emplean diversas marchas
comenzó a recoger información. Esto hizo fitoquímica, las cuales utilizan en diferentes
que se profundizara en el conocimiento de solventes que permiten el aislamiento de
las especies vegetales que poseen los principios activos o constituyentes de
propiedades medicinales y ampliar su las drogas, identificándolos por medio de
experiencia en el empleo de los productos reacciones químicas cualitativas de
que de ellas se extraen 1,2. coloración y precipitación. Un gran
En la actualidad existe un reconocimiento porcentaje de los principios activos de las
del empleo de fuentes naturales y en plantas están comprendidos dentro de los
especial de la fitoterapia, como la ciencia llamados metabolitos secundarios que son
que estudia la utilización de los productos compuestos químicos de estructura
de origen vegetal con la cual se justifica en relativamente compleja y distribución más
muchos casos por razones económicas, la restringida y más característica de fuentes
presencia de reacciones adversas de botánicas específicas que los llamados
fármacos sintéticos, el mejor metabolitos primarios, universalmente
conocimiento químico, farmacológico y distribuidos y que participan en la actividad
clínico de las drogas vegetales y sus celular de todo ser viviente.7
productos derivados, el desarrollo de Las plantas medicinales son definidas por
métodos analíticos que facilitan el control la Organización Mundial de la Salud
de la calidad, el desarrollo de nuevas (OMS) como toda especie vegetal en la que
formas de preparación y administración de el todo o una parte está dotada de actividad
los medicamentos fitomedicamentos. Con farmacológica. Esta última corresponde a
una tendencia en los países desarrollados al compuestos químicos propios de la planta,
retorno del empleo de productos naturales que están sometidos a variables físicas,
en el tratamiento de diversas afecciones; en tales como la humedad del suelo,
lo que se destaca el importante papel de la condiciones de luz, temperatura y otros 8.
Organización Mundial de la Salud (OMS), .
De acuerdo a un estudio basado en
en cuanto a la utilización de la fitoterapia entrevistas etnobotánicas llevadas a cabo
dentro de los programas de salud de los desde 1996-2000 en Trinidad y Tobago, se
distintos países, a través de la xivalidación halló que la Bixa orellana es utilizada para
de efectos etnobotánicas adjudicados a las la diabetes mellitus y la ictericia (Lans C.,
plantas durante la existencia de la 2006). Se podrían mencionar otros usos del
humanidad 3,4,5. achiote como: astringente, febrífugo, anti
Desde el punto de vista científico disentérico, diurético, afrodisiaco y para el
experimental las plantas curativas están en tratamiento de enfermedades venéreas,
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erisipelas, fiebres intermitentes y otras
afecciones. Estas evidencias de uso
tradicional han sido un paso preliminar para
garantizar la efectividad y la seguridad del
Achiote, así como servir de sustento para
los ensayos clínicos y como información de
sus propiedades terapéuticas 17,18.
En la actualidad, dentro de los usos
medicinales de la Bixa orellana podemos
mencionar su uso como antídoto contra la
Manihot esculenta (yuca o yuca brava o
yuca amarga): se come el fruto o toma la
infusión de fruto y semillas; como
antiemético (contra los vómitos de sangre),
se recomienda tomar el líquido de las hojas
machacadas; como antidiarreico: se toma
este líquido o la infusión de las hojas o
semillas; como hemostático, contra la
hemorroides, contra la angina, contra los
abscesos y como cefalálgico se aplica la
pasta de las hojas machacadas en la frente
y sienes; malestares de la garganta,
afecciones respiratorias (tos, bronquitis): se
toma la infusión de las hojas y semillas;
malestares del hígado: se usan las semillas
y el colorante, se sugiere tomar el
cocimiento de los cogollos; dolores renales:
cocción de las hojas; inflamaciones
dérmicas y vaginales: aplicar la maceración
acuosa de las hojas; contra la malaria:
tomar el cocimiento de la raíz. Asimismo,
la B. Orellana se usa como: cicatrizante,
antihipertensivo, cardiotónico, diurético,
repelente de insectos, antipirético,
depurativo, digestivo, expectorante,
sedante, antiséptico vaginal, y para la
lepra, hepatitis, quemaduras, acarosis
(caracha) y amigdalitis, entre otros 18.
El achiote, también es conocido por sus
usos como: alimento y condimento;
colorante de alimentos, de cosméticos,
pinturas, ceras y para trabajos de artesanía;
como madera, en algunos trabajos de
carpintería; para confeccionar la punta de
las flechas (Amahuacas); y como
sahumerio de las hojas para evitar sueños
eróticos (Shipibos) 9.
Los flavonoides pertenecen a un grupo de
compuestos naturales arreglados bajo un
sistema C6-C3-C6, en el cual dos anillos
aromáticos llamados A y B están unidos
por una unidad de tres carbonos que pueden
o no formar un tercer anillo, que en caso de
existir es llamado anillo C. 19
Está comprobado que los flavonoides son
importantes para el desarrollo y buen
funcionamiento de las plantas al protegerlas
contra agentes agresores externos, como la
radiación UV, microorganismos, animales
herbívoros y del medio ambiente. Pueden
actuar como señalizadores químicos,
indicando a los insectos que planta es
apropiada para su alimentación, posición o
simplemente guiándolos y facilitando así la
polinización 19,20
Para el análisis por HPLC de los glicósidos
pueden utilizarse columnas C-18,
detectando a 254 nm y eluyendo con
mezclas ácido acético al 2%
acuoso/acetonitrilo en diferentes
proporciones. El ácido acético previene la
formación de picos asimétricos en el
cromatograma. Para el análisis cuantitativo
HPLC de las agliconas también se usan
columnas RP-18, detección a 254 nm y
elución con mezclas de acetonitrilo/agua
con ácido acético al 1%6,7. Para el caso de
flavonas metoxiladas y glicósidos de
flavanonas en plantas del género citrus se
puede consultar el trabajo de Mouly y col.
24,25
MATERIALES Y MÈTODOS:
Materiales de Laboratorio: De uso común
en el laboratorio de Farmacognosia
Equipos:
Balanza Triple Brazo, Balanza Analítica,
Estufa, Baño María, Bomba de Vacío,
Espectrofotómetro Horno Mufla, Tamiz.
Solventes: Agua destilada, Diclorometano
para análisis y Alcohol etílico de 96º GL.
Reactivos: Ácido acético glacial 99,8% de
pureza, calidad Sigma, Ácido clorhídrico
37% de pureza, calidad Sigma, Ácido
sulfúrico 98% de pureza .
METODOLOGIA
Recolección, Selección, Identificación
taxonómica, Desecación, Molienda y
Tamización.
TAMIZAJE FITOQUÍMICO DE LA
DROGA Y DEL EXTRACTO FLUIDO:
“PRUEBA DE LA GOTA.
PROCEDIMIENTO:
Pesamos 1g de droga almacenada,
agregamos 30mL del solvente (para obtener
los extractos: Diclorometánico, Etanólico,
agua acida y Acuoso). Se mantuvo a reflujo
controlado por 10 minutos en Baño María.
Luego se dejó enfriar y posteriormente se
filtró. Finalmente realizamos los ensayos
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correspondientes para cada extracto. Preparación de la solución problema

Ensayo de Shinoda: Se agregó XX gotas del
extracto y se llevó a sequedad en baño de - De la solución obtenida en la purificación
agua y el residuo se redisolvió en XX gotas de flavonoides totales se tomo 150 uL
de solución de etanol, luego se agregó unos aforandose a 100 mL con metanol ° G
trocitos de cinta de magnesio seguido por HPLC; de cada alícuota se obtuvo 3 lecturas
gotas de HClcc; las coloraciones roja de absorbancias a 256 nm en el
(flavonas), roja a crimson (flavonoles), espectrofotómetro UV-Visible Hewlett
crimson a magenta (flavanonas) y algunas Packard (8452A –
veces azul o verde, son consideradas DiodeArraySpectrofotometer).
positiva.
RESULTADOS
CUANTIFICACIÓN DE
El tamizaje fitoquimico es positivo con los
FLAVONOIDES TOTALES DEL
siguientes ensayos como :( Liebermann-
EXTRACTO FLUIDO DE BIXA
Burchard Triterpenos/esteroles ,
ORELLANA H.B.K. MEDIANTE
Rosenhein Antocianidinas, Shinoda
ESPECTROFOTOMETRÍA UV-
Flavonoides , Cloruro férrico Polifenoles,
VISIBLE.
Gelatina ) y negativo (Kedde Glicósidos
Procedimiento:
cardiotónico y Espuma Saponinas).
Preparación de la Solución Patrón:
En cuanto a la cuantificación de flavonoides
Se pesó 80 mg de quercetina patrón y se
totales en 2kg el contenido de flavonoides
disolvió con c.s.p.100 mL de metanol ° G
es 14.8 mg/ml expresados como quercetina.
HPLC; para obtener una concentración de 8
p.p.m. La cantidad de fenoles en 2 kg de las hojas
80 mg quercetina x = 100 ml de bixa de Orellana (Achiote) con el
Preparación de soluciones diluidas de la método de flavon ciocalteu nos dio como
muestra patrón para la curva de resultado 295.44mg/ml .con mililitro de
calibración acido galico en un mililitro del extracto
etanolico.
Se midió volúmenes de 0.2; 0.4; 0.6; 0.8;
1.0; 1.2 y 1.4 ml de la solución patrón y DISCUSIÓN
aforó a 100 ml con metanol de ° G HPLC, Para la determinación de Flavonoides en las
para obtener concentraciones de 1.6; 3.2; hojas de Bixa orellana se utilizó la reacción
4.8; 6.4; 8.0; 9.6 y 11.2 ppm de Shinoda; el cual consiste en que el
respectivamente. magnesio metálico es oxidado por el HCl
- Primero se realizó un espectro con la concentrado, dando como productos al H2,
disolución de 8.0 ppm en el que es eliminado en forma de gas, y al
espectrofotómetro para conocer el pico más MgCl2 que es el que forma complejos con
alto correspondiente a la λ máx a la que los flavonoides dando coloraciones
absorbe la quercetina, a la cual se leyeron características. El magnesio divalente
todas las muestras. intensifica la coloración por estar
-Acontinuación se hizo 3 lecturas de doblemente coordinado,dando así reacción
absorbancias de las concentraciones positiva con la presencia de coloración
conocidas, en el espectrofotómetro UV- rosado claro, este resultado es un indicativo
Visible Hewlett Packard (8452A– de que puede tener una buena capacidad
DiodeArraySpectrofotometer) para obtener antioxidante, dependiendo de la
la ecuación de la recta. concentración de flavonoides y de otros
polifenoles presentes en la especie; Como
Preparación de la Solución Blanco: reporta (Harbone JB 1975, Li PV 1999) la
especie Bixa orellana contribuye al efecto
Se utilizó metanol HPLC como solución antiinflamatorio por contener flavonoides,
blanco, tomar una alícuota de 3mL taninos, esteroides, lo cual esta corroborado
aproximadamente para la calibración del en el presente análisis.(17)
espectrofotómetro UV-Visible Hewlett
Packard (8452A– Además se encontró la presencia de
DiodeArraySpectrofotometer).
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Triterpenos/esteroles, Polifenoles, Taninos,
presentando reacción positiva con su
respectivo reactivo, lo cual esta corroborado
por Harbone, 1975 y Ahmad. et.al.,(2006).
(17)
se observa que 2kg de hojas de Bixa
orellana contienen 14.8mg/ml de
flavonoides totales expresados como
quercetina
En relación ala cantidad de fenoles en 2 kg
de las hojas de bixa de Orellana (Achiote)
con el método de flavon ciocalteu nos dio
como resultado 295.44mg/ml .con mililitro
de acido galico en un mililitro del extracto
etanolico
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