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Hidrogel termosensible a base de

almidón hidroxibutil para


separación de proteínas
Science Direct
International Journal of Biological Macromolecules
2019
Autores
Shiting Dong, Sai Li, Yacheng Hao, Qunyu Gao

Integrantes
Julian Bello, Geraldine Fernández, Camila Mendoza, Alejandra Gonzalez
Resumen
• El hidrogel termosensible a base de almidón (STH) es un nuevo tipo de material polimérico con
una gran capacidad de absorción de agua. En este estudio, se sintetizó una serie de STH a base de
almidón de hidroxibutil (HS) y polietilenglicol (PEG).

• Se utilizó albúmina de suero bovino (BSA) como proteína modelo para la separación de los
hidrogeles producidos.

• Mostró un hinchamiento y deshinchamiento reversibles a medida que cambiaba la temperatura. Se


encontró que la adición de HS y PEG dio como resultado estructuras más micro porosas y un
aumento de la relación de hinchamiento de equilibrio (ESR).

• El rendimiento mejorado, el método simple y el material de bajo costo conferían a STH para
servir como un biomaterial considerable para la separación de proteínas.
Introducción
• La proteína es una especie de macromoléculas biológicas complejas y frágiles con
estructura tridimensional. Sin embargo, su inestabilidad y sensibilidad limitan en
gran medida las perspectivas de desarrollo en los campos nutricional y
farmacéutico.
• En la actualidad, los métodos habituales de separación de proteínas incluyen
principalmente adsorción, evaporación, liofilización, precipitación, ultrafiltración,
• La liofilización y la ultrafiltración llevan mucho tiempo y la actividad de las
proteínas se daña fácilmente por las altas temperaturas de la evaporación. Los
hidrogeles termosensibles (TH) destacan como una clase única de biomateriales
con estructura de red tridimensional que exhiben una transición de fase de
volumen entre hinchamiento y colapso en respuesta a cambios de temperatura
•El mecanismo del método de separación por THs es que: cuando la temperatura se
ajusta por debajo de la temperatura de solución crítica más baja (LCST), las cadenas
hidrofóbicas del hidrogel se invierten. Esto da como resultado una transición de fase
volumétrica cuando las fuerzas hidrófobas son mayores que las fuerzas hidrófilas en
el hidrogel.

•El almidón pertenece a un polímero macromolecular natural y renovable con


abundancia y bajo precio. El almidón modificado ha demostrado ser un material
superior para preparar hidrogeles con mejores características que los nativos

•En particular, el almidón hidroxibutílico (HS) pertenece al éter de almidón no iónico.


Después de la eterificación, la fuerza del enlace de hidrógeno interno en la estructura
de los gránulos de almidón se debilita. Además, la energía de enlace del grupo butilo
se vuelve fuerte, lo que confiere almidón con alta hidrofilia y estabilidad y además
obtiene una respuesta obvia a la temperatura.
•  
Materiales

• Almidón de maíz ceroso


• Polietilenglicol (PEG, 4000 g / mol)
• N-isopropil acrilamida (NIPAM)
• N, N-metilenbisacrilamida (BIS)
• Persulfato de amonio (APS)
• Tetrametil etilendiamina (TEMED)
• Albúmina de suero bovino (BSA)
Métodos
• Pretratamiento del almidón
• Preparación de HS
• Preparación de STH

Espectrómetro IR Bruker Tensor 27

• Espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier (FT-IR)


• Microscopía electrónica de barrido (SEM)
• Calorimetría diferencial de barrido (DSC)
• Propiedades de hinchamiento de los hidrogeles.
• La ESR de hidrogeles a diferentes pH
NH, HS-P0 HS-P1, HS-P2, HS-P3, HS-P4

Microscopio electrónico de barrido


TM-3000
m1: peso de los hidrogeles antes de la inmersión
m2: peso de los hidrogeles después de la inmersión

m1: peso de las muestras del hinchamiento


mn: peso de las muestras después del hinchamiento DSC 8000 Perkin-Elmer
n: tiempos de colocación.
• Separación BSA
• Determinación de la solución BSA
0,01, 0,05, 0,10, 0,15 y 0,20 g de soluciones de BSA
• Efecto de agregar HS y PEG

n: relación de separación de BSA Espectrofotómetro ultravioleta (i5, Jinan


c1: concentración inicial de la solución de BSA Hanon Instruments Co., Ltd., China)
c0: concentración de medida por curva estándar.
• Efecto de las concentraciones de BSA
• Análisis estadístico
ORIGIN 9.0
Los datos se expresaron como medias ± desviaciones estándar de al
menos tres determinaciones independientes en una muestra.
RESULTADOS Y
DISCUSIÓN
. Análisis infrarrojo de (a) NH; (b) HS-P0; (c) HS-
P1; (d) HS-P2; (e) HS-P3; (f) HS-P4
Observación de la Morfología
Calorimetría Diferencial de Barrido
Conclusiones
• En este trabajo se sintetizó una serie de STH con HS y PEG y se investigaron sus
propiedades. Además, se utilizó BSA como proteína modelo para la separación de los
hidrogeles producidos.
• Los resultados de FT-IR y SEM confirmaron la copolimerización satisfactoria de almidón y
NIPAM. Esto reveló que el efecto de HS sobre estos hidrogeles modificó su estructura
(aumento de grupos hidrófilos) y condujo a propiedades mejoradas en general.
• La termo sensibilidad de los hidrogeles básicamente no se modificó y LCST todavía estaba
a aproximadamente 33 ° C a través de DSC. Estos resultados positivos contribuyeron a
separar las proteínas.
• La separación de BSA controlando diferentes concentraciones de hidrogeles y BSA mostró
que la eficiencia de separación era mejor al agregar HS. En general, el estudio indicó que
los STH podrían servir como un biomaterial considerable para la separación de proteínas a
través de un método simple, mecanismo de fácil reutilización y material barato.
Bibliografía
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Gracias…

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