Introduccion a Quimica

Analitica
Luis A. Barrera, Ph.D.
Universidad Interamericana de Puerto Rico
Recinto de Aguadilla
Departamento de Ciencias y Tecnologia
Que es la Quimica Analitica
• La quimica analitica es la ciencia que estudia el conjunto de principios,
leyes y tecnicas cuya finalidad es la determinacion de la composicion
quimica de una muestra natural o artificial.
• El analisis quimico es el conjunto de tecnicas operatorias puesto al servicio
de dicha finalidad. Se enfoca en:
• Separacion
• Identificacion
• Determinacion
De las cantidades relativas de los componentes en una muestra.
• La quimica analitica se puede subdividir en dos partes: la quimica analitica
cuantitativa y la quimica analitica cualitativa.
Conceptos Basicos en Analisis Quimico
• Muestra (sample): Parte representativa de la materia objecto de analisis.
• Alicuota (aliquot): Fraccion o porcion de muestra.
• Analito (analite): Especie quimica objeto de analisis.
• Matriz de la muestra (matrix): Especies químicas que acompañan al
analito en la muestra.
• Tecnica Analitica (analytical technique): Medio empleado para obtener
información sobre el analito.
• Metodo Analítico (analytical method): Secuencia de operaciones y
técnicas aplicadas para el análisis de una muestra.
Ejemplo: Analisis de Glucosa en Sangre
Muestra: Sangre
Analito: Glucosa
Matriz: Proteínas, sales minerales, colesterol…
Técnica analítica: Espectrofotometría de absorción molecular visible
Método analítico: Implica desde la toma de muestra hasta la obtención
del resultado final.
Otros Conceptos Importantes
• Interferente (Interferent): Especie química distinta del analito que aumenta o disminuye la
respuesta del analito bajo el método aplicado. (Ej. Analito: Ca2+, Al3+ es un interferente si la
determinación se lleva a cabo por valoración con EDTA.)
• Enmascaramiento (Masking): Transformación del interferente en otra especie química que no es
detectada con la técnica analítica empleada.
(Ej. Al3+ + 3OH- → Al(OH)3)
• Disolucion Estándar (Standard Solution): Disolución conteniendo el analito en concentración
perfectamente conocida. (Ej. Disolución acuosa conteniendo glucosa en una concentración exacta
de 75 mg/dL)
• Curva de Calibrado (calibration curve): Gráfica que representa la señal analítica monitorizada
frente a la concentración del analito.
• Determinación: Análisis de una muestra para identificar la identidad, concentración o propiedades
del analito.
• Medida (Measurement): Determinación experimental de las propiedades químicas o físicas del
analito.
• Blanco (Blank): Muestra que contiene todos los componentes de la matriz excepto el analito.
 CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ANÁLISIS

● Métodos clásicos: se basan en propiedades químicas de los analitos.

Volumetrías y gravimetrías.

● Métodos instrumentales: se basan en propiedades químico-físicas de los analitos.

Se clasifican según la propiedad que se mide (espectroscópicos,
electroquímicos, misceláneos…)

● Métodos de separación: la finalidad inicial de estos métodos era separar

interferentes antes de proceder a aplicar la técnica analítica
seleccionada. En la actualidad, existen métodos de separación
que son métodos de análisis en sí mismos, como por ejemplo
la cromatografía.

LCMS

7
EL PROCESO ANALÍTICO (Método Analítico)
El Análisis Químico alcanza sus objetivos mediante el PROCESO ANALÍTICO, que
es la aplicación del método científico, implicando el proceso de la figura:

Problema

Elección del
método analítico MÉTODO ANALÍTICO

Toma de Tratamiento Proceso de Tratamiento de

muestra de la muestra medida los datos

Valoración de
los resultados

Informe y
conclusiones

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 ETAPAS DEL PROCESO ANALÍTICO
Definición del problema: En esta 1ª etapa se plantea el tipo de análisis requerido y
la escala de trabajo.

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Selección del método de análisis
• Consideraciones importantes:
• Exactitud requerida en los resultados

• Disponibilidad de tiempo y de dinero

• Número de muestras a analizar

• Concentración esperada del analito en la muestra

• Complejidad de la muestra bajo análisis

• Etapa crucial para el éxito de los resultados finales

• Buscar en la bibliografía procedimientos apropiados o, si es necesario, poner a punto nuevos procedimientos
analíticos para llevar a cabo el análisis
Toma de muestra o muestreo
• Plan de muestreo: estrategia a seguir para garantizar que los resultados
obtenidos reflejen la realidad del material analizado.

• Características que ha de cumplir la muestra:

• ser representativa del material a analizar
• ser homogénea, lo que significa que debe ser igual en todas sus
partes.

Se reduce el error en los resultados

F1

11
Tratamiento de la Muestra
Son escasos los problemas que se resuelven sin necesidad de
tratamiento de la muestra

Lo habitual, es que la muestra necesite algún tipo de tratamiento, con el fin de:

1. Preparar la forma y tamaño de la muestra, así como la concentración del

analito(s), más adecuada para la técnica analítica seleccionada

2. Eliminar interferencias matriciales

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 Consideraciones importantes durante la
etapa de preparación de muestra
1) La preparación de la muestra no puede implicar pérdidas de analito, ni
tampoco contaminaciones.

2) Se debe transformar el analito en la mejor forma química para el

método analítico seleccionado.

3) Si es necesario, se eliminarán las interferencias de la matriz, mejorando así

la selectividad del método.

4) No se deben introducir nuevas interferencias.

5) Debe considerarse la dilución o preconcentración del analito, de manera que

se halle en el intervalo de linealidad del método seleccionado.
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La mayoría de las técnicas analíticas: MUESTRA EN ESTADO LÍQUIDO
Si la muestra es sólida
Si el análisis no Almacenamiento:
Molienda: Disminución tamaño va a ser inmediato luz, Temp., tipo de recipientes…
de partícula
Maza

Mortero
F4

F1 F5
F2

“Liofilización previa” F3

Si la muestra es líquida

Evaporación del Si el analito es un gas disuelto en un líquido

disolvente
Doble recipiente sellado
para su almacenamiento

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 MUESTRA EN ESTADO LÍQUIDO
Obtención de la Preparación de la
Elección del método
muestra muestra

Extracción del analito a ¿Se encuentra el analito

una fase líquida
No disuelto?
Sí
¿Es mensurable la propiedad
analítica?

Agitación Centrifugación Decantación Recogemos el líquido

sobrenadante
Disolvente
(H2O, EtOH, Líquido
MeOH… sobrenadante

Suspensión Residuo Residuo

del sólido en
Muestra sólido sólido
el disolvente
sólida

F1
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 Para la determinación de AAS (Atomic Adsorpion Spectroscopy) en
producto farmacéutico mediante volumetría ácido-base

Trituración del fármaco

y disolución en etanol

F1 F3
F2

- En ocasiones, se requieren condiciones más enérgicas para la

extracción del analito a la fase líquida:

Disoluciones acuosas de:

- ácidos fuertes
- bases fuertes
- agentes oxidantes
F4
- agentes reductores
- combinaciones de reactivos

Aplicación de energía externa:

- microondas
- ultrasonidos… F5

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 Obtención de la Preparación de la
Elección del método
muestra muestra

Extracción del analito a ¿Se encuentra el analito

la fase líquida
No disuelto?
Sí
¿Es mensurable la propiedad
Cambio de la forma analítica?
química del analito
No
Especie fluorescente Sí
Eliminar interferencias si las
hubiere

Ej. Sulfonamida

MÉTODOS DE SEPARACIÓN
Adicionamos reactivos (para la determinación
mediante fluorimetría)
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 DEFINICIÓN DE RÉPLICAS DE MUESTRAS
El proceso de medida debe llevarse a cabo en varias alícuotas idénticas de la muestra

F2 1 mL 110 mg/dL
Finalidad

1 mL 109.6 mg/dL 1. Establecer la

variabilidad del
análisis
2. Evitar un error grave
F1
1 mL 187.5 mg/dL
LA INCERTIDUMBRE ES
TAN IMPORTANTE
COMO LA MEDIDA
1mL 110.3 mg/dL MISMA

X ± SD
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Proceso de medida
La mayoría de los métodos necesitan de disoluciones estándar o patrón

VOLUMETRÍAS: Se mide la cantidad de equivalentes químicos de valorante

en el punto final de la valoración

Señal analítica = K x CA K= constante de proporcionalidad

CA= concentración de analito

Disolución patrón Disolución problema

CA = 80 mg/dL CA = ?
S = 0.199 S = 0.261
F1
F2

0.199 = K 80 0.261 = 0,0025 CA

K = 0.0025 dL/mg CA = 104.4 mg/dL

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Tratamiento de los datos a través de ecuaciones de calibración
Curva de calibración con patrones externos

Concentración, Señal analítica

mg/dl
0 0,001
40 0,101
80 0,199
120 0,303
160 0,401
200 0,498

mg/dl

Señal analítica = ordenada origen + K x CA

Señal analítica = 0.00129 + 0.0024 x CA

20
CÁLCULO DE CA EN LA MUESTRA A TRAVÉS DE LA CURVA DE CALIBRADO

Señal analítica = 0.0013 + 0.0024 x CA

0.261 = 0.0013 + 0.0024 x CA

CA = 108.2 mg/dL

Aplicación de factores de
dilución ó preconcentración,
si procede
mg/dl

El método de calibración frente a patrones externos es válido si una determinada

CA tanto en la muestra como en la disolución estándar proporciona la misma
respuesta analítica.

21
Evaluación de los resultados, informe y conclusiones

Los resultados han de ser evaluados por estimación de su fiabilidad

El informe dirigido al solicitante del análisis ha de:

1. Indicar claramente los resultados
2. Las condiciones experimentales empleadas
3. Limitaciones concretas de la técnica analítica empleada

1. Concentración de glucosa
As en orina
obtenida: 1. ND (no detectado)
x ± SD 2. Espectrometría de absórción atómica con
2. Técnica atomización electrotérmica (ETAAS)
espectrofotométrica … 3. LD (Límite de detección): 50 ppt
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ…

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 Conclusiones
El analista puede o no implicarse en lo que se vaya a hacer con su información.
Como mínimo debería asegurarse que las conclusiones que se extraigan
de sus datos sean coherentes con los mismos.

1. Concentración de glucosa:
520 ± 1 mg/dL
2. Técnica espectrofotométrica …
Ingreso hospitalario del individuo
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ…

1. Concentración de As en orina: 403

± 2 ng/L Envenenamiento crónico del individuo
2. Técnica HG-AAS
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ…

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 Obtención de la Preparación de la
Elección del método
muestra muestra

Extracción del analito a ¿Se encuentra el analito

la fase líquida
No disuelto?
Sí
¿Es mensurable la propiedad
Cambio de la forma analítica?
química del analito
No
Sí
Eliminar interferencias si las
hubiere
Estimar la fiabilidad
de los resultados Calcular los resultados Medir la propiedad analítica

Informe Conclusiones

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Caracteristicas de Calidad de los Metodos
Analiticos
• Exactitud (Accuracy): Medida del grado de concordancia entre un resultado
experimental y su valor previsto.
• Precision (Precision): Indicacion de la reproducibilidad de una medida o resultado.
• Sensibilidad (Sensitivity): Medida de la capacidad de un metodo para distinguir
entre dos muestras; se expresa como el cambio de la señal por cambio de unidad
de la cantidad de analito. (i.e. +/- 0.01 mg)
• Limite de Deteccion (Detection Limit, DL o LD): Informe estadistico sobre la
menor cantidad de analito que pueden detectarse con seguridad.
• Intervalo dinamico (Dynamic Interval): Intervalo de concentraciones entre el
limite de cuantificacion (LOQ) y el limite de linealidad (LOL).
• Selectividad (Selectivity): Medida de la ausencia de interferencias en un metodo.
Exactitud vs. Precision
 CRÉDITOS
--Natalia Campillo Seva, Universidad de Murcia
-Logo Portada OCW-UM. Autor: Universidad de Murcia. Dirección web: http://ocw.um.es.
-Página 5, F1. Dirección web: http://blogdelcancer.blogspot.com/
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-Página 14, F1. Fuente: “Quantitative Chemical Analysis”, Seventh Edition, © 2007 W.H. Freeman and Company.
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-Página 16, F5. Dirección web: http://www.icb.csic.es/fileadmin/grupos/ProcesosQuimicosAvanzados/HornoDeMicroondas-m.jpg
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-ensayo-cerca.jpg
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