Universidad Nacional de Trujillo

Facultad de Ciencias Agropecuaria Dpto. Bioquímica

Asignatura Bioquímica General

TEMA Nº 10
Fosforilación oxidativa a nivel de sustrato y de la cadena respiratoria. Relación
Fósforo/Oxígeno. Teoría quimiosmótica. Mecanismo de los desacopladores y los
ionóforos. Respiración celular. Transferencia de equivalentes reductores.

Docente:
Msc. Anabel González Siccha

Trujillo, 25 de Abril de 2014

 FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
 Los equivalentes reductores provenientes de la oxidación del
sustrato se utilizan para la formación de ATP.
 Tipos de Fosforilación oxidativa:
1. Fosforilación a nivel
de sustrato: En la
glucólisis (citosol) y
en el C. Krebs (matriz
mitocondrial), sólo se
forma 1 ATP por
oxidación del SH2.
2. Fosforilación a nivel
de la cadena
respiratoria
(mitocondria), se
forma 2 o 3 moles de
ATP por mol de SH2.
 FOSFORILACIÓN A NIVEL DE SUSTRATO
La hipótesis química postula que:
El acoplamiento químico directo en todas las
etapas del proceso, como las reacciones que
generan el ATP en la glucólisis.
Sosteniendo que para la síntesis de ATP debe
existir un intermediario macroenergético.
Ejemplo: Fosforilación oxidativa a nivel de
sustrato ( Citosol, matriz mitocondrial)
Hipótesis Química
Fosforilación a nivel de sustrato
Glicólisis
Fosfoglicerato cinasa
Piruvato cinasa
Ciclo de Krebs
Succinato tiocinasa
 FOSFORILACIÓN A NIVEL DE LA CADENA
RESPIRATORIA (MITOCONDRIA)

La teoría quimiosmótica

Mitchell postula que la energía de la oxidación
de componentes en la CR genera iones H+ que
son expulsados alrededor de una membrana
acopladora en la mitocondria, es decir, la
membrana actúa como una bomba de protones
cada una, en la cadena respiratoria I, III y IV.
 COMPLEJOS ENZIMATICOS
La mitocondria presenta 5 complejos PROTEÍNA - LÍPIDO, que
se extienden en la membrana mitocondrial interna.

a) Componentes Fijos: b) Componentes móviles:

I : FMN- FeS proteína – NADH Dh - El NAD,

II : FAD – FeS- Succinato Dh - La CoQ y

III : Cit b (FeS) – Citocromo C1 - El Citocromo c

IV : Cit a – Cit a3

FAD

CoQ
NAD
III IV
V
Cit c
 RELACION FOSFORO/OXÍGENO
(P/O)
Depende del complejo:
El complejo I expulsa 6 a 4 protones
El complejo III 4 protones y el complejo IV,
expulsa 2 protones.
Por tanto la relación P : O puede no ser un entero
cabal, por ejemplo, 3, pero es posible que sea 2.5
por simplificación, pero se continuarán utilizando
el valor de:
3 para la oxidación del NADH + H y
2 para la oxidación del FADH2 .
Cadena Respiratoria

Msc. Francisco Abanto Zamora

 Relación P/O : (NADH=3ATP;
FADH=2ATP, cit C= 1ATP)

El flujo de electrones desde los sustratos al oxigeno es la fuente

de energía del ATP
SITIOS DE CONSERVACIÓN DE LA
ENERGÍA
 UNA ATP SINTASA LOCALIZADA EN LA
MEMBRANA FORMA ATP
 La diferencia de potencial ATP Sintetasa
electroquímico se usa para impulsar a
una ATP sintasa localizada en la
membrana la cual en presencia de Pi +
ADP forma ATP.
 Las subunidades están adheridas,
posiblemente mediante un tallo.
 Las unidades fosforilantes similares se
encuentran en el interior de la
membrana plasmática de las bacterias,
así como en el exterior de la membrana
de los tilacoides en los cloroplastos.
 LA TEORÍA QUIMIOSMÓTICA
Postula:
1. La adición de protones (ácido) al medio externo de las
mitocondrias conduce a la generación de ATP.
2. La fosforilación oxidativa no ocurre en sistemas solubles
donde no existe la posibilidad de una ATP sintasa
vectorial. Debe haber una membrana cerrada para
obtener fosforilación oxidativa.
3. La cadena respiratoria contiene componentes
organizados lateralmente (asimetría transversal) como
los requiere la teoría quimiosmótica.
 LA TEORÍA QUIMIOSMÓTICA
EXPLICA:
La acción de los desacopladores: Estos compuestos
(por ejemplo, dinitrofenol) son anfipáticos e
incrementan la permeabilidad de las mitocondrias.
Existencia de sistemas transportadores de
intercambio mitocondrial: Estos sistemas son una
consecuencia de la membrana acoplada que debe ser
impermeable a los protones y otros iones para
conservar el gradiente electroquímico.
 MECANISMO DE DESACOPLADORES
La acción de estos consiste en disociar la oxidación en la
cadena respiratoria, de la fosforilación.
Bloquean la síntesis de ATP, al tiempo que permite que
continúe el transporte electrónico a lo largo de la CR hasta
el O2
Hay oxidación del sustrato pero no formación de ATP.
Son ácidos débiles solubles en lípidos.
Los desacopladores son anfipáticos e  la permeabilidad de
la mitocondrias a los H+   el potencial electroquímico.
Ejemplo: El 2,4 DNP, Dinitro cresol, Pentaclorofenol.
CCCP (m-clorocarbonilcianuro fenilhidrazona), 100 veces
 MECANISMO DE DESACOPLADORES
El 2,4-dinitrofenol (DNP) el cual actúa cerca a la
membrana interna, protonándose, debido al pH más bajo
existente en esta zona, esta protonación aumenta la
hidrofobicidad del DNP, lo cual permite que difunda en la
membrana y que la atraviese por la acción de masa.
Una vez dentro de la matriz, el pH más alto hace que el
hidroxilo fenólico desprotone.
 Así pues, el desacoplador tiene el efecto de transporte de
H+ de vuelta hacia la matriz, evitando el canal protónico
Fo y, por tanto, sin síntesis de ATP. Ya que la entrada de
los H+ en la matriz, a través del canal Fo proporciona la
energía necesaria para impulsar la síntesis de ATP.
 MECANISMO DE IONOFOROS
Los Ionóforos son sustancias lipofílicas y pueden
atravesar la membrana mitocondrial interna formando
complejos con cationes específicos y facilitan el
transporte de iones al interior de la mitocondria.
Permiten a los iones inorgánicos atravesar la membrana
y desacoplan la cadena de transferencia de electrones
desde la fosforilación oxidativa disipando la
contribución eléctrica y el gradiente electroquímico a
través de la membrana mitocondrial.
Ejemplo: valinomicina, nigericina.
 LA TEORÍA QUIMIOSMÓTICA
EXPLICA:
EL CONTROL RESPIRATORIO La diferencia de
potencial electroquímico a través de la membrana, una vez
que establecida como resultado de la translocación de
protones, inhibe el transporte posterior de equivalentes
reductores a través de la cadena respiratoria. Esto a su vez
depende de la disponibilidad de ADP y Pi
 ESTADO DE CONTROL DE RESPIRACIÓN
Condiciones que limitan la velocidad de respiración

Estado 1 Solamente Disponibilidad de ADP y sustrato.

Estado 2 Solamente Disponibilidad de sustrato.

Estado 3 La capacidad de la cadena respiratoria misma cuando

todos los sustratos y componentes están presentes en
cantidades de saturación.

Estado 4 Solamente Disponibilidad de ADP.

Estado 5 Solamente disponibilidad de Oxígeno.

 ESTADOS DE RESPIRACION CELULAR.
El control respiratorio asegura un suministro constante de
ATP.
La velocidad de respiración de las mitocondrias se pueden
controlar por la [ADP], esta se debe a que la oxidación y la
fosforilación están íntimamente acopladas, es decir, la
oxidación no puede proceder por la vía de la CR.
El estado de reposo se encuentra en el estado 4, siendo la
respiración controlada por la disponibilidad de ATP.
La célula se aproxima al estado 3 y 5 ya sea que la
capacidad de la CR se satura o la PO2 decrece a valores
menores, así la manera de procesos oxidativos biológicos
permite que la energía libre que resulta de la oxidación de
los alimentos, estos se vuelven disponibles y son
 TRANSFERENCIA DE EQUIVALENTES
REDUCTORES
En la membrana existen
sistemas de intercambio por
difusión para el intercambio de
aniones por iones OH- y de
cationes por iones H+.
Estos sistemas se requieren
para la captura y salida de los
metabolitos ionizados al
tiempo que se conserva la
neutralidad eléctrica y
osmótica.
 LANZADERAS DE SUSTRATO
El NADH no puede penetrar la membrana
mitocondrial, pero en el citosol se produce de
manera continua por deshidrogenasas, entonces
existe mecanismos que involucran la trasferencia
de H+ a través de la m.mitocondrial por medio de
pares de sustratos relacionados por DHs adecuadas.
 Se requiere que exista la Dh específica en ambos
lados de la membrana mitocondrial.
 Lanzadera del Glicerol-3-Fosfato
Esta lanzadera se presenta en el músculo de insectos
voladores, encéfalo, tejido adiposo pardo y músculo blanco
e importante en el hígado. Permite la transferencia de H+ a
la CR.
 Lanzadera del malato
Es importante en m. cardíaco porque presenta deficiencia del
glicerol-3-P Dh. Permite la transferencia de H+ directamente a la
matriz mit.
El OA es impermeable a la mm  transamina con el glutamato antes
de su transporte a través de la mm y se reconstituye en el citosol.
Lanzadera del Malato-Aspartato
 Lanzadera del Fosfato de Creatina
Aumenta la participación del fosfato de creatina
como amortiguador, al actuar a manera de un
sistema dinámico para la transferencia de fosfatos
de alta energía provenientes de las mitocondrias, en
tejidos activos como el corazón y el músculo
esquelético.
Permite el transporte rápido de fosfato de alta
energía de la matriz mitocondrial al citosol.
 Presenta varias
isoenzimas:
 Cka : ↑↑ATP
 CKc: C≡PC
 CKg: Glicólisis
 y sintesís PC
 CKm: FO:
ATP PC
MUCHAS GRACIAS