TEMA 8: ACTIVIDADES METABÓLICAS EXCLUSIVAS DE MICROORAGNISMOS

El 90% de la energía que capta la célula se conserva en los enlaces fosfato de la molécula.

El ATP contiene enlaces inestables. Libera energía con facilidad.

La hidrólisis de ATP cede la energía de sus enlaces fosfato, que será necesaria en los procesos celulares:
 Biosíntesis (crecimiento)
 Movimiento flagelar
 Bioluminiscencia
 Translocación de proteínas en la membrana plasmática.
 Transporte activo.
Procesos microbianos de captación de energía. Generación de ATP:
 Fosforilación: Fotosíntesis
 Fosforilación oxidativa: respiración
 Fosforilación a nivel de sustrato: fermentación.

CONCEPTOS IMPORTANTES
Quimiolitotrofía: Uso de compuestos inorgánicos como donadores de es para generar ATP mediante
fosforilación oxidativa.
Fototrofía: utilizan la luz en lugar de un compuesto químico para generar ATP mediante fosforilación
oxidativa.
Respiración: Se emplean compuestos orgánicos o inorgánicos como donadores de es para generar ATP
mediante fosforilación oxidativa
 Aerobia: aceptor final de O2
 Anaerobia: aceptor final son compuestos orgánicos, o inorgánicos distintos del O2
Fermentación: un compuesto orgánico es la vez donador y aceptor de electrones y el ATP se genera
mediante fosforilación a nivel de sustrato.
PROCESOS MICROBIANOS DE CAPTACIÓN DE ENERGÍA (exclusiva de microorganismos)
1. Quimiolitotrofía
a. Bacterias sulfoxidantes
b. Bacterias nitrificantes
c. Bacterias metanótrofas.
2. Fototrofía
a. Fosforilación no dependiente de clorofilas
b. Fotosíntesis anoxigénica
i. Bacterias púrpuras del azufre
ii. Bacterias verdes del azufre
3. Respiración anaerobia
a. Bacterias desnitrificantes
b. Bacterias sulfatorreductoras
4. Fermentación
Respiración: Es el proceso por el cual tiene lugar la degradación (oxidación) de la materia orgánica a CO2
para obtener poder reductor (por ejemplo, NADH) y energía química (ATP). Consta de una serie de pasos:
1. Glucólisis
2. Descarboxilación del piruvato
3. Ciclo de Krebs
4. Fosforilación oxidativa
Fosforilación oxidativa: los en los NADH y los protones (H+) producidos en la respiración son empleados
en la cadena transportadora de electrones para crear un gradiente electroquímico (fuerza protón motriz) que
se utiliza para la síntesis de ATP.
Respiración aerobia: el oxígeno es el aceptor final de electrones.
Respiración anaerobia: El aceptor terminal de electrones es una molécula inorgánica distinta del oxígeno
(sulfato, nitrato, o azufre)

CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES

Formada por proteínas y cofactores que aceptan y donan electrones participando en reacciones de óxido-
reducción.
Elementos
1. Oxido-reductasas: Enzimas que catalizan reacciones de óxido-reducción: transferencia de hidrógeno
(H) o electrones de un sustrato a otro en la cadena
2. Cofactores
Potencial óxido-reductor de sus componentes determina la vectorialidad del transporte de electrones desde
aquellos más negativos a los más positivos
Potencial óxido-reductor de sus componentes determina la vectorialidad del transporte de electrones desde
aquellos más negativos a los más positivos
La escala representa el potencial de reducción.
 E0′ más negativo tienen mayor tendencia a donar e-
 E0′ más positivo tienen mayor tendencia a aceptar e-
El transporte de electrones se realiza mediante reacciones de óxido-reducción en sus componentes

Ejemplo mitocondrias:
 NADH-coenzima Q reductasa (complejo I)
 Succinato-coenzima Q reductasa (complejo II)
 Citocromo C reductasa (complejo III)
 Citocromo C oxidasa (complejo IV)
En estos complejos (I-IV) existen cuatro tipos posibles centros rédox
(además del NADH/FADH2):
 Flavín mononucleótido (FMN)
 Proteínas no hémicas de Fe-S
 La ubiquinona (CoQ)
 Los citocromos a, a3, b, c, c1
Fosforilación oxidativa: La energía que se obtiene en el transporte de va a generar el bombeo de protones
al periplasma provocando una diferencia de potencial o fuerza protonmotriz que va a emplear la ATP
sintetasa para producir ATP
Ejemplo estructura Complejo I (Thermus thermophilus) Compuesto por 14 subunidades proteicas:
1. Dominio hidrofílico
a. Actividad deshidrogenasa
b. Cofactores: el mononucleótido de flavina (FMN) y 8-9 grupos de hidro y azufre (Fe-S)
2. Dominio de membrana:
a. La maquinaria de bombeo de protones
b. El mecanismo de aplocamiento entre la transferencia de electrones y la translocación de
protones no se conoce completamente.
Fosforilación oxidativa. Ejemplo mitocondrias.
1. NADH-coenzima Q reductasa (complejo I)
2. Succinato-coenzima Q reductasa (complejo II)
3. Citocromo C reductasa (complejo III)
4. Citocromo C oxidasa (complejo IV)
En estos complejos (I-IV) existen cuatro tipos posibles de centros rédox (además del NADH/FADH2):
 Flavín mononucleótido (FMN)
 Proteínas no hémicas de Fe-S
 La ubiquinona (CoQ)
 Los citocromos a, a3, b, c, c1

¿Cuál es el fin último de la CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES de la membrana

plasmática?
generar ATP
¿Qué complejo molecular es capaz de generar ATP en la membrana plasmática?:
 una ATPsintetasa, complejo molecular de 16 subunidades, con canal interno
¿Qué necesita la ATPsintetasa para formar ATP?:
ADP, Fosfato y flujo de protones por su canal, hacia el citoplasma
Para que los protones fluyan espontáneamente se requiere un gradiente
¿Cómo se origina este gradiente de protones?
A consecuencia del flujo de electrones a través de la cadena de transporte:
1. Los electrones se transfieren de un citocromo al siguiente en la membrana plasmática
2. Los citocromos liberan protones al periplasma cada vez que ceden electrones
3. Los protones se acumulan en periplasma (no pueden atravesar la membrana)
generando un gradiente electroquímico o Fuerza Motriz de Protones (FMP)
¿Cómo pasan los protones al citoplasma, si la membrana es impermeable a ellos?
A través del canal de la ATPsintetasa:
El gradiente electroquímico favorece el flujo espontáneo de protones a favor de dicho
gradiente (del periplasma al citoplasma)
LITOTROFÍA: en su mayoría son quimiolitoautótrofos
QUIMIOLITÓTROFOS
 Fuente de Carbono: CO2 o compuestos orgánicos
 Fuente de energía: compuestos inorgánicos
 Captación de energía mediante: fosforilación oxidativa
o En procesos de respiración aerobia. El oxígeno es el aceptor final de electrones.
 Ocurre en una cadena de transporte de electrones, en la membrana plasmática.
o Donador de e-: compuestos inorgánicos
o Aceptor de e-: oxígeno
La respiración aerobia ocurre a nivel de membrana plasmática (a menudo en sistemas membranosos
intracitoplásmicos,
Proporciona el ATP y Poder reductor que necesitan para fijar carbono (ciclo de Calvin-Benson a menudo en
carboxisomas)
Para generar poder reductor la cadena de transporte funciona en sentido inverso (Transporte inverso de e-).
Proceso de baja eficiencia energética.
Algunos son quimiolitoheterótrofos (bacterias nitrificantes), que no fijan CO2 y su fuente de carbono son
compuestos orgánicos.
Podría haber sido la primera forma de fijación de la energía que se desarrolló en la tierra.
Los organismos litótrofos contribuyen mucho más de lo que se creía en la biomasa de la tierra. Se encuentra
en ambientes poco conocidos, generalmente lejos de la luz y del O2.
 La mayoría de la vida microbiana oceánica.
 La vida microbiana subterránea.
Reacciones de oxidación/reducción: REDOX
Oxidación: es el fenómeno mediante el cual una especie química pierde electrones, por lo tanto, el número
de oxidación aumenta porque pierde carga negativa.
Reducción: es el fenómeno mediante el cual una especie química gana electrones, por lo tanto, el número
de oxidación disminuye porque gana cargas negativas.
El donador de ees un agente reductor que se oxida (pierde electrones, pierde carga negativa)
El aceptor de ees un agente oxidante que se reduce (gana electrones, gana carga negativa)
Diversidad en quimiolitótrofos: respiración aerobia de componentes inorgánicos.
El donador de e cede electrones a la cadena. Al oxidarse forma un producto metabólico.
Bacterias sulfo-oxidantes: bacterias incoloras del azufre
Donadores de e-:
 Sulfuro de hidrógeno.
 Azufre elemental
 Tiosulfato
Aceptor final de e-: O2.
Producto metabólico final: Sulfatos (SO4) y protones (H+)
Hábitat: zonas de descomposición de materia orgánica. Interfase donde confluyen sulfuros (de zonas
anóxicas) con oxígeno (de zonas óxicas).
Práctica agrícola: uso de azufre para corregir pH de suelos muy básicos. El aporte de azufre favorece la
proliferación de bacterias sulfoxidantes, que acidifican el medio.
BACTERIAS SULFOOXIDANTES: Oxidantes de sulfuro de hidrógeno
1. H2S se oxida a S y se acumula en el citoplasma como gránulos de reserva
2. Agotado el SH2, el complejo Citc/Sulfito-oxidasa, oxida al Sº a sulfatos.
La Cit aa3: transfiere el O2 reduciéndolo a H2O. Hay translocación de H+ a través de la membrana lo cual
genera un gradiente electroquímico que la enzima ATP sintetasa para sintetizar ATP.
Oxidación de donador inorgánico: no genera poder reductor (su potencial de reducción le impide ceder e
directamente al NAD-). Los e retroceden contra el gradiente termodinámico, impulsados por la FMP y
finalmente generan NADH a nivel de una ferroproteína.

IMPORTANTE MENCIONAR EN UNA CADENA DE TRANSPORTE

 Donador de electrones: nivel de la cadena los cede y qué producto metabólico origina al oxidarse.
 Aceptor final de electrones: a qué nivel de la cadena los capta y qué producto origina cuando se
reduce.
 Cuáles son las enzimas o complejos enzimáticos que participan.
 Cómo se origina la fuerza motriz de protones y su relación con la síntesis de ATP (quimiósmosis)
 Cómo ocurre el flujo inverso de electrones que genera poder reductor (si es el caso).
BACTERIAS NITRIFICANTES: OXIDANTES DE AMONIACO Y NITRITO
Donadores de e-: componentes inorgánicos reducidos (NH3-, NO2-). Aceptor de e-
Producto metabólico final: Nitratos (NO3-.
Dominio bacteria: autótrofoas, aerobias estrictas.
Hábitat: aguas y suelos ricos en NH3:
 Lagos/Ríos con aporte de aguas residuales
  Plantas digestoras de aguas residuales.
Sistema membranoso aloja enzimas clave: amoníaco-monooxigenasa (AMO), Hidroxilamina-
óxidoreductasa (HAO), Nitrito-oxidoreductasa (NOR).
Ninguna especie se oxida por sí solo amoníaco hasta nitratos en aerobiosis.
1. Bacterias nitrosificantes: oxidación amoníaco a nitrito (nitrosomonas)
a. NH3 → NH2OH + H2O → NOH → NO2+ 4H+ → NO3+2H+
2. Bacterias oxidantes de nitritos: oxidan nitritos a nitratos.
El proceso genera muy poco ATP. Estas bacterias crecen 20 veces más lento que la media.
Nitrificación
Etapa 1: Oxidación de amoníaco a nitritos

El proceso no genera NADH (poder reductor). Se requiere un proceso de Flujo Inverso de e-. Los e
(impulsados por la FMP) retroceden contra gradiente termodinámico desde el Cit c hasta una ferroproteína,
donde son captados por NAD, que se reduce a NADH.
Etapa 2: Oxidación de nitritos a nitratos

Excepción: nitrificación completa en anaerobiosis → Bacterias ANAMMOX (Anaerobic amonium

oxidation).
Oxida amoníaco (donador de E-) reduciendo nitritos (aceptor de e-) con producción de N2 y H2O. Ocurre
en una “organela”: anamoxisoma. Brocadia anammxidans: plantomiceto. Citoplasma compartimentalizado.
De interés en el diseño de digestores industriales anóxicos para eliminar amoníaco
El amonio/amoniaco que se producen por descomposición de compuestos orgánicos nitrogenados son
oxidados a nitrato. El nitrato es un nutriente esencial para las plantas, algas, y otros procariotas (por ejemplo,
cianobacterias).
Los nitrificantes también son importantes en el tratamiento de las aguas fecales y las aguas residuales al
eliminar aminas toxicas y amoniaco y liberar compuestos de nitrógeno menos tóxicos
La acumulación de nitratos y consumo de amoníaco acidifican el medio favoreciendo la solubilización de
minerales (estas bacterias se utilizan como indicadoras de fertilidad de suelos).
BACTERIAS METANOTROFAS: OXIDANTES DEL METANO
Donadores de e (y Fuente de C): 1 átomo de carbono (C1) Metano
Ejemplo: Metanótrofos.
 Donador de e-: metano
 Aceptor de e-: O2
 Producto metabólico: CO2
Hábitat: zonas de acumulación de metano:
 Descomposición de materia orgánica
 Dorsales oceánicas
 Sedimentos marinos
 Endosimbiontes (branquias de Batymodiolus)

FOTOTROFÍA
Fuente de carbono: CO2 o compuestos orgánicos
Fuente de energía: luz
Captación de energía mediante FOTOFOSFORILACIÓN en procesos de FOTOSÍNTESIS (clorofilas) en
una CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
O en procesos No dependientes de clorofilas AMBOS en la membrana plasmática
Fotofosforilación no dependiente de clorofilas
Mediado por bacterioodopsinas
Ciertas especies de haloarqueas como Halobacterium salinarum (extremófilo halófilo) pueden llevar a
cabo la síntesis de ATP mediada por la luz. Esto sucede en ausencia de pigmentos clorofílicos y por tanto
no se considera fotosíntesis
Aunque es un procariota aeróbico, cuando las células de Halobacterium crecen en condiciones en las que el
oxígeno resulta limitante (anóxicas) se dispara la síntesis de bacteriorrodopsina, la cual se integra en su
membrana citoplasmática
El mecanismo “Fotótrofo” más sencillo que se conoce
Genera ATP en una reacción mediada por la luz, SIN clorofilas: No se considera fotosíntesis. Es aeróbico,
pero a bajas condiciones de oxígeno, puede obtener energía de la luz.
Bacteriorrodopsina: cromoproteína fotorreceptora
Grupo proteico + grupo cromóforo: Carotenoide RETINAL (similar al de vertebrados) absorbe luz (=565
nm). Configuración trans RetT → cis RetC
Cada vez que la proteína absorbe un fotón experimenta un cambio conformacional y bombea un protón al
periplasma. Se genera un gradiente de H+ (FMP) que usa la ATPasa para generar ATP (por quimioósmosis)
FOTOSÍNTESIS ANOXIGÉNICA
BACTERIAS VERDES Y PÚRPURAS DEL AZUFRE

Síntesis de energía y poder reductor en fotótrofos (a) anoxigénicos y (b) oxigénicos. Obsérvese que los
fotótrofos oxigénicos producen O2, mientras que los fotótrofos anoxigénicos, no
COMPLEJOS DE LA LUZ (FOTOSISTEMAS)
Catalizan la conversión de la luz mediante moléculas excitadas de clorofila o bacterioclorofila en una forma
útil de energía. Constituidos por complejo antena y centro de reacción encargados de captar la luz y emplear
su energía para impulsar electrones a través de una cadena de aceptores

Las moléculas de clorofila/bacterioclorofila están unidas a proteínas que, a su vez, están alojadas en
membranas formando fotosistemas
Bacterias púrpuras del azufre: Los pigmentos clorofílicos se encuentran formando fotocomplejos proteicos
(Light harvesting, LH y Reaction centers, RC) situados en membranas celulares
La energía lumínica absorbida por bacterioclorofila y otros pigmentos en complejos (LH) se transfiere a los
centros de reacción (RC) donde empiezan las reacciones fotosintéticas de transporte de electrones
Micrografía de fuerza atómica de fotocomplejos de la bacteria roja Phaeospirillum molischianum
Los centros de reacción suelen estar situados dentro de estructuras membranosas:
 Tilacoides en cianobacterias (fotosíntesis oxigénica)
 Membranas lamelares (invaginaciones de membrana) en bacterias anoxigénicas purpúreas
 Clorosomas: En la propia membrana citoplásmica en bacterias anoxigénicas verdes

Clorosomas Lamelas

Bacterias verdes y púrpuras del azufre

Bacterioclorofilas: en lamelas (A) clorosomas (B).
Pigmentos accesorios: carotenoides
 Amplían el rango de λ que puede absorber
 Por su gran número aumentan la velocidad de captación de la luz
 Agentes fotoprotectores frente luz solar intensa
Único fotosistema: P870. Absorbe luz de λ más largas. El O2 reprime las síntesis de bacterioclorofilas.
Anaerobios estrictos y facultativos.
 Lamelas (bacterias púrpuras): Invaginaciones de membrana que contienen los pigmentos
fotosintéticos
 Clorosomas (bacterias verdes): vesículas no rodeadas por membrana que contienen los pigmentos
fotosintéticos
Bacterias púrpuras del azufre
Anaerobios o microaerófilos. Zonas anóxicas con luz
 En manantiales sulfurosos
 En lagos ricos en sulfuro
 Los electrones vuelven a las bacterioclorofilas
 Sólo produce ATP. No genera Poder Reducto
Para obtenerlo:
 Donadores exógenos como SH2 ceden e al Cit C2 y desde él
fluyen por la c.t.e. en sentido inverso (usando F.M.P)
finalmente reducen NADP+ a NADPH
 El donador exógeno (SH2) no reintegra e a la
bacterioclorofila.
La luz transforma el P870 de un estado basal a un estado excitado
(P870*). Actúa como un potente reductor y le cede sus electrones a la
bacteriofeofitina A (que se reduce), y los cede a la C.T. E.
Bacterias verdes del azufre.
Hábitat: Lodos, Agua dulce y marina, ricas en sulfuros: organótrofos
facultativos
Fotofosforilación ACÍCLICA
Los e que entran en la cadena transportadora desde la bacterioclorofila fluyen
hasta una ferredoxina, que los cede al NADP+ formando Poder Reductor. La
bacterioclorofila recupera electrones procedentes de la oxidación de SH2.
El donador exógeno (SH2) SI reintegra e a la bacterioclorofila

Aceptores terminales de electrones: compuestos inorgánicos y algunos orgánicos. Los productos

metabólicos que se generan proceden de la reducción de los aceptores terminales de e-
En el metabolismo asimilativo (nutricional) Nitratos, Sulfatos y CO2 se reducen para formar parte de los
constituyentes celulares

METABOLISMO DESASIMILATIVO:
 Nitratos, Sulfatos y CO2 se reducen durante la obtención de energía. No son nutrientes (no generan
precursores para biosíntesis). El producto reducido es excretado al medio
BACTERIAS DESNITRIFICANTES
La mayor parte del N2 gaseoso de origen biológico procede de la DESNITRIFICACIÓN
Reducción desasimilativa que convierte Nitratos en N2 gaseoso (condiciones anóxicas)
 Proceso perjudicial para la agricultura (las plantas utilizan nitratos
 De importancia en la depuración de aguas residuales
 La respiración anaerobia de nitratos ocurre en sistemas membranosos
 En bacterias de suelos y lodos, anaerobias facultativas, heterótrofas o autótrofas
Desnitrificación: ocurre en una serie reacciones en cadena catalizadas por varios enzimas 4 reductasas
terminales, reprimibles por O2 e inducibles por sustrato.

Nitrito-reductasa (NIR)
Integradas en Nitrato-reductasa (NAR)
la membrana Periplasma
Óxido nítrico-reductasa (NOR) Óxido nitroso-reductasa (NOS)
Cada reductasa tiene su propio aceptor de e: el producto generado por la reductasa anterior

Inducción “en serie”:

El producto generado por una reductasa
es el sustrato (aceptor final de e) de la reductasa siguiente
La síntesis de cada una de las reductasas no tiene lugar hasta que se acumula su sutrato
Bacterias sulfatoreductoras y sulfuroreductoras
Anaerobias obligadas, que habitan ambientes anóxicos ricos en sulfatos:
Hábitat: sedimentos, suelos encharcados, frutas en descomposición, microbiota.
Donador de e-: lactato y priuvato (y otros) (heterótrofos), gas hidrógeno (H2) (Autótrofos)
Aceptores de e-: sulfatos (SO4-) o azufre elemental (S0).
Producto metabólico final: sulfuro de hidrógeno (H2S).
El H2 externo, o proveniente del catabolismo del lactato, es oxidado por hidrogenasa (H2asa). Se generan H+
y e-
El sulfato (SO42-) se reduce mediante la sulfurilasa, formándose la adenosina-fosfo-sulfato (APS)
El Cit c3 acepta los e y los transfiere al complejo Hmc, y a la ferrosulfoproteína (FeS)
 APS-reductasa → APS →Sulfito (SO32-) → Sulfito-reductasa →sulfuro
FOSFORILACIÓN A NIVEL DE SUSTRATO
Producción de ATP a partir de ADP por transferencia directa de un grupo fosfato de alta energía de un
compuesto metabólico intermedio fosforilado

FERMENTACIÓN
La fermentación permite obtener ATP y NAD+ en el catabolismo de glúcidos (glucosa) en ANAEROBIOSIS
La fermentación y la respiración celular comienzan con la glucólisis. Sin embargo, en la fermentación, el
piruvato producido en la glucólisis no continúa su oxidación hacia el ciclo del ácido cítrico. Tampoco
interviene la cadena respiratoria. En la fermentación, a partir de una molécula de glucosa solo se obtienen
dos ATP. En la respiración aeróbica se producen de 36 a 38 ATPs
Un compuesto orgánico es a la vez donador y aceptor de electrones, y el ATP se genera mediante
fosforilación a nivel de sustrato
En ausencia de respiración aerobia o anaerobia, el NADH no es oxidado
por la cadena de transporte de electrones ya que no se dispone de ningún
aceptor externo de electrones. Muchos microorganismos usan al piruvato
(o a uno de sus derivados) como aceptor de electrones y de hidrógeno en la
reoxidación del NADH
La fermentación permite la REGENERACION del NAD+, necesario para
la glucólisis
VÍA DE ENTNER-DOUDOROFF
Vía utilizada para metabolizar glucosa en ciertas bacterias Gram (-) aerobias
que carecen de Fosfofructoquinasa-1 para convertir fructosa 6-P en fructosa 1,6 difosfato.
Gram negativos: Pseudomonas, Azotobacter, Agrobacterium, Rhizobium
Muy pocas bacterias Gram positivas: Enterococcus faecalis es una excepción
Balance: Glucosa +ADP + NAD+ + NADP+ → 2 Piruvato (C3) +ATP + NADPH + 2H+
Microorganismos: alta diversidad de estrategias metabólicas para obtener energía
Metabolismo compartido por Procariotas y Eucariotas
 Respiración aerobia de comp. orgánicos
 Fermentación Alcohólica y Láctica (no existe en arqueas)
 Fotosíntesis Oxigénica (no existe en arqueas)
 Vía de las Pentosas-Fosfato
Metabolismo exclusivo de procariotas
 Litotrofía (Respiración aerobia (y excepcionalmente anaerobia) de comp. Inorgánicos)
o Metanogénesis (sólo en arqueobacterias)
 Fotosíntesis Anoxigénica (no existe en arqueas)
 Fotofosforilación no dependiente de clorofilas (sólo en la arquea Halobacterium salinarum)
 Ciertas fermentaciones que implican la ruta de Embder Meyerhoff (Glucolisis)
 Fermentaciones que implican la ruta de EntnerDoudoroff (algunas eubacterias)
Sintrofía: Degradación de varios sustratos por DOS microorganismos diferentes, que serían incapaces de
degradarlos individualmente
Transferencia Interespecífica de Hidrógeno
Frecuente: una de las especies produce Hidrógeno, consumido por la otra especie (desnitrificantes,
sulfatoreductoras, metanógenas ..)

Oxidación de etanol a acetato: energéticamente desfavorable → Se hace favorable al acoplarse al consumo

inmediato de H2 por un metanógeno
Reacción sintrófica acoplada: etanol + CP2 → Metano + acetato + 2H+
 TEMA 9: GENÉTICA DE MICROORGANISMOS
Los procariotas deben adaptar su metabolismo a condiciones fluctuantes, como cuando cambia el suministro
de nutrientes (p. ej. crecimiento diáuxico) o cuando la disponibilidad de oxígeno se vuelve limitante. Las
vías metabólicas centrales de una célula están controladas por una serie de reguladores globales o factores
de transcripción
Sujeto a múltiples niveles de control:
 Transcripcional
 Traduccional
 Control alostérico
La expresión génica en procariotas está regulada principalmente a nivel de transcripción

REGULACIÓN DEL METABOLISMO: REGULACIÓN DE LA SÍNTESIS DE ENZIMAS

REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL
Gen A → transcripción → ARNmA → Traducción → Enzima A
Operones: grupos de genes que “operan” conjuntamente. Formado por:
 Genes estructurales que codifican las enzimas que intervienen en una ruta metabólica.
 Promotor al que se une la ARN polimerasa para transcribir los genes estructurales.
 Operador con afinidad por un elemento regulador de la transcripción de dichos genes.
Los genes bacterianos están organizados en OPERONES o grupos de genes corregulados
REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL POR CONTROL NEGATIVO
 Represión enzimática: regula procesos anabólicos (síntesis de aminoácidos). Requiere un represor
ligado a un correpresor.
o El operón arginina, regula la síntesis del aminoácido arginina. La arginina es el correpresor.
1. Se acumula arginina (correpresor). Se une al represor y lo activa: reprime la
transcripción del operón.
2. Se detiene la síntesis de arginina.
3. La arginina reprime su propia síntesis.
4. El operón volverá a funcionar cuando la célula agote el aminoácido.

 Inducción enzimática: regula procesos catabólicos (degradación de lactosa).

o Participan un represor y un inductor.
1. El represor sólo funcionará como tal si está libre en su inductor.
o El operón lactosa: regula la degradación de lactosa.
1. No hay lactosa. El represor libre está activo:
 Reprime la transcripción del operón.
 No habrá enzimas que degraden lactosa.
2. El azúcar es el inductor.
3. Aparece lactosa en el medio se une al represor y lo inactiva: el operón se transcribe
4. Las enzimas resultantes degrdarán la lactosa.
5. La presencia del azúcar. Induce su propia degradación.

REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL: CONTROL POSITIVO

La unión de la polimerasa al promotor es débil: requiere un ACTIVADOR que estabilice. La unión de la
polimerasa al promotor.
El activador sólo funciona ligado a un efector. Operón maltosa
Cuando no hay maltosa:
1. La proteína activadora (libre) no funciona.
2. La polimerasa no mantiene su unión al promotor
3. El operón no se transcribe
4. No habrá enzimas que degraden maltosa.
Aparece la maltosa (efector):
 1. Se liga a la proteína activadora.
2. Unión estable polimerasa-promotor
3. El operón se transcribe
4. Las enzimas resultantes degradarán la maltosa.

REGULACIÓN GENÉTICA A NIVEL TRANSCRIPCIONAL

Especificidad: represores e inductores específicos para cada operón. (Reconocen secuencias del operador).
Operón: operador (o sitio de unión del activador) + promotor + genes estructurales no siempre son contiguos.
 Operones con promotor bajo múltiples tipos de control.
 Operones con más de 1 promotor.
 Varios operones bajo el control del mismo represor o proteína reguladora.
Plasticidad: los procariotas regulan su metabolismo en respuesta a cambios de condiciones ambientales,
como pH, O2, tipos de nutrientes, densidad poblacional.
Proteínas sensoras: perciben un cambio en el medio externo y activan proteínas reguladoras en el
citoplasma.
Sistemas reguladores de dos componentes:
 Protéi-quinasas sensoras
 Proteínas reguladoras de respuesta.
SISTEMAS REGULADORES DE DOS COMPONENTES (mediados por sensores de superficie)
QUINASAS
Sensores específicos para cada señal química del ambiente.
1. Ante la señal sufren autofosforilación.
2. Una vez fosforilada, ceden su grupo fosforilo
Regulador de respuesta:
 Regulador fosforilado: inactivo
 Regulador desfosforilado: activo (funciona como
represor).
Regulan respuestas adaptativas a gran variedad de estímulos:
nutrientes, estado rédox celular, cambios en la osmolaridad,
señales de quórum, antibióticos, temperatura, quimioatrayentes,
pH, entre otros. Entre el 1 y el 2 % del genoma bacteriano está
dedicado a estos sistemas.
Si desaparece la señal del ambiente cesa la fosforilación-
defosforilación de la quinasa: el Regulador de Respuesta se activa
(pierde el grupo fosforilo) y la transcripción se bloquea de nuevo
 MECANISMOS DE INTERCAMBIO DE GENES
EN PROCARIOTAS

TRANSFORMACIÓ TRANSDUCCIÓN CONJUGACIÓN

N
Son procesos unidireccionales: de bacteria donadora a bacteria receptora.
Sin contacto físico entre exogenote y endogenote
Transformación: el endogenote capta ADN bicatenario libre en el medio
Transducción: Transferencia de ADN del exogenote al endogenote mediada
por un bacteriófago
Requiere contacto físico entre exogenote y endogenote
Conjugación: Transferencia de ADN del exogenote al endogenote mediada
por un plásmido
TRANSFORMACIÓN
Integración en el cromosoma de ADN captado del medio externo
CARACTERÍSTICAS
 Ocurre en algunas especies (bacterias o arqueas) y sólo en una parte de la población
 Se transfiere una sola molécula de ADN cada vez hasta que el sistema se satura.
 El endogenote debe estar en estado de “competencia” (temporal).
Bacteria competente: capaz de captar y procesar ADN exógeno (ADN transformante) sintetizando:
 Autolisinas: rompen la pared para dejar expuesta la membrana
 Proteínas de membrana con afinidad por ADN exógeno
 Nucleasas: degradan las hebras de ADN.
 Proteínas que transportan ADN ss hasta el nucleoide.
 Proteínas Rec A que ensamblan en el cromosoma el fragmento de ADN exógeno (región donde
recombinó)
 La bacteria es ahora un TRANSFORMANTE
 Es RECOMBINANTE (genes propios y ajenos)
TRANSFORMACIÓN EN GRAM (+) TRANSFORMACIÓN EN GRAM (-)
Fuente de ADN: Lisis espontánea Fuente de ADN: Sistema de secreción o apoptosis
(muerte celular programada)
Inespecífica: el ADN exógeno recombina en el Específica, el endógeno sólo capta ADN exógeno sí
cromosoma receptor si hay homología de secuencia reconoce en él las secuencias DUS (DNA uptake
(misma o distinta especie) sequences) muy repetidas en ambos genomas.
Estado de competencia inducido mediante Quorum Estado de competencia no dependiente de señales
sensing químicas externas
Capta ADN bicaternario y lo procesa a Lo procesa a monocatenario en periplasma y lo
monocatenario en el exterior celular transporta al nucleoide den vesículas membranosas:
transformasomas
Algunos Gram (+): alta eficacia Se transforma el Se transforma un bajo % de la población
100% de la población
Transducción: Transferencia de genes entre bacterias, mediante FAGOS ATENUADOS
Fagos atenuados: capaces de alternar un ciclo LÍTICO y un ciclo LISOGÉNICO
Ciclo lítico: el ác. nucleico viral entra en la bacteria, que lo replica, transcribe y traduce Se ensamblan las
cápsides de los nuevos fagos y la bacteria lisa liberando la progenie
Ciclo lisogénico: el: el ác. nucleico viral no transcribe ni replica, ni traduce. Se integra en el cromosoma
bacteriano, pasando al estado de PROFAGO. El proceso es reversible: el profago se puede escindir e iniciar
un ciclo lítico en esa misma bacteria.
Anomalías: (durante los ciclos lítico o durante el lisogénico) generan fagos TRANSDUCTORES
Fago transductor: fago capaz de transducir a una bacteria endogenote, transfiriéndole genes cromosómicos
procedentes del exogenote donde se originó.
FORMACIÓN DE FAGOS TRANSDUCTORES
1. Ciclo lítico: los fagos transductores se forman a consecuencia de una
encapsidación errónea.
a. Cuando la cápside se ensambla incluye (al azar) algunos genes del
hospedador (libres en el citoplasma tras la fragmentación del cromosoma
bacteriano durante la infección) y pierde parte de sus propios genes (la
cápside tiene una capacidad limitada)
2. Durante un CICLO LISOGÉNICO: El fago se integra (temporalmente) en sitios
específicos de su cromosoma.
a. Los fagos transductores se originan cuando el profago se escinde de forma
errónea, dejando en el cromosoma parte de su ADN y arrastrando consigo
algún gen del hospedador, pero no cualquiera, sino alguno de los que
flanqueaban al profago
En ambos tipos de ciclo, los fagos TRANSDUCTORES formados en el exogenote son:
 RECOMBINANTES (ADN propio y ADN del hopedador)
 DEFECTIVOS: su genoma está incompleto
TRANSDUCCIÓN GENERALIZADA
Se puede transferir cualquier trozo de genoma bacteriano con tamaño compatible con la capacidad de
“empaquetado” de la cápsida del fago. Las partículas transductoras sólo se forman como consecuencia de
infecciones líticas del fago.

TRANSDUCCIÓN ESPECIALIZADA
Se transfiere un número limitado de genes adyacentes al sitio de integración del profago. Las partículas
transductoras sólo se forman como consecuencia de infecciones lisogénicas
CONJUGACIÓN
La conjugación mediada por Pili F y Plásmidos F se da en Bacterias Gram (-)
 Pili F (Fimbria sexual): canal de transferencia del ADN del exogenote
 Plásmido F: CONJUGATIVO: capaz de poner en marcha un proceso de conjugación
o Porta genes que codifican la proteína de la fimbria sexual y conducen su propia transferencia
al endogenote (a veces transfiere también genes de cromosomas).
 Exogenote F+: porta plásmido F y sintetiza Pili F (Bacteria fértil)
 Endogenote F-: sin plásmido F, no forma Pili F.
1. El plásmido exogenote se replica por “círculos rodantes”
2. Una de las 2 cadenas pasa al endogenote a través del Pili (“puente conjugativo”)
3. En el endogenote circulariza y replica, originando un nuevo plásmido bicatenario
4. El endogenote que capta el plásmido F cambia su fenotipo: se convierte en donador F+
Mapa genético del plásmido F de Escherichia coli
 oriV secuencia que determina el origen de replicación del plásmido. Necesaria para que el plásmido
se duplique
 La región tra contiene los genes necesarios para la transferencia conjugativa (formación del pili)
 oriT secuencia necesaria para el proceso de transferencia del ADN plasmídico. Lugar de unión de la
enzima relaxasa
 Las secuencias de inserción (IS) pueden recombinarse con elementos idénticos en el cromosoma
bacteriano
La síntesis de DNA es necesaria para la transferencia de DNA por conjugación. La síntesis del plásmido es
en círculos rodantes.
Plásmidos movilizables: Incapaces de generar un proceso conjugativo, pero pueden transferirse entre
bacterias durante la conjugación mediada por un plásmido F.
 Plásmidos R: resistencia a antibióticos/metales pesados
 Plásmidos Col: producción de bacterias (colicinas) e inmunidad)
 Plásmidos de virulencia: producción de toxinas.
o Toxina tetánica de Clostridium tetani
o Toxina del ántrax en Bacillus anthracis
 Plásmidos de Rhizobium: codifican funciones ligadas a la simbiosis. Fijadora de nitrógeno en
nódulos radicales de las leguminosas.
 Plásmidos Ti y Ri de Agrobacterium: producción de tumores en dicotiledóneas
CONJUGACIÓN ENTRE EXOGENOTE F+ Y ENDOGENOTE F-
No suele ocurrir en parejas sino en agregados de hasta 20 células.
1. Interacción: extremo terminal del Pili F y receptor de superficie del endogenote
2. Retracción del pili F: pone en contacto las paredes celulares de donador y receptor
3. Estabilización del agregado: citoplasma conectadas por un canal
4. Replicación y transferencia: del plásmido F. Intervienen dos complejos proteicos
a. Relaxosoma: endonucleasa corta el plásmido en ORI (inicio de replicación)
b. Transferosoma:
5. Desagregación del agregado: tras cierto tiempo de conjugación
 Nuevo
5 donador,
(ahora
+)
F
s
ESTADOS DEL PLÁSMIDO F

La bacteria F’ es un tipo de bacteria Hfr

CONJUGACIÓN EN BACTERIAS GRAM (+)
Se conocen pocas conjurantes (Streptococcus, Bacillus, Clostridium).
 No participan fimbrias sexuales
 Conjugación mediada por producción de feromonas excretadas por el endogenote, que estimula en
el exogenote la producción de sustancias agregantes (aseguran proximidad)
Conjugación en arqueas: menos estudiada. Descrita en Halobacterium una modalidad bidireccional de
conjugación sin plásmidos
Conjugación inter-reinos
Agrobacterium conjuga con células de la raíz de leguminosas. Transfiere un plásmido que integra en uno de
sus cromosomas con genes que codifican proteínas reguladoras del crecimiento vegetal, causando tumores
Helicobacter pilori: genera gastritis y úlcera. Se le asocia también a linfoma de estómago.
ELEMENTOS GENÉTICOS MÓVILES
Son fuente importante de VARIABILIDAD genética.
Transponsones: descubiertos inicialmente en eucariotas
Elementos genéticos móviles distintos de plásmidos/virus. Se desplazan a diferentes puntos del genoma de
una célula o a otras células (TRANSPOSICIÓN).
 Saltan de un punto a otro, o enviar una copia a otro lugar del cromosoma
 Pueden
o arrastrar con ellos un gen (ej: de genes de Resistencia a antibióticos) o
o modificar la secuencia de destino (Ej.: interrumpir un gen)
  Si se insertan en genes reguladores, afectarán a la expresión génica
Simples: sólo contienen genes implicados en su transposición (IS elements)
Compuestos: portan genes adicionales.