INTEGRANTES:

• ACHAHUANCO CHAMBI, KATY

• APAZA YANA, PAUL
• CHACÓN BOLÍVAR, THALÍA
• MAMANI CONDORI, ROSA MARÍA
• CHÁVEZ URDAY, ALESSKA
• PALOMINO AFATA, ASTRID
KAROLINA
INTRODUCCIÓN
La disminución del suministro de
combustibles fósiles y el aumento de Fuentes de energía alternativas
las emisiones de gases de efecto
invernadero
Las macroalgas capturan la luz solar y
el dióxido de carbono para hacer
fotosíntesis, además de producir
aceites vegetales que se pueden
transformar en biodiesel
Están compuestas de polisacáridos
(bioetanol). No liberan compuestos
nitrogenados o sulfurados al ambiente.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
HIPÓTESIS
OBJETIVOS
METODOLOGÍA

MATERIALES
• MATERIA PRIMA: Ulva rigida
• MICROORGANISMO FERMENTADOR: Saccharomyces cerevisiae 5 g/l y 0,2 g
• Tubos cónicos de centrifuga 50ml
• Agua destilada 1.5 L
• Vaso precipitado 250 ml
• Micropipeta 30uL
• Matraces Erlenmeyer – modificado 50 ml
• Jeringa de 1 ml
• Tubos Eppendorft de 1,5 ml
REACTIVOS
• Ácido sulfúrico (H2SO4) 0% y 2% v/v
• Hidróxido de Sodio 2M
• Buffer acetato de sodio
• Sulfato de magnesio (MgSO4.7H2O) 0.025 g/l
• Fosfato diamónico (NH4)2HPO4 0.5 g/l
INSTRUMENTOS
• Estufa Gallenkamp a 60°C
• Baño termostato
• Autoclave
• Peachimetro
• Centrifuga
• Agitador Rotatorio
OBTENCIÓN DE MACROALGA
• La macroalga a utilizar (Ulva rigida) será proporcionada
por el Programa de Estudios Biología, de la Universidad
Nacional de San Agustín, sede Arequipa. El tamaño de la
muestra recibida será el apropiado para comenzar el
pretratamiento.
SECADO
• Se tomará una masa determinada de alga y se llevara a
una estufa Gallenkamp a 60°C durante 24 horas. La
pérdida de masa que sufra la muestra durante las 24
horas de secado en la estufa servirá para medir el
porcentaje de humedad que posee la muestra.
PRETRATAMIENTO
• Hidrolisis acida: En tubos cónicos para centrifuga de 50 ml se agregan, a razón
1:10 (1g y 10 ml), el material a pretratar y el ácido sulfúrico a una concentración
de 0% y 2% v/v.
• El proceso de pretratamiento se evaluara a dos temperaturas de 30°C y 120°C
o 30°C: Se efectuara en un baño termostato
o 120°C: Se realizara en un autoclave con un volumen de 1.5 litros de agua
destilada; los tubos son cerrados y el conjunto es llevado a una campana
extractora de gases; se cierra el autoclave y se somete al contacto directo de una
llama mediante un mechero. En el momento en que el agua ha empezado a
hervir, se deja reaccionar por 30 minutos. Para terminar la reacción, se enfría la
autoclave mediante un baño de hielo y se extraen las muestras que finalmente
también son depositadas en hielo.
• Neutralización: Las muestras se vierten en un vaso precipitado de 250 ml y se
procede con la neutralización mediante hidróxido de sodio de 2M hasta alcanza
un pH entre 8 y 11.
• Medición de la Glucosa: Se toma una muestra de 0.03 ml a 4°C.
• Separación fracción sólida y liquida: La mezcla se centrifuga a 10000 rpm
durante 10 min y se separa la fracción solida de la liquida.
 De la fracción líquida proveniente de la separación por
medio de la centrifugación, se utilizará 18 ml y se agregarán
al matraz de 50 ml, se agregará 2 ml de buffer acetato de
LA FERMENTACION sodio 10x (el cual posee los siguientes nutrientes para
proporcionar un medio base: 5 g/l de extracto de levadura,
0,025 g/l de MgSO4x7H2O y 0,5 g/l de (NH4)2HPO4). A la
mezcla anterior se agregará 0,2 g de levadura seca para
obtener una concentración inicial de 10 g/l de células.

El método DNS (técnica de miller) es una técnica

colorimétrica que emplea ácido 3,5 dinitrosalicílico para la
hidrólisis de polisacáridos presentes en una muestra.
Determina las absorbancias por medio de un
CUANTIFICACIÓN espectrofotómetro a 540nm.
Esta técnica sirve para cuantificar los azucares reductores
DE GLUCOSA
producidos durante una fermentación o para cuantificar los
productos de una reacción enzimática.
CANTIDAD DE ALCOHOL

1. Se toman 0.2 ml de la muestra, medidos en un

cilindro graduado, y se introducen en el matraz de destilación
de fondo redondo de 100 ml
2. Se añaden dos o tres piedras de ebullición dentro del
matraz, a fin de evitar los fenómenos de sobrecalentamiento
3. Se coloca en la manta de calentamiento, el
a) MONTAJE DEL SISTEMA DE calentamiento debe ser continuo y lento
DESTILACIÓN 4. En el cilindro se recogen 0.17 ml de destilado sobre
los que se añade agua hasta llegar a 0.2 ml. La mezcla acuo
alcohólica obtenida se agita para homogeneizar y, se lleva a
20ºC de temperatura o a la temperatura de trabajo.
 1. Se llena el picnómetro de agua destilada (líquido de
referencia hasta el enrase), seca, y luego pesa el picnómetro (m
agua). Después vacía el agua
2. Humedezca el interior del picnómetro y su tapa con
un poco de alcohol, dos veces, deja secar y después llena hasta
el enrase el picnómetro con la mezcla acuoalcohólica obtenida
en el proceso de destilación
3. Se pesa nuevamente el picnómetro (m liq.).
b) DETERMINACIÓN DE 4. Vacía la mezcla, lava con agua el picnómetro,
DENSIDADES RELATIVAS DE enjuague dos veces con alcohol y deja secar.
LÍQUIDOS USANDO UN 5. Busque la densidad del agua a la temperatura de
PICNÓMETRO: trabajo con las siguiente formula fundamentada con el
principio de Arquímedes: “ Todo cuerpo sumergido en el seno
de un fluido, sufre una fuerza ascendente (empuje) cuyo valor
es igual al peso del fluido desalojado por el cuerpo”

6. Obtenida la densidad se consulta la siguiente Tabla

de equivalencias "densidad/porcentaje en volumen de
alcohol".(ANEXO)
DIAGRAMA DE FLUJO DE OBTENCION DE BIOETANOL
GRACIAS