ALIMENTACIN

Selecciones Avcolas

Micotoxinas en los alimentos: medidas de prevencin y detoxificacin

J. Borrell y G. Gimeno (*)

INTRODUCCIN
Los hongos al igual que las bacterias intervienen de forma definitiva en los procesos degradativos de la materia orgnica. Esta actividad degradativa no es la nica que los hongos realizan. El metabolismo fngico es capaz de producir y sintetizar otras sustancias que utilizan como: reservorio de energa. lucha qumica contra competidores del sustrato. acceso a otras sustancias qumicas... As existen diversos ejemplos, entre ellos la biotransformacin de lpidos, vitaminas, acaricidas y enzimas. Dentro de este grupo tambin se pueden incluir las micotoxinas, molculas txicas peligrosas para microorganismos, vegetales, animales y el hombre. Es importante considerar la relevancia de la presencia de hongos y micotoxinas en los alimentos y los efectos econmicos y sanitarios derivados de los mismos. La presencia de micotoxinas en la alimentacin animal en cantidades suficientes pueden desencadenar diversos sndromes localizados en rganos

Tabla 1. Clasificacin de las principales micotoxinas aviares (*)

Sndrome Hemorrgico Hepatorenal Micotoxinas responsables Aflatoxinas, patulina, rubratoxina, T-2, c glaucnico Aflatoxinas, luteoskirina, c. Ciclopiazonico, ocratoxina, rubratoxina, citrinina Ocratoxina Fusariogenina, zearalenona Citreoviridina, patulina, fenicina, rubratoxina T-2, staquibrotriotoxina, cido Oxlico, vomitoxina y derivados de tricotecenos T-2, diaceetoxyscirpenol Zearalenona Tricotecenos, aflatoxinas, ocratoxina

Nefroptico Reproductivo Nervioso Gastrointestinal

Leucopnico Subcutneo Disminucin del rendimiento zootcnico Inmunosupresin

Aflatoxinas, tricotecenos, ocratoxina A

(*) Direccin de los autores: BIOVET, S.A. c/ Luxemburg, 25. Pol. Industrial 43120 Constant (Tarragona) Tel 977 75 13 82

especficos. La siguiente tabla muestra los principales sndromes aviares producidos por micotoxinas. Adems, su presencia continuada aun a bajas concentraciones supone consecuencias econmicas importantes que se traducen en prdidas de morbilidad, mortalidad y descenso de la produccin. Por todo ello, ser de especial inters el conocimiento de los mtodos de control, prevencin y detoxificacin que eviten o palien las repercusiones econmicas y sanitarias originadas por la presencia de micotoxinas en el alimento.

TXICOS FNGICOS: FUNCIN, INCIDENCIA, ESTRUCTURA QUMICA Y GRUPOS REACTIVOS.

La prevencin y la eliminacin de la contaminacin producida por micotoxinas implica el conocimiento de cuales son las de mayor incidencia, de su estructura y de la capacidad reactiva con otras molculas que permitan su transformacin en otras estructuras no txicas. A continuacin se presenta una tabla que resume las micotoxinas de mayor incidencia, los hongos produc-

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tores de dichas molculas y su estructura qumica. Segn muestra la tabla, desde el punto de vista estructural, las micotoxinas se clasifican en 4 grupos: 1. Micotoxinas derivadas de anillos cumricos producidos por Aspergillus: Aflatoxina B1 , B2 , G 1 , G 2 y stigmatocistina.

Tabla 2. Estructura qumica de las principales micotoxinas.

Micotoxina Aflatoxina B1, B2, G1, G2 Ocratoxina hongo productor Aspergillus flavus, parasiticus Aspergillus ochraceus, Penicillum viridicatum Aspergillus versicolor, hidulans Bipoloris estructura Qumica Anillo cumrico

Anillo lactnico

Sterigmatocistina

Anillo cumrico

Zearalenona

Fusarium tricinctum, moniliforme, Roseum gramineatum Anillo lactnico Fusarium y Trichothecium Fusarium y Trichothecium Fusarium y Trichothecium Fusarium y Trichothecium Fusarium y Trichothecium Penicillum expansum, patulum Sesquiterpenos Sesquiterpenos Sesquiterpenos Sesquiterpenos Sesquiterpenos Anillo lactnico

Tricotecenos Nivalenol Deoxinivalenol T-2

Aflatoxina B1

Diacetoxycirpenol Patulina

2. Micotoxinas derivadas de anillos lactnicos producidos por Penicillum y Aspergillus: Patulina y Ocratoxina.

Ocratoxina A 3. Micotoxinas derivadas de anillo lactnicos producidos por Fusarium: Zearalenona.

Sesquiterpeno

Segn los sustituyentes de los radicales se obtiene los distintos tipos de micotoxinas.

Una vez se ha establecido la clasificacin de las micotoxinas, se tratar de explicar la capacidad reactiva de alguno de los grupos qumicos comunes. As por ejemplo: Los grupos lactona de los derivados cumricos son comunes en las aflatoxinas B1, B2, G1, G2 , ocratoxina y patulina. Estos grupos pueden reactionar con cidos o con lcalis, provocando la ruptura de su estructura y la formacin de grupos carboxlico e hidroxlico en el punto del ruptura del anillos.

Tabla 3. Radicales sustituyentes del sesquiterpeno.

MICOTOXINAS R4 R3 R2 R1

Zearalenona

Nivalenol Deoxinivalenol

=O =O _ H

OH OH _ _

OH OH OCOH3 OCOH3

OH _ OCOH3 OCOH3

4. Sesquiterpenos derivados de tricotecenos producidos por Fusarium: Nivalenol, deoxinivalenol, T-2, Diacetoxycirpanol.

T-2 Diacetoxiscirpenol

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Los dobles enlaces no aromticos en grupo terminal dihidrofurano presentes en aflatoxina B, G1, stigmatocistina y zearalenona pueden ser atacables 1 mediante: - Reacciones de ozonlisis por el uso de ozono. - Reacciones de glicosilacin por el uso de sustancias oxidantes como perxidos - Reacciones por adicin al doble enlace de cidos como clorhdrico y sulfrico as como sus derivados. Ozonolisis: Grupo peptdico: Este grupo lo posee slo la acratoxina, la cual puede ser atacada enzimticamente por proteasas.

Glicolizacin:

DETOXIFICACIN DE LAS MICOTOXINAS. Detoxificacin y adsorcin de micotoxinas.

Adicin:

Se pueden diferenciar distintos mtodos para la detoxificacin de micotoxinas: - Mtodos naturales. - Mtodos fsicos. - Mtodos microbiolgicos. - Mtodos qumicos. -Mtodos naturales: Destaca la utilizacin de los cidos tauriclico, glucurnico y sulfrico, los cuales se conjugan con las micotoxinas dando lugar a metabolitos atxicos que se eliminan por bilis y orina. -Mtodos fsicos: 1. Radiaciones: Los rayos X son capaces de producir una emisin elevada de energa, la cual produce la ruptura de estructuras moleculares estables. Se ha establecido que las aflatoxinas B1 y G1 son ms sensibles a los rayos X.

Grupos hidroxilo de las micotoxinas y de adsorbentes hidratados: Los grupos hidroxilo hidratados pueden proceder de las micotoxinas como sterigmaticistina, zeara-lenona, ocratoxina A, patulina, nivalenol, deoxinivalenol o bien pueden proceder de ciertos adsorbentes hidratados como los silicatos.

Este tipo de unin, con enlace puentes de hidrgeno entre la micotoxinas y el adsorbente de micotoxinas, se produce tal y como se describe en el siguiente esquema:

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2. Calor: El calor utilizado como nico mtodo para la destruccin de micotoxinas resulta poco eficaz ya que las temperaturas que se alcanzan durante el proceso de detoxificacin afectan a las vitaminas y protenas del alimento. En cambio, el calor puede ser utilizado para aumentar la capacidad reactiva de molculas como son los cidos, lcalis y otros agentes. - Mtodos microbiolgicos: Anteriormente se ha citado la posibilidad del ataque de micotoxinas por enzimas especficos, como el caso de la ocratoxina A, cuyo grupo peptdico puede ser atacado por proteasas. Tambin se ha estudiado la accin que tiene la flora ruminal sobre las micotoxinas. Esta es capaz de esterificar la ocratoxina A, convirtindola en ocratoxina C. Asimismo se ha comprobado la accin aislada de bacterias y hongos tales como Corynebacterium rubrum, Asper-gillus Nger, Trichoderma viride y Mucor ambigus en la modificacin de la estructura de la aflatoxina B1. - Mtodos qumicos: 1. Insecticidas: El empleo de insecticidas para estos fines est actualmente abandonado debido a la problemtica de residuos derivada del uso de los mismos. 2. Uso de solventes: Una de las caractersticas fisico-qumicas ms destacadas de las micotoxinas es su capacidad de ser solubles en solventes orgnicos. As, combinaciones de solventes tales como hexanoacetona-agua o isopropanolagua entre otros, han demostrado arrastrar las micotoxinas. 3. Uso de agentes qumicos reactivos: en este apartado se incluyen los grupos qumicos capaces de reaccionar con la estructura de las micotoxinas. As distinguimos: -cidos tales como el cido clorhdrico, sulfrico y derivados. Tal como se indic, estos cidos son capaces de reaccionar con los grupos lactona de las aflatoxina B1 , G1 , patulina, zearalenona y con dobles enlaces no aromticos presentes en aflatoxinas, patulina, zearalenona y tricotecenos. Toxicolgicamente la reaccin de adicin de los cidos con los dobles enlaces parece ser la ms eficaz en cuanto a detoxificacin se refiere, ya que los productos de reaccin son sustancias polares, eliminables por la orina. -lcalis tales como monoetil y metilamina, hidrxido y cloruro clcico, hidrxido y carbonato sdico y amnico. Estas sustancias son reactivas con los grupos lactona de las aflatoxinas, ocratoxina, patulina y zearalenona. -Agentes oxidantes como el ozono, perxidos y permanganatos en solucin alcalina. Todas estas sustancias son reactivas con los dobles enlaces no conjugados de aflatoxinas y patulina. La reaccin denominada ozonlisis da lugar a nuevas molculas ms pequeas, aunque alguno de los productos obtenidos pueden ser txicos. La glicolizacin da lugar a la creacin de dos grupos hidroxilo que posteriormente pueden formar puentes de hidrgeno. Pero aun siendo este mecanismo eficaz para la detoxificacin, debera utilizarse en combinacin con polmeros o silicatos capaces de adsorber fsicamente la aflatoxina por medio de puentes de hidrgeno. - Agentes reductores como el formol reactivo con los grupos carbonilo de aflatoxina B, B2, 1 sterigmatocistina, zearalenona, nivalenol y deoxinivalenol, dando lugar a grupos hidroxilo que posteriormente podrn formar puentes de hidrgeno. 4. Uso de agentes qumicos inertes: En este apartado incluimos aquellas sustancias capaces de adsorber las molculas de micotoxinas en su estructura. Hay que destacar 3 grupos: -Carbn activo. -Polmeros de polivinilpirrolidona. -Arcillas, silicatos sintticos. - Carbn activado: El carbn activado corresponde a una estructura de carbono con una gran superficie externa, tanto fuera como en el interior de las molculas. No existen prcticamente referencias respecto a su utilizacin como adsorbente de micotoxinas, pero en cambio es un producto muy empleado en la fijacin de toxinas entricas. - Polmeros de pirrolidona: El mecanismo de accin de la pirrolidona se debe tanto al efecto de adsorcin fsica como al establecimiento de puentes de hidrgeno y nitrgeno en su estructura. - Silicatos alumnicos: Los silicatos alumnicos pertenecen al grupo de las arcillas, concretamente al grupo de los Phyllosilicatos y los Tectosilicatos entre los que se encuentran la bentonita, sepiolita, zeolita, etc... Estos compuestos poseen una estructura tridimensional bsica formada por la unin de tetraedros de SiO 4, tal y como se muestra en estas figuras:

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son los silicatos ya que a diferencia de otros mtodos: - no crean problemas de residuos, - no destruyen las vitaminas no las protenas, - no producen reacciones parciales, - no crean metabolitos txicos, - no tienen un precio demasiado elevado, Desde 1988 existen numerosas publicaciones demostrando el uso de los HSCAS como adsorbentes de micotoxinas, tanto estudios in vivo como in vitro. Shane -1989- indica que 100 mg de HSCAS adsorben 8 mg de aflatoxina B1 en solucin metablica despus de incubacin de 1 h. A 250C. Esta adsorcin es estable frente a la extraccin con solventes orgnicos y en agua a pH entre 2 y 10 a T de 25-37C. Los ensayos in vivo indican que la incorporacin de silicatos al 0,5-1% en el pienso de pollos contaminados con aflatoxina B1, T-2, o vomitoxina mejora el peso de los animales y el ndice de conversin. Diversos estudios realizados en campo muestran la eficacia de los HSCAS en el alimento. Destacan principalmente las mejoras obtenidas de diferentes parmetros, tal como se muestra en la tabla 4. Comentando la misma vemos que: Las lesiones plantares pueden ser debidas a diferentes orgenes. Por un lado, pueden producirse por deficiencias de biotina debidas a la falta de absorcin de la misma o pueden deberse a pequeas lesiones accidentales. Los tricotecenos presentes en las heces actan irritando las lesiones plantares ya existentes, agudizando el problema. La ingesta de HSCAS disminuye la presencia de lesiones plantares, pero no soluciona totalmente le problema. La descapsulacin del fmur se produce por la falta de absorcin de iones Ca/P a nivel intestinal. Ello es debido a la accin erosionante de las micotoxinas sobre la mucosa intestinal; por ello, la administracin de HSCAS mejora ste problema e incluso lo soluciona. La erosin en la molleja es producida por la presencia de hongos a nivel de la mucosa, aunque tambin puede deberse a diferentes orgenes. El tratamiento con HSCAS

Tetraedros independientes de SiO4

Representacin del empaquetamiento compacto del tetraedro de SiO4 Entre estos tetraedros se intercalan otros iones, como el aluminio. Los silicatos sdico alumnico clcico hidratados -HSCAS-, a diferencia de los silicatos alumnicos naturales, poseen una mayor capacidad de adsorcin al ser productos refinados. En su estructura, adems de los iones aluminio, intercalan otros como el calcio y sodio, aumentando la distancia entre los iones silicio y mejorando la capacidad de adsorcin. A continuacin se puede observar la estructura tridimensional de los HSCAS, la cual presenta numerosos puntos de enlace en su superficie

Tabla 4. Resultados obtenidos por el empleo de HSCAS en broilers.

Niveles de HSCAS en el pienso, Kg/ton Lesiones plantares, % Descapsulacin fmur, % Erosin intestino 0,75 1,4 2,2

75 63 2 2 2,36 4,28 2,47 251

50 12 1,7 1 3,06 4,72 3,36 261

50 0 0,75 1 2,59 4,4 2,85 265

50 20 0 1 2,97 4,43 2,86 275

Desarrollo esquemtico de una estructura de silicatos con inclusin de diversos iones.

Erosin molleja Peso relativo molleja, % Peso relativo intestino, % Peso relativo hgado, %

De todos los mtodos de detoxificacin anteriormente expuestos los ms empleados actualmente

FEEP (*)

(*) FEEP = (% de supervivencia x Kg PV) / das cra x Indice de conversin.

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mejora estas erosiones pero no desaparecen. Por lo que respecta a las erosiones en el intestino, stas son debidas a la accin de las micotoxinas, produciendo falta de absorcin de iones y nutrientes a nivel intestinal. Los HSCAS mejoran las lesiones y las hace desaparecer. Los pesos relativos orientan sobre el estado general del aparato digestivo y del hgado pero los resultados obtenidos muestran que no son buenos indicadores de la accin absorbente de HSCAS. Referente al FEEP, los resultados muestran que mejor notablemente a medida que se fue incrementando la dosis de HSCAS. Esta mejora supuso una disminucin del gasto en alimentacin durante el mismo periodo en estudio, debido a que se obtuvo un menor ndice de conversin y un incremento del peso de los animales. En c onclusin, el empleo de HSCAS en la alimentacin animal resulta esencial para mejorar los parmetros sanitarios y econmicos de aquellos animales con problemas de contaminacin por micotoxinas en el pienso.

BIBLIOGRAFA
(Se enviar a quienes la soliciten).

Probiticos y prebiticos: inters en avicultura. (Viene de pgina 564)

un importante papel en cuanto a la cantidad de MOS necesarios para que se establezca un grado de competicin exclusiva adecuado en el lumen intestinal, en general se obtienen buenos resultados con dosificaciones de 2 Kg/ Tm en piensos de primeras edades y de 0,5 a 1 Kg en los piensos de crecimiento y acabado. de la dieta de cara a obtener los resultados deseados. Vivimos en un mundo ganadero cada vez ms competitivo y con mrgenes econmicos muy ajustados. El nico modo de sobrevivir en esta actividad es mediante un sistema de produccin muy intensivo, con volmenes de produccin elevados y con una alta productividad de los animales. Desafortunadamente, este tipo de produccin tan intensivo suele venir acompaado por una elevada incidencia de patologas infecciosas que actualmente somos capaces, en mayor o menor grado, de controlar mediante el uso de antibiticos. Tal y como se ha apuntado al principio, existe una creciente preocupacin por parte de consumidores y autoridades sanitarias respecto al elevado uso de antibiticos en ganadera. Esta preocupacin est impulsando la investigacin de productos alternativos tales como los que se han tratado en este artculo, los cuales, aplicados correctamente y acompaados de buenas pautas de manejo y sanidad, pueden convertirse en magnficas herramientas para mantener el ritmo productivo de nuestras explotaciones disminuyendo sensiblemente el uso de antibiticos.

CONCLUSIN
A lo largo de las pginas anteriores hemos tratado de descifrar el mecanismo de accin de los probiticos y prebiticos el cual, s bien con ciertas lagunas, resulta bastante claro. Tambin hay numerosas evidencias que cada uno de estos productos puede aportar importantes mejoras en la productividad de los animales, ya sea por efecto de una mejora de la sanidad en general o por una mejora de la digestibilidad de los nutrientes de la dieta. Es importante, no obstante, conocer bien el mecanismo de accin de cada uno de estos ingredientes para utilizar aquel que mejor se adapte a nuestras necesidades en cada momento, adems de tener en cuenta las posibles interacciones con otros ingredientes