Staphylococcus
201
5
Coagulasa negativa: son menos agresivos porque carecen de la enzima
coagulasa.
El Salado Manitol
Tiene una particularidad, es de color rosado claro ya que dentro de sus componentes
tiene:
Un indicador de pH llamado Rojo de Fenol
Tiene como fuente de energía el Manitol propiamente dicho
Cloruro de sodio (5%)
El género Staphylococcus junto con los Enterococcus son los que soportan
altas concentraciones de cloruro de sodio dentro de los gérmenes gran positivo, dentro
de los gérmenes gran negativo se encuentra el Vibrio cholerae que también soportan
altas concentraciones de cloruro de sodio, los demás gérmenes se inhiben o inhiben
su crecimiento en presencia de esas concentraciones de cloruro de sodio.
Aquí diferenciaremos entre Staphylococcus y Enterococcus recuerden que yo
tengo el medio de salado manitol, siembro la colonia y al cabo de 24 horas
incubándola a 35 grados centígrados observo lo que pasa posteriormente: si es un
germen Enterococcus la colonia va a crecer pero es muy pequeña y no va a utilizar el
manitol como fuente de energía, al no usar el manitol como fuente de energía el medio
queda rosado, si es una bacteria o una cepas del genero Staphylococcus la siembro
igual (18-24 horas, 34-35 grados centígrados) y la observo al otro día, si no vira el
Staphylococcus
201
5
medio (no usa el manitol como fuente de energía) y por supuesto le hago el gram y es
un poco agrupado en racimos estoy en presencia de un Staphylococcus epidermidis,
ya que el mismo no usa el manitol como fuente de energía. Si el germen vira el medio
el mismo que estaba rosado se torna amarillo, se torna acido y eso lo da el indicador
de fenol, eso quiere decir que el Staphylococcus uso el manitol como fuente de
energía.
¿Quienes utilizan el manitol como fuente de energía?
Dos especies: Staphylococcus aureus y Staphylococcus saprophyticus
Para identificar finalmente que genero es debemos valernos de otras pruebas
bioquímicas y la principal es la coagulasa, si hay coagulasa positiva quiere decir que
es Staphylococcus aureus porque el Staphylococcus saprophyticus no coagula el
plasma. Si hay por parte de la bacteria el uso del manitol como fuente de energía lo
vira a amarillo o sea lo acidifica, y quienes acidifican ese medio: Staphylococcus
aureus y Staphylococcus saprophyticus, porque el Staphylococcus epidermidis no lo
usa.
Prueba de Hemolisis
Para ver si el germen produce beta hemolisis tomamos la muestra de un
paciente y la sembramos directamente en un medio donde crecen gérmenes gran
positivo y gérmenes gran negativo como es el medio de agar sangre: es una base agar
agar al cual se le adiciona sangre para enriquecerlo más. Según muchos
investigadores el medio de agar sangre a parte del crecimiento de gran negativo y
gran positivo sirve para ver la hemolisis, entonces nosotros tomamos la muestra de
Staphylococcus
201
5
una herida o de cualquier secreción de un paciente, la sembramos en el medio de
cultivo agar sangre a 35 grados centígrados durante 18-24 horas, después
observamos a trasluz donde podemos ver las colonias y todo lo que está alrededor de
la colonia es la hemolisis entonces eso es una beta hemolisis, eso quiere decir que es
una franca hemolisis porque hay ruptura total del glóbulo rojo. El glóbulo rojo o la
sangre se le adiciona al medio de cultivo agar agar cuando la temperatura esta a 40
grados centígrados, ya que a esta temperatura se mezcla y no se rompe el glóbulo
rojo, si agrego sangre por encima de los 40 grados centígrados va haber hemolisis de
glóbulo rojo y ese medio de cultivo se me transforma en otro llamado agar chocolate,
yo tengo que enriquecer ese medio de cultivo agar chocolate si lo que quiero es aislar
haemophilus tengo que adicionarle factor 5 y factor 10, si lo que quiero es aislar
neisseria tengo que adicionarle isovitalex para que pueda crecer las bacterias porque
por si solas en medio de cultivo agar chocolate no crecen
El agar sangre le agregué la sangre a 40 grados centígrados y al cabo de un
periodo de incubación de 18 horas a 35 grados centígrados veo una placa en el trasluz
y veo la hemolisis franca, fíjense que todo lo que es rojo son colonias y lo que está
alrededor es la hemolisis, entonces esto me hace suponer de que se trata de un
Staphylococcus por supuesto todo dependerá del tamaño de la colonia porque
recuerden que dentro de los gran positivos están los streptococcus y el streptococcus
pyogenes que es agente hemolítico, cuando vean el grupo de streptococcus hay
grupos que son beta hemolíticos pero dependerá de la colonia.
Punto rojo: colonia
Derredor transparente: hemolisis
Ej: el huevo: la yema del huevo es la
colonia y la clara del huevo es la
hemolisis.
Entonces tengo hemolisis, ahora ¿Qué hago para diferenciar un Streptococcus de
un Staphylococcus?
La catalasa. Si la catalasa es positiva es un Staphylococcus y si la catalasa es
negativa es un Streptococcus.
Todo esto lo produce el Staphylococcus en el paciente cuando está
produciendo infección, ya nosotros llevamos a la bacteria a todas las condiciones que
se pueden presentar en el paciente para hacer diagnóstico es la única manera de
poder hacer un diagnostico.
Fíjense si tengo la muestra la tome, la sembré, no sé que es, le hago gran
porque es de un medio liquido, veo que hay cocos agrupados en pareja, en escaleritas
Staphylococcus
201
5
y otros que creo son Staphylococcus simplemente le hago la prueba de la catalasa
pero ojo tengo que hacer la prueba de la catalasa de aquel medio de cultivo liquido
que tengo porque no puedo tomar la muestra de un medio de cultivo que tiene agar
sangre porque me puede reaccionar aunque sea una pisca de sangre que haya
tomado con el aza al ponerla en contacto con el peróxido de hidrogeno me va a
reaccionar y voy a interpretar que es un Staphylococcus y en realidad no es un
Staphylococcus si no un Streptococcus.
Catalasa positiva es un Staphylococcus y ahora quiero saber si es
Staphylococcus aureus epidermidis o saprophyticus por lo que hago la prueba de la
coagulasa, una coagulasa positiva es una Staphylococcus aureus
Prueba de Novobiocina
1 2
3 4
La Novobiocina es un antibiótico que no sale al mercado para tratar a
pacientes, es un antibiótico que se utiliza dentro del laboratorio para hacer
diagnósticos diferenciales entre una y otra especie bacteriana dentro del género
Staphylococcus
Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis: sensibles a la
Novobiocina
Staphylococcus saprophyticus: resistente a la Novobiocina
Que quiero decir con esto: tomamos la placa de agar agar o agar salado
manitol, sembramos en los 3 planos y le colocamos el disco de Novobiocina (30
microgramos) incubamos a 35 grados centígrados durante 18-24 horas, al cabo de ese
tiempo sacamos la placa de la incubadora y observamos.
Yo hablo sensible cuando alrededor del disco no crece nada (número 3 en la
imagen), fíjense que la bacteria se inhibió, ¿Por qué? El disco esta impregnado en
Staphylococcus
201
5
Novobiocina y al ponerse en contacto con el medio húmedo que yo sembré con la
bacteria el va a difundir: si el germen es sensible por supuesto no va a crecer y se
forma un halo inmenso alrededor del disco, si el germen es resisten crece hasta por
encima del disco. Dentro de las 3 especies de Staphylococcus el único que es
resistente es Staphylococcus saprophyticus mientras que el Staphylococcus aureus y
Staphylococcus epidermidis son Novobiocina sensible, que quiere decir eso: hizo el
gran, vi que hay unos coquitos, le hago la prueba de la catalasa determino que es
catalasa positivo descartando el streptococcus, pongo el salador manitol solito y el
disco de Novobiocina matando dos pájaros de un tiro, si yo veo de que el medio viro
(usando el medio como fuente de energía) o es Staphylococcus saprophyticus o es
Staphylococcus aureus pero como a su vez le puse el disco de Novobiocina observo la
otra prueba y veo que es sensible entonces:
¿Qué me queda? Staphylococcus aureus
¿Por qué? Porque el Staphylococcus saprophyticus es resistente a la prueba de
Novobiocina
¿Por qué no es Staphylococcus epidermidis? Porque no utiliza el manitol como
fuente de energía, entonces fíjense que aun más me determina que es un
Staphylococcus aureus.
¿Cuál es la naturaleza antigénica del Staphylococcus aureus?
La estructura del Staphylococcus aureus es una estructura antigénica compleja y
heterogénea, su pared celular tiene 3 componentes fundamentales:
1. Peptidoglicano
2. Acido Teicoico
3. Proteína A: tiene actividad antifagocitica a pesar de que el Staphylococcus
aureus no es capsulado, esta proteína actúa como una capsula y le confiere
una actividad antifagocitica y estos 3 componentes son los que le dan esa
heterogeneidad antigénica que posee el Staphylococcus aureus
Resistencia
El Staphylococcus aureus a pesar de que produce muchísimos estragos son
susceptibles a muchos componentes y a desinfectantes comunes. El pus que se va
produciendo en abscesos, flictena, forúnculo le sirve de protección al Staphylococcus
aureus por semanas ya que eso hace que el antibiótico no llegue al sitio donde se
encuentre el germen, en algunos casos sobreviven a temperaturas e 60 grados
centígrados durante 30 min pero recuerden que en el caso de intoxicación alimentaria
la bacteria muere pero la toxina queda porque el germen es termolábil (resiste 60
grados centígrados durante 30 min) pero la toxina es termoestable (soporta
temperaturas de mas de 100 grados centígrados por más de 30 min) y por eso se
produce la intoxicación alimentaria
Desde el punto de vista de inmunidad: interviene tanto el sistema de inmunidad
humoral como el sistema de inmunidad celular.
Staphylococcus
201
5
TRATAMIENTO
Antes de colocar tratamiento lo más importante es hacerle al paciente una toma de
muestra que puede ser de una fractura, de secreción nasal, de abscesos axilares
(frecuente en mujeres).
La muestra puede ser tomada en un medio de transporte llamado culturette, el
culturette es un tubo que tiene internamente un medio de cultivo el cual trae un hisopo
estéril, al tomarse la muestra esta puede permanecer hasta 5 días en temperatura
ambiente y se le coloca al paciente tratamiento empírico mientras se dan los
resultados del estudio.
Deben efectuarse pruebas de sensibilidad a antimicrobianos debido que estas nos van
a permitir saber que se está aplicando el tratamiento correcto. Una vez que se
determina el antibiótico lo ideal es colocar un esquema de antibioticoterapia no menor
de 6 días porque se debe impregnar al paciente.
En la décadas de los 40 cuando no existía la penicilina se observó que todas las cepas
de Staphylococcus eran meticilino sensibles, luego con el advenimiento de la penicilina
los gérmenes empezaron a crear resistencia de género en genero entre especies
distintas a través de la genética bacteriana lo que provoco que actualmente más del
80% de las cepas se hicieran Meticilino resistentes.
Luego se introdujeron:
La Oxacilina, pero al igual más del 80% de las cepas se hicieron Oxacilina
resistentes.
El antibiótico estándar es la Vancomicina (se utiliza en pacientes graves) a
pesar de que han encontrado cepas vancomicina resistentes.
La Teicoplanina, presenta de un 30% a 40% de resistencia.
Tigecyclina, presenta un 30% de resistencia (Esta en un derivado tetraciclinico
por lo cual no puede ser administrado en menores de 18 años ni mujeres
embarazadas)
Linezolid (Oxizolidinona), las cepas presenta una resistencia aproximada de un
20%.
RESISTENCIA <10% RESISTENCIA VARIABLE RESISTENCIA >90%
Oxacilina Eritromicina Penicilina G
Vancomicina Tetracilina Ampicilina
Imipenem Cefalopormos Aztreonam
Clindamicina Meticilina
Staphylococcus
201
5
Ciprofloxacina
Gentanicina
Cloranfenicol
Amikacina
STAPHYLOCOCCUS INTERMEDIUS
Es habitante normal de la nasofaringe y piel de los perros. Es importante conocerlo
debido a que se tienen grupos de pacientes que se dedican al cuidado de perros
(veterinarios) y otro grupo mayor de pacientes que tienen como mascotas un perro.
El Staphylococcus intermedio puede ser transmitido del animal al ser humano
desarrollando un proceso infección en él.
Infecciones que produce:
Piodermas
Otitis
Mastitis
Infecciones oculares y por via urinaria
STAPHYLOCOCCUS HYICUS
Se caracteriza por presentar epidermitis exudativa.
Staphylococcus
201
5