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Informe de Biologla 1

Biología General (Universidad Nacional Agraria La


Malina)

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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS DEPARTAMENTO

ACADÉMICO DE QUÍMICA

CURSO: Laboratorio de Biología general

TÍTULO DE LA PRÁCTICA: Microscopia - Determinación experimental de biomoléculas 1


- Determinación experimental de biomoléculas 11

INTEGRANTES: CODIGO:

Dueñas Palga, Fabrizzio (20230619) Llimpe Ochoa, Roy (20230630)

Flores Gamarra, Mitai (20230622) Juan Espinoza, Jorge

(20230561)

Sanabria Valle, Jack (20230703)

GRUPO: 3

HORARIO DE LA PRÁCTICA: E* 11 :00 - 1 :00

PROFESOR DE LA PRÁCTICA: Sandra Manrique

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 14 de abril del 2023

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 21 de abril del 20213

ÍNDICE
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1. INTRODUCCIÓN:

1. 1. MICROSCOPÍA

El microscopio es un instrumento diseñado para hacer posible la observación de


objetos muy pequeños de dimensiones inferiores a O, 1 mm. Su invención se atribuye al
fabricante holandes de lentes, Jensen en el año 1590 y a Galileo en el año 1606. Pero
Anton Van Leeuwenhoeck fue uno de los primeros en fabricarlo para fines biológicos. En
1665 Robert Hooke utilizando un microscopio óptico simple, examinó un fino corte de
corteza de corcho y encontró pequeñas celdas a las que nombro células,
1.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS
Y ENZIMAS

Las proteínas o prótidos son macromoléculas formadas por cadenas lineales de


aminoácidos, formadas básicamente por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno.
Constituyen unos de los componentes fundamentales de las células.

La función biológica de una proteína depende de su estructura, por lo tanto, es importante


comprender su forma.

Las proteínas están constituidas por moléculas llamadas aminoácidos, estos son moléculas
que contienen un grupo amino (NH2) y un grupo ácido (COOH) y en el caso particular de
los aminoácidos biológicos, estos grupos se encuentran unidos a un mismo carbono por lo
cual se denominan aminoácidos.

1.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11

En este actual informe vamos a ver sobre la determinación de carbohidratos (azúcares),


los cuales son fuente de energía en las plantas de forma de almidón, y en los animales
en forma de glucógeno, los cuales son uno de los tres nutrientes principales que se
encuentran en alimentos y bebidas. Están compuestos en su mayoría por la función de
CnH2nOn, que son originados por la fotosíntesis.

Además de ser fuente de energía, esta se encuentra en la pared celular en la célula


vegetal como celulosa, en los artrópodos e insectos como la quitina y en la pared celular
de las baterías.

Además podemos determinar a las moléculas Lipídicas, los cuales son ramificaciones de
carbonos e hidrógeno, pero en cantidades pequeñas de oxígeno, lo cual genera que sean
insolubles en agua, en el grupo hidrofílicos.

Los lípidos también tienen grupos funcionales en los cuales cumplen el rol de fuente de
energía el los músculos y en forma de grasas en los animales y en las semillas de las
plantas, además poder ser protectoras y repelentes al agua en algunos casos, por otro
grupo podemos encontrarlos en forma de vitaminas fundamentales para la vida y
absorción en las células o fuente de energía para la vida.
2. OBJETIVOS:
2.1. MICROSCOPÍA

Identificar las partes del microscopio óptico compuesto y el microscopio


óptico simple.

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Practicar el manejo adecuado del microscopio óptico compuesto y el
estereoscopio para comprender sus propiedades y características básicas para
hacer buena observación.
Realizar observaciones microscópicas de muestras biológicas.
2.2. DETERMINACION EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS Y
ENZIMAS

Identificar proteínas en una muestra


Observar experimentalmente la desnaturalización
Observar la actividad enzimática e identificar los factores que la afectan

2.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11

Reconocer la presencia de almidón y azúcares reductores en nuestros problema


Reconocer algunas propiedades fisicoquímicas de los lípidos.
Identificar la presencia de lípidos en nuestras muestras

3. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. MICROSCOPÍA

Materiales del alumno por mesa:

- 2 estiletes
Láminas portaobjetos
Goteros
Regla milimetrada de 20 cm
Láminas cubreobjetos
Muestras de agua estancada

Materiales del laboratorio:

Microscopio óptico simple o estereoscopio


Placas Petri
Microscopio óptico compuesto
Pipetas Pasteur

3.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS Y


ENZIMAS

Materiales del alumno por mesa

1 huevo
Semillas frescas de frijoles
Goteros
1 papa
1 botella pequeña de agua oxigenada
Pequeños trozos de carne e hígado
Palitos de dientes

Materiales del laboratorio:

- Tubos de ensayo
- Vaso de precipitado de 500ml
Solución de almidón al 1 %
Pipetas de 1 O mi y 5 mi

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Pinzas de madera
Lugol

3.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11


Materiales de alumno por mesa

Lámina prota y cubreobjetos


- 2 mi (40 gotas) de orina (la primera del día en ayunas)
- 4 mi ( 100 gotas) de aceite de cocina
- 2 mi (40 gotas) de leche evaporada
- 2 mi (40 gotas) de leche descremada
- 2 mi (40 gotas) de jugo de mandarina
Un trozo pequeño de papa, cebolla, zanahoria, pan y manzana.
3 goteros
Colores

Materiales de laboratorio

- Tubos de ensayo
Pipetas de 6 mi
Estufa
Pinzas de madera
Bencina
Lugol
Solución glucosa al 1 %
Reactivo de Sudam 111 en solución alcohólica
- Vaso de precipitación de 500 mi para el baño maría
Gradillas
Detergente
Cocina
NaOH al 20%
Reactivo de Benedict
- Agua destilada
Placas petri
4. MARCO TEÓRICO:

4.1. MICROSCOPÍA
MICROSCOPIO ÓPTICO SIMPLE O ESTEREOSCOPIO:

Consiste en una lupa o una lente convergente, que puede ir montada de diferentes formas.
Este tipo de microscopio es binocular, con aumentos de 4 a 40 veces (X). Permite observar
muestras opacas y realizar disecciones de estructuras en organismos pequeños, ya que
en él puede manipularse la muestra mientras se observa. Proporciona una imagen virtual,
directa y tridimensional.

MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO:


Es un instrumento que tiene como misión aumentar el tamaño de los objetos que son
realmente muy pequeños y que no se pueden ver a simple vista. Puede ser monocular o

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binocular, permite obtener aumentos de 32 a 1500 veces (X). Los objetos a observar
deben ser muy pequeños o cortados en láminas tan delgadas que puedan ser atravesadas
por la luz. Las muestras se colocan en láminas de vidrio especiales denominadas
portaobjetos y se cubren con láminas más pequeñas denominadas cubreobjetos. Las
imágenes que se obtienen son bidimensionales e invertidas. Está conformado por tres
sistemas

El sistema rnecaruco está constituido por una serie de piezas en las que van
instaladas las lentes, que permiten el movimiento para el enfoque.
El sistema óptico comprende un conjunto de lentes, dispuestas de tal manera que
producen el aumento de las imágenes que se observan a través de
ellas.
El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio que reflejan,
transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a
través del microscopio.

SISTEMA
MECÁNICO:

Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación, además permiten


desplazamientos necesario para el enfoque adecuado de la muestra

Pie: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma
de
Y o bien es rectangular.
Tubo ocular. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las
molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los
oculares.

Revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los lentes
objetivos. Al girar el revólver, los lentes objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en
posición de trabajo, lo que se nota por el ruido de un piñón que lo fija.
Columna: llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del
aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

Platina: Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va
a observar, Presenta un orificio, en el eje óptico del tubo, que permite el paso de los rayos
luminosos a la preparación. Esta puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros
casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir
movimientos circulares.
Carro: Es un dispositivo, colocado sobre la platina, que permite deslizar la preparación con
movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda.
Tornillo macrométrico: Girando este tornillo, se logra el acercamiento o alejamiento de la
muestra del lente objetivo, gracias a una cremallera. Estos movimientos permiten el enfoque
rápido de la muestra.
Tomillo micrométrico: Mediante su movimiento casi imperceptible se logra el enfoque
exacto-y- nítido de la muestra. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001
mm., que se utiliza para precisar sus movimientos y poder medir el espesor de los objetos.
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Cremallera: Soporte metálico de forma rectangular que ayuda a acercar o alejar la platina
del lente objetivo

SISTEMA
ÓPTICO:
El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes de una muestra
mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por los lentes oculares y
los lentes objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego
amplía.
Lentes Oculares: Están constituidos generalmente por dos lentes, dispuestos
sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más utilizados son los de: 8X, 10X,
12,5X,
15X. La X se utiliza para expresar en forma abreviada los
aumentos.
Lentes Objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revólver
y
producen el aumento de las imágenes de las muestras, por lo tanto, se hallan
cerca de las mismas. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos:
objetivos secos y objetivos de inmersión.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre
ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que
indican el aumento que producen, la apertura numérica y otros datos.

Así, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0, 17, significa que,
su aumento 40 y su apertura numérica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160
mm. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina.
Los aumentos de los objetivos secos que se utilizan con mayor frecuencia son: 6X, 1 0X,
20X,
45X y 60X.

El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para


observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro
entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en
contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 1 00X y se
distingue por uno o dos círculos o anillos de color negro que rodea su extremo
inferior

SISTEMA DE
ILUMINACIÓN:
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine
la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera
adecuada. Comprende los siguientes elementos
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine
la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera
adecuada. Comprende los siguientes elementos:
Fuente de iluminación: Se trata generalmente de una lámpara incandescente de
tungsteno sobrevolada. Por delante de ella se sitúa un condensador. (una lente
convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el
diámetro de la parte de la preparación que queda iluminada, para evitar que
exceda el campo de observación produciendo luces parásitas.
Espejo: necesario si la fuente de iluminación no está construida dentro del
microscopio y alineada con el sistema óptico, como suele ocurrir en los microscopios
modernos. Suele tener dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de
movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia
con iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar).

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Condensador. El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad
es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación, formando un
cono de luz con el mismo ángulo que el del campo del objetivo. El condensador
se sitúa debajo de la platina y su lente superior es generalmente
planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparación
cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor ampliación); existen
condensadores de inmersión, que piden que se llene con aceite el espacio entre
esa lente superior y la preparación. La abertura numérica máxima del condensador
debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se logrará aprovechar
todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre
un sistema de cremallera mediante un tornillo, bajándose para su uso con objetivos
de poca potencia. Diafragma: El condensador está provisto de un diafragma-
iris, que regula su abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de
manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace cerrándose más de
lo que conviene si se quiere aprovechar la resolución del sistema óptico.

CARACTERÍSTICAS DE LA VISIÓN EN EL
MICROSCOPIO: GRADO DE AUMENTO.
Es la magnificación total que sufre la imagen de una muestra debido al efecto de los lentes
oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el número de veces que aumenta el lente
ocular por el número de veces que aumenta el lente objetivo. Si el objetivo aumenta la
imagen de una muestra 40 veces, ésta al pasar por la lente ocular será nuevamente
aumentada. Si el ocular aumenta 10 veces, la magnificación total en este caso
será:10X x
40X = 400X. Este resultado permite saber cuántas veces más grande estamos viendo la
imagen de un objeto.
PODER DE
RESOLUCIÓN:
Es la capacidad de poder distinguir con nitidez una muestra. El ojo humano tiene un
poder de resolución de 0.1 milímetros, o sea, de 100 micras. Este concepto está
ligado al concepto de Distancia Límite de Resolución (D.L.R.) definido como la
distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados. El
microscopio óptico tiene un poder de resolución de 0,2 micras o 200 nanómetros o 2000
Armstrong, mejorando en 500 veces la visión del ojo humano. La distancia límite de
resolución de un microscopio óptico compuesto depende de la longitud de onda de la
fuente luminosa y de la apertura numérica (propiedad óptica de la lente). Puede ser
calculada mediante la siguiente fórmula:

D.L.R. = (0,61 2) / A. N.

A = Longitud de onda de la fuente luminosa


A.N. = Apertura numérica del
lente
D.L.R. = Distancia límite de
resolución
Existe una correspondencia entre el aumento de un objeto y su apertura numérica, de tal
modo que las lentes con mayores aumentos generalmente tendrán mayores aperturas
numéricas. El poder de resolución es quizá la característica más importante de un buen
microscopio ya que de nada sirve una imagen muy grande del objeto, si ésta se ve
borrosa y no puede distinguirse en sus detalles.
Distancia de Trabajo.
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Es la distancia que existe entre el objeto en observación y el lente objetivo. Esta distancia
variará según el aumento del lente objetivo con el que se trabaje. Es inversamente
proporcional al grado de aumento; es decir, cuanto mayor sea el aumento del lente objetivo
menor será la distancia de trabajo. Cuando se trabaje con un lente de inmersión la
distancia de trabajo será mínima. En estos casos es necesario usar aceite de inmersión entre
el lente objetivo y la preparación debido a que el índice de refracción para este tipo de
lente es la del aceite y no la del aire. Esto permite obtener una imagen de gran tamaño y
al mismo tiempo de gran nitidez.

MANEJO DEL MICROSCOPIO.

Colocar el microscopio sobre la mesa de trabajo


Identificar y ubicar las partes mecánicas, ópticas y de iluminación del microscopio óptico
compuesto de acuerdo a la descripción de su manual.
Localizar el sistema de iluminación situado por debajo de la platina y verificar la posición del
condensador, del diafragma y de la luz incorporada o espejo. Establecer sus
características y diferencias.
Observar el lente ocular y establecer sus características.
Localizar los objetivos y verificar sus características
ILUMINACIÓN:

Verificar que los lentes y la fuente de luz incorporada o espejo estén completamente
limpios y que el diafragma del condensador esté abierto.
Colocar los lentes objetivos en su posición normal para la visualización de las
muestras, subir el condensador a tope si es necesario mayor cantidad de luz o bajarlo si es
necesario menor cantidad de luz.
Enfoque.
Colocar la lámina portaobjetos en la platina, sujetada por las pinzas.
Hacer coincidir la muestra con la abertura de la platina y el lente objetivo. Coloque su vista
sobre el ocular y desplace el tornillo macrométrico hasta que aparezca la imagen.
Con el tornillo micrométrico realice movimientos finos hasta que vea con nitidez la
imagen.
OBSERVACIÓN DE MUESTRAS EN EL MICROSCOPIO:

Muestras Fijadas en Láminas Portaobjetos (Preparados en seco).


Son aquellos en los cuales la muestra se encuentra fija a la lámina portaobjetos, pudiendo
llevar laminilla cubre objeto o no. La observación de estos preparados se hace
generalmente con el objetivo de inmersión, debiéndose previamente colocar una gota de
aceite de cedro. Estos preparados también pueden ser observados por los objetivos a seco.
Observación Directa de Muestras (Preparados en
fresco).
Son aquellos preparados en los que la muestra no se encuentra fija a la lámina
portaobjeto si no que está sumergida en una sustancia líquida y generalmente se utiliza una
laminilla cubre objeto para la observación.
Observación de Muestras.

Para observar las muestras revisar los pasos indicados en el manejo del microscopio y
proceder a enfocar las suyas, empezando con el objetivo de menor aumento colocar la
lámina con los preparados en fresco o en seco, acercar la platina hasta ver con
claridad,
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luego observar las características del objeto. Mientras observa la muestra operar el tornillo
micrométrico, abrir o cerrar el diafragma hasta observar con claridad, de igual manera
suba y baje el condensador. Describa lo que observa.

4.2. DETERMINACION EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS


Y ENZIMAS
LAS PROTEÍNAS
Las proteínas son moléculas grandes y complejas que desempeñan muchas
funciones críticas en el cuerpo. Realizan la mayor parte del trabajo en las células y
son necesarias para la estructura, función y regulación de los tejidos y órganos del
cuerpo.

Las proteínas están formadas por cientos o miles de unidades más pequeñas
llamadas aminoácidos, que se unen entre sí en largas cadenas. Hay 20 tipos
diferentes de aminoácidos que se pueden combinar para formar una proteína. La
secuencia de aminoácidos determina la estructura tridimensional única de cada
proteína y su función específica.

Las proteínas se pueden describir según su amplia gama de funciones en el


cuerpo:

Descripción Ejemplo

Anticuer Los anticuerpos se unen a partículas extrañas lnmunoglo


po específicas, como virus y bacterias, para ayudar a proteger bulina G
el cuerpo. (lgG)

Enzima Fenilalanin
Las enzimas llevan a cabo casi todas las miles de a
reacciones químicas que ocurren en las células. También hidroxilasa
ayudan con la formación de nuevas moléculas leyendo
la información genética almacenada en el ADN.

Mensajer Hormona
a Al igual que algunos tipos de hormonas, las proteínas del
mensajeras transmiten señales para coordinar procesos crecimient
biológicos entre diferentes células, tejidos y órganos. o

Estructur
al Estas proteínas brindan estructura y soporte a las células. Actina
A
mayor escala, también permiten que el cuerpo se
Transpor mueva.
te! Ferritina

Estas proteínas se unen y transportan átomos y


moléculas pequeñas dentro de las células y por todo el
cuerpo.

almacen
amiento
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LA DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS

La desnaturalización define el despliegue o la ruptura de una proteína, modificando


su estructura tridimensional estándar. Las proteínas pueden desnaturalizarse por
acción química, calor o agitación, lo que hace que una proteína se despliegue o que sus
cadenas de polipéptidos se desordenen, lo que suele dejar a las moléculas no
funcionales.
REACTIVO DE
BIURET
Es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con
dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.
Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato
de sodio y potasio (KNaC4Q5·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en
presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena
corta. El Hidróxido de Potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio
alcalino necesario para que tenga lugar.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método calorimétrico que permite
determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante
espectroscopía
ultravioleta-visible a una longitud de onda de 560 nm (para detectar el ión
Cu2+)
ENZIMA
CATALASA
La catalasa es una enzima cuya función es destruir el peróxido de hidrógeno dando lugar
a oxígeno molecular y agua. Es un tetrámero que también promueve el crecimiento
celular. La herramienta de Internet ha sido esencial en la búsqueda de la información
sobre esta biomolécula. Presenta una gran homología con otras proteínas de diferentes
organismos, lo que deja entrever su gran importancia. Tiene una estructura secundaria
sencilla con diferentes motivos que al plegarse dan lugar a la disposición tridimensional
que la hace funcional. Está presente en una gran cantidad de procesos biológicos por lo
que su falta provoca enfermedades en el organismo. En la actualidad tiene un uso
industrial y es muy significativo en la industria alimentaria gracias a sus capacidades
antioxidantes.

REACTIVO
AMILOLÍTICA

El Lugol o solución de Lugol, es una disolución en base de yodo molecular 12 y


yoduro potásico KI en agua destilada. Este producto se emplea frecuentemente como
desinfectante y antiséptico, para la desinfección de agua en emergencias y como un
reactivo para la prueba del yodo en análisis médicos y de laboratorio.
Se recomienda utilizarlo como descontaminante del agua para beber en el desastre
de
Chernóbil (1986). Existen evidencias de que el yoduro de potasio previene del cáncer
de tiroides. En la actualidad se está utilizando también para contrarrestar los efectos
del desastre nuclear de Fukushima (Japón).
Es un oxidante débil pero muy selectivo. Desintoxica de halógenos y de metales
pesados como el mercurio. Protege de la radiación nuclear (al mantener llena la tiroides de
Yodo sin radioactividad).

4.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11


Los carbohidratos (hidratos de carbono) son nutrientes que se encuentran en la mayoría
de los alimentos. Representan una parte de la alimentación humana, y es posible
encontrarlos en alimentos, la función principal de los hidratos de carbono es la de
proporcionar energía a todas nuestras células, brindan energía a todos los órganos del
cuerpo, desde el cerebro hasta los músculos y funcionan como un combustible rápido y
fácil de obtener por parte del

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cuerpo humano. Intervienen reduciendo la fatiga y en la recuperación tras realizar alguna
actividad física. Por otro lado, contribuyen con la formación de material genético, como
ADN y ARN, y de diversos tejidos corporales. Existen formas diferentes, las cuales varían
dependiendo de su estructura química. En general, se describen dos tipos de carbohidratos:
Carbohidratos complejos: Son aquellos que se absorben lentamente en el intestino y que
contienen fibra, como el frijol, las habas, algunas frutas, entre otros.

Carbohidratos simples: También llamados azúcares simples o libres. Son aquellos que se
absorben rápidamente. El ejemplo más práctico es la comida chatarra o en forma de pan,
bolillo, azúcar blanco, refrescos, jugos y ¡Son las que debemos ingerir con moderación!

Los lípidos son un grupo muy heterogéneo de compuestos orgánicos, constituidos por
carbono, hidrógeno y oxígeno principalmente, y en ocasiones por azufre, nitrógeno y
fósforo. En los alimentos existen fundamentalmente tres tipos de lípidos:

• Grasas o aceites (también llamados triglicéridos o


triacilglicéridos).

• Fosfolípidos.
• Ésteres de colesterol, que muestran un componente común: los ácidos grasos. Los hay
de tres tipos: ácidos grasos saturados (AGS), ácidos grasos monoinsaturados (AGM),
ácidos grasos poliinsaturados (AGP).

El Sudán 111 es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas,
porque es lipofílico, es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe
las grasas de color rojo anaranjado.

La solución de Benedict se utiliza para detectar azúcares reductores, normalmente


monosacáridos o disacáridos. Proporcionará un resultado positivo para los azúcares
reductores como la glucosa, la fructosa, la lactosa, la maltosa y la galactosa.
Proporcionará un resultado negativo para los azúcares no reductores, como la sacarosa o el
almidón.

El reactivo de Benedict es un líquido de color azul que contiene sulfato de cobre. El cobre
se une al oxígeno del grupo aldehído o cetona libre formando un óxido de cobre. El óxido de
cobre aporta un color marrón.
5. PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA

5.1. MICROSCOPÍA

5.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS


Y ENZIMAS
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1 • Desnaturallzaclón da Protelnas.

Procedimiento:
1) Colocar 6 tubos de ensayo (enumerados del 1 al 6) en una gradilla y verter 1
mi de solución albumina a cada uno de ellos (verificar que la solución
albúmina haya sido colada adecuadamente)

2) Realizar los siguientes tratamientos a cada uno de

ellos: Tubo 1: Someter a baño maria por 3 minutos.


Tubo 2: Añadir 1ml de acetona.
Tubo 3: Añadir 1 mi de Ácido sulfhídrico al
75%. Tubo 4: Añadir 1 mi de Cloruro de sodio al
20%. Tubo 5: Añadir 1 mi de Ácido nítrico
concentrado Tubo 6: Control (sólo albúmina).

3) Observar y anotar en el cuadro los cambios ocurridos en cada uno de


los tubos. Anotar en cuales ha ocurrido la desnaturalización.

2. Determinación de Presencia de Proteínas (Reacción de Biuret).

Procedimiento:
1) En un tubo de ensayo colocar 1 mi de solución de albúmina al 1%, agregar
1ml de solución ~e NaOH al 40% y mezclar.
2) A la mezcla añadir 2 gotas de Sulfato de Cobre al 1%. La reacción es positiva
si se observa un color violeta en la mezcla.
3) Hacer blanco negativo o control repitiendo el experimento y sustituir la
albúmina por agua destilada. Anotar en el cuadro da resultados.

3. Reconocimiento de la Enzima Catalasa.

Procedimiento:
1) Coger aproximadamente •I mismo peso de higa®' carne, papa picada y frijol;
y co1oeat1 01 en tubos de ensayo enumerados
2) LuegO al mismo tiempo 11\adlr 1 mi de Agua oxigenada (H¡Oa) a cada tubo de
enaayo
3) AnOtaf lo que 1ucede ancada uno de loa tubos

> ()rdenar 1ot 1L1bol -Odtl ,u actividad enztmitlca (b~ - ~.


4 cantidad) y ■notar en •I ouadR) de ruultadol

,.1,

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4. Reacción AmiJoJítJca.
Procedim iento:

1) UbTizar los 4 pozos extremos de una placa de porcelana.


2) Colocar en cada pozo:

A. 4 gotas de lugol.

B. 15 gotas de almidón+ 2 gotas de lugol.

C. 15 gotas de almidón + 1 O gotas de saliva, después de 10 mio • 2 gotas


de lugol.

D. 10 gotas de saliva+ 10 gotas de ácido sulfhídrico, despu6s de 10 min.,


10 gotas de almidón; luego de 7 mln., 2 gotas de lugoL

5.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11

Procedimiento.

Experimento 1: Reconocimiento de Almidón


Colocar en placas petri un trozo de papa, cebolla, zanahoria, pan y manzana
Agregar dos gotas de lugol a cada una de la muestras y anotar los resultados

Experimento 2: Reconocimiento de Azúcar Reductor.

- Tubo 1: Colocar 0.5 mi de agua destilada y 1 mi de reactivo de Bened et

- Tubo 2: Colocar 0.5 mi de solución glucosa, agregar 1 mi de reactivo de


Benedlct
- Tubo 3: Colocar 0.5 mi de jugo de mandarina, agregar 1 mi de reacti vo de
Benedlct

- Tubo 4. Coloca r 0.5 mi de orina y añadir 1 mi de reactivo de Benedact.

- Colocar los 4 tubos en baño maria durante 5 minutos y anotar los


resultados.
Expartmento 3: Prop iedades de los Upldos

Enumerar 3 ~ de ensayo

.... mlnufoa para obaervar Ja ~ en dos capas del aceite

T.., 1 Colocar 2 mi de agua destilada y 1 mi de aceite, a continueción


a G f llr . la mueetra pera obN rvar una emulsión transltorta Dejar
y.,

, , ,_ .. 2
reposar 1a

TallilJil~·c•a•w• 2 mi de agua dntlleda y 1 ml ele ac:i111te. ~ w.


pizca
.,_ _..., "t obaervar la Pf'Qducd6n de una emulsl6n
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6. RESULTADOS:

6.1. MICROSCOPÍA

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w--------1 (

•"'--------z I ...J r

~--~-----·3
i.------ 4 (i. ~
lff"

r,,
..-----6
5 t

),

SISTEMAS PARTES FUNCIÓN


Optico
1.~~.. ~½~.~ .. ~!~~---~.-:.... la imagen del objetivo.
- - -- ·- - -

Amplía la imagen de la.~~?~.~ ... , se


12.~-º-~~ sitúa cerca de ésta.

. d~~~,(M~
.. . . . . . . . . . . .. .. L. os rayos1 ummosos
8.~'1:~.~':\.é~ aoa . h
luminación el condensador.

10.. ~~~-<.'f....•. Regula la... ,.~H~).\.li ...... de luz


que entra en el co,:idensador.

e.. !9.tt.b&~'--··· Sistema de lentes que... t..":\~. lle\........


los rayos luminosos sobre la preparación

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Contiene en su parte superior al .. . . ....•...

Permite.. . . . ...de objetivo al girar.

Lugar donde se coloca la ....•

so
4 .. C,\"~" ~.......
MECÁNICO
TORNILLOS DE
ENFOQUE
Consigue el enfoque -:"".. .,, .
s...H.1í.~~.w~~
-
Logra el enfoque ... Qr.'.........•...••.•

Completar el siguiente cuadro para hallar el poder de resolución de cada uno de los
.Aljeltns del miaoscoplo, col'fSiderando que la longitud de onda de la luz blanca es de
5500Aº.

()CI.L_-'ft OBJETIVO G.A. D.LR. D. T.

"º"
,00"

D L. R. • Olsllnela lfmlte de l'UOkJCl6n.

DT Dlltaneladl~

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Observación de muestras. Dibujar sus observaciones.

Estereos copio Microscopio óptico compuesto

Muastra·.l~ . ~- .. Muestra: .. ~. . , .

Observación .. f,~~.. . Observac,"6 n ....r., ......

Objetivo: .. 3 2 X

Gnldo de aumento· ..\~.!(.... Grado de aumento .

• ,mcapio 6plJco Microscopio ópllco compuesto


compuesto
Muestra:.. . . . ••. r..,¡ .Y:'!:~:!'~ ~'"'
liltestr&.~~--
Observación: ..
Oblervación: lill!IIID<lrml(~-

Objslw,: 10 X Objetivo: 40X

IM!f Gradodl~ ..

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6.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS
Y ENZIMAS

IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.

1. Desnaturalización de Proteinas.

Después de someter a la albúmina a los diferentes tratamientos se obtuvieron


los siguientes resultados:
Tubo Observación: ¿ha Desnaturahzación
Nº Someter a: cambiado algo en los
tubos {+) {-} ¿Por qué?
de ensayo?

1- Baño María -

2 Acetona

3 Ácido
sulthldríco

4 NaCI

5 HN03

_.;) r
6 Control

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Departam ento Académico de Biología

2 Detennjnacjón de Presencia de Protefnas (Reacción de Biuret)


Reacción
Muestra Observación
{Positiva o negativa)

Albúmina

Agua

3. Reconocimiento de la enzima Catalasa.

Actividad Contenido del Tubo

Muy buena actividad


'

Buena actividad

Poca actividad

Muy poca actividad

Completar la

ecuación: H:iO:i +

Catalasa
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Ex plica r Jo sucedido en cada caso, tenga en cuenta las reacciones que ocurrieron
A................ J
····· ····································• ......

.,,.,,.
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c. .L. . . .. . . . . 2 ,i.~
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Completar la eaJaclón d

l==- >Jnddón • - 1
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6.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11

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Experimento 1: Reconocimiento de Almidón
Colocar en placas petri un trozo de papa, cebolla, zanahoria, pan y manzana
Agregar dos gotas de lugol a cada una de la muestras y anotar los resultados

Muestra Observaciones Presencia


de almidón
(Sí/No)

Papa
6,
Cebolla

ZaAat-loria

Pan
Si
Manzana
\.Q\v<
11,11,.\.
~ ff:,l. ~O
&M. ,\~••"" .:a~
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7. CONCLUSIONES:

7.1. MICROSCOPÍA
La importancia de los microscopios a lo largo de la historia para poder ver,
analizar los diferentes muestras que contribuyeron con el avance biológico•
Los organismos en el agua estancada y muestra de abeja como
protozoarios, bacterias y más no se podrían ver a simple vista.
7.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS
Y ENZIMA
Se logró identificar las proteínas de las muestras dadas en los trabajos
a partir de las decoloraciones o nitidez.
Además se pudo observar la desnaturalización en fases de las muestras
en
diferentes soluciones acuosas o de precipitación.
Logro comprendido sobre los funcionamientos y roles que cumplen las
enzimas de la boca (AMILASA) y su importancia en la degradación del
Almidón.
7.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11
• Gracias a la reacción de benedict hemos podido comprobar que la glucosa
fructosa y maltosa son azúcares reductores ya que en estas muestras se produjo
la formación del precipitado de óxido cuproso de color rojo anaranjado o amarillo.

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• En conclusión al final de la práctica hemos aprendido que
procedimientos utilizar para reconocer los carbohidratos.

• Mediante el procedimiento elaborado logramos comprobar de que manera


cambiaron las sustancias por medio de los reactivos agregados al tubo de
ensayo.

8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
8.1. MICROSCOPÍA
- Brock, T. 1991. Biología de los microorganismos. Edic. Sexta. Edit. Omega
S.A., Barcelona, España 956 pp.

- Cortez, R., Chamochumbi, M. y Oliva, N. 1986. Guía de Prácticas de


laboratorio. Curso Biología l. Facultad de Ciencias Biológicas. Opto. Ciencias
Biológicas Universidad Nacional de Trujillo 97 pp.

- Guía de trabajos Prácticos. Curso Biología General. Departamento de Biología.


Universidad Nacional Agraria La Melina.

- Pelckzar, M., R. Reid, y E. C. Chan. 1984. Elementos de Microbiología. Edic.


Primera. Edit. La Colina S.A. España. 253 pp.

- https://bct. facmed. unam.mx/wp-content/uploads/2018/08/2 microscopia. pdf

8.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS


Y ENZIMAS
Audesirk, T. y G. Audesirk. 1996. Biología, La vida en la tierra. Prentice Hall lnteramericana.
889 pp
Lehninger, A. 1978. Biología, Edit. Omega S.A. España. 100 pp

Solomon B.M. 2001. Biología, Edic. Quinta. Edit. lnteramericana, Me. Grawl Hill, México.
1237 pp

8.3. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11


Campbell N. y J. Reece, 2007. Biología. Séptima Edición, Editorial Medico Panamericana,
España. 1231 pp.
Solomon B. M. 2001. Biología. Quinta Edición. Me. Grawl Hill lnteramericana
Editores. México. 1237 pp

9. CUESTIONARIO:
9.1. MICROSCOPÍA

1. ¿Qué es la apertura numérica?

Es una medida que indica la capacidad del objetivo de poder captar los rayos refractados
por las estructuras finas de las cuales está constituido el objeto que se observa.

2. A cuantos micrómetros (um), Armstrongs (A) y nanómetros (nm) equivalen


0,2 milímetros (mm)

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1 µm = 0,001 mm = 1 x 10-3 mm

0.2 mm= 2 x 102 µm1 A= 10-7 mm

0.2 mm= 2 x 106 A

3. ¿Qué lente objetivo utilizará para enfocar el preparado y obtener un


mayor campo visual?

Se usaría el de 1 00x pero con el aceite de inmersión para observar lo mejor posible

4. ¿Qué tipo de imagen se obtiene en el microscopio estereoscópico?

Nos da una imagen tridimensional con un aumento de 4 a 40 veces el tamaño de la


muestra que se tiene en observación.

5. ¿Cuál es la diferencia entre aumento y poder de resolución?

Que el aumento es la capacidad del lente para poder proporcionarnos un gran tamaño y
que el poder de resolución se encarga de la nitidez de la misma.

6. Describa los diferentes tipos de microscopio óptico y resolución

Microscopio compuesto: Es el de uso más común, generalmente sirve para agrandar


objetos.

Microscopio binocular: Sirve para examinar superficialmente como en el proceso de


disección de animales, observación de colonias, etc.

Se puede usar por larga duración

7. Enumere ejemplos de muestras que observaría en un microscopio


óptico compuesto y en un microscopio óptico simple.

MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO:

-Saliva

-Proteínas

-Savia

-Sudor

MICROSCOPIO ÓPTICO SIMPLE:

-insectos

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-cabello

-hojas de flores

-cáscara de fruta

9.2. DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 1: PROTEÍNAS


Y ENZIMAS

1. ¿Cuál es el fundamento teórico de la reacción de


Biuret?

La reacción de Biuret sirve para cuantificar proteínas totales. El reactivo de Biuret


contiene
CuS04 en solución acuosa
alcalina.

Esta reacción produce péptidos y proteínas, pero no aminoácidos ya que se debe a la


presencia del enlace peptídico CO-NH el cual se destruye al liberarse los aminoácidos. El
reactivo de Biuret lleva sulfato de cobre (11) y sosa. El Cu en un medio fuertemente
alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta cuya
intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

2. Describir las diferentes estructuras de las


proteínas.
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3. ¿Cuál es la diferencia entre las fuerzas de Van Der Waals y las atracciones
hidrofóbicas?

Las fuerzas de Van Der Waals son fuerzas de atracción débiles que se establecen entre
moléculas eléctricamente neutras y pueden ser dipolo - dipolo, puentes de hidrógeno.
También determinan muchas de las propiedades de los compuestos orgánicos,
incluyendo su solubilidad en medios polares y no polares.

La interacción hidrofóbica describe las fuerzas existentes entre el agua y los compuestos
llamados hidrófobos (moléculas con muy baja solubilidad en agua).

4. ¿Qué es la energía de activación?

Es la energía rmruma necesaria para trucrar una reacción química.


Las sustancias precisan una cierta energía de activación puesto que tienen que vencer
primero las fuerzas de repulsión, vibración, traslación, etc. que existen entre los átomos
de las moléculas que van a reaccionar.

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5. ¿Cuál es el sitio activo de las enzimas y cuáles son sus características?
El sitio o centro activo es la zona de la enzima en la que se une el sustrato para ser
catalizado. La reacción específica que una enzima controla depende de un área de su
estructura terciaria. Dicha área se llama el sitio activo y en ella ocurren las actividades con
otras moléculas. Debido a esto, el sitio activo puede sostener solamente ciertas
moléculas. Las moléculas del sustrato se unen al sitio activo, donde tiene lugar la
catálisis. La estructura tridimensional de este es lo que determina la especificidad de las
enzimas. En el sitio activo solo puede entrar un determinado sustrato. Dentro del centro
activo hay ciertos aminoácidos que intervienen en la unión del sustrato a la enzima y se
denominan residuos de unión, mientras que los que participan de forma activa en la
transformación química del sustrato se conocen como residuos catalíticos.

DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS 11:

1. ¿Cuál es el principio de la acción de la reacción de Benedict?

Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la


reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico) utilizados
hacen que este test sea más sensible y estable. Se numeran 5 tubos de ensayo. Se
añade a cada tubo 1 mi de: agua (ensayo blanco), glucosa, sacarosa, almidón y solución
problema. Se añaden 2 mi de reactivo de Benedict a cada uno de ellos y se mezcla bien.
Se calientan en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. Si la reacción es positiva
aparece un precipitado rojizo, verde o amarillo.

2. ¿Qué indica la presencia de azúcar reductor en la orina?

La presencia de azúcar reductor en la orina puede significar que la glucosa en la sangre


es alta, por lo tanto puede significar diabetes.

3. Mencione las fuentes más comunes de carbohidratos en su alimentación y


clasifíquelos según la tabla Nº1.
Por su Por su 1 Por su Por su
Comoleiidad tamaño 11
actividad
ARROZ(almidón) función
Polisacárido - Cetosa reductor
PAN DE Polisacárido - Cetosa reductor
- TRIGO(almidón)
LECHE(lactosa) Disacárido - Aldosa
1
No
-
1 1 reductor
Cereales(maltosa Disacárido - Aldosa No
) 1 1 reductor

4. ¿Qué es la emulsificación y cuál es su importancia?

La emulsificación, es decir, la formación de emulsiones a partir de dos fases líquidas


inmiscibles, es probablemente la propiedad más versátil de los agentes tensioactivos
para aplicaciones prácticas.

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El proceso de dispersión de un líquido inmiscible en otro líquido inmiscible se
llama emulsión.

La importancia de las emulsiones en la formulación y elaboración de alimentos radica en


la posibilidad que ellas abren por ejemplo para incorporar vitaminas, colorantes y
aromatizantes en la fase oleosa del sistema, para dar a los productos cierto color y
opacidad deseables, para lograr una plasticidad requerida

5. ¿Qué es la saponificación y cuál es su importancia?

La saponificación o hidrólisis de éster es una reacción química entre un lípido saponificable


o ácido graso y una base o solución alcalina. Como consecuencia de la reacción, se
obtiene una sal de dicho ácido y como subproducto, la glicerina.

• A nivel industrial, es la reacción que se utiliza para la fabricación de todos los


jabones de pasta, tales como los jabones de mano o los jabones de barra para lavar
ropa.
• Por otro lado, también se utiliza frecuentemente como el primer paso en la
obtención de ácidos grasos, los cuales luego son utilizados en una gran variedad de
industrias tales como en la fabricación de cosméticos.
• En otros casos, los ácidos grasos se suelen utilizar como solventes o agentes
dispersantes en la fabricación de pinturas, aunque es más común conseguir
aceites minerales en estos casos.
• Además de esto, esta reacción también se utiliza para limpiar cualquier
superficie grasienta tal como el interior de los hornos o la superficie de las
cocinas.

6. ¿Cuál es el principio de acción del reactivo de Sudan 111?

Sirve para el reconocimiento de las grasas. Los lípidos se colorean selectivamente de rojo•
anaranjado con el colorante Sudam 111.

7. ¿Cuál es la cantidad de lípidos adecuada que deben consumir en su dieta?


¿Dónde los puedo encontrar?

Se recomienda que las grasas de la dieta aporten entre un 20 y un 30% de las necesidades
energéticas diarias. Pero nuestro organismo no hace el mismo uso de los diferentes tipos
de grasa, por lo que este 30% deberá estar compuesto por un 10% de grasas saturadas
(grasa de origen animal), un 5% de grasas insaturadas (aceite de oliva) y un 5% de grasas
poliinsaturadas (aceites de semillas y frutos secos).

No debe obtener más del 25% al 30% de sus calorías diarias de grasas.

Debe limitar las grasas saturadas a menos del 10% de sus calorías

diarias.

Para una dieta de 2,000 calorías, esto es 200 calorías o 22 gramos (s) de grasas
saturadas al día. Como un ejemplo, solo una cucharada (15 mL) de mantequilla
contiene
7 g de grasa saturada (casi un tercio de su asignación diaria)

Si usted tiene una enfermedad cardíaca o colesterol alto, su proveedor de


atención médica puede solicitarle que limite aún más las grasas saturadas.

8. ¿ Todos los lípidos son buenos para su salud? ¿Por qué?


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Hay ciertos lípidos que se consideran esenciales para el organismo, como el ácido
linoleico o el linolénico, que si no están presentes en la dieta en pequeñas cantidades se
producen enfermedades y deficiencias hormonales. Estos son los llamados ácidos grasos
esenciales o vitamina F.

Los lípidos de alta densidad ayudan a limpiar tu organismo de las grasas malas, evitando
que estas se peguen en las arterias y las tapen. Puedes aumentar el colesterol bueno en
tu cuerpo ingiriendo grasas no saturadas como Omega 3, aguacate, aceite de oliva y
nueces, sin embargo, el ejercicio es clave para mantener tus niveles de colesterol en un
estado óptimo.
Los lípidos de baja densidad son transportados por las grasas buenas y utilizadas por tu
cuerpo para llevar a cabo diversas funciones metabólicas de gran importancia. El colesterol
de baja densidad es malo cuando sobrepasa la capacidad del colesterol bueno para ser
transportado, esto ocasiona que las grasas malas circulen libres y se adhieran en las
arterias o venas.

9. Menciona 5 funciones básicas de los carbohidratos y lípidos en su organismo.

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Carbohidratos:

• La principal función de los carbohidratos en el organismo es que son


la principal fuente de energía, es decir son moléculas energéticas.

• Se muestra como los carbohidratos forman parte de la estructura de la


membrana celular.

• Ahorro de proteínas: Se da en caso de que el aporte de los carbohidratos


sea insuficiente, de este modo se utilizarán las proteínas para fines
energéticos.

• Se encuentran en la estructura de los Ácidos nucleicos (ADN Y ARN).

• unirse los carbohidratos con los lípidos y las proteínas se forman


glicolipidos y glicoproteínas respectivamente, estos se encuentran en la
superficie celular realizan la función de reconocimiento en la membrana
para hormonas, anticuerpos, bacterias, virus u otras células.

Lípidos:

• Aislante térmico.

• Flotabilidad (Debido a que la densidad de los lípidos es menor que la


del agua).

• Reserva de agua metabólica.

• Regulador térmico (Suministran calor para mantener la temperatura


corporal).

• Combustible, función energética (Generan energía para reaJizar trabajo


mecánico).

• Transmisión eléctrica entre células nerviosas.

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