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VERSIÓN: 01
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GUÍA DE PRÁCTICAS
2024 - I
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Nombre de la Asignatura:
PROCESOS CELULARES Y MOLECULARES I
Autores:
EQUIPO DOCENTE
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INTRODUCCIÓN
Los autores
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ÍNDICE DE CONTENIDOS
Página
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BIOSEGURIDAD.
➢ El acceso al laboratorio estará limitado solo al personal autorizado, que debe cumplir
a cabalidad las normas de bioseguridad.
➢ Toda área debe estar marcada con la respectiva señal de riesgo biológico y su nivel
de contención.
➢ Emplee los equipos según las instrucciones o los procedimientos operativos
estandarizados, al igual que emplee los protocolos correspondientes al taller.
➢ Al ingresar al laboratorio se debe tener en cuenta el debido uso del mandil manga
larga, abotonado y limpio, así mismo una vez que se ingrese se debe colocar los libros
y demás objetos, en sitios adecuados para evitar un posible accidente.
➢ El personal con cabello largo deber recogerlo para trabajar dentro del laboratorio. Así
como usar todos los implementos necesarios para la protección según el nivel de
riesgo biológico.
➢ Lávese las manos a la hora de entrar y al término de cada sesión de trabajo,
secándolas con toallas de papel.
➢ Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas durante la sesión de laboratorio
para evitar la contaminación por corrientes de aire.
➢ El laboratorio debe permanecer limpio y ordenado, durante el trabajo y al término del
mismo.
➢ Durante el taller no se debe consumir alimentos ni bebidas.
➢ Hable en tono bajo y evite al máximo el movimiento dentro del laboratorio.
➢ Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al profesor.
PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD.
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CONTENCIÓN.
El término contención se utiliza para describir métodos seguros para manejar materiales
infecciosos en el ambiente de laboratorio donde son manipulados o conservados. El
objetivo de la contención es reducir o eliminar la exposición de quienes trabajan en
laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a agentes potencialmente
peligrosos.
Niveles de contención.
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Contención primaria:
Constituyen la primera línea de defensa cuando se manipulan materiales biológicos,
químicos y/o físicos.
Contención secundaria:
Se refiere al diseño y construcción de un laboratorio, lo que en seguridad biológica se
conoce como contención o barrera secundaria, contribuye a la protección del personal de
laboratorio, personas que se localizan fuera del laboratorio y protege a las personas de
la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes infecciosos.
Los modos de transmisión en el laboratorio pueden ser insidiosos y algunas veces
complicados, debido a que los vehículos y rutas de transmisión difieren de los modos
clásicos. El personal de Laboratorio esta frecuentemente expuesto a niveles muy altos de
los agentes infectantes, por lo que los periodos de incubación pueden ser más cortos que
los del mismo tipo de infección provocada por una exposición corriente.
NIVELES DE BIOSEGURIDAD.
➢ Grupo 1. Está formado por agentes de peligro potencial mínimo para el personal y el
medio ambiente.
➢ Grupo 2. Incluye a los agentes de moderado peligro potencial para el personal y el
medio ambiente.
➢ Grupo 3. Está compuesto por agentes que pueden causar enfermedades serias o
letales como resultado de la exposición.
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➢ Grupo 4. Está formado por los agentes que representan un alto riesgo individual de
enfermedades que ponen en riesgo la vida, que pueden transmitirse a través de
aerosoles y para los cuales no hay terapias o vacunas disponibles.
Corresponde al trabajo que involucra a agentes que pueden causar enfermedades serias
o letales como resultado de la exposición. Las prácticas, equipos de seguridad y el diseño
y la construcción de las instalaciones del Nivel de Bioseguridad 3 pueden aplicarse a
instalaciones clínicas, de producción, investigación, educación o diagnóstico, donde se
trabaja con agentes exóticos o autóctonos con potencial de transmisión respiratoria, y que
pueden provocar una infección grave y potencialmente letal. Se usan escafandras de
protección.
Corresponde al trabajo con agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo
individual de enfermedades que ponen en riesgo la vida, que pueden transmitirse a través
de aerosoles y para los cuales no hay terapias o vacunas disponibles. Los agentes con
una relación antigénica cercana o idéntica a los agentes de los Niveles de Bioseguridad
4 deben manejarse conforme a las recomendaciones de este nivel. En este nivel de
seguridad se incluyen también los agentes no convencionales o priones. Los riesgos
principales para el personal que trabaja con agentes del Nivel de Bioseguridad 4 son la
exposición respiratoria a aerosoles infecciosos, la exposición de membranas, mucosas o
piel lastimada a gotitas infecciosas y la auto inoculación. Se usan escafandras de
protección.
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Fuente: https://www3.paho.org/Spanish/AD/THS/EV/labs-CGC-MOD11.pdf
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1.2 COMPETENCIA.
1.4 PROCEDIMIENTO.
SEÑALES DE ADVERTENCIA
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1.5 RESULTADOS.
Reporte los procedimientos a y b (1.4). Elaborando una tabla para cada uno. Se demuestra dos
ejemplos.
1.6 CUESTIONARIO.
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PRÁCTICA N° 2: MICROSCOPÍA
El microscopio es uno de los instrumentos más versátiles usado por la ciencia. Están
diseñados para adquirir imágenes visuales o fotográficas ampliadas de objetos pequeños.
Algunos seres vivos pueden observarse a simple vista, el ojo humano tiene un límite o
poder de resolución aproximado de 0,2 milímetros, pero existen organismos tan pequeños
que miden alrededor de 0.1 mm que a simple vista no lo podemos percibir, por lo que se
tiene que recurrir a instrumentos como el microscopio, para ayudar a superar esta
limitación. Existen el microscopio óptico compuesto cuya resolución se sitúa en 0,2 micras
y el de un microscopio electrónico en 0,2 nanómetros, lo que ha permitido que hoy en día
podemos ver virus, estructuras tan pequeñas que con los microscopios tradicionales son
imposibles de vislumbrar; e incluso algunos de estos instrumentos ya son capaces de
darnos imágenes reales de los átomos
Sistema mecánico.
➢ El pie o base; parte inferior del microscopio que permite se mantenga de pie.
➢ El brazo; es la parte que conecta la base y la cabeza y el tubo del ocular a la base del
microscopio. Da soporte a la cabeza del microscopio.
➢ La platina; es aquí donde se ubica la muestra a observar y que consiste en una
plataforma horizontal con un orificio central por donde pasa la luz., además está dotada
de unas pinzas para sujetar las láminas y frecuentemente dispone de unos tornillos (2)
para desplazarla gradualmente.
➢ El revólver; es una pieza giratoria que posee diferentes lentes objetivos, cada uno de
ellos posee un aumento distinto. Al girar esta pieza es posible utilizar estos lentes para
la observación.
➢ Los tornillos de focalización; el enfoque se realiza modificado la distancia entre la
preparación y el objetivo. El ajuste se realiza con dos tornillos; el macrométrico que se
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usa para los ajustes gruesos y el micrométrico para el ajuste fino o de precisión. Este
último tiene una escala graduada, en donde cada marca representa un avance de dos
micrones.
➢ tubo óptico; cilíndrico ahuecado destinado a llevar el ocular en su extremo superior y
los objetivos montados en el revólver en su extremo inferior.
Sistema óptico.
Sistema de iluminación.
➢ El condensador; tiene como función principal concentrar y regular los rayos luminosos
que provienen de la fuente luminosa.
➢ El diafragma; se localiza en el condensador y permite regular la cantidad de luz que
sale de este.
➢ Fuente de Luz; la cual puede ser:
- Natural; emitida por el sol, se obtiene de manera indirecta mediante un
espejo.
- Artificial; se genera a través de una lámpara de bajo voltaje.
1.2 COMPETENCIA.
➢ Al finalizar la sesión de práctica, el alumno idéntico las partes del microscopio óptico
compuesto y adquiere destrezas para el uso adecuado.
➢ Microscopio óptico.
➢ Laminas portaobjetos. ➢ Tijera.
➢ Laminilla cubreobjetos. ➢ Hoja de periódico y/o revista.
➢ Muestra preparada ➢ Piseta con agua.
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1.4 PROCEDIMIENTO.
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➢ Corte con una tijera una letra “e” minúscula de un texto de periódico.
➢ Coloque en el centro de la lámina portaobjeto una gota de agua.
➢ Con ayuda de la pinza de metal, coloque la letra “e” sobre la gota de agua.
➢ Cubra con una laminilla evitando la presencia de burbujas de aire.
➢ Coloque la lámina con la preparación sobre la platina, asegurándola con las pinzas,
centrando la misma hasta que la preparación esté iluminada.
➢ Colocar el objetivo de menor aumento y utilizando el tornillo macrométrico acerque la
muestra hasta que aparezca una imagen, para aclarar la imagen observada use el
tornillo micrométrico para un ajuste fino.
➢ Mirando por el ocular, traslade la muestra de izquierda a derecha y de arriba hacia abajo
verificando hacia donde aparentemente se desplaza la imagen.
➢ Para una observación mayor, gire el sistema de revólver y coloque en posición 10X y
40X, respectivamente. Sino aparece la imagen, ajuste el macrométrico y micrométrico.
1.5 RESULTADOS.
1.6 CUESTONARIO.
1. ¿Cuáles son los diferentes tipos de microscopios ópticos e indique sus usos?
2. ¿Cuáles son los diferentes tipos de microscopios electrónicos e indique sus usos?
3. ¿Qué es un microscopio estereoscópico y cuáles son sus aplicaciones?
4. ¿Cuáles son las aplicaciones de la microscopia, cite ejemplos?
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CARBOHIDRATOS (GLÚCIDOS)
Los carbohidratos son una clase de compuestos que incluyen aldehídos y cetonas
polihídricos, y grandes moléculas que pueden ser degradadas y formar la misma clase
de compuestos. Estos compuestos incluyen azúcares, glucógeno, almidones, celulosa,
dextrinas y gomas. Los carbohidratos se hallan principalmente en las plantas, de las
cuales constituyen el 75 % del material sólido.
Los carbohidratos desempeñan varios papeles cruciales en los organismos vivos. Son
moléculas reducidas parcialmente, las cuales producen, por oxidación, la energía
necesaria para conducir los procesos metabólicos; en esta forma, los carbohidratos
pueden actuar como moléculas para el almacenamiento de la energía. Los carbohidratos
poliméricos realizan una diversidad de funciones. Por ejemplo, se les encuentra en
paredes celulares y los recubrimientos protectores de muchos organismos. Los
carbohidratos adosados a las membranas de las células desempeñan un papel en el
reconocimiento celular en los procesos de comunicación de célula a célula. Por último, se
encuentran derivados de los azúcares en numerosas moléculas biológicas, entre ellas
antibióticos, coenzimas, y los ácidos nucleicos ARN y ADN.
PROTEÍNAS
Las proteínas constituyen la clase más compleja y variada de moléculas que se hallan en
los organismos vivientes. Se encuentran en todas las células y su importancia biológica
no puede ser exagerada. Este hecho fue reconocido por el químico alemán G.T. Mulder,
en 1839, cuando él mismo dio a esta clase de compuestos el nombre de proteína, que
quiere decir “de primera importancia”. Todas las proteínas están compuestas de los
elementos carbono, nitrógeno, oxígeno e hidrógeno. La mayoría de las proteínas también
contienen azufre, y algunas tienen fósforo y otros elementos como hierro, cinc o cobre.
Las proteínas son polímeros grandes, y al hidrolizarse producen unidades monómeras
llamadas aminoácidos. El peso molecular de la mayor parte de las proteínas varía de 12
000 a un millón o más, comparados con otros compuestos, cuyos pesos moleculares
están por lo general debajo de 1 000. Este gran tamaño le da a las proteínas propiedades
coloidales. Por ejemplo, no puede pasar a través de membranas diferencialmente
permeables, como las membranas de las células. La presencia de proteínas en la orina,
es una advertencia de posible daño en las membranas que forma el glomérulo renal de
la nefrona en los riñones. Entre las funciones de las proteínas tenemos: estructurales,
enzimáticas, hormonales, de transporte, homeostáticas, inmunológicas, contráctiles, etc.
LÍPIDOS
Los lípidos son parte del grupo de biomoléculas orgánicas de vital importancia para la
vida celular; su naturaleza química le confiere características de insolubilidad en
solventes polares, pero soluble en solventes orgánicos como: acetona, éter, cloroformo,
metanol, etc. La importancia biológica de estas moléculas es:
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➢ El valor de lípidos totales varía en condiciones normales entre 400 y 650 mg/100ml
de suero o plasma.
➢ El colesterol total es de 150 250 mg/100ml, elevándose con la edad.
3.2 COMPETENCIA.
Para carbohidratos.
Para proteínas
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Para lípidos
3.4 PROCEDIMIENTO.
A. DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS
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➢ Emulsión
COMPONENTES TUBOS DE ENSAYO
I II
Aceite 2 ml 2 ml
Agua destilada 10 ml 10 ml
Sol. Concentrada de Detergente 40% 1 ml -
Agitar fuertemente y observar lo que sucede.
Interpretar el fenómeno y esquematizar
➢ Saponificación:
COMPONENTES TUBOS DE ENSAYO
I II
Aceite 50 ml 50 ml
NaOH 20% 50 ml -
KOH 20% - 50 ml
Calentar hasta ebullición, agitando constantemente por un tiempo de 20 min.
Enfriar bruscamente (con hielo o a chorro de agua fría del grifo) Observar la
formación de una sustancia espumosa (jabón)
3.5 RESULTADOS.
➢ Grafique y fundamente todas las reacciones.
3.6 CUESTIONARIO.
1. ¿Cuáles son las diferencias estructurales entre los carbohidratos e lípidos, porque los
primeros son solubles en agua y no los segundos?
2. Esquematice la estructura de un aminoácido.
1. Robertis E. Biología Celular y Molecular. 15ª ed. Buenos Aires: El Ateneo; 2008.
2. Mckee T. Bioquímica. Las Bases Moleculares de la Vida. 1ª ed. Madrid: Mc Graw Hill;
2003.
3. Horton R., Scrimgeour G., Moran, A. Principios de Bioquímica. 4a. Ed. México. Pearson
Prentice Hall; 2008.
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Gram positivas: adquieren una coloración violeta porque se tiñen fuertemente con violeta
de genciana y, Gram negativas: se tiñen muy superficialmente y se decoloran fácilmente
con solventes orgánicos. Se utiliza adicionalmente la safranina o fucsina, que se emplea
como colorante de contraste, adquiriendo una coloración rosada.
Las células eucariontes son mucho más complejas que las procariontes, presentan un
núcleo rodeado por una membrana doble, el material genético se halla separado del resto
del contenido celular, denominado citoplasma, que es donde encuentran organoides
complejos denominados organelas. En este grupo celular tenemos La célula animal y
célula vegetal, la última se diferencia de la animal por la ausencia de pared celular y
cloroplastos.
4.2 COMPETENCIA.
➢ Al finalizar la sesión práctica, el alumno diferenciará una célula procariota de una
eucariota ; e identificará las estructuras de las células vegetales y animales
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4.4 PROCEDIMIENTO.
4.4.1 Célula Procariota.
a). Observación de bacterias del yogurt
➢ Coloque una gota de yogurt sobre una lámina portaobjetos y con ayuda de otra
lámina hacer el extendido.
➢ Dejar secar a temperatura ambiental por 5 minutos.
➢ Agregue con ayuda de un gotero la colorante safranina sobre el extendido y déjelo
por 10 minutos.
➢ Enjuague con agua corriente y seque al mechero.
➢ Agregue una gota de aceite de inmersión y observe con el objetivo de 100
aumentos e identifique y esquematice las bacterias típicas de yogurt:
Streptoccocus y Lactobacillus.
4.5 RESULTADOS.
➢ Realice los esquemas de las observaciones utilizando diferentes objetivos del
microscopio, señale, describa y diferencie sus estructuras. Fundamente cada
uno de los fenómenos observados.
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4.5 CUESTIONARIO.
1. Explique cinco diferencias estructurales entre una célula animal y vegetal.
2. Esquematice mediante un mapa conceptual las diferencias entre la célula procariotas
y eucariotas.
3. Realice un esquema del cloroplasto y señale sus partes.
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ANOTACIONES
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La estructura más aceptada es la del modelo del Mosaico Fluido de Singer y Nicholson,
según este modelo la membrana celular tiene una composición mixta de Glucolípidos,
fosfolípidos, esteroles y proteínas periféricas e integrales. Las proteínas de las
membranas incluyen transportadores que de manera pasiva o activa desplazan
sustancias hidrosolubles a través de la bicapa lipídica.
Fig. La membrana plasmática. Modelo de membrana plasmática de una célula animal, elaborado a partir de
microfotografías electrónicas y datos bioquímicos
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El transporte de sustancia dentro y fuera de las células puede ser en masa y se lleva a
través de vesículas membranosas como la endocitosis y exocitosis.
Medio hipertónico: también llamado solución hipertónica, es aquella que tiene mayor
concentración de soluto en el medio externo, por lo que una célula en dicha solución
pierde agua (H2O) debido a la diferencia de presión, es decir, a la presión osmótica,
originando perdida de agua y deshidratación. En células animales ocurre la crenación y
en células vegetales las plasmólisis.
Medio hipotónico: también llamado solución hipotónica, es aquella que tiene menor
concentración de soluto en el medio exterior en relación al medio interior de la célula, es
decir, en el interior de la célula hay una cantidad de sal mayor que de la que se encuentra
en el medio en la que. El agua tiende a pasar al protoplasma y las células se hinchan y
se vuelven turgentes, pudiendo estallar. En células vegetales la pared de celulosa lo
impedirá.
Hoy se sabe que, si bien el agua es capaz de difundirse a través de la bicapa lipídica,
esta no es la vía principal en todas las membranas celulares. Se encontró que tanto
en las membranas de células vegetales y animales, existen unos canales proteicos
denominados acuaporinas que es donde pasan las moléculas de agua a mucha más
velocidad.
5.2 COMPETENCIA.
5.4. PROCEDIMIENTO.
A. Difusión.
➢ En 3 vasos Beaker colocar agua hasta la mitad (agua a 37ºC, agua caliente y agua
helada).
➢ Con la ayuda de un gotero agregar una gota de tinta líquida o azul de metileno en
cada una de ellos.
➢ Observar durante 5 minutos.
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5.5 RESULTADOS.
A. Difusión.
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6. CUESTIONARIO.
2. Las amebas y los protozoarios son organismos que viven en agua dulce y poseen
vacuolas contráctiles. Investigue ¿Cuál es la función que cumplen estas estructuras
en los organismos mencionados?
3. ¿Cuáles son los fenómenos físicos más importantes que se dan en la materia
viviente?
7. FUENTES DE INFORMACIÓN
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PRÁCTICA N° 6: MITOSIS
6.1 MARCO TEÓRICO
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6.4 PROCEDIMIENTO
6.4.2. Fijación
6.4.3. Coloración
6.4.3. Montaje
➢ Coloque una raíz sobre una lámina portaobjetos y añada 01 gota de orceína fría,
cubra la muestra con una laminilla.
➢ Con la punta de un lápiz presione cuidadosamente y golpee describiendo círculos
concéntricos para permitir la extensión del tejido meristemático.
➢ Elimine el exceso de colorante usando un trozo de papel de filtro y realice el
aplastamiento con el pulgar de izquierda a derecha (squash) lo que permite que
el tejido meristemático permanezca en el mismo plano.
➢ Si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de un estilete y agregue una
gota adicional de orceína acética; coloque nuevamente el cubreobjetos sobre la
muestra.
➢ Observar al microscopio, primero con el objetivo de 10X y luego con el de 40X.
6.5 RESULTADOS
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6.6 CUESTIONARIO
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Las enzimas son biocatalizadores de naturaleza proteica que se encuentran en todos los
seres vivos y que participan en todas las reacciones químicas del metabolismo celular y
a las reacciones mediadas se las denomina reacciones enzimáticas. La sustancia sobre
la que actúa una enzima se denomina sustrato con la cual formará un complejo enzima-
sustrato para finalmente liberar a la enzima inalterada y a un producto. Las enzimas son
capaces de acelerar las reacciones bioquímicas del organismo actuando en pequeñas
cantidades y recuperándose indefinidamente. En general, las enzimas reciben un nombre
de acuerdo con el sustrato que participa en la reacción seguida por el tipo de reacción
catalizada y por la terminación –ASA.
Las enzimas son generalmente proteínas globulares sintetizadas por las propias células
y casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran procesos
metabólicos. Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la
energía de activación de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa
de reacción. Las actividades de las enzimas están determinadas por su estructura
tridimensional, la cual viene a su vez determinada por la secuencia de aminoácidos y
generalmente las enzimas son más grandes que sus sustratos, y sólo una pequeña
estructura de las enzimas (sitio o centro activo) está involucrada en la catálisis. La
mayoría de las enzimas al igual que el resto de las proteínas, pueden ser
desnaturalizadas si se ven sometidas a agentes desnaturalizantes como el calor y el pH
extremo; pues estos agentes destruyen la estructura terciaria de las proteínas de forma
reversible o irreversible.
7.2 COMPETENCIA.
7.4 PROCEDIMIENTO.
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales
y vegetales. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante
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3 ml de H2O2 3 ml de H2O2
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7.5 RESULTADOS.
➢ Esquematice los resultados e interprete estos según los cambios ocurridos
en cada una de las reacciones
7.6 CUESTIONARIO.
1. Si el sitio activo de una enzima consiste en una seria de aminoácidos. ¿Por
qué se necesita el resto de la proteína?
2. ¿Cuál es la importancia de las enzimas en el cuerpo humano?
3. ¿Qué estructuras de nuestro producen enzimas y cuál es su función de ellas?
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VERSIÓN: 01
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ANOTACIONES
43
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
En 1869 el ADN fue aislado por primera vez, por el médico alemán Friedrich
Miescher, que lo denominó nucleína pues lo encontró en los núcleos de los
linfocitos y espermatozoides de salmón. Posteriormente Lavene (1920) dilucidó
su composición química y Watson y Crick (1953) determinaron su estructura.
Fuente: https://tw.genedirex.com/product/extract-reagent/
8.2. COMPETENCIA.
8.4. PROCEDIMIENTO.
La fresa es una buena fuente de ADN por ser un octoploide (Hirakawa et al. 2013).
➢ Verter por un lado al vaso de fresas filtrado (vaso N°1), una cantidad de alcohol a
baja temperatura similar al filtrado de fresas. No mezclar.
➢ En unos segundos, se observará el desarrollo de una sustancia blanca en la
superficie del extracto de fresas.
➢ Con ayuda del palito de helado, trata de coger el sobrenadante blanco.
8.5. RESULTADOS.
47
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REVISIÓN: 01
8.6. CUESTIONARIO.
1. ¿Por qué se usó alcohol a baja temperatura y no a temperatura ambiente?
2. ¿Por qué fue necesario moler las fresas?
3. El ADN que se extrae de la boca ¿sólo es extraído de las células de las mucosas
bucales?
4. Investigue sobre otros procedimientos que se usan para extraer ADN
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REVISIÓN: 01
ANOTACIONES
49
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REVISIÓN: 01
El sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto. Karl Landsteiner en 1900
descubrió que los glóbulos rojos pueden clasificarse en A, B y O, de acuerdo a la
presencia o ausencia de antígenos reactivos en la superficie de los glóbulos rojos. Dichos
antígenos son de mucha importancia en transfusión sanguínea, trasplante de tejidos y
enfermedad hemolítica del recién nacido. La compatibilidad de grupo ABO es esencial en
toda prueba serológica pre transfusional. Las transfusiones de sangre entre grupos
incompatibles pueden provocar una reacción inmunológica que puede desembocar en
hemólisis, anemia, fallo renal, shock o muerte.
El antígeno Rh (D) fue caracterizado en 1939 por Levine y Stetson, quienes encontraron
el anticuerpo en el suero de una madre cuyo niño tubo Enfermedad hemolítica del recién
nacido. Recibió su nombre en 1940 cuando Landsteiner y Wiener inmunizaron conejos
con eritrocitos del mono Macacus rhesus y dicho antisuero aglutinaba los eritrocitos del
85% de la población (Rho positivo). Las personas que poseen este aglutinógeno son Rh
positivos (Rh+) y las que carecen de estos aglutinógenos son (Rh-). Es muy importante
tener en consideración este factor para evitar la eritroblastosis fetal.
9.2 COMPETENCIAS.
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9.4. PROCEDIMIENTO.
➢ Rotular ceca de los pocillos de las cubetas de porcelana: Anti A, Anti B y Anti-D
o Rh.
➢ Desinfectar el dedo cordial (medio) con el algodón embebido con la solución de
alcohol
➢ yodado, esperar que se volatilice.
➢ En el lado externo del dedo, hacer una punción con firmeza y rapidez utilizando la
lanceta estéril.
➢ Dejar caer una gota de sangre sobre cada uno de los pocillos rotulados (de ser
necesario
➢ presiona ligeramente el dedo, para facilitar el flujo de sangre capilar)
➢ Agregue el reactivo específico a cada pocillo (Anti A, Anti B y Anti D ó Rh).
➢ Mezclar sangre y antisuero con un palito mondadientes.
➢ Observe la reacción de aglutinación (Aglomeración) o no de los eritrocitos de
acuerdo al siguiente esquema de identificación e identificar el tipo de grupo
sanguíneo, así como si el factor es positivo o negativo.
AGLUTINADO =
NO HAY AGLUTINACIÓN =
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REVISIÓN: 01
9.5 RESULTADOS.
De acuerdo a los resultados de sus grupos sanguíneos y de factor Rh, explique de qué
grupo puede recibir y quién puede donar.
9.6 CUESTONARIO.
1. ¿Qué es un antígeno?
2. ¿Qué es un anticuerpo?
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REVISIÓN: 01
ANOTACIONES
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REVISIÓN: 01
Al preparar sangre para microscopia se extiende primero una gota pequeña sobre una
laminilla de vidrio y se deja que seque. Se requiere mucha práctica y cuidado para obtener
un buen frotis. Después del secado, se fijan las células y se tiñen. Se emplea metanol
como fijador seguido de tinción con uno de los colorantes de Romanowsky. Estas
tinciones se preparan a partir de mezclas de azul de metileno y eosina por métodos que
involucran la producción de colorantes púrpura (azur), que son productos de la oxidación
del azul de metileno. El colorante Leishman se emplea comúnmente en Inglaterra y el
colorante de Wright en E.U.A. Una vez diferenciados los linfoblastos en linfocitos, los
monoblastos en monocitos, y los mieloblastos en polimorfonucleares o granulocitos
(basófilos, neutrófilos y eosinófilos), la concentración de leucocitos totales en sangre se
encuentra entre las 4500 y 11000 unidades por milímetro cúbico. En la médula ósea hay
una gran reserva, de modo que puede triplicar este número. Esta reserva se moviliza (y
se multiplica) en situaciones de estrés o en una infección. La división principal, los deja
de la siguiente manera:
Hay cinco tipos de glóbulos blancos: Los neutrófilos son el tipo más común de glóbulo
blanco. Estas células van al lugar de una infección y liberan sustancias llamadas enzimas
para combatir las bacterias o los virus invasores Linfocitos. Hay dos tipos principales de
linfocitos: Linfocitos B y T. Los linfocitos B combaten las bacterias, las toxinas o los virus
invasores. Los linfocitos T atacan y destruyen las células propias que han sido infectadas
por virus o por células cancerosas.
Los monocitos eliminan las sustancias extrañas y las células muertas y estimulan la
respuesta inmunitaria del cuerpo Los eosinófilos combaten las infecciones, la inflamación
y las reacciones alérgicas. También defienden al cuerpo contra los parásitos y las
bacterias Los basófilos liberan enzimas para ayudar a controlar las reacciones alérgicas
y los ataques de asma. La fórmula leucocitaria normal en el ser humano es: Neutrófilos:
50-70 %, Linfocitos: 20-40 %, Monocitos: 2-8 %, Eosinófilos: 1-4 % y Basófilos: 0-1 %
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REVISIÓN: 01
Los colorantes policromos de azul de metileno y eosina derivados del método original de
Romanowsky sirven para la tinción diferencial de la mayoría de las estructuras normales y
anormales de la sangre. La mayor parte se disuelven en alcohol metílico y combinan la fijación
y la tinción. Se han ideado numerosos métodos para la preparación y aplicación de estos
colorantes siendo los más conocidos los de Giemsa y Wright. El colorante de Wright, es
policromático porque produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un
colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). Los núcleos y algunas otras
estructuras de las células se tiñen con el colorante básico, por lo que se denominan basófilas;
ciertas estructuras solo toman el colorante ácido y se llaman acidófilas, oxífilas o eosinófilas.
Algunas otras estructuras se tiñen por una combinación de ambos y se denominan neutrófilas.
El colorante de Wright es uno de los mejores y más empleados, permitiendo la identificación de
los diferentes tipos de células sanguíneas.
10.2. COMPETENCIAS
➢ Al finalizar la sesión práctica, el alumno será capaz de reconocer las diferentes formas
nucleares en tejido sanguíneo y ubicar e identificar los palillos de tambor en los leucocitos
neutrófilos.
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REVISIÓN: 01
10.4. PROCEDIMIENTO
Obtención y frotis de la muestra de sangre.
➢ Desinfectar el dedo cordial (medio) con el algodón embebido con la solución de alcohol,
esperar que se volatilice.
➢ En el lado externo del dedo, hacer una punción con firmeza y rapidez utilizando la
lanceta estéril.
➢ Colocar una gota de sangre en una lámina portaobjetos y hacer la extensión de la sangre
con un movimiento suave y firme con otra lamina portaobjetos.
➢ Dejar secar al medio ambiente durante 1 a 5 minutos.
Coloración y observación de la muestra.
➢ Cubrir el frotis completamente con el colorante de WRIGHT durante 5 minutos.
➢ Sin tirar el colorante agregar el buffer de fosfatos pH 7.2 durante 5 minutos.
➢ Desechar el colorante y lavar con la solución Buffer o con agua corriente.
➢ Secar al calor moderado.
➢ Observar al microscopio con el objetivo de inmersión, previamente colocar una gota de
aceite de inmersión.
10.5. RESULTADOS.
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REVISIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
10.6. CUESTIONARIO:
1. ¿Cuál es el fundamento de la coloración Wright y que función cumple cada
uno de sus componentes?
2. ¿Qué función cumple el Buffer 7?0 en la coloración de Wright?
3. ¿Qué otras aplicaciones presenta la coloración de Wright?
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REVISIÓN: 01
ANOTACIONES
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REVISIÓN: 01
Por ejemplo; el cariotipo Humano normal consta de 46 cromosomas; formados por 23 pares
El extendido de las células sobre el portaobjetos hace que estas desplieguen todos sus
cromosomas, que generalmente se estudian en la metafase. Acompañado con otras técnicas
como por ejemplo la de bandeado, se ha alcanzado una mayor resolución al estudiar los
cromosomas también en la profase y la prometafase.
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REVISIÓN: 01
Hay algunos trastornos que se derivan de la pérdida de un solo trozo de cromosoma, entre
ellas:
➢ Cri du Chat (maullido del gato) donde hay un brazo corto en el cromosoma 5. El nombre
viene por el grito que causan los recién nacidos parecido al maullido de un gato debido
a una malformación de la laringe.
➢ Síndrome de supresión que se da por la pérdida de una parte del brazo corto del
cromosoma 1.
➢ Síndrome de Angelman; Un 50% de los casos falta un segmento del brazo largo del
cromosoma 15.
Dentro de las característicasde los cromosomas en el cariotipo humano normal son:
11.2 COMPETENCIAS.
➢ Al finalizar la sesión práctica, el estudiante analiza e identifica las anomalías numéricas
y estructurales cromosómicas en un cariotipo humano que son causas de muchas
enfermedades y síndromes congénitos.
➢ Tijeras
➢ Pegamento (goma)
➢ Regla
➢ Hojas de papel A4
➢ Fotocopias de juegos de cromosomas.
11.4 PROCEDIMIENTO.
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REVISIÓN: 01
11.5 RESULTADOS.
CARIOTIPO HUMANO
NORMAL: MUJER (46, XX)
CARIOTIPO HUMANO
NORMAL: VARON (46, XY)
11.6 CUESTIONARIO.
1. ¿Qué es el cinetocoro?
2. Haga un gráfico y denomine las partes del cromosoma.
3. ¿Qué es un análisis citogenético o cariotipo convencional?
4. ¿Qué permite detectar los cariotipos?
5. ¿Qué tejido se usa para obtener un cariotipo humano y por qué?
1. Lodish, H. F., Berk, a., Matsudaira, P., Kaiser, M., Krieger, M., Scott, M. P., Zipursky,
S. L. y Darnell, J. E.: Biología celular y molecular. Médica panamericana, 5.a ed.,
2010
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REVISIÓN: 01
Paciente A
Figura No. 1
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REVISIÓN: 01
Paciente B
Figura No. 2
64
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
Paciente C
Figura No. 3
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REVISIÓN: 01
Paciente D
Figura No. 3
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REVISIÓN: 01
67
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
localización de la anomalía):_________________________________
_______________________________________________________
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REVISIÓN: 01
ANOTACIONES
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
Gregorio Mendel realizó experiencias de cruzamiento con la especie vegetal Pisum sativum
“arvejas”, descubriendo las leyes que rigen la transmisión hereditaria y que constituye el
fundamento de la genética moderna, con sus observaciones se establecieron las reglas de
herencia para lo que hoy conocemos como herencia mendeliana, en la que se observa la
heredabilidad de caracteres cuyos genes presentan un solo locus, solo dos alelos, uno
dominante y otro recesivo y en el caso de observar más de un carácter, estos no se encuentran
en el mismo cromosoma.
Mendel estableció lo que hoy se conocen como las leyes de Mendel, estas observaciones se
basan en el hecho que cuando se forman los gametos, cada alelo de un gen, irá a un gameto
diferente y esto sucederá al azar e independientemente de lo que le suceda a los genes de
otros cromosomas:
Así en los seres humanos, el hijo recibirá una combinación aleatoria de genes de cada uno de
los padres genéticos. Cada ser humano normal tiene 46 cromosomas (23 pares) en cada una
de sus células somáticas que son diploides. Al formar los gametos (óvulo o espermatozoide)
se elegirá uno de cada par cromosómico, de tal forma que estas células sólo tienen 23
cromosomas (número haploide). De esta forma, cada padre contribuye con la mitad de la
información genética (genotipo) presente en el hijo.
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
12.2. COMPETENCIA
12.4. PROCEDIMIENTO.
En este juego de simulación partimos de unos padres concretos, con unos caracteres
faciales prefijados de antemano, todos ellos serán heterocigotos; es decir, manifestaran la
información dominante, aunque también sean portadores de la recesiva. Los pasos a seguir
son:
1. Los dos juegos de cromosomas, del padre y de la madre, se recortan. Los cromosomas
homólogos de cada padre se doblan por la mitad y se pegan sobre un soporte rígido. De esta
forma al tirar cada pareja de cromosomas al aire, solo se podrá ver uno de ellos, el que al
azar va a ir al ovulo o espermatozoide, que formara al futuro hijo.
2. Se mezclan y lanzan al aire los dos juegos de cromosomas.
3. Se contrasta la información recibida de la madre y del padre con la tabla de características
genéticas para identificar el fenotipo de la cara del hijo, y se identifica si es niño o niña. Con
toda esta información se dibuja la cara del bebe.
4. Los dibujos de las caras que se obtienen, de cada uno de los cruces, se colocan en un mural.
Así comprobamos la gran variabilidad genética de los posibles hijos de una misma pareja y
que la probabilidad que sean niños o niñas es la misma.
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VERSIÓN: 01
CÓDIGO: UPNW-GAC-FOR-036 FECHA: 24/08/2020
REVISIÓN: 01
72
GUÍA DE PRÁCTICAS
VERSIÓN: 01
CÓDIGO: UPNW-GAC-FOR-036 FECHA: 24/08/2020
REVISIÓN: 01
73
GUÍA DE PRÁCTICAS
VERSIÓN: 01
CÓDIGO: UPNW-GAC-FOR-036 FECHA: 24/08/2020
REVISIÓN: 01
North Carolina Dept. of Public Instruction. Biology Curriculum Support Document .Raleigh. 2002.
http://msbrownclass.weebly.com/uploads/1/2/8/9/12898835/baby_lab.pdf consultado
https://www.dentonisd.org/cms/lib/TX21000245/Centricity/Domain/530/Genetics%20of%20Parenthood..pdf
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GUÍA DE PRÁCTICAS
VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
12.5 RESULTADOS
Escribir sus resultados en la tabla y dibuje el rostro del hijo, incluir la foto de los padres.
ALELO ALELO
GENOTIPO FENOTIPO DEL
N° RASGO DE LA DEL
DEL HIJO HIJO
MADRE PADRE
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
12.6 CUESTIONARIO
1. Lodish, H. F., Berk, a., Matsudaira, P., Kaiser, M., Krieger, M., Scott, M. P., Zipursky,
S. L. y Darnell, J. E.: Biología celular y molecular. Médica panamericana, 5.a ed., 2010.
2. Luque, J. y Herraez, A.: Biología Molecular e Ingeniería Genética. Harcourt, 2001.
3. North Carolina Dept. of Public Instruction. Biology Curriculum Support Document
.Raleigh. 2002.
4. Let’s Make a Baby! [Internet] (s.f.) [citado el 11 de agosto de 2023]. Disponible en:
http://msbrownclass.weebly.com/uploads/1/2/8/9/12898835/baby_lab.pdf consultado
5. The Genetics of Parenthood—FACE LAB. [Internet] (s.f.) [citado el 11 de agosto de
2023]. Disponible en:
https://www.dentonisd.org/cms/lib/TX21000245/Centricity/Domain/530/Genetics%20o
f%20Parenthood..pdf
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
ANOTACIONES
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
El ADN que contiene la información hereditaria bajo la forma de genes, es como un libro que
contiene instrucciones para sintetizar proteínas. El alfabeto que se emplea en ese libro es sencillo:
Adenina (A), Timina (T), Guanina (G) y Citosina (C). Teniendo en cuenta que el ADN posee 4
bases nitrogenadas distintas y que existen 20 aminoácidos distintos capaces de unirse para
formar las proteínas, es evidente que la traducción está regida por una clave. Por lo tanto la
existencia de caracteres hereditarios no es sino la expresión de ciertas regiones de ADN a través
del código genético.
Transcripción: En las células eucariotas, se lleva a cabo en el núcleo a partir de una cadena de
ADN que sirve como patrón estructural para el ensamblaje del ARN, a partir de nucleótidos libres
de célula.
➢ ARNm (ARN mensajero): tiene los codones o tripletes de bases. Ejemplo: UUU
➢ ARNr (ARN ribosomal): reconoce el extremo del ARNm, por donde se debe iniciar la síntesis
de proteínas.
➢ ARNt (ARN transferencia): transfiere un aminoácido específico al ribosoma. Lleva el
anticodón que debe ser complementario al codón. Ej. AAA
Fig. 1
13.2. COMPETENCIA:
➢ Papel cuadriculado
➢ Lapiceros
➢ Ejercicio propuesto sobre código genético.
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REVISIÓN: 01
13.4. PROCEDIMIENTO:
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
4. Resolución de casos:
4.1.- Casos de Código genético:
13.5. RESULTADOS
13.6. CUESTONARIO
1. LODISH, H. F., BERK, A., MATSUDAIRA, P., KAISER, M., KRIEGER, M., SCOTT, M. P.,
ZIPURSKY, S. L. y DARNELL, J. E.: Biología Celular y Molecular. 7a ed. Editorial Médica
Panamericana. 2016.
2. https://www.youtube.com/watch?v=xD5s6W501y0 : Cómo utilizar las tablas de código
genético (bases y aminoácidos).
3. http://www.wwpdb.org/ : Worldwide Protein Data Bank
4. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/ : GenBank
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REVISIÓN: 01
ANOTACIONES
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
➢ Competencia del aprendizaje: Indicar lo que se espera logren los estudiantes después
de realizada la práctica.
➢ Procedimiento: Consignar de forma específica cada paso que llevo a cabo en cada
actividad o proceso.
➢ Referencias Bibliográficas. Son las fuentes que empleo como base para la
investigación académica, ya sea como material de apoyo o como referencia para citar y
validar las ideas expuestas en su trabajo. Estas pueden ser de diferentes tipos como
libros, artículos de revistas, tesis con valor entre otros; con valor científico.
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
Práctica N° 01
*………………………………….
*………………………………….
*………………………………….
*………………………………….
*………………………………….
Ciclo: Primero
Sección: ……………
Docente (s):
………………………………………………..
………………………………………………..
LIMA-PERÚ
2024
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
BIOSEGURIDAD
1.1 INTRODUCCIÓN.
1.4 PROCEDIMIENTO.
El Docente utilizó las diapositivas para explicar el tema donde dio a conocer cada una de
las normas que se deben seguir en el laboratorio para evitar algún tipo de accidente
durante su uso, se reconoció por medio de imágenes las señales o símbolos de
Bioseguridad del laboratorio, posteriormente se identificó cada uno de los materiales de
laboratorio a utilizar y se conoció el uso de cada uno de ellos.
1.5 RESULTADOS.
(Deben realizar sus dibujos con su respectiva explicación y de ser el caso elaborar tablas).
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VERSIÓN: 01
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REVISIÓN: 01
Se conoció el uso de los materiales de laboratorio (Fig. 1). Trabajar en tiempo pasado.
1.6. CONCLUSIONES.
1.7. CUESTIONARIO.
1. Sadava D.; Heller H.; Orians G.;Purves W. y Hillis D. . Vida. La Ciencia de la Biología.
1a ed. Buenos Aires: Ed. Médica Panamericana; 2013.
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