Re-10-Lab-034 Microbiologia I

Código: RE-10-LAB-034
Versión: 5.0
GUÍA PRÁCTICA DE MICROBOLOGÍA I
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 1
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la
salud de los que allí se desempeñan frente a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes
y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterior. En ese entendido la OMS se
dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que
se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en:
Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es
necesario para minimizar riesgos:
➢ El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se
manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.
➢ Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.
➢ Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.
➢ No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio.
1
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Vigencia desde:
2023-05-04
Protección personal:
➢ Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.

➢ Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar contacto
directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos. Una
vez utilizados los guantes, se retirarán de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.
➢ El personal y los estudiantes se lavarán las manos después de manipular muestras y antes de salir del
laboratorio.
➢ Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos
y fuentes de radiación ultravioleta artificial.
➢ Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio.
➢ Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias.
➢ Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio.
➢ No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio.
Procedimientos:
➢ Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.

➢ No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.
➢ Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de
aerosoles.
➢ Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se
comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e
incidentes.
➢ Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.
➢ Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por medios químicos o físicos) antes de eliminarlos
por el colector de saneamiento.
Zonas de trabajo del laboratorio:
➢ El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.

➢ Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente
peligroso y al final de cada jornada de trabajo.
➢ Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de
eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.
➢ Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos.
Clasificación de los Residuos:
➢ Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud humana
y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos.
➢ Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y el
ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos corporales,
cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis, órganos, tejidos, partes
corporales.
2
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➢ Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y cortopunzantes
desechables.
➢ Desechos especiales frascos de antibióticos y sachet de medicamentos
2 COMPETENCIA (S)
✓ Identifica y aplica las normas básicas de bioseguridad en laboratorio de microbiología en relación con su
contexto
✓ Investiga la metodología correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio y la
solución de problemas.
✓ Aplica la metodología correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio microbiología.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
➢ Manual de Higiene y seguridad en Microbiología.

➢ Normas de Bioseguridad.
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO.
➢ Trabajo en grupos pequeños
5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA

Dos periodos de 50 minutos
6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad.

2. Esquematizar un mapa cognitivo en forma personalizado de manejo de residuos.
3. Mencione las barreras químicas, físicas, biológicas de protección personal
4. Clasifique los residuos.
Residuos Infeccioso Cortopunzante Comunes

Jeringa con sangre
Hojas de bisturí
Cajas petri
cultivadas
Papel de escritorio
Tiras reactivas de
orina
Frasco con muestra
Aguja hipodérmica
3
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PRÁCTICA Nº 2
MATERIAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de otros laboratorios, requiriendo

de unos cuidados especiales ya que se debe trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operario,
de las muestras y del ambiente. Por todo ello es necesario reconocer cada uno de los materiales que son
utilizados en laboratorio de Microbiología y reconocer el uso que se le da en el mismo. Es cierto que muchos
materiales se comparten con otros laboratorios, sin embargo en microbiología se da un uso especial porque el
objetivo es diferente. Ejemplo: el caso de un mechero, que se utiliza para esterilizar.
2 COMPETENCIA (S)
✓ Describe y dibuja el material empleado en las prácticas de microbiología, y la solución de problemas

✓ Reconoce el uso correcto del material y equipo en las prácticas de microbiología, para la solución de
problemas que se presentan en el campo de trabajo del profesional.

EQUIPOS y MATERIALES
Cantidad
por grupo
(25
Ítem DENOMINACIÓN estudiantes) Unidad Observaciones
1 Portaobjetos 10 pzas
2 Cubreobjetos 10 pzas
3 Tubos de ensayo 10 pzas
4 Tubos de hemolisis 10 pzas
5 Cajas Petri 5 pzas
6 Asas bacteriológicas 4 pzas
7 Frascos Scott de 250 ml 3 pzas
8 Pipetas de 10 ml 2 pzas
9 Frascos lavadores 2 pzas
10 Gradillas 3 pzas
11 Varillas de tinción 2 pzas
12 Goteros 2 pzas
13 Probetas de 100 ml 2 pzas
14 Bastones o varillas de vidrio 2 pzas
15 Espátula de drigalski 2 pzas
16 Pinzas anatómicas punta roma 4 pzas
4
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17 Microscopios 6 pzas
Cantidad
por grupo
(25
17 Centrifugadora 1 pzas
18 Autoclave 1 pzas
19 Horno de calor seco 1 pzas
20 Incubadoras 1 pzas
21 Baño de agua o maría 1 pzas
22 Refrigeradores 1 pzas
23 Mechero de alcohol 2 pzas
24 Mechero de gas 4 pzas
25 Balanzas 2 pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Alcohol al 70 % 20 Ml
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO.

➢ Describiendo los materiales y su aplicacion durante las practicas
5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA


No se aplica
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7. CUESTIONARIO
1. Indique el uso y realice el dibujo que falta de cada uno de los materiales e instrumentos
MATERIALES USOS DIBUJO

Portaobjetos
Cubreobjetos
Tubo de ensayo
Tubos de hemolisis
Caja petri
Pipetas graduadas
2. ¿Qué otros tipos de materiales e instrumentos de laboratorio utilizados en Microbiología se pueden

añadir a los ya enunciados?
3. Esquematicé un microscopio e identifiqué sus partes.
4. Cite los tipos de microscopios más empleados en el diagnostico microbiológico.
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PRÁCTICA Nº 3
TINCIÓN DE GRAM
TINCION ZIEHL NEELSEN
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. -

Debido a que las bacterias y otros microorganismos son muy pequeños, se requieren generalmente tinciones
biológicas para visualizarlos adecuadamente y demostrar el fino detalle de sus estructuras internas y su
morfología. En la coloración de Gram el Cristal Violeta actúa como colorante primario o básico, que se une
a la pared celular bacteriana, luego de un tratamiento con una solución débil de lugol (Mordiente). Algunas
especies bacterianas debido a la naturaleza química de sus paredes celulares poseen la capacidadde retener
el colorante primario o básico (Cristal Violeta), luego de una decoloración con una mezcla de alcohol y
acetona o con alcohol al 95 %. Tales bacterias se denominan Gram positivas. Las bacterias Gramnegativas,
debido a su mayor contenido lipídico en su pared celular, pierden la coloración primaria (Cristal Violeta)
cuando son tratadas con el decolorante y por lo tanto deben tomar el colorante secundario o de contraste
que es la Fucsina o Safranina. Las bacterias Gram negativas aparecen de color rosadas o rojas vistas al
microscopio y las bacterias Gram positivas aparecen de color violeta purpúreo.
1.1 Fundamento de la coloración de Gram:
Este método divide a las bacterias en dos grupos: Gram positivos y Gram negativas. Al colocar los
agentes como cristal violeta o violeta de genciana y añadirles una solución lugol, se combinan con
algunos componentes de la célula bacteriana que son retenidos por la membrana citoplasmática cuando
se tratan con alcohol acetona; otros, en cambio liberan rápidamente el colorante, por lo que no
aparecerán a la visión microscópica a no ser que se contrasten con algún otro tinte biológico como
safranina o fucsina. Por lo tanto, los microorganismos que conservan el cristal violeta o violeta de
genciana se observan de violeta Gram positivo y los que no lo hacen Gram negativos muestran un color
que corresponde al colorante de contraste de color rosado.
1.2 Integridad de la Pared Bacteriana
Si bien se ha demostrado que la pared no toma el colorante, desempeña un importante papel en el

equilibrio de pasaje y retención del colorante primario (Cristal Violeta). Se ha observado que las células
mutiladas en su pared no se tiñen por el Gram y pese a ser Gram positivas, aparecen como Gram
negativas. La pared intacta constituye una barrera importante para la elusión del colorante por el alcohol.
Las células Gram positivas y Gram negativas acumulan el colorante primario por medio de un eslabón
iónico entre los grupos básicos del colorante y los grupos ácidos de la célula.
7
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1.3 Intervención de los componentes químicos:
Es muy probable que la composición química y la permeabilidad de la bacteria, intervengan en la

diferenciación del Gram. Los lípidos, polisacáridos, ácidos grasos, nucleoproteínas y ciertos ésteres
fosfóricos intervienen en la coloración. La presencia de mucopéptidos en las Gram positivas y de mayor
cantidad de lípidos en las Gram negativas, podrían ser factores para tener en cuenta. En las Gram
negativas los lípidos serian disueltos en gran parte por el alcohol, facilitando la salida del colorante
primario.
1.4 Importancia de Otros Componentes:
a. Lugol: actúa penetrando en ambos tipos de bacterias, formando un precipitado Cristal Violeta-
Yodo.
b. Alcohol-acetona: es en esta etapa donde realmente tiene lugar la diferenciación. En las Gram
negativas, el alcohol no encuentra obstáculos en las capas bacterianas y disuelve o disocia
el precipitado Cristal Violeta-Yodo, el que puede fácilmente escapar al exterior. Las bacterias
Gram negativas al perder el compuesto Cristal Violeta-Yodo, quedan libres, y pueden tomar
el colorante secundario o de contraste (Fucsina o Safranina) y aparecer de color rosado o
rojo. En las Gram positivas, el alcohol atraviesa con dificultad las capas bacterianas debido a
la deshidratación que produce y reduce los poros de la pared.
c. En consecuencia, la disolución del precipitado Cristal Violeta-Yodo se efectúa lentamente, y

el proceso de arrastre tiene lugar aún con mayor lentitud. Por lo tanto, después de transcurrido
el tiempo usual de decoloración, la mayor parte del precipitado Cristal Violeta-Yodo se queda
en las células y estas pueden observarse en el microscopio de color violeta purpúreo.
1.5 Fundamento de la Tinción de Ziehl Neelsen:
Se sabe que el fenol, que forma parte del colorante, es soluble en los lípidos, los cuales son componentes
sobresalientes de las bacterias ácido alcohol - resistentes, como el bacilo de la tuberculosis. También es soluble
en alcohol y agua, más en lípidos y menos en agua. El fenol con la Fucsina forma el compuesto fenol-color (FC).
Al ponerse este compuesto en presencia del citoplasma bacteriano, el fenol se encuentra en un medio donde
su coeficiente de solubilidad es mayor y, por lo tanto, el compuesto fenol-color se fijará fuertemente y coloreará
de rojo la bacteria. Luego se agrega, el decolorante (ácido y alcohol), los que, debido a una permeabilidad de la
membrana citoplasmática, penetran con dificultad y se encuentran con el compuesto fenol-color. El fenol se
halla entonces frente a dos sustancias en las cuales es soluble, pero, como lo es más en lípidos, la mayor parte
del color quedará en el citoplasma y una pequeña cantidad se perderá por solubilización en ácidos y alcohol. Si
se destruye la integridad de la bacteriana por cualquier método, la bacteria pierde su ácido alcohol - resistencia,
pero no su virulencia.
❖ Capitulo 12 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va
8
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2. COMPETENCIA (S). -
✓ Analiza el fundamento de la tinción de Gram – Ziehl Neelsen, para la solución de problemas en el
campo de trabajo del profesional.
✓ Interpreta los resultados de la coloración de Gram, reconociendo la morfología y características
tintoriales de los diferentes microorganismos.
✓ Reconoce la importancia de la tinción de Gram en la práctica médica diaria.
Cantidad
por grupo
(25
1 Portaobjetos 15 Pzas
2 Asas bacteriológicas 5 Pzas
3 Microscopios 8 Pzas
4 Mechero de bunsen 4 Pzas
5 Frasco lavador o piceta 2 Pzas
6 Goteros 4 Pzas
7 Varillas para tinción 2 Pzas
8 Laminas coloreadas Cocos G + 5 Pzas
9 Laminas Bacilos G - 5 Pzas
10 Laminas Cocos G - 5 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Colorantes de Gram 1 kit
2 Colorantes de Ziehl nelssen 1 kit
3 Bajalenguas 10 Pzas
4 Hisopos estériles 10 Pzas
5 Aceite de inmersión 1 fco
9
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4. TECNICA O PROCEDIMIENTO
Pasos de la tinción de Gram
 Preparar un extendido fino en portaobjetos y dejarlo secar al aire
 Fijar el material al portaobjetos de manera que no sea arrastrado durante el proceso de tinción,
pasando el portaobjetos 3 o 4 veces por la llama de un mechero de alcohol. El calor del portaobjetos
debe ser tolerado por las manos del operador.
 Colocar el preparado sobre un soporte de tinción y cubrirlo con Cristal Violeta por 1 minutos.
 Lavar con agua a chorro débil.
 Recubrir la preparación con Lugol de Gram y dejar por 1 minutos.
 Bañar la superficie del portaobjetos con alcohol de 95 % o con Alcohol-Acetona por 30 segundos.
 Lavar con agua a chorro débil hasta que la decoloración sea total, es decir que no escurra más
alcohol coloreado.
 Cubrir la preparación con safranina por 1 minuto.
 Dejar secar.
 Observar al microscopio con lente de inmersión (100X)
Pasos de la tinción Ziehl Nelssen
 Preparar el extendido en un portaobjetos utilizando asa bacteriológica o hisopo.
 Dejar secar al aire.
 Fijar el extendido pasando 3 o 4 veces por la llama de un mechero de alcohol. El calor del
portaobjetos debe ser soportado por las manos del operador.
 Colocar el preparado sobre un soporte de Tinción y cubrir con Fucsina Básica Fenicada.
 Calentar por 3 veces hasta la emisión de vapores blancos sin llegar a la ebullición, con un mechero
de alcohol, o con un hisopo de algodón embebido en alcohol, en el lapso de 5 minutos
 Escurrir el colorante y lavar con chorro fino de agua.
 Cubrir el preparado con Alcohol-ácido al 3 % (decolorante) por 5 minutos o hasta que la preparación
esté completamente decolorada.
 Lavar con chorro fino de agua.
 Recubrir la lámina con la solución de Azul de Metileno por 1 minutos.
 Escurrir el colorante y dejar secar al ambiente
 Observar con lente de inmersión.

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA
El estudiante anotara los resultados
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7. CUESTIONARIO. -
1. Complete el siguiente esquema:

PASOS METODO GRAM (+) GRAM (-)
1. Colorante básico
1. Mordiente
2. Decolorante
4. Colorante de
contraste
2. Llenar el siguiente cuadro

Género Morfología Gram habitad
Staphylococcus aureus
Streptococcus
pneumoniae
Neisseria meningitidis
Bacillus cereus
Escherichia coli
Clostridium perfringens
Staphylococus epidermidis
Klebsiella ozaenae
Enterobacter aerogenes
Corynebacterium
diphtheriae
11
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2023-05-04
PRÁCTICA Nº 4
OBTENCION DE MUESTRAS
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. – La obtención de muestra es el conjunto de procedimientos

destinados a obtener una parte representativa cualitativa y cuantitativamente a partir de un todo, en nuestro
caso, el paciente, el medio ambiente.
Recomendaciones generales para la recolección de muestras:

• Solicitud de una orden de laboratorio (nombre, edad, sexo, fecha, muestra, otros)
• Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por
escrito)
• La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso
• La recolección deberá relazarse antes de comenzar la terapia antimicrobiana o suspender el
antibiótico 48-72 horas antes de la toma de muestra
• Cuando se realice cultivo y aislamiento de gérmenes el material deberá recolectarse en
recipientes estériles
• Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible
• Etiquetar correctamente las muestras
• Toda muestra deberá como si fuera patógena
• Cuando se realiza cultivo de material deberá conocerse el lugar de donde proviene la muestra:
Zonas corporales que normalmente son estériles (sangre, punción de medula ósea, líquido
cefalorraquídeo, liquido sinovial, liquido pleural, liquido peritoneal, tracto respiratorio inferior,
orina recolectada por punción suprapúbica), Zonas corporales que poseen flora normal
comensal (boca, nariz, tracto respiratorio superior, piel, tracto genital, tracto gastrointestinal,
orina recolectada por micción media, sondas o bolsas recolectoras
MUESTRAS PARA EL ANALISIS BACTERIOLOGICO
Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales

Orina chorro medio Mujeres: limpiar la El recipiente donde se
previa higiene zona con agua y jabón, luego recolecta la muestra deberá ser
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04

enjuagar con agua, colocar estéril y no tocar la piel del
tampón vaginal, paciente.
manteniendo separados los En el caso de niños se
labios mayores y comenzar e podrá emplear bolsa
evacuar en el inodoro; recolectora.
recoger el chorro medio
después de eliminar los
primeros ml de orina.
Varones: limpiar el
glande con agua y jabón,
luego enjuagar con agua;
retraer la piel del glande;
recoger el chorro medio
después de eliminar varios
mL.
Orina por Punción Punción en la vejiga,
suprapúbica previa asepsia de la región
con alcohol yodado
Sangre venosa Limpiar el sitio de Extraer sangre durante el
punción venosa con alcohol episodio febril, extraer dos
al 70 % o con alcohol muestras, de brazo izquierdo y
yodado. derecho, no extraer más de tres
muestras en un periodo de 24
horas.
Tracto genital Limpiar la piel antes de Se puede aspirar el
femenino la recolección. líquido o se puede realizar un
hisopado, o recolectar las
secreciones con ayuda de un
hisopo.
Tracto genital Limpiar el glande con Recolectar las
masculino agua y jabón. secreciones con hisopo o en
tubo.
Vías respiratorias Enjuagar con agua Pasar el hisopo por la
superiores faringe antes de la recolección de la faringe posterior y las
muestra amígdalas, con la ayuda de un
bajalengua, sin tocar paladar,
úvula y dientes.
Vías respiratorias La muestra recolectada El paciente debe
inferiores es Esputo. Enjuagar o hacer obtenerlo por tos profunda.
gárgaras con agua antes de la
recolección.
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
Liquido Se realiza mediante

cefalorraquídeo (LCR) punción lumbar (PL) entre la
3º y 4º vértebra lumbar,

previa asepsia de la zona con
alcohol yodado
2. COMPETENCIA (S)
✓ Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico
microbiológico.
✓ Conoce los diferentes medios de transporte y técnicas de envío de muestras al laboratorio
microbiológico.
✓ Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico y su relación con el campo de trabajo del
profesional.
Cantidad
por grupo
(25
3 Pinzas metálicas punta roma 5 Pzas
4 Varillas de tinción 2 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Frascos para muestras de orina 5 Pzas
3 Hisopos de algodón estériles 15 Pzas
4 Guantes 5 Pares
5 Colorantes de Gram 1 kit
14
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
Trabajo en grupos 5 estudiantes para la extracción de muestras

Elaboración de una orden de laboratorio para solicitar un examen microbiológico


El estudiante anotara los posibles errores cometidos en la toma de muestra
7. CUESTIONARIO
1.- Llenar el cuadro que muestra son representativas en las siguientes patologías:
Enfermedad Agente etiológico muestra tratamiento
Meningitis neonatal
tuberculosis
Fiebre tifoidea
Amigdalitis
Micosis sistémicas
Infecciones urinarias
otitis
Gonorrea
Sífilis
Disentería bacilar
Chancroide
15
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 5
TÉCNICAS DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO Y MOLECULARES
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO

Las técnicas inmunológica se utilizan para detectar, identificar y cuantificar antígenos en muestras clínicas, así
como para evaluar la respuesta humoral frente a la infección y los antecedentes de exposición agentes
infecciosos de un individuo. La especificidad de la interacción antígeno- anticuerpo y la sensibilidad de muchas
de las técnicas inmunológicas las convierten en unas poderosas herramientas de laboratorio
Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño, volviéndose
insoluble en el medio dando lugar a un precipitado. Estas reacciones de precipitación se pueden llevar a cabo
en dos medios:
Medios Líquidos: En donde el anticuerpo se encuentra en solución. Ej: Reacción de VDRL
Medios Gelosados: Aquí el antígeno o anticuerpo está en un soporte (agar-agar, agarosa, poliacrilamida). Ej:
IDRS (inmunodifusión radial simple, que sirve para cuantificar IgM, IgD, IgG, IgA, IgAs
Reacción de Aglutinación: Aquí el antígeno está en forma de partícula. Puede ser:
Aglutinación directa: El antígeno particulado insoluble es aglutinado por el anticuerpo. Ej: Huddleson y Widal
Aglutinación Indirecta: Aquí se emplean transportadores a los que se adhiere en la superficie el antígeno
particulado insoluble. Esos transportadores pueden ser:
Partículas de Látex: como ejemplo encontramos: Reacción de Proteína C reactiva, factor reumatoideo,
Determinación de Grupo sanguíneo y factor, HCG, etc.
Hematíes: En este caso la técnica recibe el nombre de Hemoaglutinación, Ej: HA para Chagas, HA para
Toxoplasmosis. Tambien podemos tener
Inhibición de la Hemoaglutinación: Ej: AELO (Antiestreptolisina O)
Hemoaglutinación Reverso pasiva: Donde a los hematíes se adhiere el anticuerpo. Ej: Hepatitis
Reacción de Inmunofluorescencia: Se basa en la fluorescencia que emiten determinadas sustancias y se
observa en un microscopio especial de fluorescencia. Ej: TIF Toxoplasmosis (Test de inmunofluorescencia para
Toxoplasmosis), TIF Chagas
Reacción de Radioinmunoanálisis: En esta reacción el antígeno se marca con un radioisótopo. Ej: Hormonas,
IgE, Marcadores tumorales, HIV, Hepatitis
Reacción de Enzimoinmunoánalisis: Se emplea una enzima como marcador que actúa sobre un sustrato que
desarrolla color. Ej: Hormonas, IgE, Marcadores tumorales, HIV, Hepatitis
Pruebas cutáneas: la hipersensibilidad dérmica ofrece ciertas ventajas al determinar con facilidad y rapidez la
respuesta inmunológica (celular) del individuo a la exposición previa a los agentes infecciosos. Ej: Virus de
Herpes simple
Capítulo 5- 6 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va
16
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica las pruebas serológicas empleadas en el diagnóstico microbiológico, para la solución y toma
decisiones en el campo de trabajo
✓ Realiza e interpreta la determinación de grupo y factor sanguíneo.
✓ Analiza el fundamento de las pruebas serológicas, de acuerdo con las situaciones de campo de trabajo
del profesional
✓ Conoce otras pruebas empleadas en el diagnostico microbiológico, de acuerdo con las situaciones de
campo de trabajo del profesional

Cantidad
por grupo
(25
2 Gradilla 4 Pzas
3 Ligadura 5 Pzas
4 Mondadientes 20 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Jeringas 10 Pzas
2 Lancetas 20 Pzas
3 Guantes 5 Pares
4 Algodón 100 g
5 Reactivo de widal 1 Kit
6 Reactivo de grupo sanguíneo 1 Kit
• Se formarán grupos pequeños
• Determinación de Grupo y Factor
• Determinación de la prueba de widal
17
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04

El estudiante elabora un cuadro comparativo de los grupos sanguíneos
7. CUESTIONARIO
1. Realice un cuadro con las pruebas serológicas y moleculares

2. En qué consiste y la utilidad del inmunoblot o Western Blot.
3. Explique el fundamento de la Reacción de polimerasa en cadena y sus aplicaciones.
4. Cite la diferencia entre las pruebas de PCR y PCR latex.
18
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 6
ESTERILIZACIÓN -DESINFECCION
ESTERILIZACIÓN: Es un proceso por el que se eliminan todas las formas de vida microbiana (Microorganismos
patógenos y no patógenos), incluso las esporas bacterianas, se logra por medios físicos y químicos (Óxido de
Etileno).
DESINFECCIÓN: Es un proceso por el que se destruyen microorganismos patógenos, pero no siempre todos
los microorganismos y esporas, se logra mediante métodos químicos sobre superficies u objeto inanimados (
mobiliario, equipamiento, instrumental)y métodos quimicos.
ASEPSIA: Significa ausencia o privación de todos los gérmenes patógenos o no.
ANTISEPSIA: Uso de agentes químicos sobre la piel u otro tejido vivo para inhibir o eliminar los
microorganismos, no está implicada ninguna acción esporicida.
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
METODOS DE ESTERILIZACION
Incineración
Flama directa
Calor seco
(fuego)
Aire caliente
(estufa)
Vapor de agua
Ebullición
Calor húmedo
Metodos fisicos
Pasteurización
Tindalización
Rayos UV
Radiaciones
Rayos Gamma
Filtración
Métodos químicos Oxido de etileno
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
CONTROLES DE ESTERILIZACION
Estos controles son necesarios para cerciorarnos de la correcta esterilización del material:
➢ Controles Físicos: Son los más simples y menos precisos. Ej: Termómetro, Manómetro, Reloj.
➢ Controles Químicos: Son más precisos. Son cintas que cambian de color con la correcta esterilización.
➢ Controles Biológicos: Son los más exactos, pero lleva más tiempo realizarlos. Son bolsas selladas que
contienen microorganismos. Estas bolsas se colocan juntamente con el material a esterilizar, y luego de
finalizado el proceso de esterilización se cultivan.
METODO DE DESINFECCION
Alto nivel
Nivel intermedio
Bajo nivel
FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA DESINFECCION
 Los factores que intervienen en la desinfección son:

 La Temperatura
 El tipo de microorganismo
 La concentración del Antiséptico o Desinfectante
 La presencia de Materia Orgánica
 El Tiempo
 El pH
 La Naturaleza de la superficie a desinfectar
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LAVADO DE MANOS
Lavado Higiénico: Es el que se realiza diariamente de forma casera, disminuye la flora transitoria (flora que se
adquiere por contacto con objetos contaminados). Se realiza con agua y jabón.
Lavado Antiséptico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en
piel). Se emplea solución jabonosa antiséptica, cepillo y agua. Solo se cepillan las manos.
Lavado Quirúrgico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en
piel). Se emplea solución jabonosa antiséptica, cepillo y agua. Se cepilla el antebrazo y el codo.
2. COMPETENCIA(S)
✓ Identifica las características de desinfección, asepsia y antisepsia, que se presentan en el campo

de trabajo del profesional
✓ Realiza asepsia de las manos por medio del lavado y cepillado usando técnicas adecuadas.
✓ Realiza la limpieza y preparación de la piel o lugar en el cual se desea realizar una toma de muestra
bacteriológica o un procedimiento quirúrgico básico, en la solucion de casos clinicos
✓ Identifica las características de esterilización, métodos físicos como calor seco, calor húmedo y su
uso en el campo de trabajo profesional
3. MATERIAL, REACTIVOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Autoclave 1 Pzas
2 Mecheros bunsen 4 Pzas
3 Cajas Petri 20 Pzas
4 Pipetas de 10 ml 3 Pzas
5 Tubos de hemolisis 10 Pzas
6 Guantes para caliente 1 Par
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INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
estudiantes)
Ítem DENOMINACIÓN Unidad Observaciones
1 Papel madera o sabana 2 pliegues
2 Hilo de caña 2 Metros
3 Alcohol al 70 % 20 Ml
4 Algodón 50 Gramos
5 Fosforo 1 pza
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
➢ Lavado de manos
➢ Flama directa
➢ Uso de autoclave
La flama directa empleada para esterilizar el asa bacteriológica, se flamea con un mechero de alcohol o Bunsen,
hasta que el filamento del asa tome color Rojo vivo. De atrás hacia delante.
Calor húmedo
Para esto se utiliza la autoclave.

Se debe colocar agua en el fondo de la caldera. Acomodar el material en la cesta metálica. Adaptar la tapa y
ajustar los tornillos para asegurar el cierre hermético de la autoclave. Verificar si el orificio de escape está
abierto. Encender la autoclave y calentar hasta la salida de un chorro continuo de vapor de agua por la válvula
de escape, (para eliminar el aire residual). Cerrar la válvula de escape.
Cuando se alcance la Temperatura deseada por ejemplo 121ºC, regular la temperatura de la autoclave,
manteniendo la misma por 15 a 20 minutos. Concluida la esterilización, apagar la autoclave y dejar enfriar
espontáneamente. Esperar que la presión del manómetro marque 0. Abrir la válvula de escape para asegurarse
de que no hay presión en la autoclave.
Abrir la autoclave y retirar el material esterilizado. Dispensar los medios de cultivo en el material de laboratorio.
En autoclave se pueden esterilizar: material de vidrio, materiales metálicos, medios de cultivos, sustancias
oleosas liquidas, pijamas médicos, hisopos de algodón, etc.
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PRECAUCION
No abrir nunca la válvula de escape de la autoclave antes de que enfríe, porque la presión elevada podría
proyectar la tapa y el agua caliente hasta el exterior, con riesgo para el operador, además los líquidos podrían
entrar en ebullición expulsando los tapones de algodón y mojarlos.

El estudiante registrara en una tabla las características de cada medio preparado.
7. CUESTIONARIO
1. ¿De qué forma se esterilizarían mejor los siguientes materiales

MATERIAL MÉTODO DE TIPO DE OTROS
ESTERILIZACIÓN CALOR-TIEMPO (ESPECIFIQUE)
Pipeta vidrio
Caja petri de vidrio

Medios de cultivo
solido
Guantes
Jeringas desechables
Ropa quirúrgica
Pinzas quirúrgicas
tijeras
Hojas de bisturí
Mango de bisturí
Asa bacteriológica
Sala de quirófano
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PRÁCTICA Nº 7
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en condiciones ambientales adecuadas en los

que crecen y se multiplican los microorganismos in vitro con el objeto de aislarlos, identificarlos y poder
realizar otros estudios complementarios.
Constituyentes de los Medios de Cultivo:
Los medios de cultivos están compuestos por:
• Base de amino-nitrógeno (proteína digerida. Ej. Peptona)

• Factores de crecimiento. Ej. Sangre, suero, extracto de levadura
• Sales para tamponamiento. Ej. Fosfato, citrato
• Fuente de energía. Ej. Azúcares e hidratos de carbono
• Sales minerales. Ej. calcio, magnesio, hierro
• Agentes selectivos. Ej. Colorantes, antimicrobianos
• Indicadores. Ej. Rojo fenol
• Agentes gelificantes (para los medios sólidos). Ej. Agar
Clasificación de los Medios de Cultivo:
a. Medios Enriquecidos: Favorece el crecimiento de un determinado tipo de microorganismo, sin

llegar a inhibir totalmente el crecimiento del resto
Agar Sangre (AS): Permite el crecimiento de Gram (+) y (-) y permite observar el tipo de
hemólisis. Sirve para: Estreptococos, Estafilococos, Haemophillus influenzae, Gardnerella
vaginalis.
Agar Chocolate (AC): Este medio es más rico en nutrientes que el anterior y resulta adecuado
para el cultivo de organismos delicados, por ejemplo, Estreptococos.
Müller Hinton (MH): Es utilizado para antibiogramas porque desarrollan tanto Gram (+) y (-).
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b. Medios Selectivos: Permiten el crecimiento de un determinado tipo de microorganismos,

inhibiendo el desarrollo de los demás
Mac Conkey (Mac): Útil para Enterobacterias
Medio de Cisteina y Lactosa deficiente en electrolitos (CLDE): Para bacterias patógenas en

orina.
Azul de Metileno (AME): Los tres son selectivos para Enterobacterias, contienen lactosa y un
indicador, por lo tantopermiten la diferenciación entre gérmenes que fermentan y que no
fermentan la lactosa, una reacción importante para la identificación de las Enterobacterias.
Salmonella- Shigella (S-S): Para desarrollo de Salmonella o Shigella.
Thayer Martin (TM): Para desarrollo de Neisseria Gonorrhoeae y Neisseria Meningitidis.
Agar sangre con Violeta Cristal: Sirve para la diferenciación de Estreptococos cuando en la
muestra pueden existir otros gérmenes.
c. Medios Para Microorganismos Anaerobios:
Caldo de Tiogliconato:
Caldo para Anaerobios delicados (CAD): Ambos medios contienen agentes reductores que
ayudan a mantener el estado anaerobio, sirven para Clostridium.
d. Medios Especiales: Son aquellos en los que se ponen de relieve propiedades que un determinado
tipo de microorganismo posee.
Sabouraud (Sap): Este medio tiene pH bajo que facilita el desarrollo de hongos e inhibe el
desarrollo de la mayoría de las bacterias.
Lowenstein Jensen y Middlebrook: Ambos medios contienen glicerol y verde malaquita

constituyentes que favorecen el crecimiento de la Micobacterias como el Mycobacterium
tuberculosis.
Agar con Tiosulfito, Citrato, Sales Biliares y Sacarosa (TCBS): Para desarrollo de Vibrio
cholerae.
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e. Medios de Identificación y/o Pruebas Bioquímicas:

Kligler o TSI (agar triple, azúcar, hierro): Sirve para observar la fermentación de azúcares y
producción de ácido sulfhídrico.
Urea: Para observar la utilización de urea.
Citrato: Para ver la utilización de citrato.
Indol: Para observar el uso de triptófano.
Fenilalanina: Para ver la utilización de fenilalanina.
f. Medios de Transporte:
Stuart: Para transportar las muestras hasta el laboratorio.
2. COMPETENCIA(S)
✓ Identifica la composición y clasificación de los medios de cultivo y su relación en el campo de

trabajo del profesional.
✓ Aplica la metodología adecuada para la preparación de los medios de cultivo
3. MATERIAL, REACTIVOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Tubos de ensayo con tapa de rosca 10 Pzas
2 Pipetas de 10 ml 4 Pzas
3 Cajas petri 20 Pzas
4 Probeta de 100 ml 3 Pzas
5 Frascos Scott de 250 ml 5 Pzas
6 Balanza 2 Pzas
7 Frascos lavadores o piceta 3 Pzas
8 Autoclave 1 Pzas
9 Hornilla 2 Pzas
10 Espátula 2 Pzas
11 Gradilla 2 Pzas
12 Guantes para caliente 2 Pzas
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INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Agar MacConkey 10 Gramos
2 Agar Muller Hington 10 Gramos
3 Agar EMB 10 Gramos
4 Agar citrato de Simmons 5 Gramos
5 Agar Kligler 5 Gramos
6 Agar SIM 5 Gramos
7 Agar base para agar sangre 10 Gramos
8 Agar de Cled 10 Gramos
Hilo de caña 2 Metros
11 Jeringas de 5 ml 2 Piezas
12 Papel sabana 2
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
➢ Trabajo en grupos pequeños para la preparacion de los medios de cultivo
PREPARACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO. -

En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados, normalmente bajo la forma
de liofilizados que es preciso rehidratar. En general, la preparación de un medio de cultivo se reduce
simplemente a pesar la cantidad deseada del mismo y redisolverla en agua destilada (libre de inhibidores del
crecimiento microbiano) siguiendo las instrucciones del fabricante.

El estudiante registrara en una tabla las características de cada medio preparado.
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7. CUESTIONARIO
1. Diga que medios de cultivo utilizaría para cultivar los siguientes microorganismos
Agente etiológico Medio Muestra

Staphylococcus
aureus
Neisseria
gonorrhoeae
Streptococcus
pyogenes
Salmonella typhi
Escherichia coli
Mycobacterium
tuberculosis
Clostridium tetani
Neisseria
meningitidis
Pseudomona
aeroginosa
Giardia lamblia
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2. Llene la siguiente tabla:

Muestra biológica Medio
Heces con sospecha de cólera
Sangre con sospecha de salmonella
Aspirado traqueal
Secreción faríngea
Secreción de herida postquirúrgica
(paciente que recibe ciprofloxacina y
ceftriaxona)
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PRÁCTICA Nº 8
SIEMBRA Y CULTIVO DE
BACTERIAS
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. –

SIEMBRA es la técnica y/procedimiento que permite colocar la muestra sobre el medio de cultivo para cumplir
un objetivo el aislamiento de microorganismos
TÉCNICAS DE SIEMBRA. -
La siembra del material en los medios de cultivo puede hacerse por distintas técnicas:
Agar inclinado
En tubo Pruebas bioquímicas
Pico de flauta
En superficie Barrido con hisopo Antibiograma
En placa Agotamiento por estrías Recuento de colonias
Siembra con pipeta Aislamiento
En tubo Punción o Picadura Pruebas

En profundidad
bioquímicas En placa Siembra con pipeta
Recuento de colonias
CULTIVO DE MICROORGANISMOS
Las bacterias y los hongos crecen en la superficie de medios nutrientes sólidos, para producir colonias
compuestas por miles de células procedentes de una sola célula implantada en la superficie del agar. Las
colonias de las diferentes especies tienen con frecuencia aspectos característicos, que pueden proporcionar un
indicio sobre su probable identidad. Las colonias de la mayoría de las especies tardan de 12-48 horas en
hacerse visibles a simple vista, pero algunos organismos se multiplican con mucha más lentitud y pueden
requerir varias semanas para producir colonias visibles. Los cultivos se pueden hacer también en medios
líquidos (caldo) y el crecimiento se detecta por desarrollo de turbidez. Sin embargo, no es posible saber si existe
más de una especie en un cultivo líquido, ni si existen pocos o muchos organismos y, por tanto, los medios
sólidos tienen más utilidad en microbiología diagnóstica. Es posible cultivar la mayoría de las especies de
bacterias y hongos con importancia médica en medios artificiales, pero no existe un medio de cultivo universal
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
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que permita el desarrollo de todas ellas, y hay algunas especies que solo pueden cultivarse en animales de
experimentación, por ejemplo, Mycobacterium leprae y Treponema pallidum. Ciertas bacterias imposibles de
cultivar en medios artificiales, por ejemplo, las clamidias y las rickettsias, crecen en cultivos de células. Muchos
medios de cultivos están diseñados no sólo para prestar soporte al crecimiento de los organismos deseados,
sino también para inhibir el crecimiento de los demás, es decir, son medios selectivos.
El cultivo es el proceso de proliferación de microorganismos al proporcionarles un entorno con condiciones

apropiadas. Los microorganismos en proliferación producen réplicas de sí mismos y necesitan los elementos
presentes en su composición química. Los nutrientes deben proporcionar estos elementos en una forma que
sea accesible desde el punto de vista metabólico. Además, los microorganismos requieren energía metabólica
para sintetizar macromoléculas y mantener gradientes químicos esenciales a través de sus membranas. Los
factores que deben controlarse durante la proliferación incluyen nutrientes, pH, temperatura, aireación,
concentración de sales y fuerza iónica del medio.
2. COMPETENCIA (S):
✓ Realiza los diferentes tipos de siembra que se presentan en el campo de trabajo profesional.
✓ Aplica la metodología para realizar un cultivo bacteriológico de una muestra biología

4. EQUIPOS y MATERIALES
Cantidad
por grupo
(25
1 Estufa de cultivo 1 Pzas
2 Aguja bacteriológica 2 Pzas
3 Asa bacteriológica 4 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
Placas con medios de cultivo
1 preparados en la practica anterior XX
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
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Trabajo en grupos de 5, sembrando en los medios de cultivo y cultivando por 24 a 48 h.
Lectura de las placas cultivadas
Inoculación Por Estría en la Placa de Agar:
a. Flamear el asa bacteriológica hasta la incandescencia en el mechero Bunsen, manteniéndola

verticalmente y dejar enfriar.
b. Disponer la caja de Petri sobre la mesa de trabajo detrás del mechero con la tapa hacia abajo.
c. Quitar el tapón del tubo que contiene la muestra con el dedo meñique de la mano derecha.
d. Tomar con el asa bacteriológica una porción del espécimen.
e. Pasar la boca del tubo por la llama del mechero.
f. Colocar el tapón en el tubo que contiene la muestra.
g. Levantar el fondo de la caja y sostener con la mano izquierda.
h. Estriar con el asa cargada en la cuarta parte de la superficie del medio.
i. Girar la placa un cuarto de vuelta y estriar nuevamente arrastrando inicialmente la muestra tres
veces y realizando a continuación estrías perpendicularmente a la siembra anterior.
j. Girar nuevamente la base de la caja sobre la tapa.
k. Colocar nuevamente la base de la caja sobre la tapa.
l. Flamear el asa bacteriológica para esterilizar.
m. Incubar.
Inoculación en Medio de Cultivo en Tubo:
a. Flamear el asa bacteriológica como se describió anteriormente y dejar enfriar.

b. Quitar el tapón del tubo que contiene la muestra.
c. Flamear la boca del tubo en el mechero.
d. Tomar el tubo donde se va a realizar la siembra y quitar el tapón.
e. Pasar la boca del tubo por la llama del mechero.
f. Introducir en el tubo de siembra el asa bacteriológica con la muestra hasta aproximadamente un cuarto
de la profundidad.
g. Flamear la boca del tubo en el mechero.
h. Tapar el tubo flamear el asa bacteriológica para esterilizar.
i. Incubar.
Nota: si el material ha sido tomado con hisopo, hacer rodar éste en un tercio de la superficie del medio de
cultivo y continuar como se describe. Trabajar abrasando la llama del mechero Bunsen.
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
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El estudiante registrara las características de crecimiento de las bacterias en los medios preparados.
7. CUESTIONARIO
1. Llene el cuadro con las enfermedades provocadas por los siguientes agentes etiológicos:
Agente etiológico enfermedades

Staphylococcus
aureus
Neisseria
gonorrhoeae
Streptococcus
pyogenes
Salmonella typhi
Escherichia coli
Mycobacterium
tuberculosis
Clostridium tetani
Neisseria
meningitidis
Pseudomona
aeroginosa
Giardia lamblia
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 9
SEMINARIO DE ANTIMICROBIANOS

Las enfermedades infecciosas, por su número, severidad y frecuencia, constituyen una prioridad de salud en
Latinoamérica y en particular en Bolivia. Los avances en este campo son constantes. En las últimas décadas
se han descubiertos o reconocido nuevos patógenos capaces de producir severas infecciones. Nuevas
alternativas terapéuticas han sido desarrolladas introducidas a la práctica cotidiana incluyendo múltiples
antimicrobianos y vacunas. Sin embargo, el entusiasmo generado por dichos avances ha sido por fuerza
moderado por la aparición de cepas multirresistentes y aparición de enfermedades como el SIDA para la cual
no existe tratamiento curativo.
Por la aparición de resistencia, la mortalidad y morbilidad van en aumento. Es por ello por lo que, de este
proceso de rápido cambio, emerge la necesidad de actualizar los conocimientos médicos en infectología en
forma casi constante
Capítulo 17 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8

va
Capítulo 27 Brooks, G., Carroll, K., Butel, J., Morse, S., Metzner, T., Jawetz, Melnick y Adelberg. (2014).
Microbiología Médica. 26ª Ed. Editorial Lange – McGrawHill.
2. COMPETENCIA (S)
✓ Clasifica a los antimicrobianos de acuerdo con su mecanismo de acción

✓ Indica el uso de los principales antimicrobianos que se presentan en la resolución de problemas
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. -
• Data display
• Discusión en grupos pequeños.

El estudiante registrara en una tabla los antimicrobianos más empleados
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
7 CUESTIONARIO
1.- Llenar el siguiente cuadro:
Enfermedad Agente etiológico primera elección Segunda

elección
Faringitis
Meningitis
Osteomielitis
Pielonefritis
Gonorrea
Fiebre tifoidea
Gastroenteritis
Tuberculosis
Acné
Septicemia
2. Investigue el esquema de antibióticos de elección en el tratamiento de la meningitis bacteriana en niños,

mencione el tratamiento de acuerdo con agente etiológico (neumococo, meningococo, tuberculosis, H.
influenzae)
3. Antibiótico de elección para Salmonella Tiphy aislada de un hemocultivo.
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
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PRÁCTICA Nº 10
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS
Una vez aisladas las bacterias en cultivo puro es posible determinar su sensibilidad o resistencia a los
antibióticos en el laboratorio. Eso se suele hacer exponiendo una cepa de los organismos sometidos a
prueba, sembrados en una placa de agar, a los antibióticos contenidos en discos de papel de filtro. Durante
la incubación por 18 a 24 horas, los organismos crecen y se multiplican, y los antibióticos difunden desde
los discos e inhiben el crecimiento alrededor del disco
Esta prueba está basada en la inhibición del crecimiento de un microorganismo en la superficie de un medio
de cultivo inoculado alrededor de un disco de papel de filtro impregnado con un agente antimicrobiano. El
germen aislado se siembra en un medio de cultivo cuya composición asegura el desarrollo óptimo del
microorganismo y no interfiere con la acción del antibiótico, se pone en contacto con discos de papel de filtro
impregnados con agentes antimicrobianos en concentraciones ya establecidas y se miden los diámetros de
las zonas de inhibición del desarrollo del microorganismo. Los tamaños de las zonas se comparan con las
tablas de referencia llamadas CLSI (clinical and laboratory standards institute actualizado), y los resultados
se registran como: S (susceptible o sensible), I (intermedio) o R (resistente).
2. COMPETENCIA (S)
✓ Interpreta y analiza la repuesta de los microorganismos a los antimicrobianos a través de la resolución

de problemas en relación con su contexto.
✓ Determina la importancia del antibiograma en el análisis microbiológico y su aplicación en el tratamiento.
✓ Selecciona en antibiótico más adecuado de acuerdo con los resultados de un antibiograma, a través de
la resolución de problemas en relación con su contexto.

Cantidad
por grupo
(25
2 Micropipetas 100 a 1000 ul 2 Pzas
3 Tubos con tapa rosca 8 Pzas
5 Pinza anatómica punta roma 3 Pzas
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
2 Gentamicina 10 Unidades
3 Ciprofloxacino 10 Unidades
4 Sulfametoxazol- trimetoprim 10 Unidades
5 Tetraciclina 10 Unidades
6 Nitrofurantoina 10 Unidades
7 Acido nalidixico 10 Unidades
8 Cefalexina 10 Unidades
9 Eritromicina 10 Unidades
10 Cefoxitina 5 Unidades
11 Amoxicilina- acido clavulanico 5 Unidades
12 Vancomicina 5 Unidades
13 Ceftriaxona 5 Unidades
14 Cloranfenicol 5 Unidades
15 Solución fisiológica 15 ml
Preparación del inóculo:
La cepa se obtiene de la placa original donde se sembró el material problema. La colonia aislada se
suspende en solución fisiológica de manera de obtener una turbiedad final equivalente al 0,5 de la
escala de Mac Farland, es decir, 150 millones de gérmenes por ml
Preparación de la placa:
Antes de la siembra la placa deberá estar a temperatura ambiente.

Siembra en placa:
Por escobilladura: Se distribuye el material uniformemente en tres direcciones, con hisopo de algodón
previamente mojado en el inóculo y eliminado el exceso de caldo por presión contra las paredes del tubo.
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
Aplicación de los Discos:
Se los coloca sobre la superficie, oprimiéndolos suavemente contra ella. La distancia que separe los
discos debe ser suficiente para impedir una superposición de los halos de inhibición, y nunca será
inferior a 1,5 cm del borde de la placa.
Incubación:
Debe ser de 18 a 24 horas a 37 C, colocada la cápsula en posición invertida. Dependiendo del tipo de
bacteria identificada.
Lectura e Interpretación de los Resultados:
Con una regla se miden los halos de inhibición al milímetro más cercano, recurriéndose luego a la tabla
correspondiente para determinar si el germen es sensible, resistente o intermedio para cada antibiótico.
Así cepa sensible es aquella que, después de ser tratada en el curso de una infección general a las
dosis habituales del antibiótico, responde favorablemente al tratamiento, cepa intermedia es la que en
las mismas condiciones necesita dosis superiores a las habituales para obtener una respuesta
terapéutica adecuada y cepa resistente es la que en las condiciones antedichas no se obtiene ninguna
respuesta terapéutica.
6. . TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA


Medición de los halos de inhibición y comparación con tablas de referencia
8. CUESTIONARIO. -
Interprete los resultados de los siguientes antibiogramas comparándolos con la tabla que aparece al final e
indique el tratamiento antimicrobiano adecuado:
1. Paciente femenino de 24 años, se solicita urocultivo el cual reporta crecimiento de Escherichia coli, el
antibiograma:
• Trimetoprim y Sulfametoxazol: Resistente

• Ceftriaxona: Sensible
• Ampicilina: Resistente
• Gentamicina: Sensible
• Ácido Nalidixico: Sensible
• Amikacina: Sensible
• Nitrofurantoína: Sensible
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
¿Qué antibiótico elige? Debe justificar su elección vía de administración, costo, toxicidad, etc)
2. Paciente masculino de 18 años, en un coprocultivo se Salmonella tiphy, el antibiograma reporta:
• Trimetoprim y Sulfametoxazol: Resistente

• Cloranfenicol: Sensible
• Gentamicina: Sensible
• Ampicilina: Resistente
• Ciprofloxacina: Sensible
• Amoxicilina- ácido clavulanico: Sensible
¿Qué antibiótico elige? Debe justificar su elección (vía de administración, costo, toxicidad, etc.)
3. Paciente femenino de 9 años, con faringoamigdalitis, refiere 3 episodios al año. Solicita estudio de
secreción faríngea: especie encontrada Streptococcus pyogenes, el antibiograma reporta:
• Penicilina: sensible
• Eritromicina: sensible
• Cefalexina: sensible
• Vancomicina: sensible
¿Cree usted que está justificado un antibiograma en este caso, por qué?
¿Cuál es la conducta que seguiría con su paciente?
4. Paciente femenino de 28 años, embarazada. Muestra de flujo vaginal, reporta Enterococcus ssp
• ¿Es necesario un antibiograma, por qué?
• ¿Qué tratamiento indicaría?
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 11
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE COCOS GRAM POSITIVOS
Los cocos Gram positivos son células esféricas que se tiñen fundamentalmente con colorantes derivados
de la anilina, se acumulan formando cadenas o racimos. Pertenecen a dos géneros: Staphylococcus y
Streptococcus. En las placas de agar sangre, éstos crecen formando colonias características específicas
que posibilitan la clasificación preliminar del género.
La capacidad de los Staphylococcus de producir una enzima llamada catalasa permite diferenciarlos de los
Streptococcus, que se caracterizan por ser catalasa negativa.
STAPHYLOCOCCUS. -
Este género es el responsable de la mayoría de las infecciones supurativas y de gran porcentaje de casos
de envenenamiento alimentario. Los más comunes en la patología humana son: St. aureus, St. Epidermidis,
St. Saprophyticus y St. Haemolyticus.
a. Muestras:
Heridas varias, en lesiones cerradas se recolecta por punción, en casos de meningitis LCR.
b. Examen Microscópico:
Se presentan como células esféricas, Gram positivas, agrupadas en racimos. Este examen es
presuntivo.
c. Cultivo:
Se realiza en Agar sangre donde producen hemólisis y en agar manitol. Se debe especificar para
que bacteria es el cultivo.
d. Prueba de Coagulasa:
Esta prueba se basa en la capacidad que poseen los estafilococos patógenos de producir la enzima
coagulasa que transforma el fibrinógeno en fibrina. Esta prueba es positiva si se forma una coagulo.
En un tubo se realiza una suspensión del germen y se agrega 1 ml de plasma citratado estéril y se
incuba a 37 C y se observa a la hora y a las 4 horas. Esta prueba sólo es positiva para St. Aureus.
e. Prueba de Catalasa:
Se realiza con un asa estéril con la que se recoge del centro de la colonia y se coloca sobre un
portaobjetos y se agrega una gota de peróxido de hidrógeno al 30% con pipeta estéril o gotero.
Observar la formación de burbujas, si hay burbujas es catalasa positiva y son Staphylococcus. Solo
confirma género.
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
f. Resistencia a la Novobiocina:
Es para confirmar al St. saprophyticus, pues es el único que presenta resistencia a este agente
antimicrobiano.
STREPTOCOCCUS. -
Son células esféricas, Gram positivas, agrupadas es cadenas o en pares. Pueden producir distintos tipos
de hemólisis:
Estructura antigénica de estreptococo
Hemólisis: Se produce destrucción parcial de eritrocitos alrededor de las colonias, dando una coloración
verde-marrón en el medio agar sangre géneros
Hemólisis: Se observa una zona clara decolorada alrededor de la colonia en la placa de agar sangre por
destrucción total de eritrocitos
Hemólisis: No hay actividad hemolítica, hay falta de hemólisis
a. Muestras:
Nariz, garganta, lesiones de piel, LCR, esputo, secreción bronquial, etc.
b. Examen Directo:
Células esféricas u ovoideas dispuestas en cadenas, Gram positivos. Esto no permite diferenciar
especies patógenas de las no patógenas.
c. Cultivo:
Se realiza en agar sangre de carnero.
Prueba de susceptibilidad a la Bacitracina:
Se basa en la inhibición del crecimiento del germen por la Bacitracina que difunde desde discos
de papel de filtro. La prueba es utilizada para la identificación de Streptococcus betahemolítico
del grupo A. (Streptococcus pyogenes)
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Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
Streptococcus pyogenes
Causa faringitis, escarlatina, pioderma, erisipela, celulitis, fascitis necrosante, síndrome del shock toxico
estreptocócica, septicemia puerperal, linfangitis, neumonía, infecciones no supurativas fiebre reumática
y glomérulo nefritis.
Streptococcus pneumoniae:
Causa neumonía, otitis, sinusitis, bronquitis, meningitis y otros procesos. Es una célula esférica, Gram
positiva, lanceolada y agrupada en pares y en cadenas. Poseen una cápsula formada de polisacáridos
que permite una fácil tipificación con antisueros. Las muestras pueden ser: esputo, LCR, hisopado de
oído, etc. Se cultiva en agar sangre dando colonias pequeñas, redondas y  hemolíticas. Para
diferenciarlo del Streptococcus viridans se realiza la prueba de Optoquina (utiliza discos de
Etilhidrocupreína) y la prueba de solubilidad en bilis (utiliza Deoxicolato de sodio).
Streptococcus viridans
Causa formación de abscesos en tejidos profundos, septicemia en pacientes neutropénicos, endocarditis

subaguda, caries dental, neoplasias del aparato digestivo, meningitis.
❖ Capitulos18-19 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va
2. COMPETENCIA(S)
✓ Explica los procedimientos empleados para la obtención de muestras destinadas a la investigación de

Staphylococcus, Estreptococos
✓ Determina la importancia clínica de los cocos Gram positivos.
✓ Indica el fundamento de las pruebas bioquímicas utilizadas en el laboratorio para la identificación de
estos gérmenes.
✓ Indica tratamiento y profilaxis de las diferentes patologías producidas por estos microorganismos

Cantidad
Ítem DENOMINACIÓN por grupo Unidad Observaciones
(25
estudiantes)
43
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Colorantes de Gram 1 Kit
2 Peróxido de hidrogeno al 30 % 5 ml
Laminas teñidas de Estafilococo y
5 estreptococos 5 Pzas
6 Placas de agar sangre 5 Pzas
• Trabajo en grupos pequeños.

• Observación al microscopio de las placas teñidas
• Siembra de una muestra en placa de agar sangre
• Realización de la prueba de la catalasa.
• Realización de la prueba de la coagulasa
6. TIEMPO DE DURACION DE LA PRACTICA

7. MEDICION; CALCULOS Y GRAFICOS
El estudiante medirá los halos de inhibición y compara con tablas referencia

8. CUESTIONARIO. -
1. Enumere 5 enfermedades y tratamiento para Staphylococcus aureus.

2. Cite y explique los mecanismos de resistencia de Staphylococcus aureus.
3. Investigue la sensibilidad a los antimicrobianos actualmente de Staphylococcus aureus.
4. Enumere 5 enfermedades y tratamiento actual para Streptoccocus pyogenes.
5. Cite 3 fármacos para el tratamiento de neumonía neumococica.
6. Enumere 5 enfermedades y tratamiento para Streptococcus viridans.
7. Un frotis de LCR reporta diplococos Gram positivos intracelulares lanceolados y abundantes PMN y MN,
¿Cuál sería su sospecha diagnostica y posible tratamiento
44
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 12
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE BACILOS GRAM POSITIVOS ESPORULADOS Y NO

ESPORULADOS
Estos dos géneros pertenecen a la familia Bacillaceae que está formada por bacilos grandes y esporulados.
El esporo está formado por una parte central, rodeado de una capa de peptidoglucano y otra externa con
ácido dipicolínico. La mayoría son móviles, aunque hay especies inmóviles. Son aerobios facultativos y
anaerobios.
BACILLUS ANTHRACIS. -
La enfermedad que produce se denomina Carbunco y es una zoonosis (enfermedad transmitida por un
animal vertebrado al hombre). Se obtiene material de la zona vesiculosa de la pústula o por punción del
edema. Se efectúan extendidos, coloración de Gram y cultivos. La presencia de bacilos Gram positivos, en
cadenas y capsulados, nos da casi la seguridad de un diagnóstico positivo.
Son bacilos rectos, esporulados, Gram positivos, rodeados por una cápsula que puede envolver a un solo
bacilo, aunque lo más común es que rodee a varios. Es un germen de desarrollo fácil, no es exigente,
aerobio. Desarrolla en caldo o agar nutritivo.
CLOSTRIDIUM TETANI. -
Es el agente etiológico del Tétano. Se obtiene material de las heridas y debe ser obtenido en profundidad
con jeringa o con hisopo cuidando la anaerobiosis. Son bacilos de lados paralelos y extremos redondeados,
Gram positivos, esporulado (la espora deforma la bacteria como palillo de tambor). Es un germen anaerobio
estricto. Se lo puede cultivar en agar sangre con tioglicolato, donde produce  hemólisis que luego pasa a
 hemólisis por la producción de tetanolisinay tetanospasmina.
CLOSTRIDIUM BOTULINUM:
Produce Botulismo. El material para cultivar puede ser: restos de alimentos y vómito del paciente intoxicado.
La toxina puede manifestarse por Hemoaglutinación pasiva o RIA. Son bacilos grandes aislados o en
cadenas cortas, ciliado, esporulado, Gram positivo, anaerobio. Su cultivo puede hacerse en: caldo nutritivo,
agar nutritivo en anaerobiosis
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS. -
Es el agente etiológico de la Gangrena gaseosa debido a infecciones asociadas con heridas de accidentes
o post operatorios con complicaciones. También puede producir Intoxicaciones alimentarias por ingestión
de carne dando: diarrea, sin vómito ni fiebre que suele durar solo 1-2 días. Son bacilos gruesos, inmóviles,
capsulados, Gram positivos, no son anaerobios estrictos ya que pueden desarrollarse en presencia de
pequeñas cantidades de oxígeno.
45
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
CLOSTRIDIUM DIFFICILE. -
Es el productor de Colitis Pseudomembranosa
❖ Capitulo 20-21-30Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va
2. COMPETENCIA (S)
✓ Indica que tipos de muestras recolectaría para las patologías producidas por estos microorganismos.
✓ Determina la importancia clínica de los bacilos Gram positivos en la resolución de problemas que se
presentan en el campo de trabajo del profesional.
✓ Establece tratamientos y profilaxis adecuados para las patologías producidas por estos
microorganismos.
3. MATERIALES Y REACTIVOS.
o Data display

5. DURACION DE LA PRACTICA
El estudiante registrara las características de bacilos Gram positivos y comparara con tablas de
Referencia
7. CUESTIONARIO. -
1. Llene el siguiente cuadro

enfermedad Agente etiológico Tratamiento prevención
Botulismo
Gangrena Gaseosa
Difteria
Tétanos
Colitis
pseudomembranosa
Carbunco
2.- Resuelva casos clínicos planteados por el docente.
46
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 13
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE COCOS GRAM NEGATIVOS
Los microorganismos integrantes del género Neisseria, son cocos que tienen forma característica de granos de
café o arriñonada. Las especies patógenas para el hombre son: Neisseria gonorrhoeae (gonorrea) y Neisseria
meningitidis (meningitis cerebro espinal), ambas especies de Neisserias son semejantes en su morfología, se
encuentran de manera típica dentro de los polimorfonucleares.
NEISSERIA MENINGITIDIS. -
Los meningococos son aislados comúnmente de la garganta o nasofaringe de portadores asintomáticos.

Puede causar cuadros de meningococemia, siendo la meningitis la complicación más grave. Las muestras
que se obtienen son: nasofaringe, LCR. En el examen directo se observan diplococos lanceolados, Gram
negativos intra o extracelulares en los polimorfonucleares. Se cultiva en agar Thayer Martin. Se realiza la
prueba de Oxidasa que se basa en que los miembros del género Neisseria producen una enzima oxidasa
que en presencia del aire actúa sobre ciertas aminas aromáticas produciendo compuestos coloreados.
También se realiza la prueba de la fermentación de azúcares, que es importante cuando se desea confirmar
el diagnóstico. La Neisseria meningitidis fermenta la glucosa y la maltosa.
NEISSERIA GONORRHOEAE. -
El gonococo es el agente etiológico de la Gonorrea. La infección se contrae por regla general mediante
relaciones sexuales. Las complicaciones más frecuentes son: orquitis, epididimitis, cervicitis, proctitis, etc.
Las muestras obtenidas son las siguientes: en el hombre (secreción uretral, en los casos crónicos tratados
o asintomáticos es necesario un masaje prostático previo. Se puede recolectar el primer chorro de orina
matinal), en la mujer (secreción de uretra o endocervix). Dependiendo del hábito sexual del paciente también
se puede obtener muestra de: recto, ojo y garganta. En el examen directo se observan diplococos
lanceolados, Gram negativos, preferentemente intracelulares. El cultivo se realiza en agar Thayer Martin.
Son oxidasa positiva. Fermenta solamente la glucosa.
❖ Capitulo 23 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8va
2. COMPETENCIA(S)
✓ Explica los procedimientos empleados para la obtención de muestras destinadas a la investigación de

los cocos negativos
✓ Determina la importancia clínica de los cocos Gram negativos.
✓ Indica tratamiento y profilaxis de las diferentes patologías producidas por los cocos Gram negativos
47
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04

Cantidad
por grupo
(25
estudiantes)
Ítem DENOMINACIÓN Unidad Observaciones
5 Piceta de agua 2 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Placas cocos Gram negativos 5 Pzas

• Observación al microscopio de las placas teñidas

6. MEDICION; CALCULOS Y GRAFICOS
El estudiante medirá los halos de inhibición y compara con tablas referencia
48
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
7. CUESTIONARIO. -
1. Enumere 5 fármacos actuales para el tratamiento de la gonorrea

2. Mencione los factores de riesgo y medidas preventivas para la gonorrea
3. ¿Cuáles son los agentes etiológicos de la meningitis?
4. Realiza un esquema de tratamiento para la meningitis y justifique
5. Un frotis de LCR reporta diplococos Gram negativos intracelulares y abundantes polimorfonucleares
(PMN), ¿Cuál sería su sospecha diagnostica y posible tratamiento?
6. Un frotis de secreción vaginal reporta diplococos Gram negativos intracelulares sin polimorfonucleares.
¿Cuál sería su sospecha diagnostica y posible tratamiento?
7. Un frotis de secreción uretral reporta diplococos Gram negativos intracelulares y abundantes PMN,
¿Cuál sería su sospecha diagnostica y posible conducta?
49
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 14
BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES Y NO FERMENTADORES
Los bacilos Gram negativos pertenecientes a la familia de la Enterobacterias son los microorganismos que
con más frecuencia se hallan en el laboratorio de microbiología clínica. No son esporulados, pueden ser
móviles o no, reducen los nitratos a nitritos, son oxidasa negativa. Como su nombre lo indica, miembros de
este grupo son naturales del tracto gastrointestinal, sin embargo, las Enterobacterias se pueden recuperar
de todos los sitios anatómicos. La morfología observada por la coloración de Gram no es útil para separar a
las Enterobacterias de otros microorganismos Gram negativos, ni para identificar la especie. La clasificación
está basada en la determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas. Los sustratos sobre los
que estas enzimas actúan son incorporados al medio de cultivo, junto con un sistema indicador que detecta
ya sea la utilización del sustrato o la presencia de productos metabólicos específicos.
Todos los miembros de la familia Enterobacteriaceae exhiben las siguientes características bioquímicas:
a. Metabolizan la glucosa por fermentación.

b. Carecen de actividad de la citocromo-oxidasa (son oxidasa negativa).
c. Reducen los nitratos a nitritos.
En cuanto a la selección de los medios de cultivo se pueden elegir:
a. Agares de aislamiento primario: Mac Conkey y EAM, todos estos medios contienen en general
peptona, lactosa y un indicador de pH.
b. Agares de aislamiento selectivo: Salmonella-Shigella, CLDE y Agar sulfito de bismuto. Los medios
se hacen selectivos agregándoles a sus fórmulas inhibidores
c. Agares de enriquecimiento: Caldo de selenito. Se utilizan para acrecentar el desarrollo de
ciertas especies bacterianas inhibiendo el de los microorganismos superfluos.
Pseudomona
a. Bacilo Gram negativos, se dispone en pares.

b. Móviles, no esporulados.
c. Distribuyen ampliamente en suelo, agua, plantas, animales, materia orgánica en descomposición, en la
vegetación
d. Medio ambiente hospitalario reservorio húmedo como alimentos, sumideros, equipo de terapia
respiratoria, soluciones desinfectantes, equipos de diálisis.
e. Medios de cultivo produciendo olor dulzor semejante a jugo de uva o de maíz, formando colonias
redondas y lisas de color verde fluorescente
f. Oxidasa positiva. Aerobios, crecen a 37ºC.
g. Pigmentos: piocianina (azul), fluoresceína (Amarillo), pioverdina (verde amarillento), piorrubina (pardo
rojizo), piomelanina(negro)
❖ Capitulo 25-27 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va
50
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
2 COMPETENCIA (S):
✓ Indica que tipos de muestras recolectaría para las patologías producidas por estos microorganismos.
✓ Determina la importancia clínica de los bacilos Gram positivos y Enterobacterias a través de la resolución
de problemas
✓ Interpreta adecuadamente un informe microbiológico sobre dicho grupo bacteriano y su relación con el
campo de trabajo del profesional
✓ Establece tratamientos y profilaxis adecuados para las patologías producidas por estos
microorganismos.
3 MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Cantidad
por grupo
(25
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
Laminas teñidas de Escherichia
1 coli 5 Pzas
2 Klebsiella 5 Pzas
3 Enterobacter 5 Pzas
4 Pseudomona 5 Pzas
5 Placas Agar MacConkey
6 Placas Agar EMB
51
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
4 TECNICA O PROCEDIMIENTO
Cultivo de orina, heces, líquidos orgánicos, heridas.
Identificación bioquímica:
a. Kligler o TSI:
Esta prueba sirve para ver la acción de las Enterobacterias sobre los azúcares, el azufre de los
aminoácidos y la producción de gas. La aparición de coloración amarilla tanto en profundidad como
en superficie indica que el microorganismo fermenta la lactosa, la aparición de color rojo en la
superficie y amarillo en profundidad indica que el microorganismo no fermenta la lactosa.
b. Test de Urea: Sirve para ver la presencia de ureasa. Color púrpura indica una prueba positiva.
c. Test de Citrato: Sirve para observar la utilización del citrato. Una coloración azul intensa es un
resultado positivo.
d. Test de SIM: Para ver la producción de ácido sulfhídrico, producción de indol y motilidad.

Dos periodos académicos de 50 minutos
6. MEDICION, CÁLCULO Y GRAFICOS
El estudiante registrara las características bioquímicas de enterobacterias y comparara con tablas de

Referencia
7. CUESTIONARIO
1.- Llene el siguiente cuadro
Agente etiológico Enfermedad Tratamiento

Salmonella typhi
Escherichia coli
Shigella dysenterie
Pseudomona aeroginosa
Yersinia enterocolitica
Helicobacter pylori
Klebsiella pneumoniae
Serratia marcenscens
Vibrion cholerae
Campylobacter yeyuni
Klebsiella oxytoca
52
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
2.- Paciente femenino de 85 años con diabetes y fractura de cadera, se encuentra en cama durante los últimos
3 meses. El resultado de la prueba a la glucosa en sangre es de 250 mg/ dl y su médico solicita análisis de orina
y urocultivo.
Los resultados son:
Examen químico:
Color: Amarillo oscuro
Aspecto: Turbio
Densidad. 1.025
pH. 7.5
Examen Microscópico: Células descamadas 10 x campo
Leucocitos 30 x campo
Levaduras abundantes
Flora microbiana abundante
Cultivo: Germen aislado: Proteus mirabilis
Numero de colonias 100.000 colonias/ ml
Antibiograma:
Sensible: Acido nalidixico, nitrofurantoina, ciprofloxacino

Resistente: Acido pipemidico, norfloxacino, ampicilina, cefalexina, ceftriaxona,ceftazidima, gentamicina,
sulfatrimetoprima
a) Porque la infecciones por levaduras son comunes en los pacientes con diabetes mellitus.
b) Que antibiótico elige para realizar el tratamiento a la paciente y cual la dosis.
c) El antibiótico que elige que mecanismos de acción tiene
d) La bacteria aislada del cultivo tiene relación con el pH de la orina. Fundamenta
53
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 15
UROCULTIVO – COPROCULTIVO
En general, se define como una infección urinaria que afecta el sistema colector y los riñones (pielonefritis)
o tan solo a la vejiga (cistitis). En los últimos años se prefiere utilizar el término infección urinaria a pielonefritis
o cistitis, ya que en muchos de los casos el médico no tiene la seguridad, si la infección se hallalimitada a la
vejiga o involucra también uno o ambos riñones. La infección de la uretra sola o Uretritis se relaciona
frecuentemente con enfermedades de transmisión sexual.
a. Factores defensivos:
❖ pH urinario: ácido, evita la proliferación de gérmenes y evita que los gérmenes de la uretra anterior
y media lleguen a la uretra posterior que es estéril
❖ Frecuencia miccional: a medida que aumenta el tiempo de retención urinaria existe mayor tiempo
para colonizar
❖ Urea: la concentración en que se elimina urea por orina es toxica para las bacterias
❖ Tonicidad muscular
❖ Presencia de Ig As
❖ Poder bactericida del líquido prostático en el hombre
❖ Osmolaridad: cuando esta aumentada predispone a infecciones urinarias. Por ello cuando existe
infección urinaria se debe tomar mucho liquido
b. Factores predisponentes:
❖ Retención urinaria: puede deberse a obstrucción por cálculos o divertículos o reflujo vesicouretral
(común en niños)
❖ Edad y sexo: en la lactancia por el uso de pañal es igual la frecuencia de infecciones en niños que
en niñas. En la infancia son más frecuentes las infecciones urinarias en las niñas por poseer una
uretra más corta. En ancianos existe más frecuencia en hombre debido a hipertrofia prostática que
obstruye los conductos quedando restos de orina. Con el comienzo de la actividad sexual aumenta
la frecuencia de infecciones urinarias
❖ Embarazo: el pH urinario es alcalino, la vejiga se aprisiona, el tono muscular aumenta
❖ Presencia de obstrucciones: obstrucciones en uréteres congénitos o anatómicos y presencia de
cálculos urinarios
❖ Presencia de instrumentación: como sondas.
❖ Presencia de bacteriuria como complicación de otras enfermedades: Diabetes (existe glucosuria y
la innervación de la vejiga esta alterada)
c. Indicaciones previas:
Recordar recolección y valores de toma de muestra.
d. Falsos positivos:
❖ Muestra no refrigerada y mantenida a temperatura ambiente
❖ Contaminación por NO realizar higiene
❖ NO recolección de chorro medio
e. Falsos negativos:
❖ NO suspension de antibiótico
❖ Restos de jaboncillo
❖ Orina con menos de 3 horas de retención
❖ Orina refrigerada por más de 48 horas
54
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
COPROCULTIVO
Se entiende por diarrea al aumento de la masa de las heces, la frecuencia de las deposiciones o del contenido
líquido de estas, se acompaña con frecuencia con dolor, urgencia, molestias perianales e incontinencia. Una
diarrea con poco volumen, dolorosa y hemática se conoce como disentería.
Recordar:
❖ La frecuencia con que aparecen bacterias causantes de diarreas en los cultivos solo es del 30%.
❖ Gran porcentaje de diarreas es de origen viral
❖ En muchos casos el régimen dietario, el reposo transitorio del tubo digestivo y la medicación
sintomática resulta útil.
❖ Tener en cuenta que algunos antibióticos tienen asociados caolín o carbón o algún otro
antidiarreico.
a. Flora patógena: (agentes más comunes implicados en diarreas)
❖ Salmonella
❖ Shigella
❖ Escherichia coli (algunas)
❖ Vibrio cholerae
❖ Yersinia enterocolitica
❖ Staphylococcus aureus
❖ Pseudomona aeruginosa
❖ Candida albicans
❖ Rotavirus
❖ Giardia
❖ Ascaris
❖ Trichuris
❖ Entamoeba
CLASIFICACIÓN DE LAS DIARREAS
❖ DIARREA ACUOSA: La diarrea acuosa puede ser secretora u osmótica y la diarrea con sangre
puede ser invasiva o no invasiva.
❖ DIARREA SECRETORA: Se define como un cuadro diarreico, que se caracteriza por la
secreción de líquido intestinal, que es isotónico con el plasma y persiste durante el ayuno.
❖ DIARREA OSMÓTICA: La diarrea osmótica es aquélla que se produce por un incremento de
solutos (carbohidratos) en el lumen intestinal, y disminuye con el ayuno.
❖ DIARREA CON SANGRE O EXUDATIVA: La diarrea con sangre se presenta con una elevada
frecuencia en niños menores de 5 años. Constituye un problema de salud en los países
subdesarrollados y puede expresarse con manifestaciones clínicas severas que pueden llevar al
paciente a la muerte y, en otras ocasiones, su cuadro clínico es más benigno por tener sus
agentes causales una vida autolimitada. Es la emisión de heces purulentas y hemáticas que
persisten con el ayuno, son frecuentes las deposiciones, pero su volumen puede ser pequeño o
grande. De una manera práctica, la diarrea con sangre puede ser invasiva y no invasiva.
55
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
❖ DIARREA POR MALA ABSORCIÓN: Son deposiciones con heces voluminosas, con osmolaridad
aumentada que son el resultado de nutrientes no absorbidos y exceso de grasa (esteatorrea),
usualmente disminuye con el ayuno. (Giardiasis)
❖ DIARREA POR MOTILIDAD ALTERADA: Características muy variables de las deposiciones, volumen
y consistencia; Deben descartarse otras formas de diarrea. (Colon irritable, estrés, medicamentos, etc.)
▪ De acuerdo con el tiempo de evolución las diarreas pueden clasificarse en;
❖ Agudas: Cuando la diarrea tiene una evolución de menos de 15 días.
❖ Crónicas: Cuando la diarrea persiste por más de 28 días.
2. COMPETENCIA(S):
✓ Identifica los gérmenes que causan infecciones urinarias y gastrointestinales su relación con el contexto
de trabajo que le permita diferentes formas de intervención clínica al problema.
✓ Emplea la técnica adecuada para efectuar Urocultivo y coprocultivo
✓ Determina la importancia clínica del Urocultivo y coprocultivo a través de la resolución de problemas
Cantidad
por grupo
(25
3 Varilla de tinción 2 Pzas
4 Cubreobjetos 6 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
Placas de agar de Cled preparadas
en la práctica anterior 5 Pzas
Placas de agar de SS preparadas en
la práctica anterior 5 Pzas
56
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
Se realizará siembra de la orina obtenida por micción media según las indicaciones del práctico de medios
de cultivo y cultivo de muestras, para ello el alumno deberá saber todos los tipos de siembras que pueden
realizarse y deberá recordar de Microbiología I como debe recolectarse un urocultivo
Pasos que realizar:
• Análisis físico químico de orina (pH, aspecto, color, densidad, nitritos)
• Sedimento en fresco (leucocitos, eritrocitos, células descamadas, flora microbiana)
• Dilución de la orina
• Siembra de la orina
• Incubación en estufa de cultivo
• Recuento de colonias
• Identificación
• Antibiograma

El estudiante registrara las bacterias causantes de infección urinarias y realizara una gráfica de comparación
8. CUESTIONARIO. -
1. Enumere los agentes etiológicos responsables de las infecciones urinarias

2. En caso de sospechas de infecciones urinarias que examen solicita y que instrucciones debe dar al
paciente.
3. Caso clínico: Paciente femenino de 30 años tratada por una infección urinaria con un antimicrobiano de
amplio espectro por 7 días, trae una muestra de orina al laboratorio del hospital Univalle de “urgencia” a
las 4:00 p.m. El técnico que recibe la muestra refrigera hasta el día siguiente. Los resultados del
laboratorio:
Examen químico:
Color: Ámbar
Aspecto: Turbio
Examen microscópico: Células descamadas 10 x campo
Leucocitos 5 x campo
Flora microbiana abundante
Cultivo: negativo en 48 horas de incubación
a. Justifique el resultado negativo del cultivo
b. Porque persisten los síntomas de infección urinaria a pesar del tratamiento por 7 días.
c. Es recomendable refrigerar la muestra de orina. Explique.
57
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
4. Paciente femenino de 80 años, con sonda uretral durante 7 días, presenta bacteriuria crónica:
a. ¿Qué bacterias se aísla de esta muestra?
b. ¿Qué recomendaciones para la toma de muestra?
c. Si el paciente ya recibió imipenem y no sede al tratamiento ¿cuál la alternativa de tratamiento,
fundamente?
d. Si la bacteria aislada es Klebsiella pneumoniae productora de BLEE ¿Cuál la alternativa de
tratamiento?
5. Llene el siguiente cuadro
Enfermedad Agente etiológico Tratamiento

Disentería bacilar
Salmonelosis
Cólera
Disentería amebiana
Síndrome de mala absorción
Diarrea del viajero
Colitis hemorrágica
Gastritis
Gastroenteritis
6. ¿Qué tipo de flora patógena se puede encontrar en una diarrea y cuál es su posible tratamiento?
7. El diagnostico de una infección gastrointestinal se hace:
a. Por interrogatorio y examen clínico, justifique
b. Por coprocultivo, justifique
8. En que situaciones clínicas se indica el coprocultivo, mencione por lo menos dos.
9. Indique la resistencia natural de Shigella y salmonella spp.
10. Complete el cuadro:
Agente etiológico Tratamiento antimicrobiano

E. Coli enteropatogenica
Shigella dysenteriae
Salmonella spp
Campylobacter spp
11. Esta recomendada administrar antibióticos en diarreas en forma empírica, justifique su respuesta.
12. Elabore un algoritmo de tratamiento de diarrea aguda (moco y sangre) en un niño sano de 3 años,
considerando que se aisló del coprocultivo las siguientes bacterias:
a. Shigella spp
b. Salmonella spp
c. E. Coli enterohemorragica
58
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
PRÁCTICA Nº 16
HEMOCULTIVO
La bacteriemia produce sepsis, dando como resultado fiebre intermitente, decaimiento y postración, llegando
hasta la muerte por septicemia. En los niños y lactantes el porcentaje de bacteriemias es elevado, no siendo
así en adultos.
Podemos considerar la sepsis como una severa enfermedad sistémica caracterizada por alteraciones
hemodinámicas y mal funcionamiento orgánico, provocada por la interacción de ciertos productos
microbianos con las células fagocíticas mononucleares del huésped. La sepsis no deja indemne ningún
órgano o aparato.
Para que se produzca sepsis parecen ser necesarios tres factores: Una gran población de microorganismos
infecciosos o colonizadores, la presencia de productos bacterianos capaces de estimular la liberación de las
citoquinas del huésped y una amplia diseminación de estos productos microbianos hacia el sistema
fagocítico mononuclear del huésped.
a. Focos:
❖ Focos exógenos: inyecciones repetidas, transfusiones, catéteres urinarios (Sondas), catéteres
permanentes, respiradores, traqueotomías, endoscopias repetidas, flebotomías, prótesis, válvulas
hidrocefálicas, válvulas cardiacas, abortos sépticos
❖ Focos endónenos: Forúnculos, abscesos (pulmón, hígado, riñón), obstrucción a nivel de las vías
biliares, neumonías, salpingitis, endometritis, endocarditis, peritonitis
b. ¿Cuando se realiza hemocultivo?
❖ Sepsis del recién nacidos y niños o adultos comprometidos inmunológicamente.
❖ Infecciones severas: meningitis, neumonía, abscesos profundos o infecciones biliares
❖ Infecciones crónicas: gonorrea y meningitis
❖ Infecciones intravasculares localizada: válvula cardiaca o vaso sanguíneo trombosado o infectado.
Endocarditis subaguda
❖ Fiebre entérica, brucelosis, fiebre de origen desconocido
❖ Traumatismos o cirugías de superficies infectadas
❖ Episodios traumáticos menores: extracción dentaria o endoscopias
c. Interpretación de resultados:
❖ Dos hemocultivos por paciente, previos al tratamiento antimicrobiano. El intervalo de tiempo entre
las extracciones es suficiente con una hora, pero cuando exista una gran urgencia en iniciar el
tratamiento, este intervalo puede acortase hasta 15 minutos, o se pueden extraer dos muestras
simultaneas de diferentes sitios de punción. En casos de endocarditis subaguda se recomienda
aumentar a tres frascos de hemocultivo repartidos en 24 horas.
❖ Si las 2 o 3 muestras indican un mismo microorganismo: Es una bacteriemia.
❖ Si las 2 o 3 muestras indican diferentes microorganismos y entre ellos encontramos flora normal
de piel: contaminación
59
Versión: 5.0
Vigencia desde:
2023-05-04
❖ Si las 2 o 3 muestras indican diferentes microorganismos y es un paciente inmunocomprometido:

Bacteriemia multimicrobiana
❖ Si dentro encontramos gérmenes anaerobios y aerobios diferentes y el paciente ha tenido una
cirugía abdominal no programada: Bacteriemia
2. COMPETENCIA(S):
✓ Aplica la técnica apropiada para la toma de muestra de sangre a través de la resolución de problemas
que se presentan en el campo de trabajo del profesional.
✓ Realiza correctamente un Hemocultivo a través de la resolución de problemas que se presentan en el
campo de trabajo del profesional.
✓ Interpreta los resultados posibles obtenidos a través de la resolución de problemas que se presentan en
el campo de trabajo del profesional.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Cantidad
por grupo
(25
2 Torniquete 2 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
Frascos de hemocultivo con caldo
1 tripticase soya 2 Pzas
Frascos de hemocultivo con caldo
2 tioglicolato 2 Pzas
3 Alcohol yodado 2 Ml
4 Jeringas 2 Pzas
60
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Vigencia desde:
2023-05-04
Se debe desinfectar previamente la zona antes de la punción venosa. Cuando se ha extraído la sangre se
introduce en condiciones de asepsia en el caldo de cultivo y se lleva a estufa. Se recomienda tomar tres
muestras con intervalo de media hora y en el pico de fiebre.
Una vez incubado por 24 horas en estufa a 37 C se debe observar el resultado, si hay desarrollo se deberá
ver la morfología, coloración, tipo de hemólisis y realizar las pruebas bioquímicas.

El estudiante registrará las bacterias causantes de septicemia bacteriana y realizará una gráfica de
Comparación.
7. CUESTIONARIO. -
1. ¿Cuáles son las precauciones que se deben tomar al obtener muestras de sangre con sospecha de
sepsis?
2. ¿Qué entiende por sepsis?
3. Enumere los agentes etiológicos causante de septicemia.
4. ¿Cuándo debe realizarse un Hemocultivo?
5. ¿Qué volumen de sangre se debe tomar para realizar un hemocultivo en: ¿Neonatos, niños de 5 años y
adultos?
6. Caso clínico: Paciente masculino de 45 años que presenta síntomas y signos de endocarditis, en los
resultados de laboratorio se observa elevación de la VSG y PCR, el hemocultivo dio negativo.
a. ¿Porque el cultivo de sangre es negativo?
b. ¿Qué bacteria habitualmente se aíslan?
c. ¿Qué medios de cultivo se deberían usar para realizar la siembra en caso de sospecha de una
endocarditis aguda?
d. ¿Existen medios de cultivo especiales para realizar el hemocultivo cuando el paciente recibe
tratamiento antimicrobiano?
7. Se toma una muestra de sangre para hemocultivo y no se dispone del medio de cultivo, se envía al
laboratorio de microbiología en la jeringa con anticoagulante (EDTA).
a. Es correcto el uso de este anticoagulante, ¿Por qué?
b. ¿Cuál es el anticoagulante ideal?
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2023-05-04
PRÁCTICA Nº 17
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE BACILOS ALOCHOL ACIDO RESISTENTES

La tuberculosis (TB) es una infección bacteriana causada por Mycobacterium tuberculosis. La bacteria suele
atacar los pulmones, pero puede también dañar otras partes del cuerpo. La TB se disemina a través del aire,
cuando una persona con TB pulmonar tose, estornuda o habla. Si ha estado expuesto debería consultar a un
médico para someterse a los exámenes. Hay más probabilidades de que usted se contagie con TB si tiene un
sistema inmunitario debilitado.
Los síntomas de la TB pulmonar pueden incluir: Tos severa que dure tres semanas o más, bajar de peso,
toser y escupir sangre o mucosidad, debilidad o fatiga, fiebre y escalofríos, sudores nocturnos.
Baciloscopia directa a pesar de los múltiples avances efectuados en los últimos años en el diagnostico de TB,
la baciloscopia mediante la técnica de Ziehl Neelsen continúa siendo la base del diagnóstico y seguimiento de
la TB por su sencillez, rapidez, reproducibilidad en todos los ámbitos y bajo costo y porque detecta los casos
contagiosos de la comunidad, lo que constituye la base del diagnóstico y seguimiento de la TB. La tinción de
los bacilos va ligada a los ácidos micólicos de la pared micobacteriana y estos están presentes en el resto de
las micobacterias y no se pierden cuando el bacilo muere. Por lo tanto, una baciloscopia positiva puede
corresponderse con M. tuberculosis vivo o muerto.
Su principal inconveniente es su moderada sensibilidad, que está condicionada por la localización y el grado
de afectación de la enfermedad, la calidad de la muestra y el tiempo que dedica el observador para determinar
que una baciloscopia es negativa. La sensibilidad puede incrementarse mediante la concentración de la
muestra. Sin embargo, su especificidad es muy elevada, superior al 95%, tan solo limitada por los falsos
positivos que puede aportar otras micobacterias ambientales o por otras técnicas muy infrecuentes. Por
consiguiente, una baciloscopia negativa no descarta la TB, pero una baciloscopia positiva prácticamente la
confirma en más de 95% de los casos y es indicación de iniciar tratamiento.
Capitulo 22 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va
2. COMPETENCIA (S). -
✓ Identifica los bacilos alcohol acido resistente
✓ Interpreta los resultados de la técnica de Ziehl Neelsen
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2023-05-04
Cantidad
por grupo
(25
4 Frasco lavador o piceta 2 Pzas
5 Goteros 4 Pzas
6 Varillas para tinción 2 Pzas
INSUMOS
Cantidad
por grupo
(25
1 Colorantes de Ziehl nelssen 1 kit
2 Aceite de inmersión 1 fco
Pasos de la tinción Ziehl Nelssen
 Preparar el extendido en un portaobjetos utilizando asa bacteriológica o hisopo.
 Dejar secar al aire.
 Fijar el extendido pasando 3 o 4 veces por la llama de un mechero de alcohol. El calor del
portaobjetos debe ser soportado por las manos del operador.
 Colocar el preparado sobre un soporte de Tinción y cubrir con Fucsina Básica Fenicada.
 Calentar por 3 veces hasta la emisión de vapores blancos sin llegar a la ebullición, con un mechero
de alcohol, o con un hisopo de algodón embebido en alcohol, en el lapso de 5 minutos
 Escurrir el colorante y lavar con chorro fino de agua.
 Cubrir el preparado con Alcohol-ácido al 3 % (decolorante) por 5 minutos o hasta que la preparación
esté completamente decolorada.
 Lavar con chorro fino de agua.
 Recubrir la lámina con la solución de Azul de Metileno por 1 minutos.
 Escurrir el colorante y dejar secar al ambiente
 Observar con lente de inmersión.
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2023-05-04

El estudiante anotara los resultados y compara con tablas de referencia
• (-) No se encuentran bacilos ácido alcohol-resistentes en 100 campos.
• (+) Menos de un bacilo ácido alcohol-resistente por campo, en la observación de 100 campos.
• (++) Uno a diez bacilos ácido alcohol-resistentes por campo, en la observación de 50 campos.
• (+++) Más de diez bacilos ácido alcohol-resistentes por campo, en la observación de 20 campos.
7. CUESTIONARIO. -
1. Mencione las formas de tuberculosis

2. Elabore un cuadro con los antituberculosos
3. Como se previene la tuberculosis
4. Complete el cuadro
PASOS METODO BAAR(+) BAAR (-)
1. Colorante básico
3. Mordiente
4. Decolorante
4. Colorante de
contraste
64

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BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

➢ Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.

➢ Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.

Zonas de trabajo del laboratorio:

➢ El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.

Clasificación de los Residuos:

➢ Desechos especiales frascos de antibióticos y sachet de medicamentos

➢ Manual de Higiene y seguridad en Microbiología.

➢ Trabajo en grupos pequeños

5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

1. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad.

Residuos Infeccioso Cortopunzante Comunes

MATERIAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de otros laboratorios, requiriendo

✓ Describe y dibuja el material empleado en las prácticas de microbiología, y la solución de problemas

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

➢ Trabajo en grupos pequeños

5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

MATERIALES USOS DIBUJO

2. ¿Qué otros tipos de materiales e instrumentos de laboratorio utilizados en Microbiología se pueden

1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. -

1.1 Fundamento de la coloración de Gram:

1.2 Integridad de la Pared Bacteriana

Si bien se ha demostrado que la pared no toma el colorante, desempeña un importante papel en el

1.3 Intervención de los componentes químicos:

Es muy probable que la composición química y la permeabilidad de la bacteria, intervengan en la

1.4 Importancia de Otros Componentes:

c. En consecuencia, la disolución del precipitado Cristal Violeta-Yodo se efectúa lentamente, y

1.5 Fundamento de la Tinción de Ziehl Neelsen:

❖ Capitulo 12 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

1. Complete el siguiente esquema:

2. Llenar el siguiente cuadro

1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. – La obtención de muestra es el conjunto de procedimientos

Recomendaciones generales para la recolección de muestras:

MUESTRAS PARA EL ANALISIS BACTERIOLOGICO

Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales

Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales

Liquido Se realiza mediante

Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales

❖ Capitulo 16 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Trabajo en grupos 5 estudiantes para la extracción de muestras

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

TÉCNICAS DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO Y MOLECULARES

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO

Capítulo 5- 6 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

1. Realice un cuadro con las pruebas serológicas y moleculares

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

ASEPSIA: Significa ausencia o privación de todos los gérmenes patógenos o no.

Métodos químicos Oxido de etileno

FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA DESINFECCION

 Los factores que intervienen en la desinfección son:

❖ Capitulo 3 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

✓ Identifica las características de desinfección, asepsia y antisepsia, que se presentan en el campo