Re-10-Lab-035 Microbiologia II (Med) v3

GUIAS DE PRÁCTICA BASICAS CIENCIAS DE LA SALUD
Código de registro: RE-10-LAB-035 Versión 3.0

UNIVERSIDAD DEL VALLE
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II
PRÁCTICA Nº. 1
NORMAS BASICAS DE BIOSEGURIDAD
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger
la salud de los que allí se desempeñan frentre a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar
accidentes y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterios. En ese
entendido la OMS se dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar
recomendaciones en lo que se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en :
Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda
que es necesario para minimizar riesgos :
➢ El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares
donde se manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.
➢ Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.
➢ Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.
➢ No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio.
Protección personal:
➢ Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.

➢ Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar
contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente
infecciosos. Una vez utilizados los guantes, se retiraran de forma aséptica y a continuación se
lavarán las manos.
➢ El personal y los estudiantes se lavaran las manos después de manipular muestras y antes de salir
del laboratorio.
➢ Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras,
impactos y fuentes de radiación ultravioleta artificial.
➢ Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio.
➢ Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias.
➢ Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio.
➢ No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio.
Procedimientos:
➢ Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.

➢ No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.
➢ Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación
de aerosoles .
➢ Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se
comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e
incidentes.
➢ Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.
➢ Los líquidos contaminados deberán descontaminarse ( por medios químicos o físicos) antes de
eliminarlos por el colector de saneamiento.
Zonas de trabajo del laboratorio:
➢ El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.

➢ Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente
peligroso y al final de cada jornada de trabajo.
➢ Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de
eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.
➢ Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos.
Clasificación de los residuos:
➢ Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud
humana y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos,
restos de alimentos.
➢ Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y
el ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos
corporales, cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis,
órganos, tejidos, partes corporales.
➢ Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y

cortopunzantes desechables.
➢ Desechos especiales frascos de antibióticos y sachett de medicamentos
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica y aplica las normas básicas de bioseguridad en laboratorio de microbiología en relcion con
su contexto
✓ Investiga la metodologías correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio y
la solucion de problemas.
✓ Aplica la metodología correcta para la eliminación de los residuos generados en el laboratorio
microbiología.
3. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS
➢ Manual de Higiene y seguridad en Microbiología.

➢ Normas de bioseguridad.
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO.
➢ Trabajo en grupos pequeños
5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA

100 minutos
6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad.

2. Esquematizar un mapa cognitivo en forma personalizado de manejo de residuos.
3. Mencione las barreras quimicas, fisicas, biologicas de proteccion personal
4. Clasifique los residuos.
Residuos Infeccioso Cortopunzante Comunes
Jeringa con sangre
Hojas de bisturí
Cajas petri
cultivadas
Papel de escritorio
Tiras reactivas de
orina
Frasco con muestra
Aguja hipodérmica
PRÁCTICA Nº. 2
OBTENCION DE MUESTRAS PARA DIAGNOSTICO VIROLOGICO
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO
La actividad que desarrolla el laboratorio de microbiología está orientada esencialmente al diagnóstico

microbiológico de las enfermedades infecciosas. Una parte importante de esa actividad consiste en el
aislamiento, la identificación y la determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos de los
microorganismos causales de estas enfermedades. Otra parte importante de la actividad de un laboratorio
de microbiología consiste en la detección de anticuerpos, antígenos y ácidos nucleícos en diversas
muestras (sangre, líquidos estériles, orina, etc.), técnicas que resultan muy útiles en el diagnóstico precoz
de determinadas enfermedades infecciosas. La gran diversidad de muestras clínicas y de métodos
diagnósticos aplicables, son dos aspectos que diferencian el laboratorio de microbiología de otros
laboratorios clínicos.
Por tanto es necesario tener un protocolo que permita la adecuada manipulación de muestras que serán
enviadas a otro laboratorio y los resultados obtenidos estarán, estrechamente relacionados con el éxito
del informe final.
INDICACIONES PREVIAS A LA RECOLECCION DE MUESTRAS.

Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por escrito).
 La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso.
 Recolección de la muestra debe realizarse en frasci esteril.
 Etiquetar correctamente las muestras.
 Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible.
 Toda muestra deberá manejarse como si fuera potencialmente patógena.
Algunas pruebas virológicas pueden realizarse en laboratorios de hospitales grandes, pero la
mayor parte se llevan a cabo en centros de referencia especializados.
Las muestras requeridas pueden ser:
• Sangre coagulada para serologia
• LCR
• Heces
• Fluidos de vesiculas
• Debe recogerse sangre para la seologia durante la fase aguda de la enfermendad
despues de un intervalo de 10 dias.
- Capitulo 47 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed. Editorial
Manual Moderno, 2008.
2. COMPETENCIA (S)
✓ Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico
virologico
✓ Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico, relacionado con el campo de trabajo
del profesional.
EQUIPOS y MATERIALES
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 Piezas
2 Gradillas 4 Piezas
3 Micropipetas volumen variable 4 Piezas
4 Centrifuga 1 Piezas
5 Baño maria 1 Piezas
6 Ligaduras 5 Piezas
7 Tubos de hemólisis 15 Piezas
INSUMOS
1 Guantes 1 par par

2 Jeringas 5ml y agujas 15 Piezas
3 Tubos de eppendorf 15 Piezas
4 Algodón 100 Gramos
5 Alcohol medicinal 50 Ml
puntillas 15
6 piezas
4. TECNICA O PROCEDIMIENTO
Trabajo en grupos pequeños para la extracion de muestra de sangre por puncion
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

100 minutos
El estudiante anotara los posibles errores cometidos en la toma de muestra
7. CUESTIONARIO
1. En un paciente con sospecha de fiebre reumática, que muestras requiere y que exámenes solicita
y por que?
2. Complete el cuadro:
ENFERMEDAD MUESTRA
Herpes labial
Hepatitis infecciosa
Hepatitis serica
Gastroenteritis viral
SIDA
Mononucleosis infecciosa
3. Elabore una orden de laboratorio para extracción de una muestra para un examen microbiológico
PRÁCTICA Nº 3
TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS
Una infección provoca respuesta inmunológica dirigida contra uno o mas antígenos. En general se
genera una respuesta humoral y celular y la medición de una u otra puede ser la base para diagnosticar
una infección.
La inmunidad celular (Mediada por LiT), puede medirse o valorarse por hipersensibilidad dérmica.
La inmunidad Humoral (mediada por anticuerpos), en las infecciones intervienen principalmente dos
inmunoglobulinas IgG (Infecciones crónicas) e Ig M (Infecciones agudas).
El estudio de la inmunología, es un área amplia que cubre la investigación y aplicación clínica, se
refiere a antígenos, anticuerpos y funciones de defensa del huésped mediada por células, en especial en
lo que se refiere a la inmunidad y enfermedad.
Una vez que el microorganismo ha ingresado y ha establecido el sitio primario de infección, se

propagan de manera directa a través de los tejidos o por medio del sistema linfático a la corriente
sanguínea. Esta infección puede ser transitoria o persistente. Ante esta situación se genera una respuesta
inmune de defensa, que según el tipo de antígeno se producen anticuerpos de diferente especificidad.
La reacción de antígeno y anticuerpo da lugar al complejo antígeno-anticuerpo el cual es revelado por
alguna técnica inmunológica. Es así que en una infección también se puede detectar el inmunocomplejo
utilizando estas técnicas que poseen una ventaja; el tiempo de realización es menor al de las técnicas de
cultivo tradicional. Es necesario remarcar que en otros casos es imprescindible el cultivo.
USOS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICAS
 Diagnosticar infecciones
 Identificar microorganismos
 Tipificar sangre para bancos de sangre
 Tipificar tejidos de trasplantes
 Cuantificar inmunoglobulinas, Hormonas, Marcadores tumorales
TECNICAS INMUNOLOGICAS
Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño,

volviéndose insoluble en el medio dando lugar a un precipitado. Estas reacciones de precipitación se
pueden llevar a cabo en dos medios:
Medios Líquidos: En donde el anticuerpo se encuentra en solución. Ej: Reacción de VDRL
Medios Gelosados: Aquí el antígeno o anticuerpo esta en un soporte (agar-agar, agarosa,
poliacrilamida). Ej: IDRS (inmunodifusión radial simple, que sirve para cuantificar IgM, IgD, IgG, IgA, IgA s
Reacción de Aglutinación: Aquí el antígeno esta en forma de partícula. Puede ser:
Aglutinación directa: El antígeno particulado insoluble es aglutinado por el anticuerpo. Ej:
Huddleson y Widal
Aglutinación Indirecta: Aquí se emplean transportadores a los que se adhiere en la superficie el
antígeno particulado insoluble. Esos transportadores pueden ser:
Partículas de Látex: como ejemplo encontramos: Reacción de Proteína C reactiva, factor
reumatoideo, Determinación de Grupo sanguíneo y factor, HCG, etc.
Hematíes: En este caso la técnica recibe el nombre de Hemoaglutinación, Ej: HA para Chagas,
HA para Toxoplasmosis. Tambien podemos tener
Inhibición de la Hemoaglutinación: Ej: AELO (Antiestreptolisina O)
Hemoaglutinación Reverso pasiva: Donde a los hematíes se adhiere el anticuerpo. Ej: Hepatitis
Reacción de Inmunofluorescencia: Se basa en la fluorescencia que emiten determinadas
sustancias y se observa en un microscopio especial de fluorescencia. Ej: TIF Toxoplasmosis (Test de
inmunofluorescencia para Toxoplasmosis), TIF Chagas
Reacción de Radioinmunoanálisis: En esta reacción el antígeno se marca con un radioisotopo.
Ej: Hormonas, IgE, Marcadores tumorales, HIV, Hepatitis
Reacción de Enzimoinmunoánalisis: Se emplea una enzima como marcador que actúa sobre un
sustrato que desarrolla color. Ej: Hormonas, IgE, Marcadores tumorales, HIV, Hepatitis
Pruebas cutáneas: la hipersensibilidad dérmica ofrece ciertas ventajas al determinar con facilidad
y rapidez la respuesta inmunológica (celular) del individuo a la exposición previa a los agentes infecciosos.
Ej: Virus de Herpes simple
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica las pruebas serológicas empleadas en el diagnóstico microbiológico, para la soluccion

y toma desiciones en el campo de trabajo
✓ Realiza e interpreta la determinación de grupo y factor sanguíneo.
✓ Realiza e interpreta la determinación de proteína C reactiva.
✓ Analiza el fundamento de las pruebas serológicas, de acuerdo a las situaciones de campo de
trabajo del profesional
✓ Conoce otras pruebas empleadas en el diagnostico microbiológico, de acuerdo a las situaciones
de campo de trabajo del profesional
1 Portaobjetos 20 piezas
2 Gradillas 4 Piezas
3 Ligaduras 5 Piezas
INSUMOS
1 Guantes 1 par
2 Jeringas y agujas 10 Piezas
3 Lancetas 20 Piezas
4 Algodón 100 gramos
5 Alcohol 50 ml
6 Reactivo para widal 1 kit
Reactivo de Grupo y Factor 1
7 sanguíneo kit
Reactivo de Grupo y Factor 1
10 sanguíneo kit
11 Mondadientes 20 piezas
➢ Trabajo en grupos pequeños

➢ Determinación de Grupo y Factor
➢ Determinación de PCR latex
➢ Determinación de Factor Reumatoideo
➢ Determinación de la prueba de widal

Cuatro periodos de 50 minutos
El estudiante elabora un cuadro comparativo de los grupos sanguineos
7. CUESTIONARIO
1. Dibuje los tipos de ELISA, explique brevemente el fundamento y ¿cual su utilidad para el
diagnostico?
2. En qué consiste y la utilidad del inmunoblot o Western Blot.
3. Explique el fundamento de la Reacción de polimerasa en cadena y sus aplicaciones.
4. Cite la diferencia entre las pruebas de PCR y PCR latex.
PRÁCTICA Nº. 4
SEMINARIO: ANTIVIRALES
Dado que los virus comparten muchos de los procesos metabólicos de la célula huésped es difícil
encontrar fármacos que sean selectivos para el patógeno. Sin embargo existen algunas enzimas que son
especificas de los virus que son los posibles objetivos para el tratamiento medico. Los fármacos antivíricos
actualmente disponibles sólo son eficaces mientras el virus se esta replicando.
Inhibición de la penetración en la célula huésped

❖ Amantadina: actúa sobre el virus influenza A. Inhibe la formación de la cubierta ,su efecto
principal es inhibir la decapsidacion viral o el desensamblaje del virion durante la endocitosis.
❖ Rimantadina: derivado 4-10 veces mas activa que la amantadina.
❖ Oseltamivir: inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza.
❖ Zanamivir:inhibe la actividad de neuraminidasa del virus influenza.
❖ Docosanol: interfiere en la fusion del VHS-1 y VHS-2 a las membranas de las celulas del
huesped. Es de uso topico.
❖ La gammaglobulina: Neutraliza los virus
Inhibidores de la DNA polimerasa:
❖ Aciclovir un derivado de la guanosina, inhibe selectivamente la ADN polimerasa vírica; eficaz contra
herpesvirus; mínimos efectos indeseados.
❖ Ganciclovir, también un derivado de la guanosina, se fosforila y posteriormente se incorpora en el
ADN vírico impidiendo su replicación; utilizado en la infección por citomegalovirus (CMV),
especialmente en pacientes con SIDA y retinitis por CMV; puede tener efectos indeseados graves.
❖ Vidarabina, un derivado de la adenosina, es un inhibidor relativamente selectivo de la ADN polimerasa
vírica; eficaz contra herpes simple y varicela zoster; puede tener efectos indeseados graves.
❖ Tribavirin es similar a la guanosina y se cree que interfiere con la síntesis del ARNm vírico; puede
inhibir a muchos virus ADN y ARN.
❖ Foscarnet inhibe la ADN polimerasa vírica fijándose al lugar de unión del pirofosfato; es bastante
eficaz en la infección por CMV.
Inhibidores de la transcriptasa inversa ITI:
❖ Zidovudina (AZT) , un análogo de timina, es relativamente eficaz en VIH/ SIDA.
❖ Zalcitabina y didanosina (DDI) se usan en combinación con inhibidores de las proteasas.
❖ Inhibición de los acontecimientos postraducción.
❖ Los inhibidores de las proteasas (por ejemplo indinavir y saquinavir) inhiben la escisión de la
proteína inerte traducida en las proteínas funcionales y estructurales. Se usan en combinación con
inhibidores de la transcriptasa inversa.
❖ Inmunomoduladores
❖ Los interferones, inducen en los ribosomas de las células del huésped, enzimas que inhiben el ARNm
vírico; se usan en la infección de la hepatitis B y pueden ser útiles en el SIDA. Interferón alfa:
producen proteínas efectoras en las células expuestas, lo que contribuye a un estado de resistencia
viral.
❖ Imiquimod: modificador de la respuesta inmunitaria topica.
❖ Capitulo 29 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed. Editorial
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los principales antivirales y sus usos mas frecuentes, en la soluccion de problemas que
se presentan en el campo de trabajo
✓ Indica los principales mecanismos de acción de los antivirales, de acuerdo a las situaciones del
campo de trabajo.
Data display
Exposicion de los antivirales en grupos de trabajo de 5 estudiantes.

Realizacion de mapas conceptuales de antivirales

100 minutos

El estudiante elaborara una grafica de los mecanismos de accion de los antivirales
7. CUESTIONARIO
1. Investigue cual es el tratamiento para un paciente portador de VIH?

2. Investigue cual es el tratamiento para un paciente con SIDA?
3. Elabore un cuadro con tratamiento de las enfermedades virales
PRÁCTICA Nº. 5
METODOS DE DIAGNOSTICO VIRICO
Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse en
DIRECTOS e INDIRECTOS, según persigan demostrar la presencia del virus o de alguno de sus
constituyentes (antígeno o genoma viral) o bien la respuesta de anticuerpos específicos por parte del
huésped en el curso de la infección.
Gran parte de las técnicas utilizadas en el diagnóstico clínico se basan en pruebas serológicas que
identifican anticuerpos específicos frente a diversas proteínas antigénicas. Sin embargo, existen
circunstancias en las cuales son necesarias pruebas que detecten precozmente la infección viral
(tratamientos específicos, medidas profilácticas, etc.).
En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antígenos virales previamente al

desarrollo de la seroconversión, siendo esta prueba la única evidencia de la exposición al virus cuando
no existe aumento de los niveles de anticuerpos circulantes (pacientes inmunodeprimidos).
Igualmente la detección del genoma viral puede favorecer la precocidad del diagnóstico viral y su
confirmación. En la última década se han desarrollado una serie de técnicas para el diagnóstico viral
basadas en la detección de ácidos nucleicos. De ellas la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es
la más utilizada.
En el momento actual, la tendencia en el diagnóstico virológico consiste en emplear nuevas y más

sensibles tecnologías de detección de antígenos y de investigación de ácidos nucleicos con el propósito
de lograr un diagnóstico viral más rápido. El desarrollo de quimioterapia antiviral efectiva es responsable
de esta tendencia que hace de la identificación rápida, sensible y específica de los virus, una necesidad.
I. METODOS DE DIAGNOSTICO VIRAL:
• Confirmar el diagnostico clinico

• Seleccionar un tratamiento adecuado
• Monitorizar la evaluacion de la enfermedad
• Hacer un seguimiento epidemiologico de la enfermedad
Los métodos utilizados para reconocer las infecciones por virus humanos pueden clasificarse
DIRECTOS. Demostracion de la presencia de los virus en la muestra clinica:
• Inoculacion en animales de experimentacion

• Inoculacion en huevos embrionarios
• Inoculacion en cultivos celulares
• Deteccion del virus en la muestra
INDIRECTOS. Demostracion de la presencia de anticuerpos especificos en el suero
• ELISA ( Infecciones agudas Y Infecciones cronicas )

• INMUNOFLORESCENCIA
• RADIOINMUNOENSAYO
• REACCION DE LA POLIMERASA EN CADENA
• FIJACION DE COMPLEMENTO
• INMOBLOTTING
• INHIBICION DE LA HEMAOAGLUTINACION
- Capitulo 47 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed. Editorial
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los metodos de diagnostico virologico

✓ Interpreta los resultados de las pruebas para confirmar un diagnostico .
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Datadisplay
Trabajo en grupos 5

100 minutos

No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. Mencione la utilizadad de la prueba de ELISA para el diagnostico virologico

2. Investigue otros metodos empleados en el diagnostico de las infecciones virales
PRÁCTICA Nº. 6
VIRUS DEL TRACTO RESPIRATORIO

Los síntomas y la gravedad de la enfermedad vírica respiratoria dependen de la naturaleza del
virus, el lugar de la infección (vías respiratorias superiores o inferiores) y el estado inmunitario y
la edad del
individuo. Otros trastornos, como la fibrosis quística y el tabaquismo, que comprometen
las barreras ciliadas y mucoepiteliales frente a la infección, aumentan el riesgo de padecer una
enfermedad grave.
La faringitis y la afectación bucal son presentaciones víricas habituales. La mayoría de los
enterovirus
infectan la bucofaringe y posteriormente se diseminan por viremia a otros tejidos diana. Por
ejemplo,
algunos síntomas como faringitis de presentación aguda, fiebre y lesiones vesiculares bucales
son
característicos de las infecciones por el virus Coxsackie A (herpangina y enfermedad de
manos, pies y boca), y de algunas provocadas por el virus Coxsackie B y echovirus.
Las infecciones virales suelen afectar las vías respiratorias superiores o inferiores. Aunque estas
infecciones pueden clasificarse en función del virus causante (p. ej., influenza [gripe]), en general
se distinguen clínicamente de acuerdo con el síndrome (p. ej., resfriado común, bronquiolitis,
laringotraqueobronquitis [crup]). Cada microorganismo específico suele producir manifestaciones
clínicas características (p. ej., el rinovirus causa típicamente resfriado común, el virus sincitial
respiratorio ([VSR] es el responsable de la bronquiolitis), pero en realidad cada uno puede
provocar muchos síndromes respiratorios de etiología viral
La detección de virus patógenos con reacción en cadena de la polimerasa (PCR), cultivo celular o
pruebas serológicas suele ser demasiado lenta para ayudar al tratamiento del paciente, aunque
puede emplearse para la vigilancia epidemiológica (es decir, para identificar y determinar la causa
de un brote). Hay pruebas de diagnóstico más rápidas para detectar los virus influenza (de la
gripe) y el virus sincitial respiratorio (VSR), aunque no se determinó con precisión la utilidad de
estas pruebas en el uso cotidiano y deben reservarse para situaciones en las cuales el diagnóstico
específico del virus puede modificar el manejo clínico. Las decisiones terapéuticas suelen basarse
en los datos clínicos y epidemiológicos.
Virus influenza (gripe)
Virus parainfluenza (paragripal)

Bronquiolitis VSR
Adenovirus
Rinovirus
Virus influenza
Rinovirus
Virus parainfluenza
Resfriado común
Coronavirus
Enterovirus
Adenovirus
Metaneumovirus humanos
VSR
Virus influenza
Laringotraqueobronquitis (crup) Virus parainfluenza
VSR
Virus parainfluenza
Enfermedad seudogripal Virus influenza
Adenovirus
Virus parainfluenza
Virus influenza Enterovirus
Neumonía VSR Rinovirus
Adenovirus Metaneumovirus humano
Coronavirus
- Capitulo 39, 40 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed.
Editorial Manual Moderno, 2008.
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los virus causantes de infecciones respiratorias

✓ Aplicara el tratamiento apropiado para cada patologia.
Data display
Exposicion grupal de 5 estudiantes

200 minutos

No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. realizara un cuadro de las principales infecciones virales, bacterianas respiratorias
2. resolucion de casos clinicos
PRÁCTICA Nº. 7
VIRUS DEL TUBO DIGESTIVO

ROTAVIRUS
Generalidades: Es un género de virus perteneciente a la familia Reoviridae. Se han identificado siete

grupos, tres de los cuales (Grupo A, B y C) infectan a los humanos. El grupo A es el más común, causando
el 90% de las infecciones. Es la causa mas importante de gastroenteritis infantil en todo el mundo, Es
responsable de aproximadamente el 50% de todos los casos de diarrea infantil que requieren
hospitalización a causa de deshidratación en Estados Unidos. En los países subdesarrollados, los
rotavirus pueden producir hasta un millón de fallecimientos al año.
La enfermedad está caracterizada por vómito y diarrea acuosa de 3 a 8 días, la diarrea es acuosa color
amarillento con aspecto a yogurt. Suele remitir en un plazo de 12 a 60 horas sin complicaciones.
Transmisión: Fecal-oraL, periodo de incubación de 24 a 48 hrs.

Diagnostico: Detección de anticuerpos por aglutinación indirecta O ELISA en materia fecal y PCR-TI.
Norovirus
La familia Caliciviridae incluye virus de RNA de una sola cadena, en sentido positivo, sin envoltura, con un
diámetro de 27-38 nm, patógenos de humanos y otros animales. Presenta cuatro géneros: Lagovirus, Vesivirus,
Norovirus y Sapovirus, varios de los cuales comparten características.
Se estima que los norovirus son causantes de la gran mayoría de las gastroenteritis epidémicas de origen no
bacteriano en el humano, principalmente en la población infantil, pero no limitada a ella, puesto que se han
reportado con mayor frecuencia brotes en sujetos adultos. El desarrollo de técnicas diagnósticas moleculares
ofrece una perspectiva más clara del importante papel que juegan actualmente en la etiología de las gastroenteritis
agudas. Se considera que los norovirus son la causa principal de gastroenteritis aguda en países desarrollados (1
d cada 5 casos de gastroenteritis), en tanto que en países en desarollo se estiman como agentes causales en uno
de cada seis casos (CDC. 2014).
Los norovirus se transmiten por la vía fecal-oral, ya sea por consumo de alimentos o agua contaminados con
materia fecal o a través del contacto directo. Existe evidencia sobre la transmisión por vómito en aerosol
(pequeñas gotas eliminadas expulsadas bajo presión).
El periodo de incubación de la gastroenteritis asociada a norovirus es de alrededor de 24 - 48 horas, pero la
enfermedad también puede manifestarse al cabo de 12 horas de exposición. El cuadro clínico es de presentación
aguda, con vómito, náusea, diarrea acuosa sin sangre, calambres abdominales. En ocasiones se detecta febrícula.
En los niños se aprecia diarrea con mayor frecuencia que el vómito. La deshidratación es la complicación más
frecuente en infantes y ancianos. No existe un tratamiento específico. Es necesario la rehidratación y corrección de
trastornos electrolíticos, por vía oral o intravenosa.
ADENOVIRUS
Los adenovirus humanos se encuentran asociados a una amplia gama de manifestaciones clínicas que incluyen
infecciones en vías respiratorias, de la conjuntiva y gastrointestinales. Estos virus pertenecen a la familia
Adenoviridae, su genoma esta constituido por DNA de doble cadena (dsDNA) que se encuentra rodeado por una
cápside proteica de aproximadamente 70 nm de diámetro, no presentan envoltura lipídica y poseen una simetría
icosaédrica. Se han logrado identificar 41 serotipos diferentes de adenovirus distribuidos en 6 grupos (A-F). Los
serotipos 40 y 41 (adenovirus entéricos) han sido reconocidos como agentes importantes causales de
gastroenteritis aguda en niños menores de 5 años y principalmente en el primer año de vida, es poco común en
adultos aunque se han detectado en brotes nosocomiales
son responsables del 5-20% de las gastroenteritis en niños pequeños y representan el segundo agente viral más
común causante de diarrea después de los rotavirus. La infección por adenovirus se observa en varios países sin
considerarse endémica de alguna zona en particular, infectando de igual forma a niñas y niños en cualquier época
de año ya que no se han presentado patrones de estacionalidad para la infección. En países como China,
Guatemala y Estados Unidos se han reportado del 5 al 18% de infecciones causadas por este agente viral y en
menor porcentaje (2%) en Tailandia y Brasil.
La transmisión del virus es por vía fecal-oral y de persona a persona, presenta un período de incubación de 8-10
días y la enfermedad dura de 5-12 días, sin embargo, se puede prolongar por más de 2 semanas, generalmente la
diarrea es acuosa y más prominente que en otras infecciones gastrointestinales. Los adenovirus entéricos no
producen nasofaringitis o queratoconjuntivitis como síntoma primario a diferencia de los otros adenovirus y se
caracterizan por presentar náuseas, vómito, diarrea, dolor abdominal y fiebre.
Los métodos para el diagnóstico de adenovirus incluyen la detección directa del virus por microscopía electrónica,
de las proteínas virales por ELISA o aglutinación en látex y la detección de inmunoglobulinas específicas
- Capítulo 32, 37 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed.
Editorial Manual Moderno, 2008.
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los virus que ingresan por via orofecal

✓ Identifica a los virus causantes de infecciones en el tubo digestivo
Data display
Formacion de grupos de 5 estudiantes

100 minutos

No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. realizara un cuadro de los principales agentes causantes de infecciones en el tubo digestivo
2. resolucion de casos clinicos
PRÁCTICA Nº. 8
VIRUS CAUSANTE DE EXANTEMA
Un exantema es una erupción cutánea generalizada que suele ir asociada a una infección sistémica,
normalmente de origen infeccioso,
Víricos: las, enfermedades de la infancia como la varicela, rubéola, roséola, sarampion están asociados
con una erupción rojiza distintiva. Un exantema también puede ser la consecuencia de una
incompatibilidad de fármaco
La erupción puede aparecer primero en las zonas sensibles del cuerpo, extendiéndose en el tiempo. Los
adultos también pueden desarrollar una erupción en todo el cuerpo. La erupción puede picar y causar
hormigueo o escozor, dependiendo de qué lo está causando, y el paciente también puede presentar fiebre
y otros síntomas como tos o desorientación.La mayoría de las erupciones no específicas aparecen como
manchas o granos, y pueden o no causar picazón. La erupción suele ser generalizada y puede ser más
extensa en el tronco y las extremidades. En la mayoría de los casos, antes que la erupción aparezca, los
pacientes pueden tener síntomas de malestar general, que incluyen:
▪ Fiebre
▪ Malestar
▪ Dolor de cabeza
▪ Pérdida de apetito
▪ Dolor abdominal
▪ Irritabilidad
▪ Dolores musculares y dolores
Capítulo 31, 37, 40 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed. Editorial
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los virus causantes de exantemas

✓ Diferenciara los diferentes exantemas causadas por los virus.
datapdisplay
Trabajo en grupos .

100 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. Realizacion de mapa conceptual de los exantemas
2. Que enfermedades exantematicas se previene con vacuna
PRÁCTICA Nº. 9
VIRUS DE LA HEPATITIS
Las Hepatitis virales son enfermedades generalizadas que afectan primariamente al hígado. Estos virus
producen una inflamación aguda del hígado que trae como consecuencia una enfermedad clínica
caracterizada por fiebre, síntomas gastrointestinales tales como nauseas y vómitos e ictericia.
Independientemente del tipo de virus, durante la enfermedad aguda se observan lesiones histopatológicas
idénticas.
Virus de la hepatitis A (HAV)
HAV es un picornavirus RNA monocatenario y se considera la causa más frecuente de hepatitis viral
aguda, en particular en niños y adultos jóvenes. En algunos países, > 75% de los adultos se expusieron al
virus. HAV se disemina en forma principal por contacto fecal-oral, por lo cual es más frecuente en áreas
con higiene inadecuada. En especial en los países en vías de desarrollo, se producen epidemias transmitidas
por el agua y los alimentos. A menudo, la ingestión de mariscos crudos contaminados es responsable de la
enfermedad. También pueden producirse casos esporádicos, en general como resultado del contacto
interpersonal.
La descamación del virus en las heces se produce antes de que aparezcan los síntomas y suele cesar
unos pocos dias después de su inicio, por lo cual el período de contagio de la enfermedad suele haber
finalizado cuando la hepatitis se evidencia en forma clínica. HAV no posee portadores crónicos
documentados y no causa hepatitis crónica ni cirrosis.
Virus de la hepatitis B virus (HBV)
HBV es el virus de hepatitis mejor caracterizado y más complejo. La partícula infectiva está formada
por un núcleo (core) viral y una cubierta superficial externa. El núcleo contiene DNA circular bicatenario
y DNA polimerasa y se replica dentro de los núcleos de los hepatocitos infectados. En el citoplasma se
agrega una cubierta superficial que, debido a razones desconocidas, se produce en cantidades excesivas.
HBV es la segunda causa más frecuente de hepatitis viral aguda. La infección subclínica es frecuente,
pero mucho menos que la producida por HAV. HBV suele transmitirse por vía parenteral, en forma típica
a través de sangre o hemoderivados contaminados. La evaluación sistemática de la sangre de donantes en
busca de antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) casi logró eliminar la transmisión postransfusional,
que en el pasado era frecuente, aunque la transmisión a través de agujas compartidas por drogadictos por
vía intravenosa sigue siendo común. El riesgo de contraer el virus aumenta en pacientes sometidos a diálisis
renal e internados en unidades oncológicas y en el personal hospitalario que entra en contacto con sangre.
El virus podría tramsmitirse a través del contacto con otros líquidos corporales (p. ej., entre compañeros
sexuales, tanto hetero- como homosexuales, en instituciones cerradas, como de salud mental y prisiones),
pero su infectividad es mucho menor que la de HAV y las vías de transmisión muchas veces se desconocen.
El papel de las picaduras de insectos en la transmisión no se definió con precisión. Numerosos casos de
hepatitis B aguda aparecen en forma esporádica sin un origen documentado.
Debido a razones desconocidas, HBV a veces se asocia con diversos trastornos extrahepáticos
primarios, como poliarteritis nodosa, otras enfermedades del tejido conectivo, glomerulonefritis
membranosa y crioglobulinemia mixta esencial. El papel patogénico de HBV en estas enfermedades es
incierto, pero se sugiere la participación de mecanismos autoinmunitarios.
Los portadores crónicos de HBV representan un reservorio mundial de la infección. La prevalencia

varía de acuerdo con varios factores, como la geografía (p. ej., < 0,5% en los Estados Unidos y el norte de
Europa, > 10% en algunas regiones del Lejano Oriente y África). La transmisión vertical de madre a hijo
es común a menos que el recién nacido sea tratado con inmunoglobulina para hepatitis B (HBIG) y
vacunado inmediatamente después del parto.
Virus de la hepatitis C (HCV)
HCV es un flavivirus RNA monocatenario, del cual existen seis subtipos principales con secuencias
aminoacídicas variables (genotipos); estos subtipos presentan diferencias geográficas, en la virulencia y en
la respuesta al tratamiento. HCV también puede alterar su patrón de aminoácidos con el paso del tiempo en
las personas infectadas y producir cuasiespecies.
La infección se transmite con mayor frecuencia a través de la sangre, sobre todo cuando los
drogadictos por vía intravenosa comparten agujas, pero también a través de la realización de tatuajes y
perforaciones corporales ornamentales (body piercing). La transmisión sexual y la vertical de madre a hijo
son relativamente infrecuentes. La frecuencia de transmisión a través de transfusiones de sangre disminuyó
de manera significativa desde el advenimiento de pruebas de cribado en la sangre de donantes. Algunos
casos esporádicos surgen sin factores de riesgo evidentes. La prevalencia de HCV varía con la geografía y
otros factores de riesgo.
En ocasiones, la infección por HCV se desarrolla en forma simultánea con enfermedades sistémicas
específicas, como crioglobulinemia mixta esencial, porfiria cutánea tarda (entre el 60 y el 80% de los
pacientes con porfiria desarrolla la infección por HCV, pero sólo unos pocos pacientes infectados por HCV
experimenta porfiria) y glomerulonefritis, aunque los mecanismos de esta asociación son inciertos.
Asimismo, hasta el 20% de los pacientes con hepatopatía alcohólica es portador de HCV. Las razones de
esta asociación importante son desconocidas, porque el consumo concomitante de alcohol y drogas sólo es
responsable de un porcentaje de estos casos. En estos pacientes, el HCV y el alcohol actúan de manera
sinérgica para empeorar la inflamación y la fibrosis del hígado.
Virus de la hepatitis D (HDV)
HDV, o agente delta, es un virus RNA defectuoso que sólo puede replicarse en presencia de HBV.
Este virus aparece con poca frecuencia como coinfección en la hepatitis B aguda o como sobreinfección en
la hepatitis B crónica. Los hepatocitos infectados contienen partículas delta cubiertas por HBsAg. La
prevalencia de HDV varía en forma amplia según la región, con áreas endémicas en varios países. Los
drogadictos por vía parenteral presentan un riesgo relativamente alto pero, a diferencia de HBV, HDV no
infecta en forma amplia a la comunidad homosexual.
Virus de la hepatitis E (HEV)
HEV es un virus RNA que se transmite por vía entérica. Se informaron brotes de infección aguda por
HEV, en muchos casos transmitidos a través del agua y relacionados con la contaminación fecal de los
suministros de agua potable, en China, India, México, Pakistán, Perú, Rusia y países del centro y el norte
de África. Estos brotes presentan características epidemiológicas similares a las de las epidemias de HAV
, aunque también pueden producirse casos esporádicos. No se informaron brotes en los Estados Unidos ni
en Europa occidental. Originalmente no se pensaba que el HEV causara hepatitis crónica, cirrosis o el estado
de portador crónico; sin embargo los informes documentan la hepatitis E crónica, exclusivamente en
pacientes inmunocomprometidos (incluyendo receptores de trasplantes de órganos, pacientes que reciben
quimioterapia contra el cáncer, y pacientes infectados por el HIV).
- Capítulo 35 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed. Editorial
. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los virus causantes de hepatitis

✓ Diferenciara los diferentes los virus causantes de hepatitis
Data display
Formacion de grupos de 5 para la exposicion

100 minutos

No se aplica
7. CUESTIONARIO:
1. Describa los efectos de la hepatitis en el hígado
PRÁCTICA Nº. 10
VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA HIV
El virus de inmunodeficiencia adquirida forma parte del género Lentivirus. Estos constituyen un grupo
dentro de la familia Retroviridae. Desde su ingreso a la célula hospedadora, la cadena simple de ácido
ribonucleico (ARN) viral comienza su transformación en una doble cadena de ácido desoxirribonucleico
(ADN) por acción de la enzima transcriptasa inversa que forma parte del virus. La integrasa y otros
cofactores actúan para que el ADN del virus se fusione con el ADN de la célula hospedadora a través de
la transcripción en el genoma de la célula que aloja al virus. De esta manera, la célula queda infectada
por el virus. Después de este proceso, los lentivirus reaccionan de dos maneras posibles: puede ocurrir
que el virus entre en latencia mientras la célula infectada continúa en funciones, o bien, que el virus
comience a replicarse activamente y libere viriones capaces de infectar otras células.
Existen dos tipos del VIH, llamados VIH-1 y VIH-2.
Transmisión:
 Transmisión sexual: relaciones sexuales sin condón con personas que viven con el VIH-SIDA.
 Transmisión a través de sangre y productos de sangre contaminados con el virus, o herirse con
instrumentos cortopunzantes infectados (vía parenteral o sanguínea). Este vía incluye entre otras
cosas transfusiones de sangre o productos de sangre, uso de agujas contaminadas y tatuajes.
 Transmisión vertical de una madre que vive con el VIH a su hijo a través de la placenta durante el
embarazo, durante el parto o en la lactancia a través de la leche materna (vía perinatal o materno-
infantil).
No se transmite el VIH por:
 Compartir baños con otras personas o con personas que viven con el VIH-SIDA
 Compartir alimento y utensilios de cocina con otras personas o con personas que viven con el VIH-
SIDA
 Picadura de insectos
 Por compartir vida social
 Por compartir el ambiente del trabajo
 Abrazos, apretón de manos, besos
 Abrazar, besar o cuidar de una persona que vive con el VIH-SIDA
Diagnóstico:
Detección de anticuerpos por Elisa. Un resultado positivo debe ser corroborado con Westen blot o
Reacción de Polimerasa en cadena. El Elisa posee un periodo de ventana de 3 meses (periodo en el cual
el virus esta en el paciente y no puede ser detectado en el laboratorio) por ello ante un accidente con un
elemento cortante o relación sexual insegura se deberá corroborar un nuevo test a los 3 meses.
2. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica las caracteristicas del virus de la inmunodeficencia

✓ Elige adecuadamente el método diagnósticos correspondiente para VIH
Data display.
Trabajo en grupos pequeños con socialización.

200 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO
Resuelva los siguientes cuadros clínicos:
1. En el caso de sospechar que un neonato esté infectado, el mismo proviene de una mujer seropositiva
para HIV. Referente al diagnóstico ¿Qué tipo de acciones deberíamos tomar y por qué?
2. Cite y explique en que consisten las pruebas de presunción y de confirmación para el diagnostico del
VIH.
3. Se dosaron los siguientes antigenos y anticuerpos para hepatitis e interprete el cuadro:
4. Interprete el siguiente cuadro
Anti HBc Anti HBc

HBsAg Anti HBs HBeAg Anti Hbe
(IgG) (IgM)
+ - + + + -
+ - +++ +/- + -
- +/- +/- - - -
+ - +++ - - +
- ++ - - -
PRÁCTICA Nº. 11
OBTENCION DE MUESTRAS PARA DIAGNOSTICO MICOLOGICO Y EXAMEN DE

MICROSCOPIA DIRECTA
Las infecciones fúngicas se denominan micosis y en general pueden dividirse en: infecciones
superficiales (que afectan piel, uñas, cuero cabelludo o membranas mucosas) y sistémicas (que afectan
tejidos mas profundos y órganos).
Muchos de los hongos que pueden producir micosis viven en asociaciones con humanos como
comensales, o están presentes en el ambiente; pero, hasta tiempos recientes, las infecciones superficiales
graves eran relativamente raras y las sistémicas eran muy raras (al menos en zonas relativamente
climáticas frías y templadas). En estas zonas una infección fúngica normalmente consiste en un pie de
atleta o candidiasis oral o vaginal que producen molestias, pero apenas significan un riesgo para la vida.
Sin embargo, en los últimos 30 años ha habido un constante aumento en la incidencia de infecciones
fúngicas sistémicas secundarias graves. Uno de los motivos es la utilización generalizada de antibióticos
de amplio espectro que eliminan o merman poblaciones bacterianas no patógenas que normalmente
compiten con los hongos. Otro es el aumento en el número de pacientes con una respuesta inmune
reducida debido al SIDA o a la acción de fármacos inmunodepresores o antineoplásicos; esto ha
conllevado un aumento del predominio de infecciones oportunistas, es decir infecciones por hongos que
normalmente son inocuos o que se eliminan rápidamente en personas inmunocompetentes.
Las muestras requeridas para micosis superficiales son:
• Piel (raspado con hoja roma)
• Uñas ( corte)
• Pelo (corte)
• Las micosis progundas o invasivas precisan cultivo sanguineo y/o tejidos blandos (para
cultivo e histologia). Candida albicans pueden crecer en botellas de cultivo sanguineo
aeróbico estandar.
Colección y Envió de Muestras:
A continuación se mencionan algunas normas generales:
• Tomar la muestra del sitio más representativo del problema, de preferencia en la etapa aguda de la
enfermedad.
• Las muestras deben colectarse bajo estrictas condiciones de antisepsia. Tanto el material de colección
como el recipiente en el que la muestra sea transportada deberán ser estériles. Este último
preferentemente debe tener un tapón de rosca.
• Las muestras colectadas no deben entrar en contacto con desinfectantes.
• Las muestras deben identificarse con los siguientes datos: edad, sexo, nombre del paciente, así como
dirección teléfono
• Una vez colectadas las muestras deben enviarse lo más pronto posible
• Cuando sea necesario el uso de hisopos para la colección de las muestras hay peligro de desecación,
por ello deben enviarse en medios de transporte (Stuart, Carry-Blair, etc.) que ayudan a la preservación
de la bacteria pero no a la multiplicación.
• Es importante hacer notar que el manejo de las muestras clínicas deben realizarse con precaución
debido a que algunos agentes involucrados en las enfermedades infecciosas de constituyen un riesgo
para la salud del clínico y del bacteriólogo.
2. COMPETENCIA (S)
✓ Aplica la metodologia para recolectar una muestra sospechosa para una micosis
✓ Realiza la prepracion para la observacion de una muestra directa en el microscopio
.
Portaobjetos 10
1 piezas xx
INSUMOS
1 Cubreobjetos 25 piezas
2 Hidroxido de potasio al 10% 20 ml
3 Goteros 5 piezas
4.1. EXAMEN DIRECTO:
El propósito de este procedimiento, es determinar la presencia de hongos. En muchos casos esto
basta para el diagnóstico y constituye, en el caso de la tina versicolor y algunas otras micosis, el único
medio de análisis. El resultado positivo es mucho más valioso que el negativo. El examen directo no suele
ser suficiente para identificar las especies.
Procedimiento:
a) Se colocan algunos cabellos, raspaduras, escamas, etc., sobre uno de los extremos del porta
objetos limpio y se vierte una gota de solución de KOH al 10%, se coloca el cubreobjetos.
b) Se deja actuar el KOH durante 5 a 10 minutos o hasta que queden disueltos los elementos
tisulares, dejando así los hongos libres para el examen, la preparación se pasa por la llama del
Bunsen tres o cuatro veces; se examina al microscopio y si no está transparente se vuelve a
calentar y se observa otra vez. Se repiten estas maniobras hasta que los tejidos queden bastante
transparentes para un examen satisfactorio.

100 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO
1. Mencione los hongos causantes de micosis superficiales y cutaneas

PRÁCTICA Nº. 12
SEMINARIO DE ANTIMICOTICOS
El grupo de los antimicóticos azólicos está compuesto por dos clases de drogas, los imidazoles y los
triazoles. Aunque pertenecen a grupos químicos diferentes, estas drogas comparten el mecanismo de
acción, razón por la que se las considera un único grupo farmacológico. Los imidazoles fueron muy usados
durante la década del ’80 ya que permitieron el tratamiento de las micosis sistémicas por vía oral, con
menor toxicidad que la Anfotericina B. El papel del Cetoconazol en la terapéutica ha disminuido
considerablemente desde la introducción al mercado del Fluconazol, en 1990 y el Itraconazol en 1992.
Los triazoles se han convertido desde entonces un una mejor opción para el tratamiento de las micosis
sistémicas al presentar un mayor espectro antimicótico y menor toxicidad sobre el huésped al ser
comparado con el Cetoconazol.
Mecanismo de acción
Los azoles interfieren en la síntesis y permeabilidad de las membranas celulares fúngicas a través de la
inhibición de la esterol-14 alfa- desmetilasa (asociada al sistema del citocromo P450), una de las enzimas
que cataliza la conversión del lanosterol en ergosterol, lípido más abundante en las membranas de los
hongos. De este modo permiten la acumulación de 14 alfa metil-esteroles que modifican la disposición
interna de los componentes de la membrana, alterando así, las funciones de algunos sistemas
enzimáticos de la misma (ATPasa y enzimas del sistema de transporte de electrones), A las dosis usadas,
los azoles son fungistáticos.
Cetoconazol Es la droga patrón de los azoles aunque en la actualidad ha sido desplazada por el
Fluconazol y el Itraconazol. No hay preparados intravenosos y es tóxico en altas dosis. Al ser un fármaco
fungistático, no es útil en inmunocomprometidos.
Mecanismos de acción de los antimicóticos

TRIAZOLES
Fluconazol Oral, IV Inhibe a Lanosterol 14 Buena penetración en el SNC.

alfa desmetilasa Espectro limitado (levaduras)
dependientes del
Itraconazol Oral, IV Citocromo P450, mayor Amplio espectro, absorción
especificidad de unión a inconstante.
Voriconazol Oral, IV la enzima diana Amplio espectro, incluso levaduras y
formas miceliales.
Posaconazol, Ravuconzol En fase de investigación clinica.
ALILAMINAS
Naftifina Topica Inhibición de escualeno Terbinafina posee amplio espectro y

epoxidasa actua en forma sinergica con otros
Terbinafina Topica y oral antifungicos
ANTIMETABOLITOS
Flucitosina Oral Inhibición de la síntesis Se emplea en combinacón con
de ADN y ARN anfotericina B y fluconazol, su
toxicidad y resistencia son
problematicas
IMIDAZOLES
Ketoxonazol, bifonazol, Oral, tópica Inhibe enzimas lanosterol Ketoconazol tiene un espectro
clotrimazol, econazol, 14 alfa desmetilasa relativamente amplio y se asocia con
miconazol, tioconazol dependientes del problemas de toxicidad
citocromo P450
POLIENOS
Anfotericina B IV, tópica Se une a ergosterol y Amplio espectro, toxicidad muy

provoca daño oxidativo elevada
directo a la membrana
Anfotericina B liposomal IV Amplio espectro, menor toxicidad,
caro
Nistatina Oral y topica Formulación lisosomal en fase de
investigación
EQUINOCANDINAS
Caspofungina, IV Inhibición de la síntesis Se ha aprobado su utilización en
anidulafungina, de glucanos en la pared candidiosis invasiva y aspergilosis
micafungina celular del hongo sistemica
INHIBIDORES DE LA
SÍNTESIS DE QUITINA
Nikomicina Z IV Inhibición de síntesis de Fase de investigación clinica

quitina de la pared celular
del hongo
OTROS
Amorolfina, griseofulvina, variados variados

tolnaftato
Fuente: Murray
2. COMPETENCIA (S)
✓ Comprende las principales infecciones fúngicas que se presentan en el campo de trabajo del
profesional
✓ Identifica los fármacos antifúngicos en las principales infecciones fúngicas, que se presentan
en el campo de trabajo del profesional
 Data display
➢ Trabajo en grupos pequeños .

100 minutos
No se aplica
7. CUESTIONARIO
1- Indicar los principales mecanismos de acción de:
Fármaco Mecanismo de acción

Azoles
Nistatina
Terbinafina
Flucitosina
Anfotericina
PRÁCTICA Nº. 13
AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE HONGOS

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO PARA HONGOS
1.- CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-

Los medios de cultivo pueden ser de tres tipos: naturales, semisintéticos y sintéticos. Los naturales
están elaborados con leche, huevo, granos de cereales, levadura de cerveza, frutas y otros compuestos.
Los semisintéticos, como el Sabouraud, aportan una fuente de carbono y nitrógeno. Los sintéticos
tienen una composición química bien definida y se usan en investigación; no son de uso sistemático.
Los medios de cultivo clásicos se preparan con facilidad; los ingredientes se disuelven por separado en
agua y se mezclan en un matraz de Erlenmeyer; se calientan 15 minutos a baño María y 5 a 6 minutos
en el mechero, la solución se coloca en tubos y se procesa en autoclave a 110 °C durante 15 a 20
minutos; al sacarlos se colocan en posición inclinada para aumentar la superficie de cultivo. Cuando sea
necesario el ajuste de pH, se emplearán ácido clorhídrico (HCl) o hidróxido de sodio (NaOH). Se pueden
utilizar cajas de Petri, que deben llenarse después de esterilizar el medio.
2.- COMPETENCIAS.-
✓ Aplica la tecnica recomendada para la preparacion de los medios de cultivo
✓ Realiza un manejo adecuado de los medios preparados
3.- MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.-
1 Balanza 2 Piezas
2 Cajas Petri 15 Piezas
3 frascos Scott de 250 ml 2 Piezas
4 Probetas 5 Piezas
5 pizetas 2 Piezas
6 Espátula 3 Piezas
7 Hornilla 2 Piezas
8 Autoclave 1 Piezas
INSUMOS
Agar glucosado de Saboraud 50
1 gramos
2 Papel 5 Piezas
3 hilo 10 Metros
4 algodón 50 Gramos
5 Marcador de vidrio 5 Piezas
6 Guantes de látex 1 par
4.- TECNICA O PROCEDIMIENTO.-
Preparacion de los medios de cultivo siguiendo las instrucciones del fabricante
5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA.-

100 minutos
6. MEDICIÓN, CALCULOS Y GRAFICOS.-

No se aplica en esta práctica
7. CUESTIONARIO.-
1.- indique la clasificacion de los medios de cultivos para hongos
2. - Indique el medio adecuado para la esterilizacion de los medios de cultivo para hongos, ventajas
y desventajas
3.- Indique que antibioticos se anaden a los medios para hongos, con finalidad de inhibir el
crecimiento bacteriano
PRÁCTICA Nº. 14
SEMINARIO DE MICOSIS SUPERFICIALES, SUBCUTANEAS, CUTANEAS, SISTEMICAS,

OPORTUNISTAS
CULTIVO DE MUESTRAS PARA MICOSIS SUPERFICIALES, SISTEMICAS, OPORTUNISTAS
1.- CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO.-
Las micosis superficiales son infecciones producidas por distintos grupos de hongos patógenos para
el hombre, que invaden las estructuras queratinizadas, es decir estrato córneo, pelo, uñas y/o las
mucosas. (1,2) Están distribuidos ampliamente en la naturaleza, pueden vivir en el organismo humano
como saprofitos o parásitos. Solamente algunas especies de hongos conocidos son patógenas para el
ser humano.
Las micosis se dividen para su estudio en tres grupos: 1) superficiales; 2) subcutáneas, y 3)
profundas o sistémicas. Las formas superficiales incluyen aquellas que están limitadas a la piel, pelo,
uñas y/o las mucosas. Son infecciones muy frecuentes, la mayoría ocurre en todas las edades, algunas
son raras en niños (3,4) .
Se distinguen los siguientes tipos de micosis superficiales:
Superficiales propiamente dichas Pitiriasis versicolor
Tiña negra Piedras
Superficiales
Dermatofitosis Candidiasis
DERMATOFITOSIS
La dermatofitosis (Tiña, tinea,), es una infección superficial de la piel ocasionada por hongos
queratinofílicos que afectan estructuras que contienen queratina: piel, pelo y uñas. (2,5) .
La candidosis bucal es causada por formas de un hongo llamado cándida, un organismo que vive
en la boca y usualmente es mantenido a raya por organismos sanos que también viven allí. Sin embargo,
cuando la resistencia a la infección es baja, el hongo puede crecer, llevando a que se presenten lesiones
en la boca y en la lengua
Clasificación de las micosis:
Micosis sistémicas.
 Candidiasis sistémica oportunista
 Meningitis
 Endocarditis criptocosica
 Aspergilosis pulmonar oportunista
 Mucormicosis rinocerebral
 Blatomicosis
 Histoplasmosis
 Coccidiomicosis
 Paracoccidiomicosis
Micosis superficiales pueden clasificarse en:
 Dermatomicosis ( piel, pelo, uñas causados por dermatofitos) los mas comunes tiñas
 Candidiasis superficial (boca, vagina o piel)
Capítulo 45 JAWETZ, Ernest; MELNICK y ADELBERG. Microbiología Médica. 26va. Ed. Editorial
. COMPETENCIA (S)
✓ Identifica los hongos causantes de micosis

✓ Diferenciara las diferentes micosis
Placas de agar saboraud dextrosa xxxx
1 preparadas en anterior clase xxxx
2 Estufa de cultivo 20 a 25oC 1 piezas
3 Portaobjetos (10) 10 piezas
4 Mircroscopios 8 piezas
INSUMOS
1 Hisopos estériles 25 Piezas
2 Cubreobjetos (10) 10 Piezas
3 Hidroxido de potasio al 10 % 20 Ml
4 Gotero 5 Piezas
5 Hojas de bisturi 3 piezas
Sembrar las muestras en medio de cultivo para hongos de acuerdo a instructivo del fabricante
Observacion del crecimiento
Observacion directa al microscopio

300 minutos

No se aplica
7.- Cuestionario
En que situaciones solicita el cultivo de micosis sistemicas
Que muestras son representativas de micosis oportunistas
En caso de sospechar una micosis sistemica. Usted iniciaria el tratamiento empirico. Si o no porque?.
1. Elabore un mapa conceptual de las micosis superficiales, cutaneas.
2.- llene el siguiente cuadro de las siguientes micosis:
Agente Tipo de
Patología Tratamiento
etiologico micosis
Pie de atleta
Pitiariaisis
Tiña corporis
Tiña capis
Histoplasmosis
Onicomicosis
Esporotricosis
Criptococosis
Mucormicosis
Candidiasis oral

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GUIAS DE PRÁCTICA BASICAS CIENCIAS DE LA SALUD

Código de registro: RE-10-LAB-035 Versión 3.0

NORMAS BASICAS DE BIOSEGURIDAD

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

➢ Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.

➢ Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.

Zonas de trabajo del laboratorio:

➢ El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.

Clasificación de los residuos:

➢ Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y

➢ Desechos especiales frascos de antibióticos y sachett de medicamentos

3. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

➢ Manual de Higiene y seguridad en Microbiología.

➢ Trabajo en grupos pequeños

5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

1. Realizar un mapa conceptual sobre normas de bioseguridad.

OBTENCION DE MUESTRAS PARA DIAGNOSTICO VIROLOGICO

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO

La actividad que desarrolla el laboratorio de microbiología está orientada esencialmente al diagnóstico

INDICACIONES PREVIAS A LA RECOLECCION DE MUESTRAS.

1 Guantes 1 par par

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO

Una vez que el microorganismo ha ingresado y ha establecido el sitio primario de infección, se

USOS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICAS

Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño,

✓ Identifica las pruebas serológicas empleadas en el diagnóstico microbiológico, para la soluccion

3. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

➢ Trabajo en grupos pequeños

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO

Inhibición de la penetración en la célula huésped

3. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

Exposicion de los antivirales en grupos de trabajo de 5 estudiantes.

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

1. Investigue cual es el tratamiento para un paciente portador de VIH?

METODOS DE DIAGNOSTICO VIRICO

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

En algunas infecciones virales es posible detectar la presencia de antígenos virales previamente al

En el momento actual, la tendencia en el diagnóstico virológico consiste en emplear nuevas y más

I. METODOS DE DIAGNOSTICO VIRAL:

• Confirmar el diagnostico clinico

DIRECTOS. Demostracion de la presencia de los virus en la muestra clinica:

• Inoculacion en animales de experimentacion

INDIRECTOS. Demostracion de la presencia de anticuerpos especificos en el suero

• ELISA ( Infecciones agudas Y Infecciones cronicas )

✓ Identifica los metodos de diagnostico virologico

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

1. Mencione la utilizadad de la prueba de ELISA para el diagnostico virologico

VIRUS DEL TRACTO RESPIRATORIO

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

Virus parainfluenza (paragripal)

Virus influenza Enterovirus

Neumonía VSR Rinovirus

Adenovirus Metaneumovirus humano

✓ Identifica los virus causantes de infecciones respiratorias

3. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

Exposicion grupal de 5 estudiantes

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS