CUENTA

DIFERENCIAL DE
LEUCOCITOS
Práctica 3
Laboratorio de Inmunología
MCQ. Lizeth Jocelyn Serna Villalobos
Recuento diferencial de leucocitos
El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las
proporciones de distintas variedades de células inmunes presentes en
la sangre periférica.

Requiere realizar un frotis sanguíneo, tinción Wright, y conteo.

# Leucocitos (Neutrófilos, linfocitos, entre

Cuanti- otros)

Morfología celular
Cuali-
Organismos patógenos
Frotis sanguíneo
 • El estudio del frotis de sangre
periférica consiste en precisar e
informar las alteraciones
morfológicas de los elementos
formes de la sangre; este es un
examen sencillo, poco costoso, y
rápido.

• Un frotis de sangre o extendido

de sangre es una técnica que
consiste en la extensión de una
gota de sangre sobre la
Frotis sanguíneo superficie de un portaobjetos o
de un cubreobjetos, con el fin de
analizarla posteriormente al
microscopio.
MATERIALES
Materiales necesarios para realizar el
frotis sanguíneo:

⚫ Portaobjetos limpios, secos y sin grasa

⚫ Capilar o micropipeta

⚫ Muestra: sangre periférica

 PASOS:
1) Se pipetea una pequeña cantidad de
Técnica de extensión o frotis sanguíneo sangre.
2) Colocamos una gota, de pequeña
cantidad de sangre en un extremo del
portaobjetos.
3) Se coloca encima el portaobjetos
esmerilado con un ángulo de 30-45º.
Lo deslizamos hasta que el extremo
que contacta con el porta.
4) Movemos ligeramente, de un lado a
otro, el portaobjetos esmerilado para
que la gota de sangre se extienda
bien en su extremo.
5) Arrastramos el extremo del
portaobjetos esmerilado por la
superficie del portaobjetos horizontal
para extender la sangre en una fina
capa que conformará el frotis
sanguíneo. Debemos levantarlo antes
de llegar al final del extremo del
portaobjetos que se haya en posición
horizontal.
6) Damos por concluida la realización
del frotis sanguíneo.
Frotis sanguíneo
(Video de la técnica)
Errores comunes en
frotis sanguíneos
Características de un frotis ideal

• La cabeza ha de estar cerca de uno de

los extremos del porta.
• La cola debe estar cercana al otro
extremo del porta, pero sin llegar a él.
• El borde de la cola tiene que estar
finamente deshilachado. Ese fino
deshilachamiento recibe el nombre de
"barbas".
• Toda la extensión ha de ser fina y
homogénea.
Partes de un frotis sanguíneo ideal
Partes de un frotis sanguíneo ideal
Zona ideal de
observación
Partes de un frotis sanguíneo ideal

• Es la zona final de la
extensión.
• Es la región más fina.
• En ella se encuentra una
mayor proporción de
leucocitos grandes
(neutrófilos y monocitos).
• En su porción terminal
suelen ser más abundantes
las plaquetas, sobre todo si
son grandes.
TINCIÓN DE WRIGHT
Tinción de Wright
• La tinción de Wright es un tipo
de tinción usada en la clínica
para facilitar la diferenciación de
los tipos de células de la sangre.
• Se usa principalmente para teñir
frotis de sangre y punciones
medulares, para ser examinadas
al microscopio.
 • JAMES HOMER
WRIGHT.
• Modificación de la
tinción romanowski.
HISTORIA • Técnica patológica: un
manual práctico para el
laboratorio patológico.
TINCIÓN DE WRIGHT
• ¿De que está compuesto el
reactivo de Wright?
• Eosina Y
• Una mezcla de:
• Azul de metileno (del 50 al 75%)
• Azur B (del 10 al 25%)
¿Qué más hay
sobre la tinción
de Wright?
• Es la tinción más empleada en
frotis de sangre periférica o de
médula ósea. Está clasificada como
tinción policromática, ya que tiñe
compuestos básicos y ácidos de las
células.
Fundamento
de la técnica
¿Por qué se tiñen las células de esa
manera?

• El colorante BASICO (azul Metileno) se une

a los componentes ácidos de las células,
ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y
proteínas acidas.

• Mientas que la Eosina (colorante acido) se

une a la hemoglobina, componentes
básicos de las estructuras celulares y los
gránulos de los eosinófilos.
Y ¿Cómo se ven las células?
Materiales
• Frotis sanguíneo
• Solución Wright
• Buffer pH 6.8 a 7.2
• Pipeta Pasteur
• Cronómetro
Pasos de la
tinción de Wright
1. Cubrir frotis con la solución
Wright
2. Cronometrar 5 min
3. Agregar buffer
4. Cronometrar 5 min
5. Enjuaga con agua
Técnica de tinción de Wright
(Video)
 Microscopia
(Observación de leucocitos)

1. Dejar secar en forma

vertical.
2. Agregar aceite de
inmersión.
3. Observar al microscopio.
Resultado final
Leucocitos
Características generales de
los leucocitos
• Los glóbulos blancos también pueden
llamarse leucocitos.
• Los leucocitos son parte del sistema
inmunológico del cuerpo.
• Incluyen a:
• Neutrófilos
• Linfocitos
• Monocitos
• Eosinófilos
• Basófilos
-Leucocitosis (Nivel alto)
-Leucopenias (Nivel bajo)
Porcentajes
normales de
células inmunes
•
•
•
•
•
 LINFOCITOS
Su tamaño es de 6-10 micras

MORFOLOGÍA:
Citoplasma
Citoplasma
azulazul
claro
claro
concon
borde
borde
azulado
azulado

Núcleo redondo y grande color

violeta-azul, ocupa casi toda la
célula

Su elevación en sangre se denomina linfocitosis

Su disminución en sangre se denomina linfopenia
 PATOLOGIAS ASOCIADAS
(LINFOCITOS)

LINFOPENIA (<20%) LINFOCITOSIS (>25%)

• Infecciones avanzadas de VIH • Infecciones bacterianas crónicas
• Inmunodeficiencias • Infecciones virales
• Leucemias • Mononucleosis infecciosa
• Lupus eritematoso diseminado
• Radioterapia
• Sepsis
 MONOCITOS
Su tamaño es de 12-20 micras

MORFOLOGÍA:
Núcleo arriñonado de color
violeta-azulado

Citoplasma abundante de
color gris azulado

Su elevación en sangre se denomina Monocitosis

Su disminución en sangre se denomina Monocitopenia
PATOLOGIAS ASOCIADAS
(MONOCITOS)
MONOCITOPENIA (<3%) MONOCITOSIS (>8%)
• Cortisona • Enfermedades inflamatorias
• Medicamentos crónicas
• Infecciones virales
• Tuberculosis
 NEUTRÓFILOS
Su tamaño es de 9-14 micras

Morfología:
Citoplasma rosáceo contienen
pequeños gránulos finos color purpura

Núcleo con 2 a 5 lóbulos

Conectados por delgados puentes

Su elevación en sangre se denomina Neutrofília

Su disminución en sangre se denomina Neutropenia
PATOLOGIAS ASOCIADAS
(NEUTRÓFILOS)
NEUTROPENIA (<60%) NETROFILIA (>70%)
• Anemia aplásica • Estrés
• Alteraciones en la alimentación • Infección bacteriana
• Infecciones virales • Enfermedades inflamatorias
• Medicamentos crónicas, y reumatismos.
• Radio y quimioterapia • Leucemia
• Traumatismos
 EOSINÓFILO
Su tamaño es de 10-15 micras

MORFOLOGÍA:
Núcleo bilobulado

Citoplasma con grandes gránulos color

naranja

Su elevación en sangre se denomina Eosinofília

Su disminución en sangre se denomina Eosinopenia
PATOLOGIAS ASOCIADAS
(EOSINOFILOS)
EOSINOFILIA (>4%) EOSINOPENIA (<2%)
• Enfermedades alérgicas y
autoinmunes • Intoxicación por alcohol
• Asma bronquial • Medicamentos
• Urticaria
• Alergias alimentarias
 BASÓFILO
Su tamaño es de 8-12 micras

MORFOLOGÍA

Núcleo lobulado poco visible por

los gránulos gruesos del citoplasma

Citoplasma con grandes gránulos

densos color negro purpura

Su elevación en sangre se denomina Basofília

Su disminución en sangre se denomina Basopenia
PATOLOGIAS ASOCIADAS
(BASOFILOS)
BASOPENIA (<0.5%) BASOFILIA (>1%)
• Anafilaxia • Leucemias
• Estrés
• Hipertiroidismo
Simuladores de cuenta
diferencial de leucocitos
• Frotis de sangre virtual
Identificar cada uno de los siguientes tipos de células en el
frotis de sangre: eritrocitos neutrófilos plaquetas eosinófilos
linfocitos
http://medcell.med.yale.edu/histology/virtualSlide.php?slide
_name=CB502_Histo_0097&lab_name=blood_bone_marro
w_lab&slide_id=97

• Microscopia virtual de frotis de sangre normal vs

infecciones y enfermedades
https://students.open.ac.uk/science/biologymicroscope/mo
oc/frame.html

• Test de morfología de leucocitos

https://www.purposegames.com/game/white-blood-cell-
identification-quiz
Material de apoyo
 Repaso de células
del sistema inmune

Link de immunology wars “may your immune

system defend you”:

https://www.immunologywars.com/index.shtml

Immunology Wars es un nuevo recurso educativo destinado a describir las funciones

básicas del sistema inmunológico a través de las películas de Star Wars. Fue co-creado por
el Dr. Nigel Francis , quien ganó el premio BSI Teaching Excellence Award 2020 , junto con
sus colegas de la Facultad de Medicina de la Universidad de Swansea.
Hemograma
completo