Frotis de Sangre

DEFINICIÓN:
La preparación y tinción un frotis de sangre, es una técnica importante para cualquier
laboratorio de diagnóstico. Los frotis se utilizan para evaluar los glóbulos rojos (eritrocitos),
glóbulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombocitos). Además, los frotis de sangre
también se utilizan para detectar parásitos de la sangre tales como Babesia, Anaplasma y
Trypanosoma.
Materiales que se requieren:

 Portaobjetos limpios, preferentemente con un extremo blanco para el etiquetado

(escribir el nombre y fecha de la muestra). Los portaobjetos son a menudo bastante
sucios y deben ser limpiados antes de ser utilizados para el frotis.
 Una micropipeta o tubo capilar para colocar una gota de sangre en el portaobjetos.
 Soluciones de tinción.
Los frotis de sangre se pueden preparar inmediatamente después de la toma de la muestra
en el campo, pero los coágulos de sangre se forman muy rápidamente. Más comúnmente, la
sangre utilizada para preparar los frotis, es recolectada en un tubo que contiene el
anticoagulante EDTA (tubos con tapón de color púrpura). El frotis no necesita ser
preparado inmediatamente, pero debe ser realizado en el mismo día que se recoge la
muestra de sangre.
DESARROLLO
Preparar un frotis de sangre:

1. Mezclar con cuidado (sin agitar) la muestra de sangre contenida en el tubo antes de
preparar el frotis, Una alternativa aceptable es colocar una gota de sangre de tamaño
similar que fluya directamente de la punción de un dedo o del talón
2. Coloque una pequeña gota de sangre (1 - 2 mm de diámetro) sobre el extremo de
un portaobjetos limpio. Si la gota es demasiado grande, crea un frotis largo o grueso y, si
es demasiado pequeña, el frotis resultante es corto o delgado( Figura 1).

FIGURA 1. Frotis de sangre periférica

inaceptables.

3. Utilice un segundo portaobjetos

para distribuir la gota de sangre y
extenderla sobre la superficie:
mantenga el segundo portaobjetos
con firmeza en un ángulo de 30 - 45o
sobre la gota de sangre y mueve un
poco hacia atrás hasta tocar la gotita
de sangre, dejado que la sangre se
extienda a todo el ancho del
portaobjetos, a continuación, empuje con rapidez y suavemente hacia adelante, hasta
 el extremo opuesto para crear el frotis, extendiendo la gotita en forma constante y
uniforme para formar una película fina de sangre bien distribuida sin agujeros ni
surcos, Es importante que se tome y se extienda la totalidad de la gota de sangre(Figura 2)
(Figura 3).
4. Dejar secar.
5. Etiqueta el portaobjetos.

FIGURA 2. Frotis de sangre periférica bien

realizado.

FIGURA 3. Técnica para realizar el frotis de sangre.

periférica
TINCIÓN DE FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA
El objetivo de la tinción de frotis de sangre periférica es
identificar las células y reconocer con facilidad la
morfología a través del microscopio. La tinción de Wright
o de Wright-Giemsa es la utilizada con mayor frecuencia
para los frotis de sangre periférica y de médula ósea. Estas
tinciones contienen eosina y azul de metileno o y, en
consecuencia, se denominan tinciones policrómicas.
Las reacciones de tinción dependen del pH, y la tinción
real de los componentes celulares se produce cuando se
agrega una solución amortiguada (pH 6,4) al colorante.
El azul de metileno libre es básico y tiñe de azul los componentes celulares ácidos, como el RNA. La
eosina libre es ácida y tiñe de rojo los componentes básicos, como los gránulos eosinófilos.
Un frotis teñido de manera óptima tiene las siguientes características:
1. Los eritrocitos deben ser de color rosado a salmón.
2. Los núcleos son de color azul oscuro o violeta.
3. Los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos son de color lavanda a lila
4. Los gránulos citoplasmáticos de los basófilos son de color azul oscuro a negro.
5. Los gránulos citoplasmáticos de los eosinófilos son de color rojos a anaranjados.
6. La zona entre las células debe ser incolora, clara, limpia y sin colorante precipitado.
Los portaobjetos deben estar completamente secos antes de la tinción.