BIMI115 2024

INFORME DE PRÁCTICO 4. PROPIEDADES DE LAS PROTEÍNAS

Fecha: 2 de abril, 2024.

Nombres: Valentina Arismendi, José Huenulef

1. PROPIEDAD AMORTIGUADORA DEL pH DE LAS PROTEÍNAS

Titulaciones.

Volú menes que se titularon

- Suero completo: 0,5 ml

- Suero desproteinado: 0,5 ml

- NaCl 0,15 M: 2ml

Resultados

Volumen HCl meq reactivo HCl meq HCl

Muestra
ml utilizados
NaCl 0,15M 50 μl 10 meq 5x10-4 meq
Suero desproteinado 1,5 ml 10 meq 0,015 meq
Suero completo 3,7 ml 10 meq 0,037 meq

Ejemplo de cá lculo:
Discusión

Una vez finalizado el primer procedimiento experimental, pudimos estimar el cumplimiento del objetivo de
la actividad prá ctica n° 1, que se basaba en comprobar la capacidad amortiguadora de las proteínas del
suero sanguíneo, haciendo una comparació n entre el cloruro de sodio, suero desproteinado y suero
completo. En primera instancia logramos preparar las soluciones dispuestas a titular, utilizando una
solució n de rojo de metilo como indicador, para visualizar el cambio de pH. Al realizar cada una de las
titulaciones, pudimos determinar que el NaCl presenta una despreciable capacidad amortiguadora de pH,
ya que la solució n se tornó color rojo con una mínima cantidad de HCl. Para el suero desproteinado,
logramos observar su capacidad amortiguadora, en que fue necesario agregar 1,5 ml en la titulació n para
lograr el cambio de color del indicador. En el caso del suero completo, pudimos evidenciar su alta
capacidad amortiguadora de pH, por la presencia de una gran cantidad de proteínas, en este fue necesario
agregar un volumen mucho mayor (3,7 ml) a los anteriores para lograr que se observe el color rojo.
Esta actividad nos llevó a pensar en la importancia que tienen las proteínas, como pueden ser la albú mina y
las globulinas, en la regulació n del pH sanguíneo para lograr la homeostasis y el adecuado funcionamiento
de nuestro cuerpo.

2. DETERMINACIÓN DEL pH ISOELÉCTRICO DE LA CASEÍNA

Resultados

Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9

pH 5,97 5,67 5,45 5,15 4,75 4,45 4,15 3,85 3,55

10 min 0 0 + + +XX +X ++ 0 0

20 min 0 0 + ++ +XX +X ++ + 0

Ejemplo de cá lculo de pH:

 Valor del pI:

El valor estimado para el punto isoeléctrico corresponde a 4,75. Debido a que

este es el pH del tubo 5. Al analizar la reacció n se identificó que el tubo 5 fue el
que generó un abundante precipitado, lo que indica que solubilidad de este tubo
era mínima, por lo que se concluye que el pH de este es punto isoeléctrico.

Imagen 1: Tubo 5 con

abundante precipitado.
Discusión

Luego de concluir el segundo procedimiento experimental se constató el logro del objetivo de la actividad
n° 2, el cual consistía en determinar el punto isoeléctrico de la caseína (proteína). Previo a la sesió n
practica pudimos calcular cada uno de los pH, asociados a los 9 tubos. Estando en el laboratorio logramos
preparar las 9 soluciones con sus respectivos volú menes, utilizando el instrumento adecuado (micropipeta
o pipeta graduada segú n el caso). Luego, visualizamos la traslucidez, turbidez opalescencia o la formació n
de precipitado, transcurridos 10 minutos y 20 minutos, para así poder establecer visualmente que el punto
isoeléctrico de la caseína corresponde a 4,75.
En esta sesió n logramos determinar el poder que tiene un á cido para modificar el pH, incluso generar un
cambio observable a simple vista, esto al utilizar distintas concentraciones y/o distintos volúmenes de un
ácido, de esta manera se puede establecer el punto isoeléctrico de, por ejemplo, una proteína como la
caseína. Además logramos demostrar que el punto isoeléctrico (4,75) obtenido es muy cercano al
descrito en la literatura (4,8).