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Iván Rebolledo
Esquema General
Microscopía
Microscopía Optica
Optica Microscopía
Microscopía Electrónica
Electrónica
Deshidratación : Deshidratación :
alcoholes crecientes acetonas crecientes
xiloles INCLUSION
óxido propileno
parafina. Congelación Epon
Desparafinación :
xiloles crecientes Grueso : azul de
Hidratación : toluidina.
alcoholes decrecientes COLORACION Fino : acetato de
Hematoxilina (H) y uranilo y citrato de Pb
Eosina (E)
Deshidratación :
alcoholes crecientes Grueso : Permount.
xiloles MONTAJE
Permount.
Técnica histológica
H2O 50 70 80 95 100 X P
Técnica histológica
Se utiliza en histoquímica, en la
cual deben conservarse las enzimas
celulares sin ser alteradas o
extraídas por los líquidos fijadores
o deshidratadores. Consiste en
Cuchilla de diamante
enfriar los tejidos frescos hasta su
congelación, sumergiéndolos en 3.2. Micrótomos :
una sustancia refrigerante, como el
nitrógeno líquido. Es muy útil en Este es el nombre que reciben
los diagnósticos urgentes durante los instrumentos destinados a
una intervención quirúrgica. obtener cortes delgados del tejido.
En MO es frecuente el uso del
3. Microtomía micrótomo rotatorio, el cual
mediante una rueda con acción
Los tejidos fijados e incluídos (y manual o automática, puede
los congelados) deben someterse al moverse el bloque contra la
proceso de corte, con el fin de cuchilla o a la inversa. Otro
obtener láminas delgadas que micrótomo usado en MO es el
puedan ser observadas por micrótomo de deslizamiento, en el
transparencia con el MO ó el ME. cual se desliza la cuchilla sobre
unos rieles rebanando finamente
3.1. Cuchillas : un bloque fijo en el centro del
instrumento. Los cortes de
Para MO se utilizan cuchillas de congelación se obtienen en un
acero y para ME las de vidrio y micrótomo que mantiene tempera-
diamante. turas bajas : es el crióstato.
Técnica histológica
4. Tinción Ejemplo :
El núcleo de una célula contiene
La finalidad de la tinción o ADN cuya naturaleza química es
coloración es aumentar el contraste ácida. Los ribosomas del
de las estructuras celulares citoplasma contienen ARN cuya
mediante la adición de compuestos naturaleza química es ácida. El
coloreados que tiene propiedades colorante utilizado para teñir el
selectivas por determinadas zonas núcleo y los ribosomas posee el
del tejido. Generalmente son color en su radical básico. Al
compuestos orgánicos (azul de añadir el colorante al tejido, el
toluidina) o inorgánicos radical básico del colorante se une
(ferrocianuro de potasio) y en al radical ácido del ADN y ARN.
cuanto al origen pueden ser Así el radical ácido del ADN y ARN
naturales (hematoxilina) o atraen el radical básico del
sintéticos (eosina). colorante, por esto se dice que
estas estructuras son basófilas
4.1. Mecanismo de acción de los Cuando las propiedades de tinción
colorantes : de un colorante se localizan en un
radical ácido de su molécula, se
Cuando las propiedades de dice que el colorante es ácido y las
tinción de un colorante se localizan estructuras que lo captan se
en un radical básico de su llaman acidófilas, en este caso,
molécula, se dice que el colorante dichas estructuras poseen
radicales básicos.
Ejemplo : Ejemplo :
X X 100 95 80 70 50 H2O
Técnica histológica
Grilla o
rejilla
5. Montaje