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LABORATORIO

N° 7

ACTIVIDAD ENZIMATICA

ACTIVIDAD: EXPERIMENTAL
Como las enzimas son proteínas; los factores que
1. INTRODUCCION afectan la estructura de la proteína, también afectan
la función o actividad de las enzimas. La
Las células poseen compuestos químicos que temperatura, el pH y la concentración son algunos
controlan las reacciones que ocurren en su interior. de los factores que influyen en la actividad de las
La sustancia que controla la velocidad a la que enzimas.
ocurre una reacción química sin que la célula sufra
daño alguno ni se destruya se conoce como 2. OBJETIVOS
catalizador. Las enzimas son sustancias (proteínas)
que actúan como catalizadores en las células y Identificar en una reacción las enzimas y su
hacen posibles las reacciones que ocurren en las respectivo sustrato.
células disminuyendo la cantidad de energía de Observar la actividad de algunas enzimas en tejidos
activación que se necesita. Las enzimas también animales y vegetales.
controlan la velocidad a la que ocurre la reacción Demostrar el efecto de la temperatura, el pH y la
para que la energía se libere a una temperatura que concentración sobre la actividad de una enzima.
no haga daño al organismo. Las miles de Demostrar la forma en que una enzima es específica
reacciones que constituyen el metabolismo de los para cierto sustrato.
seres vivos están bajo control de miles de enzimas.
Diferentes enzimas controlan diferentes reacciones. 3. MATERIALES
La sustancia sobre la cual actúa una enzima se
llama Sustrato. Al ocurrir una reacción el sustrato Laboratorio:
se convierte en uno o más productos nuevos. Beakers, tubos de ensayo pequeño, baño maria,
gradilla, vidrio de reloj, cajas petri, pinzas para
E + S ======== ES ------------- E + P tubos de ensayo, cuchilla o bisturí, papel
Las enzimas no se consumen en las reacciones y se absorbente, estufa, termómetro, probetas, pipetas,
pueden volver a utilizar. Sin embargo una enzima cinta para rotular, pitillos plástico, varias jeringas
particular actúa solo sobre un sustrato específico, (1 y 10ml), balanzas analítica, cucharas
así que una enzima solo puede controlar un tipo de desechables, mortero, algodón.
reacción específica.
Una enzima recibe el nombre del sustrato sobre el Reactivos y Soluciones:
cual actúa; Ej. Anhidrasa carbónica, la cual actúa Solución de almidón, solución de lugol, solución de
en la conversión del CO2 en HCO3. Como nota, a peróxidos de hidrogeno al 6%, agua destilada,
una parte del nombre del sustrato sobre el cual actúa agua en bolsa, hielo, cloruro férrico (en cristales).
la enzima se le añade el sufijo asa. Ácido acético, Hidróxido de sodio o amoniaco,
anticoagulante 8citrato de sodio), Benedict, MnO 2.
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Biológico: ________________________________________
Saliva, un pedazo de hígado, un pedazo de riñón, ________________________________________
papa, zanahorias, remolacha, sangre fresca, ________________________________________
levadura.
B. Efecto de la temperatura sobre la velocidad
4. PROCEDIMIENTO enzimática

Para el extracto de hígado; previamente el Rotule y prepare tres tubos de ensayos


estudiante debe tomar un pedazo de hígado en buen de la siguiente forma:
estado y macerarlo en un mortero con agua
Número ml de Temperatura °C Volumen de
destilada. del tubo Extracto de peróxido de
Luego filtre con un pedazo de tela o algodón y hígado hidrógeno
conserve el filtrado para la práctica. 1 2.0 Baños con hielo 2 ml
2 2.0 Tempera 2 ml
Para la siguiente práctica utilice tubos de ensayos ambiente
grandes. Las muestras de la solución de peroxido 3 2.0 Agua hirviendo 2 ml
de hidrogeno se deben tener por separados en tubos Espere que el material que este dentro de los tubos
de ensayos antes de agregar la muestra del extracto tenga la misma temperatura que la de los
de hígado en los respectivos tubos de ensayos. Esto respectivos baños; luego agite y proceda agregar al
con el fin de que las soluciones de peroxido sean mismo tiempo 2 ml de peróxido de hidrogeno a
agregadas al mismo tiempo en cada uno de los cada uno de los tubos.
tubos que contengan la muestra. Describa todo lo que observa y su explicación.
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A. Efecto del volumen (enzima- sustrato) ________________________________________
con relación a la velocidad enzimática. ________________________________________
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Rotule y prepare 5 tubos de ensayos de ¿Cómo afecta la temperatura la velocidad de una


la siguiente forma: reacción enzimática?
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Número del Mililitros (ml) de Volumen de
tubo extracto de peróxido de
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hígado hidrógeno ________________________________________
1 1.0 0 ml ________________________________________
2 1.0 1 ml
3 1.0 2 ml
4 1.0 4 ml C. Efecto del pH sobre la velocidad
5 1.0 6 ml enzimática

Agite cada uno de los tubos, agregue al mismo Rotule y prepare tres tubos de ensayos de la
instante las siguientes cantidades de peróxido de siguiente forma:
hidrogeno:
Al tubo No 1. 0 ml; al tubo No. 2. 1 ml; al tubo No. Tubo ml de Extracto pH ml de
Nº de hígado peróxido
3. 2 ml; al tubo No. 4. 4 ml, al tubo No. 5. 6 ml;
1 2 Ác. acético (5.0 2 ml
Describa detalladamente todo lo que observa y su gotas)
explicación. 2 2 Neutro 2 ml
________________________________________ 3 2 Amoniaco (5.0 2 ml
________________________________________ gotas)
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________________________________________ Agite cada uno de los tubos y agregue al mismo
instante 2 ml de peróxido de hidrogeno en cada uno
Cómo afecta la cantidad de sustrato la actividad de ellos.
enzimática?
Describa todo lo que observa y su posterior
explicación.
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¿Cómo afecta el pH la velocidad de una reacción


enzimática?
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5. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Para los procedimientos realizados identifique la


enzima y los respectivos sustratos.
2. ¿Cómo explicaría usted el burbujeo que se
produce al aplicar peróxido de hidrogeno (H202) a
una herida; Cuál es el propósito de este
procedimiento?
3. Realice una breve descripción de la forma en que
se puede inhibir la actividad de una enzima.
4. Está usted de acuerdo con la interacción enzima
– sustrato es análoga a lo de una cerradura y su
llave. Explique su respuesta.
5. Desde el punto de vista enzimático; cómo una
fiebre alta puede afectar su actividad? Explique.
6. A qué se debe que una enzima actúe mejor a un
determinado pH y sea inactiva a otro?. Explique

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