de MEGACARIOCITO a PLAQUETA

DRA. ESTEFANIA PERAGALLO

HEMATOLOGÍA CLÍNICA
Cambios en la hematopoyesis con la edad
• Los megacariocitos en la sangre del cordón son poco poliploides (2n - 4n).
Baja capacidad de responder a situaciones de estrés.
• Implicancias:

• Menos capacidad de producción de plaquetas. Trombocitopenia en neonatos.

• Frecuencia de trombocitopenias en UTI neonatal, ante situaciones graves de
infecciones o sepsis.
• Situaciones clínicas en TAR (trombocitopenia y ausencia de radio),
mieloproliferativos trascendentes de 5q, Síndrome de Down, etc.
• En casos donde hay trombocitopenias estas suelen mejorar con la edad,
porque los megacariocitos son poliploides. (entre los 2 y 4 años)
• El megacariocito va migrar desde el nicho osteoblástico hacia el nicho vascular,
desde ahí emite las prolongaciones dentro de la circulación.
• Este proceso está regulado por factores quimiotácticos (VDFG1) que es el que
hace que el megacariocito sea reclutado al nicho vascular.
• PROPLAQUETAS: son finas prolongaciones que
tienen engrosamientos sistemáticos, hasta
llegar a uno final que se denomina tips.
• El TIP va a ser la primera plaqueta naciente. En
cada uno de estos engrosamientos se encuentra
todo el contenido plaquetario (gránulos,
mitocondrias).
• Los MICROTÚBULOS que estaban ocupados en
formar los husos durante la endomitosis, pasan
a formar una banda marginal alrededor de la
membrana, ejerciendo una fuerza protrusiva
que va hacer prolongar las proplaquetas.
También intervienen filamentos de actina y
miosina (doblan y ramifican a los microtúbulos).
• Este anillo de microtúbulos se va ver en las
plaquetas formando parte del anillo de tubulina
que le da la forma discoide.
Factores que intervienen en estos procesos:
maduración y producción de plaquetas
• Es la hormona o citoquina más
importante para la producción de
megacariocitos y de plaquetas.
• Esta actúa a través de su receptor
MLP que poseen todas las STEM
CELLS.
• También hay otras citoquinas que
pueden colaborar
Durante el período de
maduración y poliploidización
hay distintos factores de
transcripción que van a
comandar todo el proceso que va
sufrir el megacariocito y la
expresión de sus proteínas.

El FLIP1 y RUNX1 son

específicos del linaje
megacariocíticos.
• El RUNX1 downregula la cadena pesada de la miosina 10 que interviene en el
estrangulamiento de las dos células durante la mitosis. Por eso la célula no se
divide.
• IL-6 es importante porque promueve la proliferación y está aumentada en
procesos infecciosos.
• Después en la fase final ya para reorganizar el citoesqueleto y producir
plaquetas hay un factor que es el NF2 que aumenta la producción de
tubulina. Tambien son otros los factores que intervienen, en particular el
SPD1 que es una quimioquina que hace migrar al megacariocito.
• Hay otros factores que modulan la proliferación como la EPO, stem cell grow
factor y la IL-3
 Reguladores Negativos
• Hay reguladores negativos de este proceso, que son proteínas que están en
los gránulos de las plaquetas.
• Hacen un efecto de feed back negativo.
• El megacariocito una vez que produce las plaquetas va haber liberación de
TGF beta, TSP-1 y FP4, estos inhiben gradualmente la producción de
plaquetas.
• El interferón alfa es inhibidor de la megacariopoyesis.
Regulación de los niveles de TPO
• La TPO se produce principalmente en el
hígado y en el riñón.
• Una vez que sale a la circulación se va
encontrar con las plaquetas donde se
encuentra su receptor (MPL) va a secuestrar
la TPO circulante.
• Si hay muchas plaquetas, la TPO va a bajar
impactando a nivel de médula ósea.
• Si hay pocas plaquetas no va haber tanto
MLP, por lo que va haber mucha TPO
circulando que a nivel de médula ósea va
ejercer acción sobre los megacariocitos para
producir más plaquetas.
• Existe una síntesis inflamatoria inducible de
TPO por IL-6. El hígado responde
produciendo más TPO. (trombocitosis
reactiva)
• Hay producción de TPO a nivel medular
(estroma) inducible por PDGF (está en los
gránulos de MK plaquetas).
TPO TPO N o leve
Trombocitopenia por déficit de producción
Disminución de megacariocitos
• Aplasia o hipoplasia medular
• Trombocitopenia amegacariocítica adquirida o congénita
Alteración en la megacariocitopoyesis (MK displásicos)
• Mielodisplasia
• TH secundario a mutaciones de factores de transcripción MK
Alteración en la trombopoyesis (MK de aspecto normal)
• Trombocitopenias hereditarias secundarias a defectos del citoesqueleto o GPIb
• Alteración en la trombopoyesis + destrucción periférica
Actúan en dos lugares distintos del
receptor
• Eltrombopag (transmembrana)
• Ambos activan toda la
señalización. No se utilizan sólo en
PTI se usan en algunas
trombocitopenias hereditarias.
Conclusiones
• La poliploidización y la formación del DMS son adaptaciones que convierten al MK en un
eficiente producción de plaquetas.
• Los factores de transcripción involucrados en la maduración del MK inducen la expresión
de proteínas específicas del linaje y proteínas involucradas en los cambios del
citoesqueleto.
• El citoesqueleto es esencial en la maduración, la migración del MK y la formación de
procesos proplaquetarios.
• La TPO es la principal estimulante de la megacariocitopoyesis y su nivel plasmático se
regula por la presencia de MPL en las plaquetas, la producción hepática constitutiva e
inducible por IL-6 o la endocitosis de plaquetas desialiladas.
• Las plaquetas senescentes son eliminadas de circulación por el bazo y el hígado, luego de
la inducción de apoptosis o desialinización, respectivamente.
 Hemostasia
Conjunto de mecanismos fisiológicos que aseguran el mantenimiento de la
integridad del sistema vascular frente a la injuria.
• Involucra:
• Proteínas de la coagulación (proteínas plasmáticas solubles, Ej FvW)
• Plaquetas (elementos formes en suspensión)
• Endotelio vascular (superficie que limita la vasculatura)
Es un proceso dinámico, localizado en el sitio de injuria, gracias al balance
entre mecanismos de activación en inactivación que actúan de manera
coordinada.
Sistema CIRCULATORIO
PLAQUETAS
• Pequeñas células nucleadas (diámetro 2um, volumen 8-10 fl)
• Concentración promedio en sangre 150-400/450 mil
• Derivan de la fragmentación de los megacariocitos de MO
• La integridad funcional del endotelio asegura el estado de reposo gracias a
la producción de PGI2 y ON.
 ESTRUCTURA
Si uno hace un corte de la plaqueta en reposo,
lo que va ver es la estructura interna donde se
ve un área que es proceso de invaginación de la
membrana que da origen al sistema canalicular
conectado a superficie.
• Cuentan con un sistema de energía formado
por las mitocondrias y glucógeno.
• Sosteniendo esa estructura en reposo están
los microtúbulos que son los sostienen la
estructura discoidea de la plaqueta en
reposo.
• Tiene dos tipos de gránulos:
• Gránulos densos (se llaman así por aspecto
opaco en ME)
• Gránulos alfa: gránulos proteicos
CITOESQUELETO
GRANULOS PLAQUETARIOS
Gránulos Alfa: gránulos proteicos, hay entre 50-80
gránulos por plaqueta. Existe una organización de la
distribución de las proteínas dentro del gránulo.
• Contiene:
• Proteínas de la coagulación: plasmáticas o sintetizadas
por el MK (FVW)
• Proteínas propias (factor plaquetario 4, trombomodulina)
• Factores de crecimiento que intervienen en la reparación
del vaso dañado. Existen algunos gránulos que contienen
factores de crecimiento pro angiogénicos y otros factores
anti-angiogénicos.
Gránulos densos: contienen fundamentalmente ATP, ADP,
serotonina, calcio y polifosfatos
Enzimas hidrolíticas: permiten a través de la hidrólisis de
las fibras de colágeno sostener la activación adicional y
también intervienen en los procesos de neovascularización
 Contribuyendo al proceso de amplificación de
la señal.
Los gránulos que están rodeados por
membrana, contienen en la superficie de dicha
membrana algunos complejos proteicos que
son característicos.

Las alteraciones en estos mecanismos generan plaquetas

menos eficientes, esto se puede detectar con el
lumiagregómetro por una disminución de la respuesta de las
plaquetas en el proceso de degranulación.
Complejo Ib-IX-V
• Existen alrededor de 20.000 copias por
plaquetas.
• Es el receptor de FVW
• También se une a la trombina
• Está conectado al citoesqueleto, eso cobra
importancia al momento de la activación ya
que este complejo puede emitir una señal
mecánica hacia la estructura intracelular.
Complejo IIb-IIIa
• Glicoproteína más abundante hay
alrededor de 80 mil copias.
• Heterodímero formado por: unidad IIb y
unidad IIIa. La interacción entre estas dos
moléculas está mediada por puentes de
calcio.
• No está anclada, flota sobre la membrana.
• Permite la interacción plaqueta-plaqueta.
Receptores de 7 dominios transmembrana,
acoplados a proteína G:
• Receptor de tromboxano
• Receptores de trombina
• Receptores de ADP
• Receptor de prostanglandina A2 (inhibidor)
Se llaman 7 dominios por sus características morfológicas, en la porción
citoplasmática del receptor están unidos a una porción regulatoria beta y gamma del
complejo de proteína G.
Cuando el respectivo ligando le entrega GTP (Nucleotido Guanosin Trifosfato) a la
subunidad regulatoria de la proteína G, esa proteína G se separa y se transforman en
efectores de la cascada de señalización que va a continuación:
• 1. fosfolipasa beta
• 2. movilización de calcio
• 3. activación de fosfoinositido-3-kinasa.
 Receptores de ADP

• P2Y1: Alta afinidad

• P2Y12: baja afinidad (coordina y
perpetúa la actividad de la GP IIb-IIIa).
• Se usan en la terapia antiagregante.
Receptores de trombina

• Tienen el mismo sitio de unión transmembrana.

• Para que la trombina active al receptor es necesario que ejerza su efecto
proteolítico (que esté activa). La trombina hidroliza el segmento N-terminal del
receptor PAR1 o PAR4, al dejar libre una porción N-terminal, está va activar al
receptor.
• PAR1 produce una activación rápida de la plaqueta, y PAR4 tiene una cinética más
demorada.
• La plaqueta tiene un rol central en la hemostasia primaria.
• Actualmente también se la relaciona en procesos inflamatorios, oncogénesis.

Cual es el rol de la plaqueta en procesos inflamatorios?

En el proceso inflamatorio a nivel de la microvasculatura hay aumento de la
permeabilidad capilar. Eso hace que haya huecos a nivel de la pared del endotelio
pueden permitir la extravasación.