UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA”

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

Mg. M. V. Z. Agustín Guerrero Canelo

Agustin.guerrero@unica.edu.pe
Laboratorio de Biología
Ciclo celular
Ciclo celular
 REGULACION Y CONTROL DEL Ciclo celular

• Leland Hartwell, Paul Nurse, Tim Hunt: mecanismos bioquímicos y

moleculares que regulan y controlan cada fase del ciclo celular.

Premio Nobel: Fisiología

• Hartwell (1960): “puntos de control” genéticos para ciclo celular:

- Detección.

- Activación .
 REGULACION DEL Ciclo celular
Activadores:

• Ciclinas

• Cinasas dependientes de ciclina

Inhibidores de cinasas dependiente de ciclinas (CDKs):

• INK4 (p16, p15, p18 y p19)

• KIP (p21/WAF1, p27/KIP1 y p57)

• Otra forma de control: degradación de la ligasa de ubiquitina.

 REGULACION Y CONTROL DEL Ciclo celular
Sepsis (sistema inmunitario responde a una infección, lesionando
sus propios tejidos y órganos):

• Activación del estrés oxidativo con producción de especies reactivas

del oxigeno (ROS) o prooxidantes

• Lesión del ADN de la célula.

Ciclo celular:

• Detección para reparar el ADN.

• Activación (cuando ADN es reparado).

Fuentes de especies reactivas del oxígeno (ROS)

• Metabolismo aeróbico fisiológico normal.

• Cadena de transporte de electrones de la mitocondria

• Cadena de transporte de electrones (microsomal y cloroplastos).

• Peroxisomas

• NADPH oxidasa

• Óxido nítrico sintetasa desacoplada

• Sistema del citocromo P450

Oxígeno singlete (1O2)

Radical hidroxilo (HO)+

 principales especies reactivas del
oxígeno (ros) o sustancias prooxidantes
• Radical hidroxilo (HO)+

• Peróxido de hidrógeno (H2O2)

• Anión superóxido (O-2)

• Oxígeno singlete (1O2)

• Oxígeno nítrico (NO)

• Peróxido (ROO)

• Semiquinona (Q)

• Ozono (O3)
 Función fisiológica de los RADICALES LIBRES
Bajas concentraciones:

• Defensa contra agentes infecciosos (fagocitosis)

• Favorecen la síntesis (colágeno y prostaglandinas)

• Activan enzimas de la membrana celular

• Disminuyen la síntesis de catecolaminas por (glándulas suprarrenales)

• Modifican la biomembrana y favorecen la quimiotaxis.

• Señalización celular (H2O2, moléculas mensajeras por medio de la

modificación oxidativa de proteínas de señalización)

• Inducción de la respuesta mitogénica

 ROS
• Son pequeñas moléculas ubicuitarias y difusibles.

• Estructura atómica con 1 electrón desapareado o impar (orbital externo)

• Muy reactivos. Vida media corta. Actúan cercano al sitio en que se forman.

• Reacción oxidación (interacción biomoléculas), produce daño celular (oxidativo).

 SISTEMAS DE DEFENSA ANTIOXIDANTE
• Retrasan o previenen la oxidación del sustrato oxidable.

• Sustrato oxidable: proteínas, lípidos, hidratos de carbono y ADN.

• Interactúa mas rápido con radicales libres de oxigeno y ROS.

• Impiden que moléculas de microambiente (membrana plasmática,

citosol, núcleo o líquido extracelular) se unan al oxígeno.
Clasificación de los antioxidantes según el sitio donde
ejercen su acción

Intracelular Membrana Extracelular

Superóxido dismutasa Vitamina E Ceruloplasmina
Catalasa Betacarotenos Transferinas
Peroxidasa Ubiquinol-10 Lactoferinas
DT-deafarasa Albúminas
GSH Haptoglobinas
Proteínas que ligan metales Vitamina C
Sistemas proteolíticos Ácido úrico
Vitamina C Vitamina E
 Clasificación de los antioxidantes, según origen
Origen Acciones
1. Exógenos
Vitamina E - Neutraliza el oxígeno singlete
- Captura radicales libres hidroxilo
- Captura O2
- Neutraliza peróxidos
Vitamina C - Neutraliza el oxígeno singlete
- Captura radicales libres de hidroxilo
- Captura O2
- Regenera la forma oxidada de la vitamina E
Betacarotenos Neutraliza el oxígeno singlete
Flavonoides
Licopenos
 Clasificación de los antioxidantes, según origen
Origen Acciones
2. Endógenos
a) Enzimáticos Cofactor
Superóxido dismutasa (SOD) Cobre, sodio, manganeso
Catalasa (CAT) Hierro
Glutatión peroxidasa (GPx) Selenio
b) No enzimáticos
Glutatión Barreras fisiológicas que enfrenta el oxígeno a su
Coenzima Q paso desde el aire hasta las células
Ácido Tioctico Transportadores de metales (transferrina y
ceruloplasmina)
 estrés oxidativo
• Desequilibrio: prooxidantes y antioxidantes

• Déficit de antioxidantes. • Incremento exagerado de la producción de ROS

 EFECTOS DE LOS RADICALES LIBRES
a) Lípidos (peroxidación lipídica o enranciamiento): afecta a
estructuras ricas en ácidos grasos poliinsaturados, y altera la
permeabilidad de la membrana celular produciéndose edema y
muerte celular.

Tenemos:

• Oxígeno

• Oxígeno singlete

• Peróxido de hidrógeno

• Radical hidroxilo.
 EFECTOS DE LOS RADICALES LIBRES
b) Proteínas:

• Oxidación (fenilalanina, tirosina, histidina y metionina).

• Entrecruzamientos de cadenas peptídicas.

• Formación de grupos carbonilos.

c) Ácido desoxirribonucleico (ADN):

• Mutaciones y carcinogénesis: alteración (inactivación/pérdida de

algunos genes supresores de tumores).

• Genes supresores de tumores pueden ser modificados por un

simple cambio en una base crítica de la secuencia del ADN.
 EFECTOS DE LOS RADICALES LIBRES
c) Ácido desoxirribonucleico (ADN):

• Pérdida de expresión o síntesis de una proteína (daño de un gen).

• Modificaciones oxidativas de las bases.

• Delecciones.

• Fragmentaciones.

• Interacciones estables ADN – proteínas.

• Reordenamientos cromosómicos.

• Desmetilación de citosinas del ADN que activan genes.

 Hartwell (1960): PUnTOS DE CONTROL
• Asegura la calidad genética de células hijas resultantes (ciclo celular).

• Identifica el gen CD28 que lo denominó “start” (inicio del ciclo).

Paul Nurse (1970): Descubre gen cdc2 (era el mismo gen CD28)

• Codifica: proteinquinasas o cinasas dependientes de ciclinas (CDKs)

• CDKs: Motores que inician o detienen distintas fases (ciclo celular).

• Tim Hunt (1980): ciclinas regula la actividad de las CDKs.

variaciones cíclicas durante el ciclo celular.

 Reguladores del ciclo celular (MITOSIS)
• Contenido genético óptimo (células resultantes autosuficientes).

• Puntos de control reguladas (síntesis y degradación: ciclo celular)

- Ciclinas. 10 distribuidas en cuatro diferentes clases: ciclinas A, B, D, E.

- Cinasas dependientes de ciclina (CDKs). 3 CDKs de interfase (CDK2, CDK4 y

CDK6), y 1 CDK de mitosis (CDK1 “proteína 2 de control de división celular” CDC2)
Ciclina E

Ciclina D Ciclina A Ciclina B

Concentración
 Reguladores del ciclo celular (MITOSIS)
Mecanismo de acción:
Síntesis de Ciclina
Ciclina

Ciclina CDK (célula) Siguiente fase:

activada por ciclina se separa de
CDK inactiva CDK y es destruida
ciclina

CDK activa CDK inactiva

Proteína diana
CDK realiza cambios
fosforila en la célula, que
Proteína
proteína pasa así a la
diana inactiva Proteína
diana siguiente fase
activándola diana activa
 PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
1. Punto de control G1/S (objetivo):

• CDKs 4 y 6 fosforilen la proteína de retinoblastoma (pRb) para que

libere al factor de transcripción E2 (E2F) y estimule la producción de

la CDK 2 y la ciclina E, que son necesarias para la fase S

• Errores: INK4 (p16) y la CIP (p27) inhiben a las CDKs y ciclinas

impidiendo la fosforilación del Rb, bloqueando de esta forma que la

célula avance a la fase S.

 PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
2. Punto de control G2/M: CDK 2 y ciclina E (activadas en el punto de

restricción G1/S), que activan al Rb favoreciendo que E2F inicie síntesis de ADN.

• Errores: factor de transcripción p53 y CIP (p21), bloquean (CDK 2 y ciclina E),

deteniendo la replicación del ADN.

3. Punto de control M: CDK 1 y ciclina A y B:

• Induce el ensamblaje del huso mitótico

• Verifica que cromosomas se ajusten a éste y condensación del material genético.

• Errores: p53 y la p21 inhiben el complejo CDK 1 – ciclina A y B.

 PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR
Proteínas que
inhiben el
progreso

C
CDK4 E2F CDK2 A
Proteínas que
CDK1
permiten en E2F C C
el progreso CDK6 pRb
E B

Proteínas de Puntos de Puntos de

restricción control 1 control 2
 Proteínas p 53 y retinoblastoma (p53 y pRb)
P53 (guardián del genoma): Preserva estructura y función del ADN.

Supresor tumoral (daño ADN):

• Detiene el ciclo G1/S para reparar y evitar acumulación de mutaciones.

• Induce a la célula la apoptosis en caso de daño severo.

 Proteínas p 53 y retinoblastoma (p53 y pRb)
• pRb: transforma tumores hacia la malignidad

• Estado inactivo se liga al factor E2F, y cuando se fosforila libera al

factor E2F, permitiendo la trascripción de genes críticos para la

progresión de células de la fase G1 a la fase S de la interfase.

• Como es lógico pensar la inhibición de la fosforilación de la pRb

bloquea la progresión del ciclo celular.

Fosforilación de pRb por el complejo ciclina D/CDK4/6 libera los factores de transcripción
(E2F) para activar la transcripción de genes y permitir la progresión del ciclo celular. pRb
sufre sucesivas fosforilaciones a lo largo del ciclo celular.