UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA

UNIDAD ACADÉMICA DE SALUD Y BIENESTAR

CARRERA DE BIOFARMACIA / BIOQUÍMICA Y FARMACIA

PRESENCIA DE LEVADURAS POTENCIALMENTE PATÓGENAS

Tema: EN AMBIENTES EXTREMOS DOMÉSTICOS DEL ORIENTE
ECUATORIANO

Protocolo del trabajo de investigación, previo la obtención del título de

Químico/a Farmaceuta

Autor: García Marín Andrés Nicolás.

Lazo Alvarado Julio Humberto.

Director: Lic. Luis Andrés Yarzábal Rodríguez, PhD.

Co-directora: Lic. Lenys Buela Salazar, Mgs.

Cuenca – Ecuador

2022
A. DATOS GENERALES

LÍNEA – SUBLÍNEA DE INVESTIGACIÓN

Línea institucional: Salud y Bienestar por Ciclos de Vida.

Línea de la carrera: Atención Integral a la Salud de la Familia.

Sublínea: Microbiología, Inmunología, Biología Molecular y Biotecnología.

Mecanismo patogenéticos de enfermedades crónicas transmisibles y no transmisibles.

B. RESUMEN EJECUTIVO (150 a 200 PALABRAS)

Realizar una síntesis clara y concisa sobre el proyecto, considerando antecedentes sobre la
temática abordada, la justificación de la investigación que se propone, los objetivos del
proyecto, la metodología que se utilizará.

C. DESCRIPCIÓN

DEFINICIÓN DE LA PROBLEMÁTICA

Los ambientes domésticos considerados “extremos” son reservorios de microorganismos de

todo tipo, incluyendo especies patógenas o totalmente inocuas. Entre estos ambientes, se
encuentran aquellos que presentan temperaturas muy elevadas o muy bajas (lavaplatos,
refrigeradores), presencia de detergentes o compuestos antimicrobianos tóxicos (lavadoras),
períodos intermitentes de humedad-deshidratación (cocinas y baños), etc. A nivel de
Latinoamérica no se ha estudiado de manera significativa este tipo de ambientes
domésticos, en relación con su función como reservorios de microorganismos extremófilos,
es decir, capaces de multiplicarse bajo condiciones consideradas “extremas” para otros
seres vivos. Esto es particularmente relevante en el caso de hongos levaduriformes, muchos
de los cuales se comportan como patógenos oportunistas. Por lo tanto, resulta interesante
abordar este tema y definir el grado del riesgo al cual se enfrentan las personas dentro de
sus propios hogares.
A través del presente estudio, abordaremos esta problemática bajo dos ámbitos de interés: el
primero de ellos, el problema “de salud”, está relacionado con la presencia de
microorganismos potencialmente patógenos para el ser humano en hogares de clase media;
el segundo, que denominamos el “problema científico” se relaciona con la falta de
información y conocimiento acerca de estos microorganismos en estos ambientes.

Tomando en cuenta la ausencia de trabajos relacionados con esta temática en el sub-

continente, partimos de la información relacionada con esta problemática surgida de
estudios similares en países europeos. Pretendemos generar información inédita para
nuestra región.

JUSTIFICACIÓN

La información recopilada de esta investigación es importante dentro del ámbito científico,

sobre todo a nivel del continente Sudamericano, ya que existen pocos estudios relacionados
con la presencia de levaduras (entre las cuales pueden presentarse especies patógenas y
oportunistas) en ambientes extremos a nivel doméstico. Esto es aún más relevante en la
zona del Oriente Ecuatoriano, en la que hasta la fecha no se ha realizado ningún estudio de
este tipo. Debido a la poca información existente, se desconoce el riesgo que representa la
presencia de estos patógenos oportunistas, en este tipo de ambientes; a consecuencia de esta
falta de información, tampoco se han propuesto estrategias o protocolos a seguir para evitar
la propagación de estos microbios en estos ambientes, con los que interactuamos
diariamente de manera totalmente desprevenida.

Con esta investigación aspiramos a generar conocimiento nuevo acerca de levaduras

patógenas oportunistas en ambientes extremos domésticos en el Oriente Ecuatoriano. La
noción acerca de la variedad de especies de levaduras en un ambiente húmedo, como el que
se presenta en las cocinas, determinará el grado de peligro al cual están expuestas las
personas diariamente. Esto podría permitirnos plantear posibles medidas para evitar la
propagación de estos microorganismos en el entorno.

Los principales beneficiarios de este proyecto de investigación seremos los estudiantes de

Bioquímica y Farmacia, quienes podremos cumplir con uno de los requisitos exigidos para

1
culminar nuestros estudios universitarios. De esta manera, contribuiremos a cumplir con
una de las misiones de la Universidad Católica de Cuenca, es decir, generar conocimiento a
través de la investigación científica. Esto, además, será útil para futuros investigadores,
debido a que tendrán mayor información acerca de las levaduras patógenas oportunistas en
ambientes extremos domésticos de las zonas periféricas del Amazonas.

Otros beneficiarios del proyecto de investigación son los pobladores de la región en la que
se llevará a cabo, puesto que con la información generada podrán tomarse medidas que
eviten posibles infecciones.

OBJETIVOS

General

● Conocer la diversidad de levaduras cultivables que están presentes en ambientes

domésticos de la región amazónica de Ecuador.

Específicos

● Aislar levaduras a partir de muestras colectadas en ambientes domésticos

extremos de la región amazónica del Ecuador.

● Caracterizar desde un punto de vista morfológico, bioquímico y fisiológico a los

aislados de levaduras obtenidos a partir de dichos ambientes.

● Determinar la expresión de factores de virulencia por parte de los aislados de

levaduras obtenidas a partir de ambientes domésticos de la región amazónica del
Ecuador.

● Identificar mediante métodos moleculares las especies a las cuales pertenecen

dichas levaduras.

PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN

Preguntas científicas

● ¿Se encuentran presentes levaduras potencialmente patógenas en ambientes

2
 domésticos extremos de la región amazónica del Ecuador?

● ¿Qué tipo de especies de levaduras están presentes en dichos ambientes?

● En caso de estar presentes, ¿cuáles son las características generales de estas

levaduras?

● ¿Cuáles son las características de virulencia particulares de este tipo de levaduras?

ANTECEDENTES

Para nadie es un secreto que gran parte de nuestro tiempo la pasamos en el interior de
nuestros hogares, en espacios como la cocina –en general- y el lavaplatos –en particular-,
participando en procesos de limpieza y desinfección. Como hemos dicho, es allí donde
podríamos entrar en contacto íntimo con diferentes microorganismos patógenos, los cuales
podrían causarnos algún tipo de infección. Como antecedentes directos del presente
proyecto de investigación, podemos mencionar los siguientes:

En un estudio realizado en Australia por Zalar y sus colaboradores, se determinó que los
lavaplatos son ambientes ideales para el desarrollo de especies microbianas patógenas. Esto
se debe a que, con frecuencia, estos ambientes presentan un pH alcalino, húmedad
constante y altas temperaturas, factores ambientales que determinan a que especies como
Exophiala dermatitidis y Exophiala phaeomuriformis, se presenten bajo la forma de
ecotipos de células muriformes, fuertemente melanizadas . Estas características les
permiten sobrevivir en nuestros hogares, pero también y provocar enfermedades sistémicas
en los seres humanos, llegando a colonizar los pulmones de pacientes inmunodeprimidos
(5).

En un trabajo similar, Kulesza y sus colaboradores identificaron la presencia, en ambientes

domésticos, de levaduras poli-extremo-tolerantes, oligotróficas con mayor presencia de
Exophiala dermatitidis y Exophiala phaeomuriformis. Estas especies se adaptan a factores
de estrés, y son más tolerantes a condiciones adversas debido a la formación de
biopelículas, estructuras protectoras. La capacidad de formar biopelículas aumenta su grado
de virulencia, asumiendo un papel relevante en procesos de infección.

Un grupo de investigadores dirigido por la Dra. Nina Gunde, pionera en este tipo de

3
estudios, detectó la presencia de diversos géneros fúngicos como Candida, Cryptococcus y
Rhodotorula a nivel de lavaplatos manuales. Este estudio demostró cómo las condiciones
específicas de los lavaplatos pueden influir en la abundancia de grupos microbianos.
Además, se determinó que la frecuencia de uso y la dureza del agua del grifo utilizada en
los lavaplatos afectan la estructura y composición de las comunidades fúngicas que allí
residen. La prevalencia de Candida spp. fue la más alta y se cree que especies
pertenecientes a este género se encuentran entre los colonizadores primarios en lavaplatos
recién comprados (7).

Cabe resaltar que, en una investigación realizada en la ciudad subtropical de Mersin,

Turquía, se analizó en el año 2013 la presencia de hongos negros y filamentosos en
ambientes húmedos. Se tomaron 893 muestras de: lavavajillas, lavadoras, frigoríficos,
bañeras, paredes del baño y cabezales de ducha en 177 viviendas privadas. De ellas, 30
muestras resultaron positivas para hongos. Entre los hongos identificados, Exophiala
dermatitidis fue la especie más común, seguida de Exophiala phaeomuriformis,
Magnusiomyces capitatus y Candida parapsilosis. Los autores resaltan que estos
microorganismos son patógenos de los seres humanos (8).

MARCO TEÓRICO

Los microorganismos que colonizan nichos domésticos presentan ciertas características de

interés médico, que les permiten crecer en ambiente antropogénicos,. Ppudiendo
encontrarse en diversas áreas y objetos, como en sistemas de aire acondicionado, residuos
orgánicos, y utensilios de cocina. Estos microorganismos pueden afectar la salud humana,
causando infecciones, alergias o intoxicacionesefectos tóxicos. En efecto, una gran cantidad
de los microorganismos aislados a partir de estas superficies corresponden a especies
patógenas capaces de tolerar las condiciones extremas que se presentan en los mencionados
ambientes (4). Se puede decir que los factores más importantes que participan en esta
predominantes de contaminación son los alimentos, las plagas, los animales de compañía y
el agua contaminada. En la mayoría de los casos, los patógenos se siendo transmitenidos
por contacto directo ser humano-germen.

Debido a la capacidad de los microorganismos de crecer en ambientes húmedos se han

logrado propagar de manera sencilla en nuestros implementos de cocina (cCucharas,
Chiquillos, pPlatos, tTabla de picar, etc) o en utensilios de limpieza (eEsponjas, pPaños)

4
consideradas reservorios o diseminadores (9).

Cuando hablamos de la limpieza de nuestros hogares hacemos referencia a la que

realizamos limpieza realizada de forma diariamente. Como sabemos, con esto
pretendemosBuscando prevenir, o reducir o eliminar la presencia de invertebrados y
microorganismos patógenos que se pueden encontrar en alfombras y edredones, como los
ácaros, bacterias y hongos., Aunque generalmente son transportadoas por el aire, cualquiera
que sea su origen son un importante factor en desarrollo de enfermedades respiratorias.

El aire disperso en el interior de nuestros hogares se compone por una mezcla de

bioaerosoles, entre los cuales se encuentran restos biológicos (eEscamas de piel), esporas,
virus y hongos. Dentro de las fuentes más comunes de aerosoles en interiores se identifica
la acumulación de polvo (10).

El polvo en el interior de nuestros hogares contiene una gran variedad de agentes

compuestos biológicos (virus, hongos, escamas, artrópodos) y no biológicos
(cenizas,procesos de combustión, pesticidas, productos de limpieza, productos arrastrados
desde el exterior) (10).

Es importante tomar en cuenta que para el desarrollo de la mayoría de estas especies es

indispensable necesaria la disponibilidad de agua y no solo la presencia de un reservorio
primario como lo es el polvo,; por esta razón, el crecimiento de moho y la formación de
biopelículas microbianas en los hogares depende de este dos factores: agua y humedad.
Cualquiera que sea el sustrato sobre el que se multipliquen, que permita la presencia de
humedad en un hogar favorecerá a la aparición de determinados organismos convirtiéndose
en una fuente de bioaerosoles (10).

Durante los primeros estudios realizados en ambientes domésticos en alusión a la relación

del polvo con las enfermedades respiratorias se exploró la presencia de estos hongos en
rellenos de almohadas, muebles y fundas. Determinando que la presencia de taxanos era
predominante en interiores y exteriores (11).

Pero no todos estos aspectos son necesariamente perjudiciales ya que analizando desde el
contexto sanitario se pueden determinar aspectos beneficiosos. En estudios realizados en
países occidentales y países subdesarrollados tomando en cuenta su estilo de vida, se
determinó que niños de países occidentales tenían una mayor tendencia a desarrollar asma.
Por lo cual se postula que debido a la exposición frente a microbios inmersos en el

5
ambiente doméstico protege a los niños (países subdesarrollados) del desarrollo de
enfermedades alérgicas (11).

Si bien la presencia determinación de microorganismos presentes en el aire y polvo ha

tomado relevancia, no tenemos que olvidar que el agua de grifo constituye otra fuente de
ingreso y diseminación del microorganismos. Por esta razón el agua de consumo humano
tiene un estricto control de calidad. Aun así, determinados hongos, protozoos y bacterias no
suelen se transportadas a través del agua potableser consideradas un factor importante (12).

Algunos microorganismos patógenos comunes que se han podido detectarencuentran en el

agua potable incluyen.

- Rotavirus: Virus capaz de producir fiebre, vómitos y diarrea grave, afectando en

mayor proporción a infantes.

- Virus de la hepatitis E (VHE): Patógeno vírico capaz de provocar un daño

hepático, ictericia y, en casos graves, el paciente puede presentar insuficiencia
hepática.

- Norovirus: Patógeno viral caracterizado por provocar gastroenteritis, provocando

diarrea, vómitos y dolor de estómago

- Cryptosporidium spp: Parásito “protozoario” capaz de causar enfermedades

gastrointestinales, como calambres abdominales, náuseas y diarrea.

- Escherichia coli (E. coli) O157:H7: Bacteria capaz de provocar una diarrea grave,
calambres abdominales y, en algunos casos, insuficiencia renal.

Se plantea entonces que Por lo cual estos microorganismo pueden emplear el agua como
medio de transporte (vector), llegando a los ambientes domésticos. Una vez allí en donde
pueden ser controlados parcialmente con la utilización de diversos mecanismos como los
son productos de limpieza y desinfección; también puede emplearse agua caliente para ,
cambios de temperatura constantes en el agua entre otras medidas que pueden limitar su
crecimiento. Sin embargo, esto no es suficiente y finalmente muchas especies se establecen
de manera definitiva en los distintos nichos que encuentran en el interior de los hogares.

La patogenicidad depende de varios factores, como la cantidad de microorganismos

presentes, la virulencia de la cepa y la susceptibilidad del huésped. Algunos
microorganismos pueden causar enfermedades graves en personas con sistemas

6
inmunológicos debilitados, como ancianos, niños y personas con enfermedades crónicas
(13).

De hecho, algunas eEspecies tiene una gran con mayor capacidad de resistencia a
condiciones extremas (extremotolerancia); muchos entre ellos no sólo son capaces de
resistir a estaos condicionesmecanismos, sino que, además, se comportan como patógenos
oportunistas presentan una notable patogenicidad oportunista. Por ejemplo, entre las
especies que se han logrado identificar en agua calentada a más de 42°C se encuentran
cepas de especies d el género Exophiala, especie que muchas de las cuales revistenpresenta
importancia médica por su capacidad de causarpresentar infecciones cerebrales y
sistémicas, que pueden pudiendo llegar a ser mortales (13).

Por otra parte, dDesde los años 70s se sabehan realizado trabajos en donde se da a conocer
que el agua potable puede transportarcontiene hongos filamentosos, entre los cuales
destacan logrando identificar una gran variedad de especies pertenecientes a los géneros
entre las cuales se encuentra Cladosporium, Aspergillus y Penicillium. Algunas especies
están implicadas en enfermedades respiratorias como el , asma; otrase incluso ciertas
especies son capaces de producir micotoxinas capaces de alterar el sistema inmune de un
individuo o de producir ciertos tipos de cáncer llegando a ser carcinógenas. EntreDe las
micotoxinas de mayor relevancia que podemos encontrar encontramos en el agua potable
están la tenemos zearalenona (Fusarium spp.) y las aflatoxinas (Aspergillus spp.) (14).

Pese a que su densidad en el agua potable es extremadamente baja, la exposición a estas

micotoxinas implica riesgos importantes. En efecto, a niveles bajos pueden ser
teratogénicos y mutagénicos, pudiendo afectar el desarrollo normal de un embrión a nivel
de órganos como riñón, hígado y sistema inmune, y aumentando su susceptibilidad a
infecciones (15).

La Relacionando su resistencia de muchos microorganismos al estrés causado por el

tratamiento del agua con sustancias desinfectantes se ha relacionado con la capacidad de
producir “melanina.” la cual le da una mayor resistencia a sus esporas al tratamiento del
agua. De hecho, las esporas de muchos hongos están pigmentadas (melanizadas), De las
características de mayor relevancia de estas esporas se encuentra lo cual refuerza su
carácter hidrofóbico y su tendencia a agruparse, protegiéndoselos así de los efectos nocivos
del agua tratada con desinfectantescontra la desinfección del agua (14).

7
Pese a que su presencia en el agua potable se encuentra muy diluida no podemos descartar
los posibles riesgos que implica una exposición a estas micotoxinas, que a niveles bajos son
teratogénicos y mutagénicos afectando el desarrollo normal de un embrión pudiendo afectar
órganos como riñón, hígado y sistema inmune aumentando la susceptibilidad a infecciones
(15).

En laos últimaos década tiempos, microorganismos potencialmente patógenos se han

descubierto en otros entornos domésticos como lavadoras y lavaplatos (manuales y
automáticos)vajillas, La adaptabilidad de estos organismos a condiciones extremas, como
las que se encuentran en saunas, lavadoras y lavaplatos, se debe a su plasticidad fenotípica,
lo que puede explicar su éxito como patógenos humanos (16). Estos hallazgos lo que han
despertadogenerado un gran interés en los investigadores. Estos descubrimientos han dado
origen a muchas preguntas de interés científico: sobre ¿cómo estos microorganismos
ingresan y se propagan estos microorganismos en los entornos domésticos?;, ¿cuáles son
sus reservorios naturales? y ¿qué factores de virulencia expresan? y ¿cómo afectan a los
hospedadores humanos?. La adaptabilidad de estos organismos a condiciones extremas,
como las que se encuentran en saunas, lavadoras y lavavajillas, se debe a su plasticidad
fenotípica, lo que puede explicar su éxito como patógenos humanos (16).

Como hemos visto, lLa presencia de microorganismos en el interior de las viviendas es

común, incluso a pesar de las medidas sanitarias adoptadas por los residentes humanos, el
uso de productos químicos y las altas temperaturas a las que generalmente están sometidos.
Aunque el interés se ha centrado en las bacterias y los virus, los hongos también se
reconocen cada vez más como posibles fuentes de infección. Actualmente la información
disponible que se encuentra en la web es drásticamente limitada. Por ejemplo, estudios
recientes han permitido descubrir una amplia gama de especies de levaduras de los géneros
Saccharomyces, Debaryomyces, Pichia, Yarrowia y Meyerozyma en áreas interiores
húmedas, como baños, cocinas y electrodomésticos (17).

Aunque muchas de estas especies no son peligrosas para los seres humanos, ciertas especies
de levaduras oportunistas de los géneros Rhodotorula, Naganishia y Candida, así como las
levaduras negras de los géneros Exophiala y Aureobasidium representan un riesgo
potencial de infección, particularmente para aquellas personas inmunodeprimidascon
sistemas inmunológicos debilitados. Estas levaduras se caracterizan por su capacidad para

8
degradar los agentes de limpieza, producir polisacáridos extracelulares, tolerar temperaturas
altas, niveles de pH alcalinos y elevadas concentraciones de sal. Además, estos
microorganismos se caracterizan por formar biopelículas, con losque pueden tener contacto
con las personas pueden tener contacto, y produciéndoser una infección (17).

Los lavaplatos representan un sistema extremo de diferentes hábitats en donde los hongos
pueden diseminarse mediante aerosoles, contaminando superficies de las cocina y las
manos. Sin embargo, para que su diseminación y posterior colonización sea exitosa, los
hongos (incluidas las levaduras) deben cumplir características fenotípicas específicas. Por
ejemplo, deben ser capaces de resistir cambios de humedad, temperatura, pH o el uso de
diversos detergentes. Todos estos aspectos han establecido la presión selectiva necesaria
para que dichos microorganismos desarrollen biopelículas, responsables en ocasiones de
las enfermedades que se producen a consecuencia del contacto con las mismas (18).

Dentro de los hallazgos más relevantes de hongos patógenos encontramos Exophiala

dermatitidis, bien conocida por su capacidad de producir y excretar compuestos
tensioactivos, su tolerancia a condiciones de oligotrofía y su resistencia a los ácidos. Las
condiciones dentro (o en torno a) los lavaplatos permiten, de hecho, su desarrollo. Lo
mismo sucede con otra especie relacionada, Exophiala phaeomuriformis, un conocido
patógeno oportunista identificado en alrededor del 35% de los lavaplatos analizados en un
estudio publicado (19).

Una vez abordamos los ambientes domésticos desde un punto de vista general he
identificando los microorganismos que pueden estar presentes y utilizar como vector el
agua potable, es necesario abordar las áreas específicas nuestro estudio las cuales se centran
en lavavajillas y determinadas áreas afines.

Los lavavajillas comprenden un sistema extremo de hábitats en donde los diversos hongos
pueden liberarse mediante aerosoles contaminando superficies de las cocina y las manos,
sin embargo deben cumplir características fenotípicas específicas, de esta manera resistir
cambios de humedad, temperatura, pH o el uso de diversos detergentes. Todos estos
aspectos han llevado a que dichos microorganismos desarrollen biopelículas, responsables
de las enfermedades que se producen por su exposición (18).

9
Dentro de los hallazgos más relevantes de hongos patógenos encontramos Exophiala
dermatitidis conocida por su capacidad de tensioactivos, tolerancia oligotrófica y
resistencia a los ácidos, las condiciones dentro de los lavavajillas que permiten su
desarrollo también brindan un enriquecimiento para Exophiala phaeomuriformis patógeno
oportunista identificado en alrededor del 35% de lavavajillas analizados (19).

PRINCIPALES RESULTADOS A OBTENER

Describir los resultados que se espera obtener con la realización del proyecto,
considerando los objetivos planteados. (Máximo de 200 palabras)

DISEÑO MARCO METODOLÓGICO

Tipo de investigación (Diseño y clasificación de Investigación)

Guiarse por el libro “Metodología de la Investigación de Roberto Hernández Sampieri

– Pag 119”

Variables: Definición conceptual y operacional:

Variables Definición Clasificación Indicador Escala.

Poner en esta tabla las variables que ya discutimos en las reuniones que hemos
sostenido.

Universo de estudio, tratamiento muestral y muestra (Aplica, únicamente para

estudios epidemiológicos).

No aplica por no tratarse de un estudio epidemiológico.

10
Métodos y técnicas.

Poner aquí lo que les enviaré por correo.

Instrumentos de investigación o recolección de datos (Aplica, únicamente para

encuestas validadas).

No aplica para este proyecto.

Análisis estadísticos (Cuando aplique).

Máximo 1000 palabras.

Aspectos Normativos
Comité de ética de investigación en seres humanos (CEISH – UCACUE)

No aplica

Permiso por el ministerio de ambiente, de acceso a recursos biológicos y genéticos.

No aplica

En caso necesario.

11
D. CRONOGRAMA
MESES
No. ACTIVIDADES RESPONSABLE
1 2 3 4

Objetivo Específico 1  

1 Actividad 1.1

Objetivo Específico 2    

5 Actividad 2.1    

6    

7    

8    

Objetivo Específico 3    

9 Actividad 3.1

10

11

12
12

13
E. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (VANCOUVER)

1. Novak Babič M, Gostinčar C, Gunde-Cimerman N. Microorganisms

populating the water-related indoor biome. Appl Microbiol Biotechnol. 2020
Aug;104(15):6443-6462.

2. Zupančič J, Novak Babič M, Zalar P, Gunde-Cimerman N. The Black Yeast

Exophiala dermatitidis and Other Selected Opportunistic Human Fungal
Pathogens Spread from Dishwashers to Kitchens. PLoS One. 2016 Feb
11;11(2):e0148166.

3. Kulesza K, Biedunkiewicz A, Nowacka K, Dynowska M, Urbaniak M,

Stępień Ł. Dishwashers as an Extreme Environment of Potentially
Pathogenic Yeast Species. Pathogens. 2021 Apr 8;10(4):446.

4. Gostinčar C, Grube M, Gunde-Cimerman N. Evolution of fungal pathogens

in domestic environments? Fungal Biol. 2011 Oct;115(10):1008-18.

5. Zalar P, Novak M, de Hoog GS, Gunde-Cimerman N. Dishwashers--a man-

made ecological niche accommodating human opportunistic fungal
pathogens. Fungal Biol. 2011 Oct;115(10):997-1007.

6. Kulesza K, Biedunkiewicz A, Nowacka K, Dynowska M, Urbaniak M,

Stępień Ł. Dishwashers as an Extreme Environment of Potentially
Pathogenic Yeast Species. Pathogens 2021, 10, 446.

7. Raghupathi P K, Zupančič J, Brejnrod A D, Jacquiod S, Houf K, Burmølle

M, Gunde-Cimerman N, Sørensen S J. Microbial Diversity and Putative

14
 Opportunistic Pathogens in Dishwasher Biofilm Communities. Appl Environ
Microbiol. 2018 Feb 14;84(5):e02755-17.

8. Döğen A, Kaplan E, Oksüz Z, Serin MS, Ilkit M, de Hoog GS. Dishwashers

are a major source of human opportunistic yeast-like fungi in indoor
environments in Mersin, Turkey. Med Mycol. 2013 Jul;51(5):493-8.

9. Beumer RR, Kusumaningrum H. Kitchen hygiene in daily life. International

Biodeterioration & Biodegradation. 1 de junio de 2003;51(4):299-302.

10. Leonas K. Microorganisms in Carpet. University of Georgia. 2003;

11. Rintala H, Pitkäranta M, Täubel M. Chapter 4 - Microbial Communities

Associated with House Dust. En: Laskin AI, Sariaslani S, Gadd GM,
editores. Advances in Applied Microbiology [Internet]. Academic Press;
2012 [citado 13 de junio de 2023]. p. 75-120. Disponible en:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B978012394805200004X

12. Islam MMM, Islam MA. Quantifying public health risks from exposure
to waterborne pathogens during river bathing as a basis for reduction
of disease burden. J Water Health. junio de 2020;18(3):292-305.

13. Novak Babič M, Gostinčar C, Gunde-Cimerman N. Microorganisms

populating the water-related indoor biome. Appl Microbiol Biotechnol.
agosto de 2020;104(15):6443-62.

14. Afonso TB, Simões LC, Lima N. Occurrence of filamentous fungi in

drinking water: their role on fungal-bacterial biofilm formation. Research in
Microbiology. 1 de enero de 2021;172(1):103791.

15
 15. Bogantes- Ledezma P, Bogantes-Ledezma D, Bogantes- Ledezma S.
Aflatoxinas. Acta Médica Costarricense. octubre de 2004;46(4):174-8.

16. Gostinčar C, Grube M, Gunde-Cimerman N. Evolution of Fungal Pathogens

in Domestic Environments? Fungal Biology. octubre de 2011;115(10):1008-
18. 19. Buzzini P, Lachance MA, Yurkov A, editores. Yeasts in Natural
Ecosystems: Diversity [Internet].

17. Cham: Springer International Publishing; 2017 [citado 04 de junio de 2023].

Disponible en: http://link.springer.com/10.1007/978-3-319-62683-3

18. Raghupathi P, Zupancic J, Brejnrod A, Jacquiod S, Houf K, Burmølle M, et

al. Microbiomes in Dishwashers: Analysis of the microbial diversity and
putative opportunistic pathogens in dishwasher biofilm communities.
Applied and Environmental Microbiology. 12 de enero de
2018;84:AEM.02755-17.

19. Zupančič J, Novak Babič M, Zalar P, Gunde-Cimerman N. The Black Yeast

Exophiala dermatitidis and Other Selected Opportunistic Human Fungal
Pathogens Spread from Dishwashers to Kitchens. PLoS One. 11 de febrero
de 2016;11(2):e0148166.

F. ANEXOS

Posibles instrumentos investigativos a emplear

Validación de instrumentos en el caso de ser necesario
Autorización para obtención de muestras en el caso de ser necesario

16