UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA E INVESTIGACIÓN APLICADA

NÚMERO DE PRÁCTICA: 07
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
SIEMBRA DE BACTERIAS POR TÉCNICA DE VERTIDO EN PLACA
DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: AGRONOMÍA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGÍA
CICLO/NIVEL: TERCER CICLO
ESTUDIANTE: WELLINGTON EFRAIN CAGUANA ROCANO

1. FUNDAMENTACIÓN
La siembra de bacterias utilizando la técnica de vertido en placa es un método
fundamental en microbiología que se utiliza para cuantificar y aislar bacterias presentes
en una muestra. Esta técnica es ampliamente empleada en diversos campos como la
medicina, la industria alimentaria, la investigación ambiental, entre otros.
El aislamiento y cuantificación de la siembra en placa mediante vertido permite a los
microbiólogos aislar y cuantificar bacterias presentes en una muestra. Al diluir la muestra
y verterla sobre el medio de cultivo sólido en la placa de Petri, se facilita la formación de
colonias individuales derivadas de células bacterianas únicas presentes en la muestra
original. Estas colonias pueden ser contadas y evaluadas individualmente,
proporcionando una estimación cuantitativa de la cantidad de bacterias presentes en la
muestra.
En la obtención de colonias aisladas, permite que cada bacteria presente en la muestra
tenga la oportunidad de crecer en un área aislada del medio de cultivo. Esto es crucial
para la identificación y caracterización de diferentes especies bacterianas, ya que cada
colonia derivada de una sola célula bacteriana representa un clon puro que puede ser
estudiado de manera individual. En la identificación de microorganismos, una vez que las
bacterias se han desarrollado en colonias individuales, es posible realizar pruebas
bioquímicas, moleculares o serológicas para identificarlas a nivel de especie o género.
Esto es esencial en muchos campos, como la medicina clínica, donde la identificación
precisa de los microorganismos presentes en una muestra es crucial para el diagnóstico y
tratamiento de enfermedades. También en la detección de contaminantes, la siembra en
placa también se utiliza para detectar y cuantificar contaminantes microbianos en diversas
muestras, como alimentos, agua, aire y productos farmacéuticos. La presencia de colonias
bacterianas atípicas puede indicar la contaminación de la muestra, lo que puede ser crítico
para garantizar la seguridad y calidad de los productos.

La siembra de bacterias por técnica de vertido en placa es una herramienta esencial en

microbiología que permite la cuantificación, aislamiento, identificación y caracterización
de bacterias presentes en diversas muestras. Esta técnica proporciona resultados
confiables y reproducibles, lo que la convierte en una práctica fundamental en el estudio
de microorganismos en una amplia variedad de aplicaciones científicas e industriales.

2. RESULTADOS DE APRENDIZAJE
 Los estudiantes aprenderán los principios detrás de la siembra por vertido en
placa, incluyendo la dilución de la muestra, la preparación de medios de cultivo
selectivos o diferenciales, y las condiciones necesarias para el crecimiento
bacteriano óptimo.
 Adquirir habilidades prácticas en el laboratorio, como la manipulación de
muestras, la esterilización de equipos, la preparación de medios de cultivo, la
siembra de placas y la incubación bacteriana.
 Los estudiantes aprenderán sobre las precauciones de seguridad necesarias al
trabajar con bacterias patógenas o potencialmente peligrosas, así como sobre el
manejo adecuado de desechos biológicos.

3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
 La siembra en placa puede utilizarse para determinar si una muestra contiene
bacterias viables y en qué cantidad.
 La siembra en placa puede ayudar a aislar colonias individuales de bacterias para
su estudio posterior. Este paso es esencial en la identificación y caracterización
de microorganismos.
 Al estudiar múltiples muestras y analizar las colonias bacterianas formadas en
placas, se puede investigar la diversidad microbiana en diferentes entornos.

4. EQUIPOS, MATERIALES E INSUMOS

MATERIALES

 Vaso de precipitación
 Balanza analítica
  Cocineta
 Varilla de vidrio
 Cajas Petri
 Agua destilada

MEDIOS DE CULTIVO:
Agar: Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo.

 Agar Saboraud

Se lo utiliza para determinar hongos

5. PROCEDIMIENTO
Para sacar cuanto se tenía que utilizar, se realizó una regla de 3 para saber cuánto gramos
se va a utilizar del caldo nutritivo.
30 g 1000ml
X 300ml
Este procedimiento es de 9 g que es el que se va a utilizar del caldo nutritivo
Para sacar cuanto se tenía que utilizar de Agar, se realizó de igual manera una regla de 3
para saber cuánto gramos se va a utilizar de Agar.
15 g 1000ml
X 300ml
Este procedimiento es de 4.5 g, pero para que no hubiese algún problema en el trascurso
de la solidificación se le coloco 6 g de Agar.
N° ACTIVIDADES
1 En lo primero se pesó los 6 gramos
de agar y 9 g del caldo nutritivo
saboraud, se tomó una medida en el
vaso de precipitación de 300ml de
agua destilada, ya pesado el agar y el
caldo nutritivo saboraud se lo coloco
junto al agua destilada.
2 Procedimiento de mezcla, se lo debe
hacer ya colocado todos los
materiales requeridos, colocando el
vaso de precipitación con los
materiales sobre la cocineta, se tiene
que remover para que se mesclen
bien, el tiempo que se tiene que
remover es un aproximado de 10
minutos.
3 Una vez ya mezclado todo los
materiales de medios de cultivo se
debe esperar un tiempo a que este
enfríe, un máximo en que nuestra
mano soporte el caliente, para hacer
que se enfríe de una manera más
rápida se sumerge el vaso de
precipitación hasta el margen donde
está el medio de cultivo, en un
recipiente con agua fría.
OBSERVACIONES
Al pesar el agar y el caldo nutritivo, se
tiene que hacerlo de una manera
precisa, para luego poder evitar algún
problema al momento que se mezclen
ambos materiales.
Al momento que se esté removiendo,
darse cuenta que no que queden grumos
en el fondo del vaso de precipitación,
para evitar eso se tiene que remover
bien para que se pueda disolver y
mezclar todo junto.
Al momento que se deja enfriar hacerlo
con un tiempo necesario, que no se
enfríe demasiado porque se puede
solidificar y se dañaría todo y no habrá
como colocarlo sobre la caja Petri y
tocara hacer todo el procedimiento
desde el principio.
 4 En la colocación del medio de
cultivo, ya no tan caliente, primero
se colocó 1 ml de agua destilada
sobre la caja Petri y encima se colocó
el medio de cultivo.
Al momento de hacer la colocación del
medio de cultivo en las cajas Petri, tener
que en cuenta que en todas las cajas
Petri se coloque una media igual a
todas.

5 Ya colocado el medio de cultivo en Se debe de colocar la incubadora a un

las cajas Petri se llevaron todas a na punto ni tan bajo ni tan alto para que
incubadora, durante un tiempo de 24 pueda surgir de manera correcta el
horas a esperar el resultado. procedimiento de la siembra de
bacterias por técnica de vertido en placa

7. RESULTADOS ESPERADOS
 Las colonias que crecen en el medio de cultivo indican la presencia de
bacterias viables, lo que permite determinar si la muestra contiene
organismos que pueden crecer en las condiciones del medio utilizado.
 La principal finalidad de esta técnica es contar el número de colonias
viables presentes en una muestra. Esto proporciona una estimación de la
densidad de bacterias presentes en la muestra original.
 Al observar la morfología y características de las colonias formadas en las
placas, es posible evaluar la pureza de la muestra. La presencia de
diferentes tipos de colonias puede indicar la presencia de contaminantes o
diferentes especies bacterianas en la muestra.

Bibliografía
Camacho, A. M. (2009). Cuenta en placa de bacterias. UNAM, Facultad de Química.
Obtenido de file:///D:/user/Downloads/52510010-Tecnica-de-vertido-en-
placa.pdf
María M. Reynoso, C. E. (s.f.). Siembra en picadura o punción. Obtenido de
espanol.libretexts.
9. ANEXOS

Ilustración 1 Ya pasada las 24 h se puede observar dentro de la caja Petri una especie de
bacterias u especie de hongo que se ha desarrollado dentro, en diferentes colonias.