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“AÑO DE DIÁLOGO Y LA RECONCILIACIÓN NACIONAL”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERÍA PESQUERA


DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE INGENIERÍA PESQUERA

INFORME DE PRÁCTICAS N° 04
CULTIVOS BACTERIOLOGICOS: SIEMBRA POR DILUCION
CURSO: MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS

INTEGRANTES:
 BALLES SEGUNDO
 CHUQUIHUANCA CHUMACERO YORLI
 ELIAS SANCHEZ JULIO CESAR
 GARCIA JIMENEZ MARLON
 NIMA CORDOVA ROSSANA
 PAMPAS MACHACUAY JOSELIM
 JIMENEZ FERIA DAVID
SEMESTRE: 2018-II
DOCENTE: DRA. MARÍA JIMÉNEZ FORERO

PIURA, DICIEMBRE DEL 2018


CULTIVOS BACTERIOLOGICOS: SIEMBRA POR DILUCION

I. INTRODUCCION
Los cultivos bacteriológicos, facilitan al alumno el acceso a determinados
conceptos del mundo microbiano para que comprenda cómo se comportan los
microorganismos, los cambios que causan en los medios de cultivo y como es
su desarrollo.

Con las prácticas en el análisis de diferentes alimentos el alumno, efectuara la


detección y la identificación de microorganismos, relacionados con el campo
alimentario. El examen microbiológico rutinario de los alimentos para detectar
microorganismos patógenos y de sus toxinas no es practicable en la mayoría de
los laboratorios de microbiología de alimentos. Sin embargo, es imperativo
realizar los análisis microbiológicos de rutina correspondientes siempre que la
información epidemiológica sugiera la presencia de un agente patógeno
específico en un determinado alimento. El procesador de alimentos prefiere la
identificación de grupos de microorganismos, cuya enumeración o recuento se
realiza con gran facilidad y cuya presencia en los alimentos (en determinado
número) indica que sus productos estuvieron expuestos a condiciones que
pudieran haber introducido microorganismos peligrosos.

II. COMPETENCIAS

2.1 Competencias especificas


1. Preparar muestras en diluciones y medios de cultivo para realizar cultivos
bacteriológicos.
2. Desarrolla el procedimiento de siembra de microorganismos por dilucion
de acuerdo a lo normado y establecido científicamente.
2.2 Competencia profesional
Aplica las técnicas de siembra por dilucion y comprueba la utilidad de los
medios de cultivo, diferenciales y selectivos para efectuar análisis
microbiológicos de alimentos eficientemente en el área de control de
calidad.
PROCEDIMIENTO

Antes de realizar el plaqueo por instrucciones de la docente de práctica se marca el


material a utilizar en la práctica con un plumón indeleble. (Pipetas y placas Petri)

PLACA N°01 PLACA N°02 PLACA N°3

1- PLAQUEO
El agar que ha sido previamente preparado en la práctica anterior y colóquelo
en bañomaria para que se licue, luego agregue con cuidado en placas estériles
en una cantidad que cubra toda la superficie del fondo aproximadamente un
cuarto de la altura de la placa. Dejar enfriar para luego efectuar las siembras
microbiológicas por superficie.

Plaqueo, colocar el Siembras microbiológicas,


agar rugosa en las agar saboraud y agar rugosa
placas Petri
2- PREPARACION DE LA MUESTRAS
MUESTRAS LIQUIDAS. Para muestras liquidas no viscosas como agua, leche,
refrescos, etc., la distribución de Mos, es homogénea o fácilmente
homogenizable con agitación

MUESTRAS SOLIDAS. Las muestras solidas congeladas, debe descongelarse


en refrigeración de 4 a 8 °c durante 18 h y no ms de 24 horas antes de proceder
a su dilución y análisis.

Para la preparacion de la muestra a analizar, se debe seguir los siguientes


pasos:

 Triturar la muestra sólida en forma homogénea en un mortero con la


ayuda del mazo.

Trituración de la
muestra (tomate)
 Pesar 10 g de la muestra por analizar.

 Colocar los 10 g de muestra, en un Erlenmeyer que contiene 90 ml de


solución salina peptonada, homogenizar cuidadosamente, dejar
sedimentar, esta solución sería la solución 10-1.

 De esta solución 10-1de la parte sobre nadante transferir 1ml con una
pipeta estéril a un tubo que contiene 9ml de solución salina peptonada,
esta solución sería la solución 10-2
 De esta solución 10-2 transferir 1ml con una pipeta estéril a un tubo que
contiene 9ml de solución salina peptonada, esta solución sería la
solución 10-3

AGAR SABORAUD
CUESTIONARIO

1. ¿Que se requiere para un buen cultivo microorganismo?

Los requerimientos son:


 que el medio de cultivo cumple y garantiza buenos resultados de cultivo.
 disponibilidad del nutriente.
 presencia y ausencia de oxígeno y otros gases.
 condiciones adecuadas de humedad (Conservarlas refrigeradas).
 luz ambiental.
 pH adecuado.
 temperatura.
 esterilidad.
2. Mencione 2 diferencias entre cultivos puros y cultivos mixtos

Cultivos puros: son aquellos que contienen un solo tipo de microorganismo. El


modo de obtener estos cultivos consiste en obtener colonias aisladas, que
provienen de una sola célula (son clones).

características:
 Las colonias deben ser iguales en forma, tamaño y color.
 Que no existan formas inhibidas.
 Al microscopio deben tener un aspecto común.
 Tiene que tener iguales propiedades tintoriales
 Deben ser bioquímicamente y fisiológicamente iguales.
 Una regla importante es no coger nunca de la primera colonia

cultivo mixto.

El cultivo mixto consiste en plantar distintas variedades en estrecha vecindad,


basándose en el antiguo concepto de “plantas compañeras”. El cultivo mixto permite
que las cualidades naturales de las diferentes especies se complementen.
La plantación contigua ofrece muchas ventajas. Las legumbres, por ejemplo,
suministran al suelo un nitrógeno que las plantas vecinas pueden aprovechar.
Ciertas plantas proporcionan elementos disuasorios naturales contra las plagas de
insectos. Las plantas altas sirven de soporte a las trepadoras. Las plantas bajas
proporcionan sombra a las raíces de las plantas cercanas.
3. Que métodos conoce Ud. ¿Para aislar cultivos puros?

3.1 Técnica de siembra por placa:

técnica de siembra por estrias: se pasa una porción de la muestra a la superficie


de un medio de cultivo y se siembra por estrías o por difusión.

técnica de siembra por rayado o método francés: consiste en hacer 5 líneas


paralelas con el inoculo sobre la superficie del medio. Luego se gira la placa y
se hace 5 líneas arrastrando el inoculo hasta completar la placa.

3.2 Técnica de placa invertible: consiste en diluir la muestra en tubos con


agar fundido.

Esta técnica se realiza de forma cuantitativa o cualitativa. Cuando se hace de


forma cuantitativa podemos determinar el número de MOS.
Esta técnica también usa diluciones múltiples en tubo.

3.3 Técnica de enriquecimiento de cultivo: estos medios se usan cuando: el tipo


de bacterias que queremos aislar se encuentran en muy pequeñas cantidades
y es de desarrollo muy lento que otras especies presentes.

3.4 Las células bacterianas quedan superficialmente separadas en algunas áreas


de placa.

4. ¿Qué factores afectan el recuento de microorganismos en placas?

Este recuento es sólo de microorganismos vivos.

 La utilidad del indicador depende de la historia del producto y el momento de


la toma de muestra. En alimentos perecederos manipulados correctamente
pueden desarrollar recuentos elevados y perder calidad si son almacenados
por un período de tiempo prolongado. En este caso, el recuento no se
encontraría elevado por la condición de higiene del producto, sino por la vida
útil del mismo.
 Los procedimientos que sufre el alimento en su elaboración, por ejemplo un
proceso térmico, pueden enmascarar productos con altos recuentos o
condiciones deficientes de higiene. Además, el almacenamiento prolongado
en congelación o con pH bajo puede producir una disminución del recuento.
 El recuento de mesófilos nos indica las condiciones higiénico sanitarias de
algunos alimentos pero no tiene significado sanitario en otros productos que
han sido madurados con bacterias (por ejemplo quesos) o alimentos que
dentro de su formulación tienen conservadores.
 Excesiva contaminación de la materia prima.
 Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración.
 La posibilidad de que existan patógenos, pues estos son mesófilos.
 La inmediata alteración del producto.

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