Diversidad y repertorio

inmunológico.

Generación de la diversidad
inmunológica para el reconocimiento
antigénico, mecanismos genéticos
 Respuesta humoral Respuesta mediada por células

La capacidad del
sistema inmune para
reconocer antígenos
depende de la
generación de
anticuerpos por las
células B y de los
receptores de
antígenos expresados
en células T.
Teorías de la formación de anticuerpos:
Paul Ehrlich Teoría de la cadena Lateral 1879

Propone que la combinación de un elemento inmunogenico (antígeno)

con un receptor de célula B (anticuerpo), inicia la producción y secreción
de mas de estos receptores por la célula
 Selección Clonal
Amplifica linfocitos que responden a
antigenos individuales
• Niels Jerne y Frank Macfarlane Burnet
– Teoría de selección clonal Década del 1960

• Cada linfocito B expresa una unica inmunoglobulina

• Cada linfocito T expresa un unico receptor T.
• Gran variedad de inmunoglobulinas y de receptores T.
• La unión de un antigeno con una inmunoglobulina de
célula B o un receptor de célula T desencadena la
multiplicación clonal
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• Las reservas de linfocitos inmaduros
contienen celulas B y T que forman
anticuerpos y receptores con diversas
especificidades
• Los antigenos se unen a una
inmunoglobulina o receptores de celulas T
e inician la multiplicación clonal de la
célula.
 Genes de Immunoglobulinas son
emsamblados en linfocitos
• Una inmunoglobulina es un tetramero de 2 cadenas ligeras y dos
cadenas pesadas

• La cadena ligera agrupada en dos familias lambda y kappa

• La cadena pesada forma solo una familia.
• Cada cadena tiene:
– N-terminal region variable (V)
– C-terminal region constante (C)
• Dominio V reconoce el antigeno.
• Dominio C la respuesta efectora.

• El dominio V y el dominio C son codificados separadamente

por los segmentos genicos V y C

• Un gen que codifica para una inmunoglobulina completa es

generada por una recombinacion somatica que une al
segmento genetico V con el segmento genetico C

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J=joining codifica los últimos aminoácidos de la región variable, en el
RNA se convierte en la parte terminal del exon variable integro
 La cadena ligera es ensamblada como
producto de una unica recombinación
• La cadena ligera lambda es ensamblada por una
recombinación entre :
– Segmento genico V
– Segmento genico J-C

• Segmento genico V :
– leader exon
– intron
– Region codante variable

• Segmento genico J-C :

– short J-coding exon
– intron
– Region C-codante
• La cadena ligera kappa es ensamblada como producto
de una recombinación entre:
– Segmento genico V
– Uno de los cinco J segmentos geneticos que precede al Segmento
genico C
La cadena pesada es ensamblada como
producto de dos recombinaciones
• Las unidades para recombinar:
– Segmento genico V
– Segmento genico D
– Segmento genico J-C

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• La primera recombinación une D a J-C.
• La segunda recombinación une V a D-J-C.
 Una gran Diversidad es generada por
recombinación
• Un locus de cadena ligera produce >1000
cadenas por combinación:
– 300 genes V
– Cuatro a Cinco genes C
• Un locus de cadena pesada H produce >4000
cadenas por combinación:
– 300 genes V
– 20 segmentos D
– Cuatro segmentos J

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 La recombinación Immune Usa dos
tipos de secuencias concenso
• La secuencia concenso usada para la recombinación es :
– heptamer separado por 12 o 23 bp de un nonamero.
• La recombinación ocurre entre dos secuencias concenso que tienen
diferentes espaciamientos.
La recombinacion genera deleciones o
inversiones
• La recombinación
ocurre por ruptura de la
doble hebra en los
heptameros de las dos
secuencias concensos.

• Si la recombinación de
genes es invertida en
lugar de la orientación
directa, esta es una
inversión y no una
deleción del circulo
escindido.
• La señal terminal de los
fragmentos entre las
rupturas usualmente se
unen para generar un
fragmento circular
escindido.

• Las terminaciones
codantes son
covalentemente unidas
para formar:
– V a J-C (Cadena L )
– D a J-C y V a D-J-C (cadena
H)
 Las proteínas RAG catalizan la ruptura y unión
de los segmentos
• Las proteínas RAG son necesarias para la reacción de corte
• RAG1 reconoce el nonamero consenso para la recombinación.
• RAG2 se une a RAG1 y corta el heptamer.

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El procesamiento de los extremos de codificación introduce variabilidad en la unión
• La reacción es similar a la de
la topoisomerasa en
transposicion.

• Se produce un hairpin
intermediario en el extremo;
• La ruptura del hairpin es responsible
de adición de bases extras (P
nucleotidos del hairpin) en el gen
recombinado.

• Adicionalmente son
colocados nucleotidos N al
azar
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• Deoxynucleosido transferasa inserta adicional N
nucleotidos en el extremo codante.

• El codon en el sitio V-(D)J :

– Tiene una secuencia extremadamente variable
– Codifica para el amino acido 96 en Igs en el sitio de union al
antigeno

• La ruptura de doble hebra son reparadas por el mismo

sistema involucrando una reparación de DNA de union
de los extremos no homologos (system
nonhomologous end-joining of damaged DNA. NHEJ).
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Un rearreglo productivo genera una
exclusión alelica
• La recombinación para generar un
gen integro de inmunoglobulina es
productiva si se logra expresar una
proteina activa .

• Un rearreglo productivo impide

que ocurra cualquier rearreglo
adicional
– Un rearreglo no productivo no
impide la formación de otro
rearreglo
La exclusion alelica se aplica
separadamente a las cadenas ligeras
(solo puede rearreglarse de manera
productiva una cadena κ o λ) y a las
pesadas (una cadena pesada se
rearregla de manera productiva)
• Un exacerbador de la expresión o enhancer en el gen C activa
al promotor del gen V después de que la recombinación haya
generado un gen integro de inmunoglobulina.
La expresión de la cadena pesada puede ser
cambiada por el procesamiento del RNA

• Todos los linfocitos inician la

sintesis de IgM de
membrana (expresión
temprana)

• Un distinto corte y empalme

(RNA splicing), provoca el
reemplazo a la forma de
IgM secretada cuando la
célula B se diferencia
 El cambio de clase de Igs es causada
por recombinación del DNA
• Immunoglobulinas estan divididas en 5 clases de
acuerdo a al tipo de región constante en la cadena
pesada.
• El cambio de clase en CH
ocurre por
recombinación en la
región S (switch) :
– Borra la region entre la
antigua y la nueva CH

• Pueden presentarse
multiples
recombinaciones de
cambios sucesivos.
El cambio de clase ocurre por una
reacción de Recombinacion

– El cambio de clase pasa

por etapas bien definidas.

– Los promotores inician la

transcripción
– Ruptura doble

– Reparación NHEJ

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• La caracteristica importante en la region de cambio
de clase S (switch) es la presencia de regiones
invertidas.

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 Mutaciones somaticas generan una
adicional diversidad en Ratones y Humanos
• Genes de Igs activos tienen regiones V con secuencias que son
cambiadas por mutacion en la linea germinal
• Mutaciones somaticas pueden ser inducidas por
Citidine Deaminasa y Uracilo Glycosylasa.
Las celulas B de memoria permiten
una rapida respuesta secundaria
• La respuesta primaria es montada por
celulas B que no sobreviven despues del
periodo de respuesta.

• Las celulas B de memoria se producen

con especificidad para el mismo antigeno
pero son inactivas.

• Una reexposicion reinicia la respuesta .

– Las celulas de memoria se activan
rapidamente.
 Los receptores de celulas T estan
relacionados a Immunoglobulinas

• Las celulas T usan un

mecanismo similar de union
de V(D)J-C que las celulas B
para producir los tipos de
receptores T.
• TCR αβ >95% de linfocitos T ;
– TCR γδ <5%.

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 El receptor de células T actua con el
MHC

• El TCR reconoce un corto peptido que se une a

la curvatura de la proteina de MHC sobre la
superficie de la celula presentadora.
 El locus del complejo Mayor de Histocompatibilidad
codifica para muchos genes del sistema inmune
• MHC locus class I y class II
• Class I proteinas importantes en transplante
– Reconocimiento de tejidos “self” de “nonself” .

• Class II
– Interacción con células T.

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MHC class I molecule presenting an
Figure 3-23
epitope
• MHC class II protein
• Heterodimerica
• α y β cadena.