Diversidad y repertorio

inmunolgico.

Generacin de la diversidad
inmunolgica para el reconocimiento
antignico, mecanismos genticos
La capacidad del
sistema inmune para
reconocer antgenos
depende de la
generacin de
anticuerpos por las
clulas B y de los
receptores de
antgenos expresados
en clulas T.
Respuesta mediada por clulas Respuesta humoral
Teoras de la formacin de anticuerpos:

Paul Ehrlich Teora de la cadena Lateral 1879

Propone que la combinacin de un elemento inmunogenico (antgeno)
con un receptor de clula B (anticuerpo), inicia la produccin y secrecin
de mas de estos receptores por la clula
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Seleccin Clonal
Amplifica linfocitos que responden a
antigenos individuales
Niels Jerne y Frank Macfarlane Burnet
Teora de seleccin clonal Dcada del 1960


Cada linfocito B expresa una unica inmunoglobulina
Cada linfocito T expresa un unico receptor T.
Gran variedad de inmunoglobulinas y de receptores T.
La unin de un antigeno con una inmunoglobulina de
clula B o un receptor de clula T desencadena la
multiplicacin clonal
Las reservas de linfocitos inmaduros
contienen celulas B y T que forman
anticuerpos y receptores con diversas
especificidades
Los antigenos se unen a una
inmunoglobulina o receptores de celulas T
e inician la multiplicacin clonal de la
clula.

Genes de Immunoglobulinas son
emsamblados en linfocitos
Una inmunoglobulina es un tetramero de 2 cadenas ligeras y dos
cadenas pesadas

La cadena ligera agrupada en dos familias lambda y kappa
La cadena pesada forma solo una familia.
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Cada cadena tiene:
N-terminal region variable (V)
C-terminal region constante (C)
Dominio V reconoce el antigeno.
Dominio C la respuesta efectora.

El dominio V y el dominio C son codificados separadamente
por los segmentos genicos V y C

Un gen que codifica para una inmunoglobulina completa es
generada por una recombinacion somatica que une al
segmento genetico V con el segmento genetico C

J=joining codifica los ltimos aminocidos de la regin variable, en el
RNA se convierte en la parte terminal del exon variable integro
La cadena ligera es ensamblada como
producto de una unica recombinacin
La cadena ligera lambda es ensamblada por una
recombinacin entre :
Segmento genico V
Segmento genico J-C

Segmento genico V :
leader exon
intron
Region codante variable

Segmento genico J-C :
short J-coding exon
intron
Region C-codante
La cadena ligera kappa es ensamblada como producto
de una recombinacin entre:
Segmento genico V
Uno de los cinco J segmentos geneticos que precede al Segmento
genico C
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La cadena pesada es ensamblada como
producto de dos recombinaciones
Las unidades para recombinar:
Segmento genico V
Segmento genico D
Segmento genico J-C
La primera recombinacin une D a J-C.
La segunda recombinacin une V a D-J-C.
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Una gran Diversidad es generada por
recombinacin
Un locus de cadena ligera produce >1000
cadenas por combinacin:
300 genes V
Cuatro a Cinco genes C
Un locus de cadena pesada H produce >4000
cadenas por combinacin:
300 genes V
20 segmentos D
Cuatro segmentos J
La recombinacin Immune Usa dos
tipos de secuencias concenso
La secuencia concenso usada para la recombinacin es :
heptamer separado por 12 o 23 bp de un nonamero.
La recombinacin ocurre entre dos secuencias concenso que tienen
diferentes espaciamientos.

La recombinacion genera deleciones o
inversiones
La recombinacin
ocurre por ruptura de la
doble hebra en los
heptameros de las dos
secuencias concensos.

Si la recombinacin de
genes es invertida en
lugar de la orientacin
directa, esta es una
inversin y no una
delecin del circulo
escindido.
La seal terminal de los
fragmentos entre las
rupturas usualmente se
unen para generar un
fragmento circular
escindido.

Las terminaciones
codantes son
covalentemente unidas
para formar:
V a J-C (Cadena L )
D a J-C y V a D-J-C (cadena
H)
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Las protenas RAG catalizan la ruptura y unin
de los segmentos
Las protenas RAG son necesarias para la reaccin de corte
RAG1 reconoce el nonamero consenso para la recombinacin.
RAG2 se une a RAG1 y corta el heptamer.
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La reaccin es similar a la de
la topoisomerasa en
transposicion.

Se produce un hairpin
intermediario en el extremo;
La ruptura del hairpin es responsible
de adicin de bases extras (P
nucleotidos del hairpin) en el gen
recombinado.

Adicionalmente son
colocados nucleotidos N al
azar

El procesamiento de los extremos de codificacin introduce variabilidad en la unin
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Deoxynucleosido transferasa inserta adicional N
nucleotidos en el extremo codante.

El codon en el sitio V-(D)J :
Tiene una secuencia extremadamente variable
Codifica para el amino acido 96 en Igs en el sitio de union al
antigeno

La ruptura de doble hebra son reparadas por el mismo
sistema involucrando una reparacin de DNA de union
de los extremos no homologos (system
nonhomologous end-joining of damaged DNA. NHEJ).
Un rearreglo productivo genera una
exclusin alelica
La recombinacin para generar un
gen integro de inmunoglobulina es
productiva si se logra expresar una
proteina activa .

Un rearreglo productivo impide
que ocurra cualquier rearreglo
adicional
Un rearreglo no productivo no
impide la formacin de otro
rearreglo
La exclusion alelica se aplica
separadamente a las cadenas ligeras
(solo puede rearreglarse de manera
productiva una cadena o ) y a las
pesadas (una cadena pesada se
rearregla de manera productiva)

Un exacerbador de la expresin o enhancer en el gen C activa
al promotor del gen V despus de que la recombinacin haya
generado un gen integro de inmunoglobulina.
La expresin de la cadena pesada puede ser
cambiada por el procesamiento del RNA
Todos los linfocitos inician la
sintesis de IgM de
membrana (expresin
temprana)

Un distinto corte y empalme
(RNA splicing), provoca el
reemplazo a la forma de
IgM secretada cuando la
clula B se diferencia
El cambio de clase de Igs es causada
por recombinacin del DNA
Immunoglobulinas estan divididas en 5 clases de
acuerdo a al tipo de regin constante en la cadena
pesada.


El cambio de clase en C
H

ocurre por
recombinacin en la
regin S (switch) :
Borra la region entre la
antigua y la nueva C
H


Pueden presentarse
multiples
recombinaciones de
cambios sucesivos.
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El cambio de clase ocurre por una
reaccin de Recombinacion

El cambio de clase pasa
por etapas bien definidas.

Los promotores inician la
transcripcin
Ruptura doble

Reparacin NHEJ

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La caracteristica importante en la region de cambio
de clase S (switch) es la presencia de regiones
invertidas.

Mutaciones somaticas generan una
adicional diversidad en Ratones y Humanos
Genes de Igs activos tienen regiones V con secuencias que son
cambiadas por mutacion en la linea germinal
Mutaciones somaticas pueden ser inducidas por
Citidine Deaminasa y Uracilo Glycosylasa.

Las celulas B de memoria permiten
una rapida respuesta secundaria
La respuesta primaria es montada por
celulas B que no sobreviven despues del
periodo de respuesta.

Las celulas B de memoria se producen
con especificidad para el mismo antigeno
pero son inactivas.

Una reexposicion reinicia la respuesta .
Las celulas de memoria se activan
rapidamente.
Las celulas T usan un
mecanismo similar de union
de V(D)J-C que las celulas B
para producir los tipos de
receptores T.
Los receptores de celulas T estan
relacionados a Immunoglobulinas
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TCR >95% de linfocitos T ;
TCR <5%.
El receptor de clulas T actua con el
MHC
El TCR reconoce un corto peptido que se une a
la curvatura de la proteina de MHC sobre la
superficie de la celula presentadora.
El locus del complejo Mayor de Histocompatibilidad
codifica para muchos genes del sistema inmune
MHC locus class I y class II
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Class I proteinas importantes en transplante
Reconocimiento de tejidos self de nonself .


Class II
Interaccin con clulas T.
Figure 3-23
MHC class I molecule presenting an
epitope
MHC class II protein
Heterodimerica
y cadena.