IDENTIFICACIÓN DE PROTEINAS

Álvaro Ricardo, Luz Adriana Ramírez y Luis Jerez Obredor

Fundación universitaria san Martin
Odontología Semestre 2
Palabras clave: desnaturalización, proteínas, acido nitrico.

El reconocimiento de proteínas se refiere al proceso mediante el cual una proteína

se une y reconoce específicamente a otra molécula, ya sea otra proteína, un
lípido, un carbohidrato o un ácido nucleico.

Introducción: La denaturalization de alimentarios, como adhesivos,

proteínas es un proceso en el cual la
estructura tridimensional de una
proteína se altera o desestabiliza,
perdiendo su forma nativa y, en
consecuencia, su función biológica.
Esto puede ser causado por cambios
en el pH, la temperatura, la presencia
de agentes químicos o físicos, entre
otros factores.
Albumina: La albumina utilizada en
reacciones químicas se refiere a la
albúmina de huevo o albúmina de
suero bovino, que son formas
purificadas de la proteína albumina.
Estas formas de albumina se utilizan
en diversos experimentos y ensayos
químicos, como estabilizadores de
enzimas, agentes de precipitación,
bloqueadores de sitios de unión y
como proteínas modelo en estudios
bioquímicos y biotecnológicos.
Caseina: La caseína es una proteína
presente en la leche, especialmente
en la leche de mamíferos como las
vacas. Es una proteína de digestión
lenta y se utiliza en la industria
alimentaria para la producción de
productos lácteos como el queso y el
yogur. También se utiliza en la
fabricación de productos no
pinturas y recubrimientos.
Biuret: es un compuesto químico que
se forma por la condensación de dos
moléculas de urea. Es un cristal
blanco o polvo cristalino que se utiliza
en análisis químicos para detectar la
presencia de proteínas. La reacción
del biuret con las proteínas produce
un complejo coloreado, lo que
permite su cuantificación
espectrofotométrica.
Identificar las reacciones por medio
del reconocimiento de proteinas
teniendo en cuenta la
desnaturalizacion, y reducción
agregandole reactivos como acido
nitrico, y biuret.
Metodología: Se inició la practica
tomando 6 tubos de ensayo y una
gradilla además de esto se utilizó un
gotero de 3mL para extraer las
muestras.
Practica#1
En el tubo #1 fue tomado una
preparación de Albumina en el tubo
#2 se tomó una pizca de Caseína y
en el tubo #3 se tomó suficiente
Gelatina sin sabor. a cada tubo de
ensayo se le adicionó 2mL de H2O,
para luego añadirle 10 gotas del
reactivo Biuret a cada uno.
Practica #2:
Se realizo el proceso de
desnaturalización utilizando 1 tubo de
ensayo en el cual fueron agregados
2mL de albumina con ayuda de un
gotero de 3mL y ácido nítrico (HNO3)
con ayuda de una pipeta volumétrica
de 20mL y un auxiliar de pipeteo
hasta lograr observar una reacción
por cambio de color.
Practica #3:
Fue tomado un tubo de ensayo en el
cual se adiciono 2mL de leche con
ayuda de un gotero de 3mL y ácido
acético hasta lograr una reacción por
medio de coagulación.
El sobrenadante fue adicionado a un
tubo de ensayo en el cual se le
agrego posteriormente el reactivo
Biuret hasta que este tuvo una
reacción por cambio de color.
Resultados y discusión:
Fueron tomados 6 tubos de ensayo
en el tubo #1 se añadió albumina
2mL de agua, y 10 gotas del reactivo
de Biuret la cual se observó la
reacción por cambio de coloración la
cual fué en tono violeta ESTO SE
DEBE A? Cuando se utiliza albúmina
y el reactivo de biuret, se produce un
cambio de color debido a la formación
de un complejo coloreado. La
albúmina es una proteína que se
encuentra en abundancia en el
plasma sanguíneo y tiene la
capacidad de formar enlaces
peptídicos con otras moléculas.
El reactivo de biuret contiene cobre,
que tiene la propiedad de reaccionar
con los enlaces peptídicos presentes
en la albúmina. Esta reacción entre el
cobre y los enlaces peptídicos forma
un complejo de coordinación,
conocido como complejo de biuret,
que tiene una estructura química
específica. Cuando se forma el
complejo de biuret, se produce un
cambio en la estructura electrónica
del cobre, lo que provoca un
desplazamiento en la absorción de
luz visible. Este desplazamiento da
lugar a un cambio de color
observable a simple vista.
El complejo formado entre la
albúmina y el reactivo de biuret tiende
a ser violeta o azul intenso,
dependiendo de las condiciones
específicas de la reacción. Este
cambio de color se utiliza
comúnmente como una prueba
cualitativa para detectar la presencia
de proteínas en muestras biológicas.
Es importante tener en cuenta que
este cambio de color no es exclusivo
de la albúmina y el reactivo de biuret.
Otros compuestos que contienen
enlaces peptídicos también pueden
reaccionar con el reactivo de biuret y
producir un cambio similar en el color.
Sin embargo, la albúmina es una
proteína comúnmente utilizada en
experimentos y pruebas bioquímicas,
lo que explica por qué se menciona
con frecuencia en relación con el
reactivo de biuret.
En el tubo #2 se añadió caseina 2mL
de agua y 1o gotas de Biuret la cual
se obtuvo una reacción por cambio
de color, a un color azul verdoso. A
QUÉ SE DEBE ESTO? Cuando se
utiliza caseína y el reactivo de biuret,
se produce un cambio de color
debido a la formación de un complejo
coloreado. La caseína es una
proteína que se encuentra en la leche
y es responsable de su capacidad
para formar coágulos.
El reactivo de biuret contiene cobre,
que reacciona específicamente con
los enlaces peptídicos presentes en
las proteínas. En el caso de la
caseína, que es una proteína
compuesta por una secuencia de
aminoácidos unidos por enlaces
peptídicos, la reacción con el reactivo
de biuret es posible.
Cuando se mezcla la caseína con el
reactivo de biuret, ocurre una
reacción química en la cual el cobre
del reactivo de biuret se une a los
enlaces peptídicos presentes en la
estructura de la caseína. Esta unión
forma un complejo coordinado
conocido como complejo de biuret.
El complejo de biuret formado tiene
una estructura química específica que
absorbe luz visible en una longitud de
onda característica. Este
desplazamiento en la absorción de
luz provoca un cambio en el color
observable a simple vista.
El cambio de color puede variar
dependiendo de las condiciones
específicas de la reacción y la
concentración de caseína presente.
En general, cuando se forma el
complejo de biuret con la caseína, se
observa un cambio hacia tonos
violeta o azulados.
En el tubo #3 se agrego Gelatina sin
sabor, 2mL de agua y 10 gotas del
reactivo biuret la cual reacciono por
medio de cambio de color a un color
translucido en su fondo y violeta en la
parte superior. ¿ESTO SE DEBE A?
La gelatina sin sabor y el biuret son
sustancias químicas con propiedades
distintas y no reaccionan entre sí de
manera significativa. La gelatina sin
sabor, compuesta principalmente de
proteínas, actúa como un agente
gelificante en presencia de agua. Por
otro lado, el biuret es una sustancia
utilizada en bioquímica para detectar
la presencia de enlaces peptídicos en
proteínas.
En el tubo #4 se añadió 2mL de
albumina y se añadió acido nítrico la
cual se obtuvo una reacción por
cambio de color amarillo translucido.
ESTO SE DEBE A? Al mezclar
albúmina con ácido nítrico, se
produce una reacción química
conocida como prueba de
xantoproteica. Esta reacción provoca
un cambio de color observable.
La albúmina es una proteína presente
en diversas fuentes, como la clara de
huevo y el suero sanguíneo. El ácido
nítrico, por otro lado, es un ácido
fuerte. Cuando se combinan, el ácido
nítrico descompone la albúmina en
sus componentes básicos, los
aminoácidos.
Durante esta reacción, los grupos
aromáticos presentes en los
aminoácidos fenilalanina y tirosina se
oxidan. Esto da lugar a la formación
de compuestos nitrofenilos y
nitrotirosilos. Estos compuestos son
amarillos o anaranjados, lo que
provoca un cambio de color en la
mezcla. Así, al mezclar albúmina con
ácido nítrico, se observa un cambio
de color que va desde incoloro o
blanquecino a amarillo o anaranjado.
Este cambio de color es indicativo de
la presencia de proteínas en la
muestra analizada.
En el tubo #5 se agrego 2mL de leche
y ácido acético hasta formar una
coagulación. ¿ESTO SE DEBE A? Al
mezclar leche y ácido acético, se
produce una reacción conocida como
coagulación de la leche. La leche
contiene proteínas llamadas
caseínas, que son solubles en agua.
El ácido acético, al ser un ácido débil,
puede reducir el pH de la leche, lo
que provoca la desnaturalización de
las proteínas.
Cuando el pH de la leche disminuye
debido al ácido acético, las caseínas
pierden su solubilidad y se agregan
entre sí formando una red
tridimensional. Esto resulta en la
formación de grumos o coágulos de
aspecto gelatinoso. La coagulación
de la leche es un proceso importante
en la producción de productos lácteos
como el queso. En este caso, se
utiliza un ácido más fuerte o una
enzima llamada cuajo para lograr una
coagulación más rápida y controlada.
En el tubo #6 se añadió el
sobrenadante y se le agrego Biuret
hasta que se obtuvo una reacción por
cambio de color azul claro. ¿ESTO
SE DEBE A? El cambio de color en
el sobrenadante de leche al mezclarlo
con ácido acético puede deberse a
varios factores. En primer lugar, el
ácido acético puede afectar la
estructura de los pigmentos
presentes en la leche, como la
lactoflavina y la riboflavina, lo que
puede dar lugar a un cambio en el
color. Estos pigmentos son sensibles
a los cambios de pH y pueden
experimentar modificaciones en su
estructura molecular cuando se
encuentran en un ambiente ácido.
Además, la formación de los coágulos
de caseína durante la coagulación de
la leche puede atrapar pequeñas
partículas o impurezas presentes en
el sobrenadante. Estas partículas
pueden contribuir al cambio de color,
ya sea oscureciendo o aclarando el
líquido. Es importante destacar que el
cambio de color puede variar
dependiendo de la composición
química específica de la leche y las
condiciones de la reacción. Por lo
tanto, es posible observar diferentes
tonalidades o matices en el
sobrenadante de leche al mezclarlo
con ácido acético.
 Leche 2mL

Conclusión: Se logro el objetivo de

Fig1
esta práctica debido a que se realizó
el reconocimiento de algunas
proteínas como lo son Albumina,
Caseína, Gelatina, las cuales
indicaban por medio de su reacción
por cambio de color los enlaces
peptídicos que se encuentran en
cada una de estas proteínas, por lo
cual entre menos coloración menos
enlaces péptidos, Agregando algunos
reactivos como lo son acido nítrico,
ácido acético, Biuret.

Fig. 2 BIBLIOGRAFIAS:

1. Reinaldo Ochoa, (1875)

Departamento de Bioquímica y
Biología Molecular, Campus
Universitario de Rabanales,
Córdoba.
2. Suelter CH (1985): A Practical
guide to enzymology, Editorial,
John Wiley & Sons, New York.
3. Villar_Illescas, A. (2018).
Validación de un método
analítico para determinación
del contenido total de
Fig. 3 proteínas en leche.
4. Gonzales M.P (2003) practica
REACTIVOS CANTIDAD
de laboratorio y aula. Madrid,
Albumina Una pizca
Caseína Una pizca Narcea.
Gelatina Una pizca
H2O 6mL
Biuret 30 gotas
Ácido nítrico Suficiente
Ácido acético Hasta formar
coagulación