UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS AGRÍCOLAS

CENTRO DE BIOLOGÍA

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

INTEGRANTES: SALTOS CORAL YIRABEL GABRIELA

CARRILLO VILLAMARIN ISIS CAMILA

MELANI SALETH GUALOTUÑA IMBAQUINGO

CHIMARROS SALAZAR LENIN JOEL

VEGA VELASCO MATEO SEBASTIAN

VERA HIDALGO MARK JOSUE

DOCENTE: CRINTINA TROYA

TÉCNICO DEL CENTRO DE BIOLOGÍA: ANDRES GRANDA
PARALELO: 002
GRUPO: #3
PRACTICA No 3 FECHA: 08/06/2023.

TEMA: BIOMOLECULAS - PROTEINAS

1. OBJETIVOS:
 Identificar las reacciones de las proteínas con diferentes reactivos.
 Observar la desnaturalización en la ovoalbúmina.
 Conocer los cambios tanto físicos y químicos de las muestras establecidas.

2. PARTE EXPERIMENTAL
a. Materiales y Equipos
Materiales: Tubo de ensayo, huevos, leche.
Equipos: Mandil y Cofia
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b. Sustancias y Reactivos
Agua + biuret, Albumina + biuret, Leche + Biuret, Albumina Millon, Albumina + Calor,
Albumina + ácido clorhídrico, Albumina + nitrato de plata.

c. Procedimiento

1. Prueba de Biuret
La identificación de proteínas

Reactivo Biuret Tubo1: Agua y agregamos Biuret entre 6 a 10 gotas

Reactivo Biuret Tubo2: Albumino más Biuret
Reactivo Biuret Tubo3: leche caseína y agregamos Biuret
Reactivo Millon Tubo4: Albumina y agregamos reactivo de millón dejamos en reposo
de 2 a 3 minutos
Reactivo Xontoprotèica Tubo5: En este tubo agregamos Albumina, Ácido nítrico,
reactivo de millón y dejamos enfriar para luego agregar hidróxido se sodio.
Desnaturalización Tubo6: Albumina más calor
Desnaturalización Tubo7: Albumina más ácido clorhídrico un 10%
Desnaturalización Tubo8: Nitrato de plata más Albumina

3. PROCESAMIENTO DE DATOS (solo si se puede)

a. Observaciones y Resultados

En 8 tubos de ensayo procedimos a colocar cada uno de los materiales requeridos en el

laboratorio.

 Rx Biuret

Tubo 1: H2O + Biuret se tornó de color celeste.

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Tubo 2: Albumina + Biuret se tornó de color violeta en la superficie y transparente en la parte

inferior.

Tubo 3: Leche (Caseína) + Biuret se tornó de un color violeta claro.

 Rx Millon

Tubo 4: Albumina + Millon + Calor calentamos en el vaso de precipitado entre 2-3 minutos se
formó una estructura viscosa en la superficie y en la zona inferior se quedó un líquido
amarillento.

Tubo 5: Albumina + HNO3 + Calor + Enfriar + NaOH se formó una sustancia espumosa en la
parte superior y en la zona inferior quedo un líquido amarillo.

Tubo 6: Albumina + Calor se tornó de color blanco.

Tubo 7: Albumina + HCl (10%) se generó un residuo blanco en el fondo del tubo y en la parte
superior se quedó un líquido transparente.

Tubo 8: AgNO3 + Albumina se tornó de color blanco con burbujas en la parte superior.

Figura 1 Figura 2 Figura 3

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Figura 4 Figura 5 Figura 6

Figura 7 Figura 8

En las practicas, pudimos constatar varios cambios al momento de hacer reaccionar varias
proteínas como la leche y la albumina las cuales, al reaccionar con distintas sustancias o
reactivos, de los cuales algunos requirieron de calor, se constataron algunos cambios observados
a simple vista.
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Tabla 1 prueba de Biuret

Prueba Observación Resultado Reacción

El R. Biuret se Se torno de un color Se torno de ese color ya Reacción
mezcló con la celeste claro bajo que no hay presencia de negativa
sustancia H2O proteínas

El R. Biuret se Se formo un líquido Se torno de ese color Reacción

lo mezclo con espeso de un color por la presencia de positiva
Albumina morado intenso proteína
Con un burbujeo en la
parte superior
El R. Biuret se Se formo un líquido Se torno de ese color Reacción
lo mezclo con complejo debido a las debido a la presencia de positiva
leche características de la leche proteínas
y se tornó de un color
violeta en su totalidad

Tabla 2 prueba de Millón

Prueba Observación Resultado Reacción

Colocamos en un La solución se tornó Se torno de esa Reacción Positiva
tubo de ensayo de un precipitado forma debido a que
albumina más R. blanco, que posterior hay presencia de
Millon, procedimos mente se formó a un tirosina
a calentarlo por 2 rojo carnoso (aminoácidos de
min proteínas)
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Tabla 3 prueba de Xantaproteica

Prueba Observación Resultado Reacción

Colocamos en un Luego de dejarlo El líquido se Reacción positiva
tubo de ensayo reposar, el líquido se transformó de esa
albumina más tornó de un color manera debido a la
HNO3, selo calentó, amarrillo intenso, presencia de
procedimos a dejarlo con una presencia de proteínas de grupos
enfriar para así coágulos carnosa aromáticos
añadir NaOH

Tabla 4 prueba de desnaturalización

Prueba Observación Resultado Reacción

Colocamos albumina Se torno de un color Debido a la Positiva para
en un tubo de ensayo blanco intenso presencia de iones desnaturalización
y la sometimos a espeso orgánicos hubo una
calor unión en su
estructura
Colocamos albumina Se torno de un color Se formo una Positiva para
en un tubo de ensayo claro intenso al coagulación al fondo desnaturalización
más HCl fondo del tubo una del tubo debido a
coagulación que se rompen los
enlaces
Colocamos albumina Se liquido se tornó Se formaron los Positiva para
en un tubo de ensayo de un color blanco coágulos debido a desnaturalización
más AgNO3 intenso con una que se rompen los
coagulación por toda enlaces
la sustancia
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4. DISCUSIÓN

En base a las proteínas se realizó el análisis del método del Biuret: Se basa en la formación de un
complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico.
1Cu2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad de coloración es directamente proporcional a la
cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que
pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la
cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados (por ejemplo, en suero). (Cejudo,
2020)

En base a las proteínas se realizó el análisis del método del Millon: La reacción es debida a la
presencia del grupo hidroxifenílico (C6H4OH) en la molécula proteica. Cualquier compuesto
fenólico no sustituido en la posición 3,5 como la tirosina, fenol y timol, dan positiva la reacción.
El mecanismo de la reacción es poco conocido, posiblemente por la formación del complejo
óxido de mercurio y fenol. (Ing. Yanira G. Vázquez-Jorge, 2014)

Prueba Xantoproteica: Es una reacción que reconoce los aminoácidos que poseen el grupo
bencénico (tirosina, fenilalanina, triptófano). Las proteínas que tienen en su composición estos
aminoácidos también darán la reacción. La positividad se reconoce por la aparición de un color
amarillo o verde debido a la formación de nitrocompuestos. (Ing. Yanira G. Vázquez-Jorge,
2014)

5. CONCLUSIONES
 Identificamos con éxito la presencia de proteínas en las mezclas que se realizó
determinada mediante el reactivo Biuret que contiene CuSO4 en una solución acuosa
alcalina, como se mencionó anteriormente tornándose a un color violeta-purpura por la
presencia de péptidos y proteínas. En el caso del reactivo Millon que contiene (Hg
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(NO3)2) y (HNO3) el cual es un medio fuertemente acido se tornó color rojo-marrón por
la presencia de aminoácido tirosina.
 Con el procedimiento adecuado y mediante el calentamiento y enfriamiento pudimos
obtener la desnaturalización de la ovoalbúmina y este cambio trae como consecuencias
perdidas en las estructuras secundaria, terciaria o cuaternaria pero no en la primaria.
 En todos los tubos se obtuvo la reacción y pudimos observar los cambios físicos y
químicos de cada uno de ellos, desde el cambio de color y la temperatura hasta su
densidad y apariencia.

6. CUESTIONARIO

CUESTIONARIO PRÁCTICA 4. BIOMOLÉCULAS. PROTEÍNAS.

1. ¿Qué son las proteínas y cuál es su función principal en los organismos vivos?
Las proteínas están formadas de aminoácidos y están unidos por enlaces péptidos, las
proteínas tienen un peso aproximado de la mitad del organismo, contienen C, H, O, N. Su
función principal es el crecimiento gracias a su contenido de nitrógeno, además de que
funciona para el mantenimiento de las estructuras corporales (CuidatePlus, 2021).

2. ¿Qué es la desnaturalización de las proteínas y qué factores pueden

desencadenarla? ¿Cómo afecta esto a la función de las proteínas?
La desnaturalización viene a ser la ruptura de enlaces no covalentes existentes en la
estructura de la proteína, esto provocaría la pérdida de su forma, pérdida de estructura y
perdida de función de la proteína, el causante de esta desnaturalización es el pH, factores
ambientales, temperatura o agentes químicos. La desnaturalización afecta a la unión de
aminoácidos que forman las proteínas (StudySmarter, s.f.).

3. Explique con un ejemplo las estructuras: primaria, secundaria, terciaria y

cuaternaria de una proteína.
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Primaria: Fosfoserina, sucesión lineal de aminoácidos que forman la cadena peptídica.

Secundaria: Queratina, mantienen ordenamiento sin recurrir a grandes modificaciones,
pueden formar hélices o láminas.
Terciaria: alfa queratina, plegamiento global de la cadena polipeptídica, da lugar a una
forma tridimensional específica (StudySmarter, s.f.)
Cuaternaria: Hemoglobina, acoplamiento de varias cadenas polipeptídicas con estructuras
terciarias, quedan auto ensambladas por enlaces débiles no covalentes.

4. ¿Cuál es la estructura básica de una proteína y cómo influye en su función?

Estructura primaria – aminoácidos, Su estructura sirve para confeccionar una
clasificación de la complejidad de estas, esta estructura es la responsable de generar
determinadas funciones esenciales para los seres vivos. Cabe mencionar que esta
estructura está determinada por el ADN (López, 2015).
5. ¿Cuál es el fundamento de identificación de proteínas o péptidos a través del
reactivo de Biuret, Millon y la reacción Xantoproteica?
El reactivo de biuret es caracterizado por su color violeta, esto posterior a su adición de
sulfato de cobre a todos los componentes que tengan dos enlaces peptídicos unidos a
través de un átomo de carbono intermedio. Se una para la detección de proteínas y
péptidos que tienen más de dos aminoácidos.
En la reacción de millón Se da un coagulo blanco que si es sometido al calor forma un
coagulo de color rojo, esto identifica restos de tirosina (Uzai, s.f.).
En la reacción xantoprotéica se puede determinar la presencia de proteínas solubles en
una solución, usando ácido nítrico concentrado, su resultado es positivo cuando las
proteínas tienen aminoácidos portadores de grupos aromáticos.

6. ¿Qué indica la intensidad de coloración con el Reactivo de Biuret?

La intensidad en proporcional a la cantidad de proteínas, enlaces péptidos, la coloración
es de tonalidad violeta. (StudySmarter, s.f.)
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7. ¿Cómo se forma un enlace peptídico de una proteína? Grafique y rotule.

Figura 9

8. ¿En base a qué se establece los aminoácidos esenciales? Escriba la fórmula de 3 de

ellos.
Los aminoácidos son los que el cuerpo no puede obtener por sí mismo, por lo tanto, se
debe proporcionar mediante la alimentación.

Figura 10 Figura 11 Figura 12

9. ¿Cuáles son las fuentes principales de proteínas en la dieta humana y por qué son
importantes para la salud?
El colágeno, la queratina y la elastina, de ahí productos consumibles en la alimentación
serían productos lácteos, carnes, algunos granos, huevo y frutos secos. Son importantes
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para el desarrollo de tejidos y masa muscular, para nutrir al cuerpo y desarrollar fuerza
física, fuerza en los huesos y órganos.

10. Describa al menos una función de cada uno de los 10 aminoácidos esenciales.
Arginina: En el cuerpo se convierte en óxido nítrico, este hace que los vasos sanguíneos se abran
más para mejorar el flujo sanguíneo

Histidina: Estimula la producción de jugo gástrico en el estómago, favoreciendo a la digestión.

Elimina exceso de metales pesados y protege de la radiación solar

Isoleucina: Esencial para la síntesis de hemoglobina y para la regulación de los niveles

sanguíneos de glucosa.

Leucina: Estimula la síntesis de proteínas musculares

Lisina: Construye tejido muscular y colágeno, el colágeno es fundamental para el cartílago,

tejido conectivo y piel.

Metionina: Es beneficiosa para las articulaciones, protegiéndolas de la artritis crónica (Sikorska,

2023).

Fenilalanina: Se necesita para metabolizar las proteínas

Treonina: Formación de colágeno y elastina. También ayuda a la digestión e inmunidad

Triptófano: ayuda a producir melatonina y serotonina, la melatonina ayuda a regular el ciclo del
sueño y la serotonina ayuda a regular el apetito, el sueño, el estado de ánimo y el dolor
(DrTango, 2022).

Valina: Sintetiza las proteínas musculares, proporciona energía durante ejercicio físico intenso

7. BIBLIOGRAFÍA
Cejudo, E. F. (2020). Métodos para la cuantificación de proteínas. Campus Universitario de
Rabanales,Edificio Severo Ochoa, 14071-Córdoba .
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https://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/27%20METODOS%20PARA%20LA%20CUANTIFICACION%20DE%20PROT
EINAS.pdf

Ing. Yanira G. Vázquez-Jorge, D. L.-M.-T.-B.-J. (2014). Caracterización físicoquímica y

contenido de proteínas de extractos fluidos del ostión de mangle (Crassostrea rizophorae).
Revista Cubana de Química.
https://www.redalyc.org/pdf/4435/443543737009.pdf

Claudia, U. (s.f.). Práctico N°2: Proteínas. Liceo 6:

https://liceo6.weebly.com/uploads/7/1/5/4/7154339/pr%C3%A1ctico_n%C2%BA2_prote%
C3%ADnas_pos_lab.pdf

CuidatePlus. (16 de 2 de 2021). Proteínas. Cuidate plus:

https://cuidateplus.marca.com/alimentacion/diccionario/proteinas.html

DrTango. (2 de 4 de 2022). Triptófano. Medlineplus:

https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002332.htm

López, R. (2015). La materia viva. Gobierno de España, Ministerio de Educación:

http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/profesor/formacion.htm

Sikorska, J. (03 de 1 de 2023). Metionina. Foodcom: https://foodcom.pl/es/metionina-

propiedades-y-usos-en-la-alimentacion-
animal/#:~:text=La%20funci%C3%B3n%20de%20la%20Metionina,muchos%20procesos%
20metab%C3%B3licos%20del%20organismo.

StudySmarter. (s.f.). Desnaturalización de las proteínas. StudySmarter:

https://www.studysmarter.es/resumenes/quimica/enlaces-quimicos
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