UNIDAD II

Replicación
del ADN
Rolando Laurel Laurel
 Contenido

2.1 Características de la 2.7 Estructura y función de las polimerasas en

procariontes
replicación 2.8 Estructura y función de las polimerasas en
2.2 Replicación semiconservativa eucariontes
2.3 Origen de la replicación 2.9 Enzimas y factores proteicos de la replicación:
replicasa, helicasa, topoisomerasa, primasas, ligasas.
2.4 Dirección de la replicación 2.10 Proceso de replicación.
2.5 Fidelidad de la replicación Iniciación
2.6 Tipos de DNA polimerasas Elongación
Terminación
 01

Características
de la Replicación
Características
01
Proceso semiconservador

- Fin: síntesis de una nueva cadena

- Producto: Dos nuevas moléculas de ADN

- Cada cadena de ADN parental actúa de

molde

- Cada molécula nueva posee una cadena

vieja y una nueva.
Características
02
Comienza en un punto del ADN

- Ambas cadenas ADN se replican al mismo tiempo

- Inicia un punto —> Origen

- El ADN parental se desenrolla en este punto

- El ADN parental forma un lazo

- Los extremos del lazo se denominan horquillas de

replicación
Características
02
Comienza
Comienza en un puntoen
delun
ADNpunto del
ADN
- Ambas cadenas ADN se replican al mismo tiempo
Cromosoma circular bacteriano
Punto
- Inicia un punto —>inicial
Origen

En un gen denominado oriC

- El ADN parental se desenrolla en este punto

- El ADN parental forma un lazo cuyos

- Los extremos del lazo se denominan horquillas de

replicación
Características
03
Replicación es bidireccional

- Inicia en un punto del ADN

- El proceso se desarrolla hacia los dos

extremos de la cadena

- Formándose dos lazos

- Los extremos u horquillas de replicación

avanzan hasta completar la copia
Características
04
La síntesis de ADN se desarrolla en dirección 5'
→ 3’

- Las enzimas tienen una dirección fija y única:

Dirección 5’ a 3'.

- ∴ La cadena molde tendrá dirección 3’→5'

- ∴ La cadena nueva tendrá dirección 5' →3'

- De esta forma la cadena en formación,

complementaria y antiparalela coincidirá con el
sistema de trabajo de la enzima
Características
05
La síntesis de ADN es semidiscontinua

- Debido a la diferencia de direcciones

- En una cadena —> síntesis continua

- En su paralela —> síntesis discontinua
Características
05
- Okazaki:
1. Formación de cadena nueva continua
(Conductora)
. Síntesis desarrollada en misma dirección de la
enzima o de la horquilla de replicación

2. Otra cadena nueva era discontinua (Rezagada o

retrasada)
. Síntesis en contra de la dirección de la horquilla
. Síntesis mediante fragmentos

- Fragmentos de Okazaki
. Secuencias formadas por centenares o miles de
nucleótidos
Características
05
- Okazaki:
1. Formación de cadena nueva continua
(Conductora)
. Síntesis desarrollada en misma dirección de la
enzima o de la horquilla de replicación

2. Otra cadena nueva era discontinua (Rezagada o

retrasada)
. Síntesis en contra de la dirección de la horquilla
. Síntesis mediante fragmentos

- Fragmentos de Okazaki
. Secuencias formadas por centenares o miles de
nucleótidos
Fidelidad de la Replicación
Extr
a
- Error que es producido por cada base duplicada

- Alta:

. Sólo 1 error es producido cada 109 pares de

bases duplicadas

. ADN polimerasa
- Comete un error por cada cien millones o mil
millones de nucleótidos procesados

. Fidelidad entre 10 8 y 109

Fidelidad de la Replicación
Extr
a
- Error que es producido por cada base duplicada

- Alta:

. Sólo 1 error es producido cada 109 pares de

bases duplicadas

. ADN polimerasa
- Comete un error por cada cien millones o mil
millones de nucleótidos procesados

. Fidelidad entre 10 8 y 109

Características
- Okazaki:
1. Formación de cadena nueva continua
(Conductora)
. Síntesis desarrollada en misma dirección de la
enzima o de la horquilla de replicación

2. Otra cadena nueva era discontinua (Rezagada o

retrasada)
. Síntesis en contra de la dirección de la horquilla
. Síntesis mediante fragmentos

- Fragmentos de Okazaki
. Secuencias formadas por centenares o miles de
nucleótidos
 02

Tipos de ADN
polimerasas
 ADN polimerasas

- Basada en una reacción química

- Reacción de polimerización

- Formación de un enlace
fosfodiéster entre nucleótidos
 ADN polimerasas

- Reacción es termodinámicamente
favorable:

1. Hidrólisis del pirofosfato

2. Interacciones no covalentes de las
bases

- Reacción es catalizada por varias enzimas

ADNpolimerasas
 Necesitan una cadena de ADN molde
Sigue el principio de complementariedad de
bases
Fijan el nucleótido en formación
Necesitan un cebador
Polimerización requiere una cadena previa inicial (cebador)
- Son incapaces de comenzar la síntesis
- Sustrato: Cadena preexistente
- Ninguna es capaz de iniciar síntesis desde
su primer nucleótido

- Reacción es termodinámicamente
favorable:
ADN
polimerasas
1. Hidrólisis del pirofosfato
Dirección de síntesis fija de 5'→ 3’ Procesividad
2. Interacciones no covalentes de las
Adición de nucleótidos en extremo
fijo bases
(extremo 3’) Velocidad con que adicionan nucleótidos
Usan su grupo fosfato o extremo 5'
para añadirlo a la cadena
- Reacción es catalizada por varias enzimas Se mide como el número de nucleótidos
Característica propia en
incorporados de la
cada polimerasa.
unidad de tiempo

ADNpolimerasas
Estructura y función de las polimerasas en procariontes

Fidelidad

- ADN-polimerasas tienen precisión

- Errores son corregidos por polimerasas

- Capacidad de corrección
. Mediante discriminación de bases correctas e
incorrectas
 Estructura y función de las polimerasas en eucariontes

ADN polimerasas en eucariotas

- Número de ADNP mayor que en

procariotas

- Se conocen 14

- Cinco con importancia para la replicación

Pol α, Pol β, Pol γ,

Pol δ y Pol ε
 Estructura y función de las polimerasas en eucariontes

- Familia A: ADN polimerasas γ, θ y ν

- Familia B: ADN polimerasas α, δ, ε y ζ

- Familia X: ADN polimerasas β, λ, σ y μ

- Familia Y: ADN polimerasas η, ι y κ

 Estructura y función de las polimerasas en eucariontes

- Familia A: ADN polimerasas γ, θ y ν

- Familia B: ADN polimerasas α, δ, ε y ζ

- Familia X: ADN polimerasas β, λ, σ y μ

- Familia Y: ADN polimerasas η, ι y κ

Características
- Okazaki:
1. Formación de cadena nueva continua
(Conductora)
. Síntesis desarrollada en misma dirección de la
enzima o de la horquilla de replicación

2. Otra cadena nueva era discontinua (Rezagada o

retrasada)
. Síntesis en contra de la dirección de la horquilla
. Síntesis mediante fragmentos

- Fragmentos de Okazaki
. Secuencias formadas por centenares o miles de
nucleótidos
Enzimas y factores proteicos de la replicación:
helicasa, topoisomerasa, primasas, ligasas

- Proteínas para la replicación

- Descritas 20 proteínas diferentes

- Conjunto: Sistema ADN replicasa o

replisoma

- Constituyen una unidad funcional

 Enzimas
01 Helicasas

Enzimas que separan las dos cadenas de

la molécula de ADN parental
Se desplaza a lo largo de la molécula de
ADN
Eliminan los enlaces entre las cadenas
consumiendo en el proceso ATP
 Enzimas
01 Helicasas

Van Brabant (2000), describieron las

ADN Helicasas
Enzimas con función de desenrollar el
ADN
Replicación, reparación, recombinación
del ADN
 Enzimas
01 Helicasas

Separan cadena del ADN en hebras simples

Comienzan a desenrollar el ADN en
colocaciones conocidas como
Usan energía almacenada (ATP)
Involucradas en reparación y transcripción
del ADN
 Enzimas
01 Helicasas

Importancia clínica
Cuando ocurren mutaciones en genes codificantes para helicasas
Trastornos genéticos humanos con predisposición al cáncer
Helicasas XPB y XPD
Presentes en reparación y transcripción de nucleótidos
Genes BLM, WRN y RECQL4
Fallas en la reparación y deficiencia en recuperación de la
transcripción del ARN (radiación UV)
Xeroderma pigmentoso, Sx Cockayne, tricotiodistrofia, Sx Bloom,
Sx Werner y Sx Rothmund-Thomson.
 Enzimas
02 Topoisomerasa

Enzimas que pueden desenrollar el ADN

Enzimas que pueden relajar el ADN
Cuatro topoisomerasas (I a IV)
Actúan:
Eliminando superenrollamientos
negativos
Induce superenrollamientos negativos
 Enzimas
02 Topoisomerasa

Únicas enzimas que resuelven

problemas topológicos de la replicación,
recombinación y transcripción del DNA
En 5 genes (TOP1, TOP2A, TOP2B, TOP3A
y TOP3B)
Inicia ciclo catalítico en la formación de
la rotura transitoria del ADN
 Topoisomerasa
02
 Topoisomerasa
02
 Topoisomerasa
02
 Enzimas
02 Topoisomerasa

Enzimas que pueden desenrollar el ADN

Enzimas que pueden relajar el ADN
Cuatro topoisomerasas (I a IV)
Actúan:
Eliminando superenrollamientos
negativos
Induce superenrollamientos negativos
 Enzimas
03 Primasas

Enzimas que sintetizan el cebador

Fragmento corto de ARN
Necesario para ADN polimerasa III
Eliminado y sustituido por un
fragmento de ADN por la ADN
polimerasa I.
 Enzimas
03 Ligasas

Enzimas encargadas de unir

trozos formados de cadenas
Mediante un enlace fosfodiéster
Entre nucleótidos
pertenecientes a dos
segmentos de una cadena
 Proceso de Replicación
Fase de
01
Iniciación

En función a la
Fase de participación de cada
02 enzima
Elongación

Fase de
03
Terminación
 El origen de la replicación:

Inicio
En una porción de ADN
- Contiene una secuencia
característica de bases
Segmento reconocido por una
proteína determinada del ADN
 Fase de elongación
Formación del cebador y la síntesis
de la cadena de ADN
 - En Escherichia coli con un
Fase de terminación
cromosoma circular
- Dos horquillas de la replicación
se encuentran en el extremo
contrario al origen terminando así
la replicación y necesitando,
únicamente, la presencia de una
topoisomerasa para la separación
de las dos moléculas
What do we see in the graph?

Another characteristic is that there points, meaning the function

are no curves whatsoever always increases at the same
rate. We will touch on what slope
The line is only straight and it is in the next section lesson!
stretches infinitely in both
directions. Linear functions also
have the same slope across all the
Table of contents

Features of the
01
parent function

Important
02
terms to know
What you need to be successful
Here are important terms and vocabulary important to linear functions
that you need to know to succeed

“Slope”
Slope is the average rate of change at all the points of a linear function. You can find the slope
between 2 points by taking the change in y (subtracting the y values of 2
coordinates of the function) and dividing it by the change in x(subtracting the
x values of 2 coordinates of the function- must be subtracted in the same
order that the y values were). Slope is also known as rise over run because y
values go from up to down (rise and fall) and x values go from left to right (you
can run from left to right or right to left)
 What you need to be successful

“Horizontal and
vertical”
Horizontal and vertical lines are 2 very
special cases that come up. Horizontal
y=3
lines always have a slope of 0 because
the change in y is always 0. The
function isn’t going up or down but
instead always staying put and only
going from left to right

Follow the link in the graph to modify its data and then paste the new one here.

For more info, click here

What you need to be successful

A vertical line has an undefined

slope because the change in x is always 0,
and you cannot divide by zero (remember
slope is change in y/change in x). x=3
Also a vertical line by default fails
the vertical line test, so it is not
even a function

Follow the link in the graph to modify its data and then paste the new one here.

For more info, click here

This is a basic introduction to
what you need to know to
get started with
linear functions
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 JANU FEBRU MAR APR MA JUN
ARY ARY CH IL Y E

PH
AS
E
Ta1
sk
1
Ta
sk
2
PH
AS
E
Ta2
sk
1
Ta
sk
2

JANUARY FEBRUARY MARCH APRIL

PHASE
1

Task 1

Task 2
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