UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE

MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES

ZARAGOZA

Carrera de Biología

Ciclo Intermedio 4to semestre 2023-2

LIF lV. Unidad de aprendizaje 1.

Anteproyecto Experimento 2.

COMPORTAMIENTO SAPONINA EN SEMILLAS DE LENS CULINARIS

ESTRESADAS CON SUSTRATOS DE DIFERENTE pH.

Asesora: Dra. Yolanda Córdova Galaviz

Equipo 9

Herrera Patricio Fernando Enrique

Frias Zavala Miridalia

Ballesteros Maya Mariana

Carmona González Jesús Etiene

Sánchez Cerón María Alejandra

Grupo: 2451 Fecha de entrega: 24-02-2023

INTRODUCCIÓN
La Lenteja (Lens Culinaris) es una especie dicotiledónea, herbácea, anual, de porte erecto y
ramificado. Pertenece a la familia de las Leguminosas y es de hábito de crecimiento
indeterminado.Se encuentra registrada como la cuarta leguminosa de importancia mundial y
actualmente se cultiva en cuatro millones de hectáreas en las regiones templadas,
subtropicales y tropicales (5) por lo que se adapta a condiciones agroclimáticas adversas con
temperaturas que oscilan entre 6 a 28 ºC, precipitaciones anuales de 260 a 850 mm y altitudes
comprendidas entre los 100 hasta 3 100 metros.La lenteja crece en una amplia gama de
suelos, desde los más ligeros a los más pesados, con pH comprendido entre 5,5 a 9,0. Las
tierras fértiles así como la humedad elevada, provocan un exceso de producción de follaje
con mermas en la producción de granos . (Cárdenas T. 2014)
En la mayoría de leguminosas podemos encontrar un metabolito importante para su supervivencia la
saponina durante el proceso de experimentación analizaremos el comportamiento de este metabolito
en el germinado de semillas de Lens Culinaris sometidas a un estrés de pH en el sustrato. Las
saponinas son metabolitos secundarios que constituyen una gran familia de compuestos
estructuralmente constituidos por un anillo terpenoide o esteroidal, conocidos como aglicona
o sapogenina, sustituidos por oligosacáridos a través de enlaces glucosídicos que les
confieren un carácter anfifílico (véase la figura 1).

Figura 1. Estructura general de una saponina. Se indica el enlace glucosidico entre la aglicona
y un glucósido.

Las saponinas no resisten cambios bruscos de pH, valores muy ácidos o básicos generan la
ruptura de los enlaces O-glucosídicos (véase figura 1). Esta característica es útil y empleada
en metodologías para su cuantificación y elucidación estructural. (A. Ahumada 2016)
La práctica del encalado se refiere a la aplicación de un material alcalinizante al suelo, cuyo objeto es
reducir la acidez del mismo e incrementar la disponibilidad de nutrientes, en especial calcio y
magnesio ( Ken 2006 ).
La afrosimetría es un método de evaluación de saponinas el cual está basado en la propiedad
físico-química que presenta las soluciones acuosas de saponinas, disminuyendo la tensión superficial
de los líquidos acuosos, provocando abundante espuma por agitación. Esta medida es preciso efectuar
en determinadas condiciones para que pueda tomarse como base analítica. Para determinarlo se
procede primero a preparar un macerado, un lixiviado o una infusión de la muestra ( Enzio, Et al.
2005 ).

OBJETIVOS

Observar el comportamiento de saponina en semillas de Lens Culinaris estresadas con dos

sustratos de distinto pH.
Analizar los cambios físicos o repercusiones que causan el cambio de pH en la germinación
de las Lens Culinaris.
Comprobar la disminución de saponina en semillas de Lens Culinaris sometidas a un
aumento de pH.

HIPÓTESIS

La saponina es un metabolito secundario presente en las semillas de Lens Culinaris; durante

este experimento buscamos observar su comportamiento al aplicar un estrés de cambio de pH
en la germinación de Lens Culinaris, esperamos una disminución de la presencia de
saponina debido su sensibilidad a un pH muy básico o muy ácido tras generar la
ruptura de enlaces O-glucosídicos (A. Ahumada 2016) y un crecimiento regular para la
semilla debido a que el cambio de pH no será muy alejado a los parámetros óptimos
para su crecimiento.

METODOLOGÍA EN LABORATORIO

Material

➢ Dos contenedores de plástico (espacio suficiente para plantar 20 semillas en cada uno)
➢ Tierra de maceta (suficiente para los contenedores, 10 cm de grosor en el sustrato)
➢ 40 semillas de LENS ESCULENTA
➢ Medidor de pH para suelo (tiras reactivas de pH)
➢ Tres vasos de precipitados de 50, 150, 500 mL
➢ Dos morteros con pistilo
➢ Parrilla de calentamiento
➢ Dos gasas
➢ Dos ligas
➢ Tres tubos de ensayo
Reactivos
Cal (CaO)
Agua destilada

Material biológico
40 semillas de Lens Culinaris

Procedimiento

Preparación de la semillas
● Las 40 semillas se pondrán a remojar en agua potable con un pH de 7, durante 7 horas
antes de ser plantadas.

Preparación del sustrato

● Medir el pH del sustrato y rellenar los contenedores con el mismo.
● Se agregó 50 g de CaO a uno de los dos contendedores (contenedor amarillo),
posteriormente se umedecio el sustrato ligeramente, mezclamos el sustrato con la cal,
por ultimo medimos el pH (este proceso se realizo tres veces para poder llegar al pH
de 12, agregando finalmente 150 g de CaO).
● En ambos contenedores se marcaron 4 surcos.

Proceso de plantación de LENS ESCULENTA

● Plantar 20 semillas en cada contenedor (cinco semillas en cada surco), regar con agua
potable sin producir charcos ( solo humedecer). (Figura 2)
● Regar una vez al día durante dos días para ambos lotes (en caso de notar sequía se
debe regar).
Preparación del extracto de saponina
1. Desenterrar las semillas germinadas de ambos
contenedores, retirando bien la tierra y colocarlas en
un frasco de vidrio etiquetado con el valor de su pH.

2. En un mortero triturar las semillas, añadir 7 ml de

agua destilada y proceder a triturarlas (Figura 3).

3. Filtrar el líquido en un vaso de precipitados

respectivamente (etiquetados con el pH del sustrato),
colocando una gasa sobre la boca del vaso
sosteniendola con una liga (Figura 4).

4. En dos tubos de ensayo previamente

etiquetados, colocar en cada uno 2 ml de la
suspensión.

5. Repetir los pasos anteriores con ambas

muestras.

6. En un vaso de precipitado de 500 ml añadir 250 ml

de agua corriente, colocarlo en la parrilla de
calentamiento y esperar a que esté a punto de
ebullición, sumergir cada tubo de ensayo en el agua
por 5 minutos generando movimientos circulares en
el sentido de las manecillas del reloj (Figura 5).

7. Sacar el tubo de ensayo del agua para observar su

coloración y si produjo espuma. En caso de no presentar ningún cambio, volver a
sumergir la muestra por 2 minutos más mientras se mueve en forma circular. Retirar
el tubo de ensayo del agua, observar la aparición de espuma y medir el tiempo en que
tarda en desaparecer.
RESULTADOS
La muestra #1 con pH de 8 tardó 16 minutos en desaparecer su espuma ( + )

Figura 6 Muestra 1 del lote control

La muestra #2 con pH de 8 conservó su espuma por más de 30 minutos y el líquido cambio

de color beige a blanco. ( +++ )

Figura 7 Muestra 2 del lote control

La muestra #1 con pH de 12 en 10 minutos desapareció su espuma. ( + )

Figura 8 Muestra 1 del lote encalado

DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS

Los resultados obtenidos concuerdan con lo descrito por ( Enzio V. 2005 ) en el cual califica
la persistencia de la espuma de la siguiente manera: 5 - 20 min. (+); 20 - 25 min. (++); 30 -
Más (+++). Mostrando que las muestras no encaladas tenían una mayor cantidad de
saponina.
Debido a fallas en el proceso de filtración parte de las muestras se perdió lo que hizo que no
se pudiera obtener un resultado más completo (Figura 9).

Figura 9 derrame de la muestra de LENS

ESCULENTA en el proceso de filtración
del lote problema.

CONCLUSIÓN
La hipótesis planteada se comprobó de manera casi satisfactoria, ya que los fallos en
el número de muestras que fueron plantadas en ambos lotes impidió recabar una
mayor cantidad de datos y obtener un resultado más preciso, sin embargo las
calificaciones dadas a los resultados mostraron que la cantidad de saponina disminuyó
en el lote encalado.
BIBLIOGRAFÍA
Cárdenas Travieso, Regla M, Ortiz Pérez, Rodobaldo H, Rodríguez Miranda, Odile, de la Fé
Montenegro, Carlos F, & Lamz Piedra, Alexis. (2014). Comportamiento agronómico de la lenteja
(Lens culinaris Medik.) en la localidad de Tapaste, Cuba. Cultivos Tropicales, 35(4), 92-99.
Recuperado en 09 de febrero de 2023, de
https://www.researchgate.net/publication/317519115_Comportamiento_agronomico_de_la_lenteja_Le
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Home & garden, (2016) CAMBIANDO EL pH DEL SUELO, rescatado de pagina web:
https://hgic.clemson.edu/factsheet/cambiando-el-ph-del-suelo/#:~:text=El%20pH%20ideal%20var%C
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AGRI NOVA SCIENSE, Rescatado de pagina
web:https://infoagro.com/herbaceos/legumbres/lenteja.htm
https://hgic.clemson.edu/factsheet/cambiando-el-ph-del-suelo/#:~:text=Dos%20de%20los%20materia
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AGROLOGICA, (2012), CORRECCIÓN DE UN SUELO ALCALINO, RESCATADO DE PAGINA

WEB : https://blog.agrologica.es/correcion-de-un-suelo-alcalino-ph-basico/

A. Ahumada, A. Ortega, D. Chito, R. Benítez, Saponinas de quinua (Chenopodium quinoa Willd.): un

subproducto con alto potencial biológico, Rev. Colomb. Cienc. Quím. Farm., 45(3), 438-469 (2016).