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RELACIONES PLANTA- AGUA

POTENCIAL HÍDRICO DE UN TEJIDO VEGETAL


METODOS DE PESO TISULAR Y METODO DE COLORACIÓN DE
SHARDAKOV
1
Argoty Salcedo Jhon Jeiner (1.004.199.220); 2Acuña Pinzón Camilo
(111.649.525); 3Bernal Sossa José Alejandro (1.115.721.277); 4Álvaro
Cañizarez cañizarez (1.007.357.409).

Universidad de Pamplona

Facultad Ciencias Agrarias

Programa De Ing. Agronómica


Laboratorio de Fisiología Vegetal, Facultad de ciencias básicas, Universidad de Pamplona,
Norte de Santander, Colombia.

RESUMEN.
Esta práctica tiene como objetivo comprender el potencial hídrico de tejidos vegetales
utilizando métodos indirectos cualitativos y cuantitativos basados en la concentración molar
de sacarosa. Se emplean tubérculos de papa y tejidos de cebolla como materiales de estudio.
El procedimiento consta de dos métodos: el método de peso tisular y el método de coloración
de Shardakov. En el método de peso tisular, se preparan soluciones de sacarosa de diferentes
concentraciones y se sumergen cilindros de papa en estas soluciones. Luego se registran los
cambios de peso de los cilindros después de un tiempo determinado. El método de coloración
de Shardakov implica el uso de azul de metileno para observar la difusión de una gota de
solución en contacto con los tejidos de papa. Además, se realiza un experimento similar con
tejidos de cebolla para observar cómo las células reaccionan en soluciones con diferentes
potenciales osmóticos, registrando si permanecen turgentes o se plasmolizan.

Palabras claves: Potencial hídrico, tejido vegetal, sacarosa, método de peso tisular, cilindros
de papa, azul de metileno, tejidos de cebolla, turgencia.

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INTRODUCCIÓN
En el ámbito de la biología y la botánica, comprender las relaciones entre las plantas y el
agua es esencial para abordar una variedad de procesos fisiológicos y fenómenos naturales.
El potencial hídrico de un tejido vegetal es un parámetro fundamental que influye en la
absorción y distribución del agua en las plantas. Esta práctica tiene como objetivo principal
explorar y comprender el potencial hídrico de tejidos vegetales utilizando métodos indirectos,
tanto cualitativos como cuantitativos. En particular, se hará uso de la concentración molar de
una solución de sacarosa para determinar este parámetro de manera precisa.

Para llevar a cabo esta investigación, se emplearán tubérculos de papa y cebolla cabezona
como materiales de estudio. La elección de estos tejidos vegetales se basa en su
disponibilidad y su capacidad para manifestar cambios en su estado turgente en respuesta a
soluciones con diferentes potenciales osmóticos.

Dos métodos principales se utilizarán en esta práctica: el método de peso tisular y el método
de coloración de Shardakov. En el primero, se sumergirán los cilindros de papa en soluciones
de sacarosa de diferentes concentraciones y se registrarán los cambios en su peso para
determinar el potencial hídrico. Mientras que en el segundo, se empleará una solución de azul
de metileno para evaluar la difusión y el comportamiento de las gotas de solución en contacto
con los tejidos de papa.

Además, se llevará a cabo un experimento con tejidos de cebolla en soluciones de sacarosa


tinturadas, con el propósito de observar cómo reaccionan las células vegetales frente a
diferentes potenciales osmóticos y determinar si permanecen turgentes o plasmolizan en las
diversas condiciones.

Este estudio proporcionará una visión más profunda de cómo las plantas interactúan con el
agua y cómo responden a cambios en el potencial osmótico de su entorno. Estos
conocimientos son fundamentales para la comprensión de procesos como la absorción de
agua, la presión de turgencia y la adaptación de las plantas a entornos variables.

METODOLOGIA

Materiales.
Tubérculos de papa

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Probeta graduada 50ml
Sacabocados
Cuchilla de afeitar o bisturí
Balanza de precisión
Tubos de ensayo
Gradillas
Pipeta Pasteur
Toallas de papel
Lápiz marcador o cinta o etiquetas engomadas
sacarosa. P.M =342g
Agua destilada
Azul de metileno
Pinzas
Cebolla cabezona

Reactivos.
Azul de metileno

Procedimiento.
METODO DE PESO TISULAR

1. Se preparó una solución de sacarosa 1 molar y, a través de diluciones sucesivas, se


crearon soluciones con concentraciones de 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8 y
0.9 molar.

2. Luego, se tomaron tubos de ensayo y en cada uno se añadieron 10 ml de las soluciones


preparadas, asegurando que cada tubo contenía una concentración diferente. Además,
se colocaron otros tubos con 10 ml de agua destilada para establecer un punto de
referencia. Cada tubo de ensayo fue identificado de manera clara.

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3. Utilizando un sacabocados, el estudiante extrajo 11 cilindros del tubérculo de papa,
asegurándose de que cada uno no tuviera más de 1 cm de diámetro. Estos cilindros
fueron cortados a una longitud de 1 cm, con especial atención para evitar que
quedaran restos de la capa suberizada o la corteza del tubérculo. Se manejaron los
cilindros con pinzas para mantener la higiene y evitar contaminaciones.

4. Posteriormente, se procedió a lavar de manera rápida los cilindros de papa con agua
destilada y se secaron con papel toalla. Cada uno de los cilindros fue pesado con
precisión y luego se sumergieron en las soluciones previamente preparadas. Durante
este proceso, se registró detalladamente el procedimiento y la hora de inicio.
Nuevamente, se utilizaron pinzas para manipular los cilindros de papa y mantener la
higiene en el experimento.

5. Despues de que se preparó las soluciones de sacarosa con diferentes concentraciones


y sumergió cilindros de papa en estas soluciones. Después de una hora de inmersión,
retiró los cilindros, los secó y los pesó nuevamente con la ayuda de pinzas.

MÉTODO DE COLORACIÓN DE SHARDAKOV:

1. Se preparó una nueva serie de tubos de ensayo utilizando las mismas


soluciones de sacarosa que se habían utilizado previamente. En estos nuevos
tubos de ensayo, añadió una gota de azul de metileno a cada solución.

2. Con sumo cuidado, se utilizó una pipeta para añadir una gota de la solución
tinturada a cada uno de los tubos de ensayo donde previamente se habían
colocado los cilindros de papa. Se aseguró de lavar la pipeta con atención cada
vez que cambió de solución para evitar la contaminación cruzada.

3. Observó atentamente si la gota de solución se difundía uniformemente en cada


tubo, flotaba en la superficie o se hundía. El estudiante comprendió que el
potencial osmótico del tejido de papa sería igual al potencial osmótico de la
solución en la que la gota de solución coloreada se mantuvo suspendida por
un breve período antes de diluirse uniformemente.

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REACCIÓN DE TEJIDOS VEGETALES EN SOLUCIONES CON DIFERENTE
POTENCIAL OSMÓTICO:

1. El siguiente paso implicó el uso de una cebolla de bulbo (cabezona). El


estudiante retiró los catafilos y seleccionó una capa delgada de la cebolla.
Luego, recortó 10 trozos de aproximadamente 1 cm² de esta capa.

2. En las mismas series de solución de sacarosa tinturadas con azul de metileno,


donde previamente se habían sumergido los cilindros de papa, colocó un trozo
de tejido de cebolla en cada una de las soluciones.

3. Después de al menos una hora de inmersión, se retiró los trozos de cebolla de


las soluciones y los colocó en portaobjetos. Luego, observó estos tejidos
vegetales al microscopio.

4. Registró sus observaciones y anotó en qué soluciones las células permanecían


turgentes y en cuáles se plasmolizaban, proporcionando una comprensión de
cómo las células vegetales reaccionaban a diferentes potenciales osmóticos.

RESULTADOS
Solución Peso inicial Peso final Diferencia de Comportamiento de cota coloreada Potencial
molaridad pesos osmótico de la
solución s
Sube Baja Se diluye

0,1M 0,7854g 0.8687g 0.0833 x


0.2M 0.8168g 0.8645g 0.0477 X
0.3M 0.5348g 0.5237g 0.0111 X
0.4M 0.8929g 0.8496g 0.0433 x
0.5M 0.7157g 0.6397g 0.076 X
0.6M 0.7975g 0.6916g 0.1059 X
0.7M 0.6190g 0.5347g 0.0843 X
0.8M 0.7771g 0.6560g 0.1211 X
0.9M 0.7688g 0.6377g 0.1311 X
1M 0.9081g 0.7671g 0.141 x

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POTENCIAL OSMÓTICO DE LA SOLUCIÓN ΨS

ΨS = -MiRT

−0.1 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑒𝑟𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎 𝑎𝑚𝑏𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 =
𝑚𝑜𝑙

−0.2 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑒𝑟𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎 𝑎𝑚𝑏𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 =
𝑚𝑜𝑙

−0.3 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−0.4 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−0.5 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−0.6 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−0.7 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−0.8 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−0.9 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

−1 M 𝑏𝑎𝑟𝑖𝑎
ΨS= 1000𝑔 𝐻2𝑂 ∗ 1 ∗ 0.0831 𝐿 ∗ 𝑇𝐴 =
𝑚𝑜𝑙

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1. Concentración de sacarosa 0.1 M

Células en turgencia (ilustración 2)

Ilustración 1. Epidermis de cebolla en solución Ilustración 2. Epidermis de cebolla en solución


de sacarosa a 0.1 M observada a 10x. de sacarosa a 0.1 M observada a 40x.

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2. Concentración de sacarosa a 0.2 M

Ilustración 3. Epidermis de cebolla en solución Ilustración 4. Epidermis de cebolla en solución de


de sacarosa a 0.2 M observada a 10x. sacarosa a 0.2 M observada a 40x.

Células de cebolla en estado de turgencia.

3. Concentración de sacarosa a 0.3 M

Ilustración 5. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 6. Epidermis de cebolla en solución de


sacarosa a 0.3 M observada a 10x. sacarosa 0.3 M observada en microscopio a 40X

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Células en estado de turgencia.

4. Concentración de sacarosa a 0.4 M

Ilustración 7. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 8. Epidermis de cebolla en


sacarosa a 0.4 M observada a 10x. solución de sacarosa a 0.4 M observada a
40x.

En la ilustración 8 se pueden observar células de cebolla plasmolizada.

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5. Concentración de sacarosa a 0.5 M

Ilustración 9. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 10. Epidermis de cebolla en solución de


sacarosa a 0.5 M observada a 10x. sacarosa a 0.5 M observada a 40x.

Células de cebolla en estado de plasmólisis (ilustración 10)

6. Concentración de sacarosa a 0.6 M

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Ilustración 11. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 12. Epidermis de cebolla en solución de
sacarosa a 0.6 M observada a 10x. sacarosa a 0.6 M observada a 40x.

En la ilustración 12 se puede observar células plasmolizadas.

7. Concentración de sacarosa a 0.7 M.

Ilustración 23. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 14. Epidermis de cebolla en solución de
sacarosa a 0.7 M observada a 10x. sacarosa a 0.7 M observada a 40x.

En la ilustración 14 se observa células en estado de plásmolisis

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8. Concentración de sacarosa a 0.9 M

Ilustración 15. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 36. Epidermis de cebolla en solución
sacarosa a 0.9 M observada a 10x. de sacarosa a 0.9 M observada a 40x.

En la ilustración 16 vemos células plasmolizadas debido a que se encuentran en una

solución hipertónica.

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9. Concentración de sacarosa 1M

Ilustración 57. Epidermis de cebolla en solución de Ilustración 48. Epidermis de cebolla en solución de
sacarosa a 1 M observada a 10x. sacarosa a 1 M observada a 40x.

En la ilustración 18 podemos observar células plasmolizadas.

CONCLUSIONES
❖ Se pudo concluir que las porciones de papa tuvieron una diferencia de peso
después de la concentración 0,5M hasta 1M fue mayor la diferencia de peso.

❖ La epidermis de la cebolla al observarse en el microscopio se puede examinar

las células de la cebolla en un estado de turgencia o plasmólisis, el cual se ve

turgencia en la epidermis de 0.1M, 0.2M y 0.3M y plasmólisis desde 0.4M

hasta 1M.

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ANEXOS
1. Haga una discusión sobre qué es el potencial hídrico y cuál es su importancia en el
movimiento del agua en células y tejidos.

RTA: El potencial hídrico (Ψ) es una medida que refleja la energía potencial del
agua en las plantas. Se compone de dos factores principales: el potencial osmótico
(Ψs) relacionado con la concentración de solutos en la célula, y el potencial de
presión (Ψp) asociado con la presión ejercida en la pared celular. Ψs tiende a ser
negativo debido a la presencia de solutos, mientras que Ψp puede ser positivo o
negativo dependiendo de si la célula está turgente o flácida.
El potencial hídrico es esencial para entender cómo el agua se mueve en las plantas.
El agua fluye desde áreas de alto Ψ a áreas de bajo Ψ. Esto es fundamental para
procesos como la absorción de agua por las raíces, la transpiración foliar y la
distribución de nutrientes.

2. En plantas que crecen en un ambiente normal de agua, ¿Cuál es el valor máximo del
potencial hídrico de las hojas?.

RTA: Cuando las plantas tienen un acceso adecuado al agua en un entorno normal,
el valor máximo del potencial hídrico en las hojas ronda aproximadamente los -0.1
megapascales (MPa). En este punto, las células de las hojas están bien hidratadas y
turgentes.

3. ¿Cómo varía el potencial hídrico desde la raíz hasta las hojas en una planta? ¿Cuáles
son los valores de Ψ (MPa) en cada trayecto que recorre el agua desde el suelo, a
través de la planta, hasta llegar a la atmòsfera?

RTA: El potencial hídrico varía a lo largo de la planta. Comienza en valores


negativos en el suelo, donde el agua es fácilmente accesible para las raíces. Luego,
en las raíces, tiende a ser cercano a cero o ligeramente negativo. A medida que el
agua asciende a través del xilema del tallo, el Ψ disminuye debido a la resistencia en
el transporte. Finalmente, en las hojas, el Ψ es más negativo debido a la pérdida de
agua por transpiración.

4. A través de un gráfico o figura represente los flujos y resistencias presentes a lo


largo de la planta que explican como el agua asciende desde el suelo a la atmósfera
pasando por el cuerpo de las plantas.

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RTA:

( El agua en las plantas. Nutrición y transporte de elementos minerales. Nutrición

mineral.)

5. Represente gráficamente a nivel de célula los componentes del Ψ (Ψs y Ψp).

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Ψs Ψ Ψp

6. Explique cuando el Ψg (potencial gravitacional) debe ser considerado como


componente del Ψ y cuando no.
RTA:
El componente del potencial gravitacional (Ψg) debe considerarse en situaciones donde la
gravedad tiene un papel importante, como el ascenso de agua en plantas altas. Sin embargo,
en la mayoría de los casos, especialmente en plantas más pequeñas o con crecimiento
horizontal, Ψg es insignificante en comparación con otros componentes de Ψ como Ψs y Ψp.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
MALAVER Luis Vicente, CANTILLO Stella H., Ejercicios de Laboratorio para el curso de
Fisiología Vegetal. Universidad Nacional, Facultad de Ciencias Agropecuarias. 1989,
Pág.62,63.

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CARTAGENA V. José Rómulo; MARTÍNEZ B. Enrique y HOYOS S. Rodrigo A.
Manual de Prácticas de Laboratiorio de Fisiología Vegetal. 12 Bioensayos.
Universidad Nacional de Colombia. Sede Medellín. Facultad de Ciencias
Agropecuarias. Pág. 3-9.

Libretext español. 29 de octubre de 2022. Transporte de Agua y Solutos en Plantas - Presión,

Gravedad y Potencial Matrico. http://bit.ly/3o8JoL3

O'Meara, L. (01 de febrero de 2018) la importancia del agua para las plantas.

https://bit.ly/3Uw8obt

Universidad politécnica de Valencia. El agua en las plantas. Nutrición y transporte de

elementosminerales.Nutriciónmineral.

http://www.euita.upv.es/varios/biologia/Temas/tema_12.htm

CK-12, 16 de noviembre de 2015, osmosis, ck-12, https://www.ck12.org/book/ck-12-

conceptos-biolog%c3%ada/section/2.13

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