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INGENIERIA AMBIENTAL

DESCRIPCIÓN DE UN ECOSISTEMA MICROBIANO A PARTIR DE LAS


COLUMNAS DE WINOGRASKY Y RECONOCER LOS MICROORGANISMOS
PRESENTES EN EL AGUA Y EL SUELO.

GABRIELA FEO LOPEZ


ANGELA SOFIA RAMOS MAHECHA

DOCENTE
LUZ MARINA CASTILLO LOIZA

BOGOTA D.C

2022
RESUMEN
La Columna de Winogradsky consiste en construir un ecosistema microbiano en
cual él se puede identificar los microorganismos que se encuentran en el agua y el
suelo según la muestra obtenida de una cuenca hidrográfica como, laguna, rio,
humedal, agua residual. Así poder identificar la taxonomía y relación de cada uno
de ellos.

El propósito del laboratorio es la caracterización y observación de la columna de


Winograsky que fue elaborada con diferentes materiales orgánicos e inorgánicos.
Los desechos orgánicos e inorgánicos fueron recolectados en El Parque Simón
Bolívar. Luego de la montura, se realizaron diferentes observaciones a partir de la
textura, olor, color, pH, temperatura y presencia de un ciclo biogeoquímico,
presentes en cada semana observada, también se evidenciaron diferencias semana
tras semana debido a la actividad microbiana. Es un método simple que permite
evidenciar y llevar a cabo el estudio de procesos microbianos de manera controlada
en un laboratorio.

palabras clave: microorganismos, laboratorio, evidencias, ecosistema,


observación.
INTRODUCCIÓN
En 1880, Sergei Winogradsky propuso un cultivo abierto en columnas que simula
un micro ecosistema, donde se demuestra la ubicación de los microrganismos en
microespacios altamente específicos de acuerdo con sus necesidades fisiológicas
y nutricionales, tales como: fuente de carbono, energía y oxígeno, así como la
interdependencia entre las poblaciones microbianas (Aquiahualt R. M.A. 2017). A
este modelo de cultivo abierto se le conoce como Columnas de Winogradsky.
Este modelo de ecosistema miniatura pretende identificar los factores químicos y
físicos que son importantes para el crecimiento de la diversidad microbiana. A partir
de este estudio podemos entender los acontecimientos ecológicos que se pueden
presentar en los humedales, los arrozales, pantanos, entre otros. Además, podemos
reconocer los factores nutricionales que componen a los microorganismos como,
por ejemplo, la Quimiotrofia, la Heterotrofia y la Fotoautótrofia. Adicionalmente
vemos la interacción mutualista que se encuentra entre el potencial redox con
algunos microorganismos reductores del óxido del hierro.
Esta caracterización de estos microorganismos se involucra con diferentes estudios
como el ciclo del azufre, teniendo en cuenta lo anterior podremos evidenciar la
presencia de microorganismos en diferentes ecosistemas para así definir su
taxonomía y su relación de cada uno de ellos.
MATERIALES Y MÉTODOS
1. Botella de vidrio de boca ancha o botella de PET de 5 L, clara y LISA.
2. Entre 250 y 150 g de Lodo o sedimento de un humedal, lago, río, charca, o
planta de tratamiento de agua residual.
3. Recolectar 200 g de suelo húmedo 1 L de Agua superficial de un humedal,
lago, río, charca o plata de tratamiento de agua residual.
4. Fuente de carbono: papel periódico o papel sin tinta, glucosa, almidón.
5. Sulfato (CaSO4 o yemas de huevo cocidos)
6. Tampón o buffer: CaCO3 Sales: CaHPO4 o K2HPO4 y NH4Cl
7. Boñiga de vaca o caballo
8. Papel Vinipel
9. Papel aluminio
10. Papel negro o trozos de papel oscuro
11. Cinta aislante o papel parafilm

3.1 OBJETIVO DE ESTUDIO


A partir de las columnas de Winogradsky pudimos construir el ecosistema
microbiano al cual le identificamos los microorganismos presentes en el agua y el
suelo de las muestras adquiridas, ríos, lagunas o humedales y así pudimos
identificar la taxonomía y la relación entre ellos.

3.2 INSTRUMENTACIÓN
Probeta (para medir el agua)
Espátula (para sacar las sales y limpiar el vidrio de reloj)
Vaso de precipitado de 50 mL. (para verter las sales y poder pesarlas, también
realizamos la mezcla homogénea)
Vaso de precipitado de 100 mL. (para verter las sales y poder pesarlas)
Bisturí (para cortar la parte superior de botella PET)
Balanza de plato libre Protect Scientific (para pesar las sales y todas las sustancias
que vertemos en la botella)
Termómetro (para medir la temperatura)
Medidor de pH de laboratorio Apera Instruments (para medir el pH)
3.3 MÉTODOS Y TÉCNICAS
SEMANA 1- 04/03/22
1. Iniciamos lavando la botella PET, sin jabón y sin detergente
2. Cortamos la parte superior de la botella PET
3. Marcamos la botella con el tratamiento correspondiente ((Tratamiento 2))
4. Cortamos en trozos pequeños papel periódico hasta llenar la parte base de
la botella
5. Pesamos en un vaso precipitado de 250 ml la cantidad de suelo y lodo que
eran 50g de Lodo y 100g de suelo
6. Pesamos las cantidades de sales correspondientes que eran, Sulfato de
calcio 5 g, carbonato de calcio 5g y por último Cloruro de amonio 1g
7. Luego de pesar las cantidades de sal las agregamos al vaso precipitado
donde se encontraba el lodo y el suelo
8. Por último, pesamos la cantidad de boñiga de vaca que fueron 4g y las
agregamos al vaso precipitado
9. Después de agregar todo al vaso precipitado, agregamos agua junto con
las cantidades mencionadas anteriormente y mezclamos todo hasta obtener
una mezcla homogénea y agregarla a la base de la botella PET y distribuirla
10. Agregar todo el contenido del vaso con porciones iguales a la mezcla
anterior de agua de superficial, vaciando poco a poco a la botella ese
contenido
11. Completar el final de la botella con agua superficial y el nivel del agua
superficial debía alcanzar 1 cm más debajo de parte superior de la botella
12. Envolver la botella cuidadosamente con papel aluminio y vinipel que
quedara sellada completamente sin que le entrara un poco de aire
13. Forrar la botella en papel oscuro para así no permitir la entrada de luz
14. Por último, colocar durante una semana la botella en un lugar donde la
temperatura promedio sea de 28°C
Figura 1
Semana 1. Ramos, A. Feo, G.2022

Nota: elaboración propia


Tabla 1
Comparación semana 2,3,4, 5, 6 y 7
FECHA SEMANA 2 SEMANA 3 SEMANA 4 SEMANA 5
11/03/2022 18/03/2022 25/03/2022 08/04/2022

IMAGEN

pH Básico No se tomo 6.95 6.92


moderadamente moderadamente
acido acido
TEMPERATURA 26° C No se tomo 31,6° C 24,8° C
CARACTERISTICAS 1.Disminución del 1.Bomba de aire 1.Bomba de aire en 1.Bomba de aire en
nivel del agua en la parte la parte superior la parte superior
((5mm)) superior 2.Burbujas en la 2.Gran ocupación de
2.Crecimiento de 2.Crecimiento de parte superior la biopelícula en las
microorganismos gusanos en la 3.Crecimiento paredes en la
alrededor y sobre bomba de aire microbiano en las columna
el agua 3.Oscurecimiento paredes de la 3.Nivel del agua
3.Presencia de del agua columna (Color igual
burbujeo 4.Gran cantidad verde, rojas, 4.Disminucion del
4.Olor Sulfúrico de burbujas en la moradas) olor sulfúrico
parte superior 4.Disminucion del 5.Presencia de
nivel de agua 5mm microorganismos en
la parte media color
rojo y verde

Nota: Observaciones tomadas durante 4 semanas


FECHA SEMANA 6 SEMANA 7
29/04/2022 06/05/2022
IMAGEN

PH No se tomo No se tomo
TEMPERATURA 30°C 30°C
CARACTERÍSTICAS Colonias y biopelículas En la parte superior se
(polisacáridos) evidencia círculos de color
Nivel del agua bajo 3cm morado
No hay olor putrefacto Presencia de hongos en la
Presencia de base de la botella
microorganismos en la Alrededor tenía un color
parte media color rojo y amarillo verdoso
verde Presencia de hongos y
Gran ocupación de la bacterias de color verde
biopelícula en las paredes Bacilos largos, gran
en la columna positivos, 2 especies de
Degradación del papel bacilos algunos tienen una
periódico curva y al final en forma
espiral
Figura 2
pH 4 semanas de observación.

14

6,95 6,92

Semana 1 Semana 3 Semana 4

Nota: elaboración propia

Figura 3
Temperatura 4 semana de observación.

31,6

26
24,8

semana 1 semana 3 semana 4


Nota: elaboración propia (Tabla por semana y comparación entre columnas 1,2,3)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Tabla 2
Comparación de columnas semana 2
TRATAMIENTO TRATAMIENTO TRATAMIENTO BLANCO
1 2 3

pH BASICO BASICO BASICO 6.61


TEMPERATURA 28°C 26°C 26°C 25°C
CARACTERÍSTICAS 1.No se evidencio 1.Disminución del 1. Crecimiento de 1. olor fuerte de
disminución del nivel nivel del agua microorganismos en metano
del agua ((5mm)) las orillas y paredes 2. crecimiento
2. se reflejó cambio 2.Crecimiento de de la botella PET microbiano
en el color a causa microorganismos 2. Olor a metano mesófilos,
de las distintas alrededor y sobre el 3. Presencia de neutrófilos, hay filo
comunidades que se agua burbujeó leve cocos áureo
desarrollaron en la 3.Presencia de 4. El agua de este
columna burbujeo tratamiento es más
3.Minima presencia 4.Olor Sulfúrico clara que las demás
de burbujas en la columnas
parte superior 5. El centímetro de
4.Se evidencia agua se conserva
crecimiento de como en la semana
microorganismos en inicial
la parte interior y
alrededor de la
botella PET

Nota: comparación de 4 tratamientos – semana 2

Tabla 3:
Comparación de semana 3
TRATAMIENTO TRATAMIENTO TRATAMIENTO BLANCO
1 2 3
pH No se tomo No se tomo No se tomo 6.73

TEMPERATURA No se tomo No se tomo No se tomo 25°C

CARACTERISTICAS 1.El agua se 1.Bomba de aire en 1. Bomba de aire en 1. no tiene olor


encontraba más la parte superior la parte superior de la 2. mesófilos,
oscura 2.Crecimiento de columna neutrófilos
2. por el gusanos en la 2. Presencia de Quimio autótrofas,
metabolismo bomba de aire pigmentos en la parte fotoautótrofas y
presentado en la 3.Oscurecimiento superior de la botella metanogénicas
columna el nivel del agua de color marrón
del agua aumento 4.Gran cantidad de 3. Presencia de olor
y se generó burbujas en la parte fuerte a metano
sulfhídricos superior 4. En la zona inferior
3. Presencia de se presencia tierra
actinomicetos
alrededor de la
botella PET
4. El olor que
presentaba la
columna tenía
metano

Nota: comparación de 4 tratamientos – semana 3

Tabla 4:
Comparación semana 4
TRATAMIENTO TRATAMIENTO TRATAMIENTO BLANCO
1 2 3
IMAGEN

PH 6.88 6.95 6.69 7.28


Moderadamente Moderadamente Moderadamente
acido acido acido
TEMPERATURA 28.5°C 31,6°C 23,8°C 26,2°C

CARACTERÍSTICAS 1. Presencia de 1.Bomba de aire en 1. Se observa 1. no tiene olor


bacterias de color la parte superior grumosidad en su 2. mesófilos,
rojo (purpura) en las 2.Burbujas en la parte superior neutrófilos
paredes de la parte superior "Biopelicula" Quimio autótrofas,
columna y en la 3.Crecimiento 2. Tiene una fotoautótrofas y
zona superficial microbiano en las variación en las metanogénicas
2.El olor que paredes de la Biopeliculas que 3. mediante tención
presentaba aún columna (Color contienen de gran (bacilos, gran
seguía siendo de verde, rojas, positivos, cocos,
metano moradas) Vibrio)
3.El nivel de agua y 4.Disminucion del
de burbujas nivel de agua 5mm
disminuyo
4.Presencia de
biopelículas en la
parte superior

Nota: comparación de 4 tratamientos – semana 4

Tabla 5:
Comparación semana 5
TRATAMIENTO 1 TRATAMIENTO 2 TRATAMIENTO 3
IMAGEN

PH 6.94 6.92 8.1


Moderadamente Moderadamente Básico
acido acido
TEMPERATURA 34°C 24,8°C 34°C

CARACTERÍSTICAS 1. Se presenta pasto 1.Bomba de aire en la 1. El olor que presentaba


en la superficie de la parte superior era a sulfuros
columna 2.Gran ocupación de la 2. La tonalidad del agua
2. El olor que biopelícula en las paredes es oscura
presentaba aún seguía en la columna 3. Presencia de
siendo de metano 3.Nivel del agua igual actinomicetos en los
3. El nivel de agua y de 4.Disminucion del olor bordes
burbujas aumento sulfúrico 4. El nivel del agua se
5.Presencia de mantiene y el fondo aún
microorganismos en la
4. Presencia de parte media color rojo y está con material
biopelículas de color verde compacto.
rojo

Nota: comparación de 3 tratamientos – semana 5

Tabla 5: comparación semana 6


Tratamiento 1 Tratamiento 2 Tratamiento 3

imagen

pH No se tomo No se tomo No se tomo


Temperatura 31° C 30°C 24°C

Características La columna estaba Colonias y biopelículas La columna con


bombacha, el nivel (polisacáridos) contaba con inflaciones
del agua se mantuvo Nivel del agua bajo 3cm como en las anteriores
estable, disminuyo las No hay olor putrefacto observaciones, el olor
burbujas grandes Presencia de que presenta es
presentadas la microorganismos en la aliacido (cebolla). La
semana anterior en la parte media color rojo y tonalidad del agua es
superficie de la verde muy oscura. Se
columna, presentaba Gran ocupación de la mantiene el nivel del
olor a cebolla y biopelícula en las agua inicial. Presenta
dióxido de carbono. paredes en la columna bastantes biopelículas
Aumentaron las Degradación del papel de color marrón, violeta
biopelículas por el periódico y verde.
borde de la columna
en la parte superficial
e interna. Presencia
biopelículas purpuras,
verdes y marrones
Nota: comparación de 3 tratamientos – semana 6
Tabla 6: comparación semana 7
Tratamiento 1 Tratamiento 2 Tratamiento 3

Imagen

pH No se tomo No se tomo No se tomo


Temperatura 22°C 30°C 27°C
Características Nuevamente se En la parte superior Se observan
sopló la columna, se evidencia círculos biopelículas violetas,
disminuyo el nivel de color morado verdes y marrones
del agua y su color Presencia de como anteriormente
se tornó más claro hongos en la base se observaban, el
esto debido a que se de la botella nivel del agua ha
va descontaminando Alrededor tenia un bajado un poco,
el agua superficial, color amarillo continua con olores
presento burbujas verdoso aliacidos, pero
en la capa aeróbica Presencia de menos fuertes, el
indicando la hongos y bacterias papel que se agregó
producción de de color verde al inicio se torna
oxígeno por las Bacilos largos, gran muy oscuro y como
cianobacterias. El positivos, 2 especies mohoso con un
papel periódico el de bacilos algunos contorno cenizoso
cual fue introducido tienen una curva y al en algunas partes,
a la columna como final en forma espiral tiene diferentes
fuente de carbono morfologías. (Bacilo
aún no se ha cocos)
terminado de
degradar y por
último se presenta la
mineralización e
inmovilización de
nutrientes. Presento
biopelículas
purpuras y verdes
las purpuras indican
que son bacterias
que absorben
energía lumínica y
fotosintetizan, no
producen oxígeno y
su fuente de
carbono es el CO2
(dióxido de carbono)
y sigue presentando
el ciclo del azufre.

Nota: comparación de 3 tratamientos – semana 7

Figura 4:
Microorganismos fotoautótrofos

Nota: elaboración propia


En la anterior imagen (figura 4) fue tomada en la semana 5, donde pudimos
evidenciar microorganismos fotoautótrofos los cuales reciben su nutrición por una
fuente de CO2 (carbono) y son dependientes del azufre.

Figura 5:
Microrganismos heterótrofos
Nota: elaboración propia

Continuando con las evidencias de la semana 5, en imagen (figura 5) pudimos ver


microorganismos heterótrofos que obtiene su nutrición a través de una fuente de
CO2 la cual no es su única opción de alimento, además tienen concentraciones de
ácido sulfhídrico H2S.

FECHA EVIDENCIA OBSERVACION


FOTOGRAFICA
11 de marzo del 2022 1.Disminución del nivel
del agua ((5mm))
2.Crecimiento de
microorganismos
alrededor y sobre el agua
3.Presencia de burbujeo
4.Olor Sulfúrico

18 de marzo del 2022 1.Bomba de aire en la


parte superior
2.Crecimiento de
gusanos en la bomba de
aire
3.Oscurecimiento del
agua
4.Gran cantidad de
burbujas en la parte
superior
25 de marzo del 2022 1.Bomba de aire en la
parte superior
2.Burbujas en la parte
superior
3.Crecimiento microbiano
en las paredes de la
columna (Color verde,
rojas, moradas)
4.Disminucion del nivel
de agua 5mm

08 de abril del 2022 1.Bomba de aire en la


parte superior
2.Gran ocupación de la
biopelícula en las
paredes en la columna
3.Nivel del agua igual
4.Disminucion del olor
sulfúrico
5.Presencia de
microorganismos en la
parte media color rojo y
verde

29 de abril del 2022 Colonias y biopelículas


(polisacáridos)
Nivel del agua bajo 3cm
No hay olor putrefacto
Presencia de
microorganismos en la
parte media color rojo y
verde
Gran ocupación de la
biopelícula en las
paredes en la columna
Degradación del papel
periódico

06 de mayo del 2022 En la parte superior se


evidencia círculos de color
morado
Presencia de hongos en la
base de la botella
Alrededor tenía un color
amarillo verdoso
Presencia de hongos y
bacterias de color verde
Bacilos largos, gran
positivos, 2 especies de
bacilos algunos tienen una
curva y al final en forma
espiral
CONCLUSIONES

• Atreves de la ejecución de la columna de Winogradsky nos dimos cuenta que


la “Luz” es un factor importante en la fase de latencia, ya que ayuda a activar
a los microorganismos en su crecimiento.
• La columna de Winogradsky es un modelo de ecosistema microbiano que
explica las adaptaciones de los microorganismos en espacios específicos en
función de sus interacciones con el ambiente y sus necesidades.
• Según las comparaciones anteriores podemos concluir que cada columna
cumple con un ciclo biogeoquímico (Ciclo del Azufre, Ciclo del Carbono y
ciclo del Nitrógeno) Estos son procesos naturales que reciclan los elementos
en diferentes formas químicas, así pudimos comparar las columnas con el
funcionamiento de un ecosistema.
RECOMENDACIONES

1. Forrar bien toda la columna con papel vinipel para que no le entre aire a los
microorganismos
2. Darle la suficiente fuente de luz a todos los lados de la columna para mejores
resultados
3. Se recomienda dar cada 3 días la vuelta a la columna de esa forma todos
sus lados estén igual de temperatura
BIBLIOGRAFÍA

• Caycedo,L.Corrales,L.Trujillo,D.(2021). Las bacterias, su nutrición y


crecimiento: una mirada desde la química.Recuperado.
http://www.scielo.org.co/pdf/nova/v19n36/1794-2470-nova-19-36-49.pdf

• Castillo,L.(2022). Práctica de laboratorio. columna de


winogradsky.Recuperado.
https://moodlepresen.sanmateo.edu.co/moodle/pluginfile.php/950314/mod_l
abel/intro/Gu%C3%ADa%201%20de%20lab%20Microbiolog%C3%ADa.pdf

• MADIGAN, M.T. et al. Microbiologia de Brock. São Paulo, Pearson Education


do Brasil, 2004

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