“Año del Diálogo y Reconciliación Nacional”

BIORREMEDIACÍON

“ Biorremediación del tiocianato (-SCN) con lechuga (Lactuca sativa L.) y el

jacinto de agua (Eichhornia crassipes) ”

Docente:
Dra. Susan Medina C.

Integrantes:
Canchari Madueño, Franklin
Corahua Mitma, Giovana
Jacay Inga, Jhairo Roony
Lino Bilbao, Vanessa
Maldonado Flores, Betty
Soca Luque, Pedro
Toro Saavedra, Shirley

Horario:
4: 00 a 7:00 pm
 Biorremediación del tiocianato (-SCN) con lechuga (Lactuca sativa L.) y el
jacinto de agua (Eichhornia crassipes)
Resumen
El presente trabajo de investigación tiene por finalidad usar diferentes técnicas de biorremediación para
un agente contaminantes en dos tipos de contexto, tanto agua como suelo. Este trabajo ha sido instalado
en el invernadero de la Universidad Científica del Sur, donde se evaluaron sistemas de remediación
para agua y suelo contaminado con Tiocianato de Potasio (KSCN); para ello, se tomaron muestras de
suelo del huerto de la Universidad Científica del Sur. Se utilizó el diseño estadístico al azar con tres
réplicas por cada tratamiento, siendo un total de cuatro tipos de tratamiento y un control. Se agregó a
cada maceta (excepto al control) urea y NPK (fertilizante), además del contaminante KSCN. También
se preparó en muestras de agua, agregándole glucosa, sal y micronutrientes, además del contaminante
Tiocianato de Potasio a dos sistemas que constan de tres réplicas por cada una, y un sistema que fue
el control. Se usaron agentes remediadores, para el suelo se usó la lechuga (Lactuca sativa I.) y para el
agua se usó Jacintos de Agua (Eichornia crassipes) que fueron obtenidas del Area de Refugio de Vida
Silvestre, Pantanos de Villa, se colocó sólo en el sistema 6. Se usaron 2 cepas de hongos para los
sistemas 2 y 4 de suelo que consta cada una de 3 réplicas. Se diseñó un experimento tipo factorial con
un total de 4 tratamientos para el suelo: Remediación natural, biolabranza y remediación con hongos,
fitorremediación, biorremediación combinada. Y para tratamientos del agua se usó: Fitorremediación y
Remediación Natural. Se realizó la recolección de datos morfológicos de las plántulas midiendo su
altura y número de hojas además de la clorofila Spad Minolta, así mismo se midió la temperatura, pH y
conductividad de suelo de las macetas y del agua de los frascos.

Introducción descontaminación de agua, suelo o aire .(Ruiz,

Uno de los rasgos característicos de la sociedad
moderna es la creciente emisión al ambiente de
sustancias contaminantes que generalmente
proceden de las actividades industriales,
mineras, agropecuarias, artesanales y sistemas de tratamientos: T1 (Remediación
domésticas (Delgadillo,A. 2011), de esta
manera las sustancias se incluyen en un
proceso cíclico que involucra todos los
ambientes: aire, agua y suelo, y desde cualquier
perspectiva, a los seres vivos tanto emisores
como receptores de los
contaminantes(Domínguez, G., 2015),
representando una amenaza para los seres
vivos, por lo que se han desarrollado una serie
de métodos para enmendar el impacto causado
(Jaramillo et al, 2012), pero estos se
caracterizan porque suelen ser costosos y
pueden afectar de manera irreversible las
propiedades del suelo, agua y de los seres vivos
que en ellos habitan (Padmavathiamma y Li,
2007); ante ello , se promueven otras técnicas
para remover contaminantes como la
biorremediación que consiste en el uso de
plantas vasculares, algas u hongos para la
J., 2011).
En esta práctica se evaluaran sistemas de
remediación tanto para el suelo como para el
agua que se encontraron compuestos por 4
natural), T2 (Biolabranza y biorremediación con
hongos), T3 (Fitorremediación), T4
(Biorremediación combinada) con un Control
para el suelo y un T1 (Fitorremediación) para el
agua, utilizando la lechuga (Lactuca sativa L.) y
el jacinto de agua (Eichhornia crassipes)
respectivamente que se expondrán al tiocianato
(-SCN) que se conoce como un intermediario de
la conversión del cianuro por una reacción de
adición de azufre (Sorokin et al. 2004) que en
dosis bajas es menos tóxico que el cianuro, pero
es altamente tóxico cuando la dosis exceden los
0.3 g.L-1 (Boucabeille 1994); además, se ha
comprobado que en los peces causa alteración
en el equilibrio, la presión osmótica y la
respiración, en aquellos individuos sometidos a
concentraciones mayores a 10 mM (Medina et
al, 2012).
Materiales y Método
El trabajo se realizó en los meses de abril 2018
– julio de 2018 en el invernadero de la Facultad
de Ciencias Ambientales de la Universidad
Científica del Sur.
Preparación del suelo
Se extrajo suelo agrícola del biohuerto de la
Universidad Científica del Sur-Villa 5, el cual se
excavó los primeros 15 - 20 cm de profundidad
del suelo, seguidamente se separó mediante
con un rastrillo el suelo fino a usar sin contenido
de piedras para pesar aproximadamente 75 kg
para 15 macetas, con un peso 2.5 kg cada una.
Se trasladó al invernadero para agregar a cada
maceta de 3-5 g de urea y NPK (u otro
fertilizante) y se agregó el contaminante (KSCN
a 0.1 g/kg suelo, es decir 0.25 g en cada maceta)
a todas las macetas excepto el control. Siendo
agregada al principio en todas las macetas igual
concentración, excepto el control que está
comprendido por 3 réplicas. El diseño
experimental y tratamiento corresponde a la
tabla Nº 1.
Preparación del agua
Se preparó agua de caño para 7 botellas de 500
ml a cada una se agregó 40 g de glucosa, 5 g
de sal y 4 g de micronutrientes; y agregar el
contaminante (KSCN a 0.1 g/l de agua, es decir
0.1 g en cada botella) a las botellas de los
sistemas 6 y 7, cada una comprendida con 3
réplicas y el sistema 8 el control con solo una
botella. La siguiente tabla Nº 1 muestra el diseño
experimental y tratamientos.
Preparación de Agentes Biorremediadores
Las lechugas (Lactuca sativa l.) fueron
sembradas en almácigos en el invernadero de la
Universidad Científica del Sur, 2 semanas antes
de realizar el trasplantado hacia las macetas. El
mantenimiento de la humedad del suelo en el
almácigo es alta el cual comprende un riego
continuo a capacidad de campo para dar el
tamaño ideal hasta que esté listo para
trasplantar hacia las macetas (experimento de
remediación de suelo).
Los Jacintos de agua (Eichhornia crassipes)
fueron traídas de cuerpos de agua superficial
que se encuentran alrededor del Área Natural
Protegida (ANP) Refugio de Vida Silvestre,
Pantanos de Villa, específicamente de la zona
de amortiguamiento. Fueron llevados hacia el
invernadero en balde con contenido de agua,
evitando que se dañen las raíces de las plantas.
De todas las plantas llevadas, solo se
seleccionaron aquellas que presentan un mismo
tamaño para ponerlos sobre cada botella del
sistema 6 que está comprendido por 3 réplicas.
Se preparó 2 cepas de los hongos en un cultivo
líquido (Caldo Sabourud 250 ml en agitación
suave) e incrementar su población por unos 10
días, luego centrifugar a una revolución de 7000
– 9000 rpm / 10 minutos. Una vez separado la
parte sólida de la liquida mediante la
centrifugación, se procedió a luego diluir cada
cultivo en agua destilada estéril hasta obtener
12 ml de cada cepa en dilución. Luego se pasó
por el vórtex para agitar y conseguir el
premezclado de la cepa 1 con el agua destilada
para que la dilución sea homogénea, del mismo
modo se hizo para la cepa 2. Se procedió a
agregar 2 ml de cada cepa hacia las macetas del
sistema 2 comprendido con 3 repeticiones y al
sistema 4 también con 3 réplicas.
Se realizó el diseño experimental una vez tenido
preparados todos el suelo, el agua y los agentes
biorremediadores. Se continuó solo a integrar el
agente biorremediador en agua y suelo de
acuerdo a la tabla Nº 1
Diseño experimental y tratamientos
Se estableció un experimento de tipo factorial
con un total de 5 tratamientos completamente
al azar con tres repeticiones y un total de 15
unidades experimentales.
S. 1 S. 2 S. 3 S. 4 S. 5
(control)
Suelo (kg) 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
Contaminante 0.3 0.3 0.3 0.3 ---
–SCN (g)
 Hongo (ml) --- 2 --- 2 --- provista por la docente. Se utilizaron tiras
indicadoras de pH MColorpHast. Estas tiras
poseían una escala de 0 a 14, graduada por
Lactuca --- --- 3 3 --- unidad de pH; la temperatura tanto para las
sativa l. muestras de la botella y suelo se siguió las
indicaciones de la docente, mediante el uso de
termómetro de manera directa se introduce por
Preparación del hongo
unos dos minutos aproximadamente tanto al
S. 6 S. 7 S. 8 suelo como las botellas para determinar la
(control) temperatura; La conductividad eléctrica se
realizó de manera directa con el conductímetro
Agua (ml) 500 500 500 en las botellas mientras que la conductividad
eléctrica del suelo se siguió las indicaciones de
Contaminante la docente. Todos los parámetros se midieron
cada dos semanas, con respecto a las botellas
–SCN (g) 0.1 0.1 --- el experimento culminó dos semanas antes que
las macetas con la extracción de los jacintos de
Glucosa (g) 40 40 --- agua que fueron secados, medidos tanto raíces,
tallos y hojas para luego ser procesados
mediante el programa IMAGE J. y se determinó
sal (g) 5 5 --- el área de hojas, tallos y raíces.
Al final del experimento se cosechó todas las
Eichhornia
crassipes
partes de las lechugas ( hoja, tallo y raíz), en el
1 --- --- caso de la raíz se siguió las indicaciones del
docente, se volteo la unidad experimental dando
suaves golpes para que el suelo se separe de la
maceta y posterior a ello se hecho agua
Procedimiento corriente para recuperar la mayor cantidad de
raíces, posteriormente se separaron los
Preparación del agua
componentes aéreos y subterráneos por cada
Se preparó agua para 6 botellas de 1L cada una tratamiento estos fueron pesados, medidos sus
presenta 40 g de glucosa, 5g de sal y 4 g de raíces, la altura de las hojas y el conteo hojas
micronutrientes o solución de Hoyer´s dilución de las lechugas ( Rissato et al, 2015)
1:2 a cada botella. Se vació 1L de agua en cada
botella y se agregó el contaminante (Pb o –SCN
a 0.1 g/l de agua, es decir 0.1 g en cada botella)
a las botellas de los sistemas 7 y 8.
Resultados (2000 palabras máximo)
Los parámetros que se midieron en las macetas
como botellas son: la clorofila siguiendo la Figura N° Area de los componentes de la lehuga
metodología de Sainz y Echevarria, 1998 donde (Lactuca sativa)
se llegó a medir la clorofila a la mitad de la
distancia entre el borde la hoja y el nervio medio;
el pH para suelo y agua teniendo como
referencia la metodología de Beretta (2015), en
la cual se sumergió la tirilla en el suelo más de
10 segundos para realizar la medición. A cada
una de estas tiras se las dejo secar unos
minutos luego se lavaron con el fin de eliminar
partículas visibles de su superficie, y se
comparó el color desarrollado con la escala
En esta grafica podemos apreciar las
variaciones de KSCN en diferentes tiempos ( , ,
, ) en donde se observa que en la primera
fecha
 tipos de contexto, tanto el agua como
para el suelo, para ver las diferentes
variaciones y comprobar dichos
resultados de eficiencia.
Recomendaciones
● Se recomienda contar con los
instrumentos necesarios a utilidad en el
laboratorio.
● Se recomienda tener una buena
recolección de datos, ya que por ello
puede existir variaciones en nuestros
resultados.
● Se recomienda hacer una corrección de
datos, para así reducir el error
experimental de nuestros resultados.
● Se recomienda realizar las
preparaciones de las muestras según las
indicaciones de la guía y la profesora,
para así reducir la alteración de nuestros
resultados en los tratamientos.

ANEXOS:
Registro Fotográfico

Podemos observa

Fotografía N° 01 realizado en la sesión N° 03

Preparación del suelo fecha: 12 Abril 2018

Conclusiones
● El propósito de dicho informe es usar
diferentes técnicas de biorremediación
para un agente contaminantes en dos
 Fotografia N° 2 Fotografia N° 5

Plantacion de lecuchas realizado el 19 de Abril

del 2018
Fotografia N° 3

Medicion de clorofila realizado con el equipo

SPAD realizado el 10 de mayo del 2018
Fotografia N° 6

Preparacion del agua realizdo el 26 de Abril del

2018
Fotografia N° 4
Extracción de muestra para análisis por
espectrofotometría realizado el 10 de mayo del
2018.

Preparacion de la solución en suelo para el

análisis por el espectofotometro
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