Como ya sabemos el microscopio es un instrumento que nos permite observar objetos que no

son perceptibles para el ojo humano, ampliando la imagen, y de esta forma podemos
identificar las características estructurales, sin embargo el microscopio por si solo no es
suficiente para considerarse como una herramienta de análisis, ya que la mayor parte de las
muestras requieren un tratamiento especial, de técnicas y procedimientos específicos

Logros de aprendizaje:

• Definir y clasificar las técnicas de observación en microscopia

• Reconocer la importancia de utilización de las técnicas de observación en microscopia
• Conocer los diversos procesos y técnicas y su utilidad
• Llevar a cabo las técnicas básicas de observación en microscopia
• Observar las placas realizadas con las distintas técnicas.

Generalidades:

Las técnicas de observación son un conjunto de procedimientos que se realiza en una muestra
biológica o no, con la finalidad de conferirle condiciones óptimas para ser observadas
examinadas y analizadas morfológicamente en el microscopio.

Se debe tener en cuenta que algunas células presentan pigmentos de acuerdo a su función ,
como lo son la hemoglobina y cromoplastods, es decir el resto de estructuras celulares son
incoloras y carecen de contraste. Por lo cual sería imposible la observación y análisis si no se
procediera la aplicación de las adecuadas técnicas de observación.
El objetivo de la preparación de muestras, es permitir que las estructuras de los materiales se
revelen con suficiente contraste , de este modo las características de interés sean grabadas,
descritas y caracterizadas en detalles vicibles a una escala menor que la agudeza del ojo
humano.

Obtención de la muestra:

Esto va a depender de la muestra y el tipo de estudio requerido

• Tejidos en células vivas: se vale de procedimientos como cultivo de células y cultivo de

tejidos, teniendo como finalidad la observación con mínima modificación de las
características vitales, evitando los procesos como la fijación y la tinción.

• Biopsia:Una biopsia es un procedimiento que se realiza para extraer una muestra de

tejido o de células del cuerpo para su análisis en un laboratorio.
La biopsia se la realiza para examinar la presencia de enfermedades en los tejidos, con
más frecuencia es utilizado para el diagnóstico de cáncer , pero también puede ayudar
a identificar otras condiciones tales como infecciones y y desordenes autoinmunes e
inflamatorios.

• Necropcia muestra se obtiene de los cadáveres, y el estudio de estas muestras tiene

como finalidad determinar condiciones preexistentes o la causa de la muerte.

Frotis: consiste en la extracción de una muestra (sangre, esputo, secreción vaginal, saliva,
cultivos) sobre un portaobjetos , para separar lo más posible y disminuye su densidad,
permitiendo asi ,obtener una imagen más clara y nítida
 Dependiendo que tipo de frotis se realice, debe ser sometido a diferentes técnicas, sean
estas de fijación o tinción.

Este procedimiento es útil para determinar si el aspecto de las células es normal o anormal,
en el caso de la sangre permite contar los distintos tipos de células sanguíneas.

Tinción de Ziehl-Neelsen

es una técnica de coloración de microorganismos para la identificación de patógenos,

como Mycobacterium tuberculosis causante de la tuberculosis

esta tecnica nos sirve para identificar la los bacilos acido-alchol resistentes(BAAR)

en los baar se encuentran las microbacterias , agentes etiológicos de enfermedades como

tuberculosis(TBC)y lepra

Papanicolau

La coloración de Papanicolaou, además de la detección temprana del carcinoma de cuello

uterino, brinda información sobre el estado hormonal y es orientativa al diagnóstico de
infecciones cervicovaginales.

Es un procedimiento que se lleva a cabo para detectar el cáncer cervical en las mujeres.

El examen de Papanicolaou consiste en recolectar células del cuello uterino, el extremo inferior
y angosto del útero que está arriba de la vagina

La tinción de Papanicolaou se aplica a exudados vaginales para la detección de cáncer uterino o

vaginal. La técnica utiliza un elevado número de colorantes en su procedimiento.

• Hematoxilina: es la tinción nuclear escogida, permite básicamente revelar los núcleos de las
células presentes en la muestra. Suele usarse Hematoxilina de Harris.
• Orange G: es un colorante sintético de carácter ácido que revela compuestos básicos como la
prequeratina (que tiñe de color rosado) o la queratina (que tiñe de color naranja brillante).

• Eosina amarillenta: tiñe de color rosa-anaranjado el citoplasma de las células escamosas

maduras, de las células ciliadas y de los eritrocitos.

• Verde Luz SF amarillento: tiñe de color verde-azulado las células escamosas no superficiales
(inmaduras o a parcialmente maduras).
• Pardo Bismark R: no tiñe el citoplasma celular pero si la mucina.

• Ácido fosfotúngstico: tiene una función mordiente, especialmente importante para el Verde
Luz SF.

Se coloca el especulo en el conducto vaginal, en el cual se introduce un cepillo para realizar un

raspado y tomar muestras de células.

Resultado de las tinciones celulares:

núcleos—————————————en azul
células acidófilas————————–rojo a naranja
células basófilas—————————verde o azul verdoso
células o fragmentos de tejido impregnados de sangre—-naranja o naranja verdoso
Como prueba para la detección del cáncer cervico-uterino, se toma una muestra de células del
epitelio del cuello uterino y se extienden en una lámina de vidrio que es la que se colorea con
Papanicolaou.