UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BUCARAMANGA

MEDICINA – CUARTO SEMESTRE

PROCESOS PATOLÓGICOS 201910

GUIA DE LABORATORIO 1-01

TEMA PROCESAMIENTO EN PATOLOGÍA

DURACION 120 minutos
DOCENTES CAG – LRC
ESTUDIANTE SEBASTIÁN PINILLA ALDANA

JUSTIFICACIÓN
Muchos de los diagnósticos en medicina se hacen por medio de una biopsia por lo tanto es importante
que el médico general conozca los requisitos de la muestra (desde la toma y envío), el tiempo
necesario para el procesamiento del material y la interpretación del resultado histopatológico final y así
hacer un uso adecuado de ésta herramienta.

OBJETIVOS
1. Conocer el papel y las funciones del Patólogo y del Laboratorio de Patología
2. Reconocer la importancia del médico general en la eficacia del Laboratorio de Patología
3. Describir los diferentes tipos de biopsias y muestras para patología
4. Identificar los diferentes medios de fijación según el tipo de muestra
5. Entender los pasos del procesamiento en Patología y el tiempo requerido en el procesamiento de
una biopsia.
6. Enumerar algunas coloraciones especiales y su utilidad

PREGUNTAS

1. Defina: biopsia, citología, legrado, ACAF, trucut, medio fijador, punch, exfoliativa,
impronta, pieza quirúrgica, conización, amputación.

Biopsia: es el procedimiento por el cual se remueve tejido de un organismo para el estudio

histopatológico macroscópico y microscópico que permite establecer un diagnóstico definitivo en la
mayoría de los casos.
Todos los órganos son accesibles para este tipo de procedimiento incluyendo el cerebro y el
endocardio.

Citología: es el estudio de las alteraciones morfológicas de las células desprendidas libremente de los
epitelios de revestimiento o extraídas de diferentes zonas del cuerpo por métodos poco invasivos como
raspado, cepillado, aspiración, etc.
La muestra puede ser preservada permanentemente y se puede hacer el muestreo de amplias áreas
de tejido.

Legrado: consiste en el raspado de la superficie de ciertos tejidos, principalmente útero o los huesos,
para eliminar sustancias adheridas o para obtener muestras de tejido.

ACAF (Aspiración con Aguja Fina): es una prueba diagnóstica que consiste en la extracción de una
muestra total o parcial de tejido para ser examinada al microscopio por un patólogo.
Se realiza usando técnicas de imagen como ecografía, TC, escáner.

Trucut: también conocida como Punción con Aguja gruesa. Esta técnica permite extraer un cilindro de
tejido tumoral conformado no solo por células sino también por elementos de soporte, tejido conectivo,
vasos linfáticos y microcapilares.
Conserva la arquitectura del tejido lo cual permite establecer con mayor precisión el potencial de
malignidad e invasión de una lesión tumoral.

Medio fijador: son moléculas con varios grupos activos que se unen a diferentes moléculas de la célula
generando una red molecular interconectada que hace que los ataques bacterianos y enzimáticos sean
infructuosos, manteniendo de esta manera la estructura celular. Son sustancias que evitan la
degradación de células o tejido por acción de bacterias y enzimas para su posterior estudio.

Punch: instrumento cortante cilíndrico que permite la obtención de muestras de piel. Sinónimo de
sacabocados.

Exfoliativa: crema que elimina en forma de pequeñas laminas o escamas las células muertas.

Impronta: en órganos donde las células tienen pocos nexos de unión (bazo, ganglios linfáticos, medula
ósea) es posible obtener una capa unicelular sobre portaobjetos por contacto directo de este con la
superficie de sección del órgano, sin que sea preciso realizar raspado o exfoliación previa.

Pieza quirúrgica: de gran tamaño, a menudo comprender órganos enteros e incluyen toda la lesión.
Extraídas por cirujanos para su análisis y posterior determinación del tratamiento.

Conización: cirugía para extraer una pieza (muestra) de tejido anormal de cuello uterino.
Muestra en forma de cono.

Amputación: separación o corte de un miembro o parte del cuerpo de un ser vivo, generalmente se da
por un procedimiento quirúrgico.

2. Clasifique los tipos de muestras que se envían al laboratorio de patología.

- Biopsia
- Citología
- Piezas quirúrgicas
- Líquidos
- Cadáveres
- Frescos

3. Mencione las diferencias entre una biopsia incisional y una biopsia excisional.

En la biopsia incisional solo se toma una porción de la lesión y por lo tanto este procedimiento tiene un
fin diagnostico; por otro lado, en la biopsia excisional toda la lesión es removida, usualmente con
tejido normal a su alrededor, y por lo tanto este procedimiento es diagnóstico y terapéutico.

4. Mencione las difierencias entre una biopsia y una muestra citológica.

La biopsia se centra a nivel macro y micro de los tejidos y órganos. Se usa para diagnosticar y
determinar el tratamiento más adecuado. Todos los órganos son accesibles en este procedimiento.
Entre los especímenes enviados para examen histopatológico se incluyen fluidos, tejidos, pelos, uñas,
productos de la concepción, dispositivos médicos implantados en el cuerpo y objetos extraños
removidos del cuerpo. Además, existen muchos tipos, entre ellos por colposcopio (se emplea un
aparato que magnifica la imagen), por raspado, congelación (no necesita medio de fijación y el
resultado sale en 30 minutos por ende es un método de urgencia), pleural, punch, excisional, incisional
y BACAF.

La citología se enfoca más a nivel de los cambios celulares. Es poco invasiva. Tiene alta tasa de
especificidad para la mayoría de los tejidos estudiados. Tiene mínima tasa de morbilidad. Rapidez
diagnostica. Es útil en el test de “screening” en lesiones cervicales, en la detección precoz de cáncer y
lesiones premalignas, en nódulos tiroideos, en síndromes linfoploriferativos, en lesiones del sistema
nervioso central y en diagnóstico de lesiones inflamatorias. Además, existen muchos tipos, entre ellos
está por punción o ACAF (glándula mamaria y tiroides), de líquidos (pleural, LCR, sangre  se
centrifugan y se separa el líquido de las células, no necesita medio de fijación) y secreciones,
improntas, cepillado (endocervix), lavado y raspado.

5. Diga que tipos de medios de fijación se utilizan para enviar biopsias, estudios citológicos
y las muestras para congelación.
 - Biopsia  Formol buferado al 10% (medio de fijación ideal), formol al 10%, alcohol etílico 95%
o 96%, glutaldehido (microscopia electrónica  ejemplo: glomerulopatias), Bouin (en biopsias
renales o de médula ósea)
- Citología  Alcohol etílico al 95% o 96%, citospray y etanol (para posterior tinción con Wright,
Gremsa o Diff-Quick).
- Biopsia por congelación  Resina para congelación.
- Microscopia electrónica  Glutaraldehido

6. Cuál es la coloración de rutina en histopatología y explique sus fundamentos.

La coloración de rutina en histopatología es la hematoxilina eosina. Es un colorante que tiene, por un

lado, un carácter básico dado por la hematoxilina, por lo tanto, se une a sustancias ácidas que en el
caso de las células seria el núcleo el cual se tiñe de un azul-violáceo, y por otro lado también tiene un
carácter ácido dado por la eosina, que tiene tonalidad rosa-rojo que se disuelve en etanol y se une a
las estructuras básicas de los tejidos. Las estructuras con mayor pH en los tejidos son las proteínas
debido a los puentes de azufre y nitrógeno que tienen, es por ello que con esta técnica se tiñe el
citoplasma y la matriz extracelular, por sus altos niveles de proteínas.
En conclusión, la hematoxilina tiñe de azul-violáceo al núcleo pues tiene carácter básico y por ende
tiñe lo acido, y por otro lado la eosina al tener un carácter acido tiñe de rosa-rojo el citoplasma celular
pues este es básico por el alto contenido proteico.

7. Busque cinco (5) coloraciones especiales en histopatología y de ejemplos.

La coloración de rutina en las biopsias es la hematoxilina eosina y en las citologías es Papa Nicolav.

- Azul de toluidina  Gránulos de mastocitos.

- Tricromica de Masson  Cartílago y fibras musculares.
- Wright  Células sanguíneas.
- PAS  Glucógeno.
- Orceina  Fibras elásticas.
- Sales de plata  Tejido nervioso

8. Haga una orden médica para solicitar un estudio histopatológico (solicitud de examen)
con todos los datos relevantes.

Siempre la orden medica que acompaña la muestra debe contener el nombre, genero, edad, resumen
de la historia clínica y la localización de la muestra. Además, debe contener los datos del solicitante
junto con la clínica o centro de salud donde trabaja.
Por otro lado, el informe histopatológico de la biopsia contiene también los datos del paciente, pero
además de ello contiene el análisis macroscópico, microscópico, el diagnóstico y finalmente la firma del
patólogo.

DESARROLLO
Se realizará un recorrido por el laboratorio de histopatología y la sala de microscopia.
Durante la actividad se resolverán integralmente todas las preguntas y se resaltarán los aspectos más
importantes.
Se puede realizar un quiz para conocer el grado de preparación previa y la participación en el
desarrollo del taller.

BIBLIOGRAFIA
http://www.unisanitas.edu.co/Revista/54/LA_BIOPSIA_Y_LA_CITOLOGIA_PILARES.pdf
http://www.unisanitas.edu.co/Revista/55/LA_BIOPSIA_Y_LA_CITOLOGIA.pdf
http://www.elsevier.es/es-revista-revista-colombiana-cancerologia-361-articulo-biopsia-por-
congelacion-recomendaciones-practica-S0123901514000110
http://www.wesapiens.org/es/class/4933003/T%C3%A9cnicas+Histol%C3%B3gicas
García del Moral R., Laboratorio de Anatomía Patológica. Interamericana Mc Graw-Hill. 1993.
Juan Rosai. Ackerman’s, Surgical Pathology. Volumen one. Eighth edition. Mosby. 1996.
 LABORATORIO: PROCESOS PATOLOGICOS
BIOPSIA

Se extrae un pedazo de tejido de un organismo vivo para determinar un diagnóstico.

- Biopsia de medula ósea: se realiza en la cresta pélvica o esternón para diagnósticos sanguíneos
- Biopsia con sacabocados: pinzas especiales, para examinar ulceras
- Biopsias endoscópicas: se realiza por medio del endoscopio generalmente en tracto digestivo
- Biopsia de tejidos blandos: se remueve una porción pequeña de tejido por medio de una aguja
de biopsia
- Biopsia miocárdica: para examinar el miocardio especialmente en trasplantes
- Biopsia incisional: muestra del tejido afectado y una del tejido normal para hacer una
comparación
- Biopsia pleural: por medio de una aguja a ciegas
- Biopsia transpleural: para evaluar presencia de neumotórax
- Biopsia por raspado: se utiliza un bisturí en el tejido afectado para dermatitis inflamatorias
generalmente
- Biopsia por sacabocados: taladro quirúrgico en tejidos densos para obtener una muestra
- Biopsia con aguja gruesa: pistola automática para evitar complicaciones y tiene alto margen de
extracción, realizada por especialista y anestesia local
- Biopsia por punch: cilindro para la dermis
- Biopsia por congelación: presentes en el laboratorio de patología, donde se toma la muestra (Ej:
ovario) y lo manda sin medio fijador envuelto en gasa. En el momento de llegar al patólogo se
hace un imprint y la resina se fija con alcohol.

La diferencia entre citología y biopsia es que la citología NO es diagnóstica, porque en la biopsia veo el
tejido, estroma, epitelio, en la citología solo veo la parte superficial, se evalúan características y es poco
invasiva.

Las biopsias pueden ser incisionales o escisionales; las escisionales son generalmente quirúrgicas y las
incisionales son la toma de una parte especifica de tejido.

MANEJO Y PROCESAMIENTO DE TEJIDOS

La finalidad es preparar la muestra para poder estudiarla.

Son procesos mediatos y post vitales

1. Toma de muestra: es muy importante ya que la calidad de esta determinará un buen

diagnóstico.
2. Fijación: objetivo principal es detener la vida de la célula y que sufra procesos autolíticos
perdiendo su estructura y función
3. Medios de fijación:
- Oxidantes:
- Reductores: formaldehido, alcohol etílico y metílico
 Características de un buen fijador: mate inmediatamente la célula para impedir procesos auto
líticos, penetración, fácil de conseguir, económicos.
- Fijadores simples: solución acuosa que coagula las proteínas (ácido acético, sulfato de Zinc).
- Mezclas fijadoras: el más importante es el formol tamponado 10%, preserva excelentemente
el tejido y es compatible con la mayoría de técnicas.
Formaldehido también es muy usado normalmente

Si el tejido se descompone por estar en un medio totalmente diferente es debido a la autolisis, para
evitar esto se debe hacer la fijación para preservar la estructura y ver detalladamente los hallazgos. Se
mata la célula, pero sin destruirla.

4. Inclusión: el objetivo es hacer que el tejido adquiera dureza por medio de la sustancia de
inclusión. Las sustancias de inclusión; solubles en agua o solubles en solventes orgánicos.
5. Microtomía: obtención de los cortes  sujeción del bloque de parafina, sujeción de la navaja,
sección del bloque en delgadas láminas, y se coloca en un portaobjetos.
6. Coloración: se utiliza un colorante para que la estructura adquiera color con el fin de poder
diferenciar y distinguir estructuras para dar un mejor dx.
Los colorantes pueden ser naturales (vegetales o animales) o artificiales que son ácidos, básicos,
etc.
7. Montaje: al finalizar el proceso de tinción debemos colocar una gota de sustancia adherente
(resina especial) y encima de ellos una lámina portaobjetos.

TINCIONES ESPECIALES

- Hematoxilina eosina: colorante de carácter básico que se une a componentes ácidos

generalmente en los núcleos de las células, la eosina es de color rojo y ácido, que tiñe el
citoplasma de las células.
- Tricrómica de Masson: unión de elementos acidofilos, como citoplasma, musculo, colágeno
(tejido fibroso). El colágeno se tiñe de color azul
- Ácido peryodico de Shift PAS: evidencia de polisacáridos como el glucógeno particularmente
ya que oxida las uniones carbono
- Sales de plata: se utiliza generalmente para estructuras muy finas o pequeñas
- GRAM: se utiliza el colorante cristalino y lugol, alcohol acetona y safrinina.
Tiñe los peptidoglicanos presente en la membrana celular. Gram positiva; posee gran
cantidad de ácidos y tiñe morado. Gram negativa  roja.

SOLICITUD E INFROME HISTOPATOLÓGICO DE UNA BIOPSIA

Dentro de la solicitud debe ir la identificación del paciente y del médico solicitante, además de ello debe
ir la fecha del procedimiento (incluida la hora en la cual se realizó la biopsia). Por otro lado, debe ir
consignado el tipo de espécimen con la respectiva orientación (se coloca un hilo para indicar el borde
superior, y doble hilo para ubicar el borde medial). Finalmente, la solicitud debe contener un resumen de
la historia clínica y el propósito de la resección del espécimen.
En el caso del informe, también debe contener los datos del paciente y del patólogo, seguido del estudio
morfológico (macroscópico y microscópico), el diagnostico dado por el patólogo y la firma de este.