LA CITOLOGIA

COMO
HERRAMIENTA
PARA EL MEDICO
DR. JOSE ANTONIO LOMAS ARGUMEDO

D R . A LY S O N V I L L A R E A L L O P E Z

D R . A L B E RT O I S A I M E R C A D O PA R R A

D R . A L D O G A B R I E L G A R Z A VA L L E J O

D R . J E S U S A L B E RT O PA C H E C O H E R N A N D E Z
QUE ESTUDIA LA
CITOPATOLOGIA
Estudia y evalúa material celular constituido por células aisladas y pequeños
conglomerados celulares o “microbiopsas”
BIOPSIA POR ASPIRACION CON
AGUJA FINA (BAAF)
Procedimiento diagnostico que consiste en la extracción de muestra mediante el uso de una
aguja fina en donde se realiza una punción de lesiones de órganos profundos o lesiones
superficiales por personal entrenado para el procedimiento.

Biopsia de mama o seno por aspiración con aguja fina. (n.d.). Geosalud.com.

https://www.geosalud.com/cancerpacientes/mama/biopsia-por-aspiracion-con-aguja-

fina.html
IN SITU
Es la valoración de la calidad del espécimen de forma inmediata, por el citopatólogo.
OBTENCION DE LA MUESTRA PARA SU ESTUDIO CITOPATOLOGICO
Existe un factor en común que debe seguirse al pie de la letra en todos los especímenes
citológicos, el cual consiste en la correcta elaboración del frotis, así como su fijación inmediata.
Dos tipos más comunes de preparación de muestra citológica
Elaboración directa: se emplea cuando la muestra es rica en células.
Elaboración indirecta: las muestras obtenidas están constituidas fundamentalmente por líquido.
FORMAS EN LAS QUE PUEDEN SER RECIBIDOS
EN LABORATORIO
• Frotis previamente fijados
• Frotis secados al aire
• Muestras sin elaborar
• Muestras por extensión directa
• Previa centrifugación
• Cito centrifugación
• Filtros de membrana
OTROS PROCEDIMIENTOS DE
ELABORACÍON DE LA MUESTRA
BASE LIQUIDA
La técnica de procesamiento en base líquida tiene un elevado costo, la elaboración de los
especímenes es laboriosa y, sobre todo, no mejora de manera sustancial el desempeño —en
especial de la citología ginecológica— si se le compara con la técnica convencional —siempre y
cuando esta última sea realizada en condiciones óptimas, como ocurre con la citología
tradicional.
TÉCNICAS DE FIJACIÓN DEL
MATERIAL CITOLÓGICO
Su principal objetivo es conservar el detalle morfológico de
las células conservando todas sus características tal como
están en el tejido vivo
TIPOS DE FIJADORES
ALCOHOLES
-Etanol al 96%.: Es el fi jador de elección para material de origen ginecológico y de secreciones
bronquiales, también cuando la tinción usada es la de Papanicolaou. Produce resultados
satisfactorios siempre y cuando los especímenes citológicos sean de calidad, elaborados como
ya se ha indicado, los cuales se sumergen de inmediato en el etanol al 96% durante 15 a 20
minuto.
-Metanol al 100%. Este fijador se utiliza cuando los especímenes son fijados al aire, en especial
cuando se evalúa la calidad del material in situ
-Propanol e isopropanol al 90%. Son de uso más restringido.
Líquido de Carnoy
Este fijador puede ser útil en especímenes con
gran contenido hemático y su función al
contener ácido acético glacial al 2.5% y
cloroformo es de producir hemólisis de los
eritrocitos, que impiden la evaluación de otro
tipo de células. Su uso es restringido, ya que si la
muestra se deja más de 15 minutos se pierde el
detalle nuclear.
Citoespray
Es un fijador en forma de aerosol
que, además, deposita una capa
protectora de polietilenglicol
(Carbowax, mezcla de polímeros, con
alcohol isopropílico) que debe
retirarse a través de enjuagues de
etanol y agua antes de que los
especímenes sean teñidos.
TINCIÓN DEL MATERIAL
CITOLÓGICO
Los principales objetivos de la tinción de los especímenes
son:
• Visualización óptima de las células.
• Diferenciación de los diversos constituyentes celulares.
• Que el análisis y evaluación específica de las características de la estructura nuclear sean
adecuados, ya que los cambios morfológicos evalúan la conducta celular anormal.
• Análisis del citoplasma, cuyos cambios orientan el origen celular.
TIPOS DE TINCIONES

Tinción de Papanicolaou
Está particularmente indicada para el estudio de la queratinización de las células malpighianas
patológicas. Fue introducida por Papanicolaou en 1925
Tinción de Shorr
Es un procedimiento histórico y se utilizaba como tinción diferencial en las evaluaciones
hormonales.
Tinción de May-Grünwald-Giemsa
Dicha coloración es utilizada en el estudio de lesiones linfoides, también en el material obtenido
por BAAF. Es de gran utilidad por la marcación fina de cambios nucleares.
Coloraciones extrarrápidas
Son coloraciones utilizadas como tinciones útiles en el diagnóstico peri o transoperatorio, la
evaluación o la evaluación in situ de la calidad de los especímenes que necesitan coloraciones
rápidas, como el azul de metileno y otras tinciones

Coloración con azul de metileno al 1%

Es empleada para efectuar diagnósticos rápidos y la evaluación del material en fresco.

Coloración de ácidos nucleicos
Es el Feulgen y tiñe de manera específica el DNA, se utiliza ampliamente en instrumentos que
efectúan mediciones, incluso existen “kits” para medición cuantitativa del DNA.
OBTENCION ADECUADA DE LAS
MUESTRAS
MUESTRA DE CITOLOGÍA GINECOLÓGICA
El estudio citológico del cuello uterino ha demostrado ser un arma de prevención secundaria
bastante efectiva contra el cáncer cervicouterino invasor. Todo este proceso inicia desde la
selección del paciente , hasta la consumación del tratamiento oportuno y correcto,
En la obtención del estudio intervienen diferentes personales de
salud, y si no se sigue este proceso con la máxima calidad, la prueba
resultará en un fracaso,
CITOLOGÍA DE LA INFECCIÓN POR V
PH EN CUELLO UTERINO.
Citología de la infección por VP
H en cuello uterino. A. células e
scamosas normales (40X); B. coi
locito (40X); C disqueratocito (1
0X); D binucleación (10X); E. hip
ercromasia leve y megalocariosi
s (10X); F. hipercromasia leve y
megalocariosis (10X); G: células
de paraqueratosis (10X); H. célu
las maduras con núcleos irregul
ares e hipercrómicos (10X).
Es necesario conocer la historia natural de la neoplasia cervical y el HPV. Así mismo, la infección
por HPV, no es suficiente, ya que una transformación neoplásica no es unifactorial, si no que se
desarrolla de mutaciones celulares en eventos múltiples Las infecciones se adquieren al inicio de
la vida sexual, la mayoría intrascendentes, ya que nuestro propio sistema inmune se encarga de
combatirlas
En la actualidad se encuentran con pruebas moléculas para ir dentífricas los genotipos del HPV,
así mismo ya se cuentan con vacunas, por lo que la prevención hoyo es toda una realidad
Hay estrategias enfocadas en el tratamiento y sobre todo la prevención de las mujeres en
situación de riesgo, dichas estrategias son
• identificar a las mujeres infectadas
• Dirigirlas a servicios de estudio y tratamiento
• Al reducir los casos, se optimizan los recursos, con una mejor optimización de los recursos
Para que todas estas estrategias se cumplan el estudio debe ser de óptima calidad durante lo
largo de todo este proceso, así como el resto de los estudios y procedimientos, la estrategia
fallará si se comete un error, como frotis mal elaborados o una mala fijación.
¿Quién debe realizarse el estudio del
Papanicolau?
De acuerdo a la NOM, debe estar basada en la historia natural de la enfermedad y
características epidemiológicas Sin embargo esta población debe de ser:
• májeles que ya han tenido relaciones sexuales
• Mujeres desde los 25 hasta los 65
Se debe realizar una vez por año, pero si durante 3 años, el resultado es negativo, podrá
espaciarse hasta cada 3 años
¿En qué momento debe realizarse el
estudio?
En población asintomática
• A la mitad del ciclo menstrual 1
• NO se recomienda durante el periodo menstrual
• Mujeres con sangrados anormales
• El embarazo no contraindica la toma del papanicolaou
• En presencia de infecciones que produzcan procesos inflamatorios 2
• En caso de que haya un fenómeno inflamatorio muy severo será mejor esperar hasta después
de que la Px termine un tratamiento contra la infección
Recomendaciones previas al estudio:
• La mujer debe de abstenerse densos tener relaciones sexuales, 24 horas previas al estudio
• No administrarse medicamento por vía vaginal, 24 horas previas al estudio
• No realizar lavados vaginales
Material necesario para la obtención de
una muestra adecuada
• Mesa ginecológica.
• Lámpara.
• Espéculo de metal o plástico
(estándar y de diversos tamaños).
• Espátula de Ayre.
• Cepillo endocervical o torunda de
algodón no absorbente.
• Portaobjetos, de preferencia con
extremo esmerilado.
• Alcohol de 96° o fijador en espray
Obtención del espécimen del cuello uterino Los especímenes serán obtenidos justo de la
mucosa del cuello uterino, es donde se presenta la metaplasia
La zona de transformación es muy variable,
dependerá de:
• edad. 3
• Ubicación anatómica, 4
• En edad avanzada, y posmenopausicas hay
que tener en cuenta que migra hacia el canal
endocervical , debe dirigirse con precisión a
esta zona anatómica
CUAL SERÁ EL INSTRUMENTO
ADECUADO PARA OBTENER EL
ESPÉCIMEN DE CADA TIPO DE CUELLO
UTERINO
• Mujeres jóvenes
La espátula de Ayre es el instrumento adecuado. Tiene dos extremos, uno ligeramente puntiagudo, en contigüidad
con una porción redondeada que se adapta en modo perfecto al contorno del cuello uterino , con la que se tomara
una muestra de la zona de transformación y la mucosa endocervical, al efectuar una rotación de 360 grados. El
extremo opuesto de la espátula está diseñado para que con un raspado suave se obtenga material de la mucosa
exocervial
• Mujeres de edad avanzada
O con bajos niveles de estrógenos cuya transformación está parcialmente oculta el instrumento adecuado será un
cepillo como el Cytobrush, que permite obtener muestras de la he ha migrado hacia el canal endocervical , es de
suma importancia realizar con cuidado y gentileza, rotando el cepillo solo 45 grados, para evitar erosiones de la
mucosa de un epitelio delicado y atrófico y unas aún evitar el sangrado
PASOS PARA UN CORRECTO
PROCEDIMIENTO EN LA OBTENCIÓN DE
ESPECÍMENES DE CALIDAD
1 - preparar las laminillas identificando las correctamente
2- la paciente debe estar en posición ginecológica, se debe observar la región vulvar en busca de
alguna patología separar los
labios mayores y menores induciendo el espejo vaginal
(Mujeres posmenopáusicas será necesario humedecer ligeramente las caras extremas de las
manos del espejo con suero
fisiológico o agua destilada a fin de facilitar esta maniobra)
3-visualizar el cuello uterino además realizar una evaluación de las paredes vaginales
4- ya con el cuello uterino expuesto buscar lesiones macroscópicas como lesiones sugestivas de
cáncer, la indicación precisa es obtener una biopsia en una área no necrótica.
5- después observar acerque a la mucosa el extremo de la espátula y obtenga la muestra, raspar
ligeramente con un movimiento circular de 180° hacia la derecha
6- Voltee la espátula y acerca de la punta alargada al endocérvix repitiendo la maniobra giratoria
respaldo ligeramente en sentido contrario, es decir, la izquierda
7- elabore de manera inmediata el frotis depositando primero el material celular obtenido con el
extremo de punta Roma a lo largo del portaobjetos. Inmediatamente después voltee la espátula
y deposite en la otra mitad del portaobjetos en sentido de longitudinal la muestra del
endocérvix. Sumerja con rapidez de laminilla en el cole para lograr su correcta fijación. ESTA
MANIOBRA NO DEBE EXCEDER LOS 20 SEGUNDOS.
En caso de utilizar cito espray, tener cuidado de esparcir el rocío de fijador a unos 20 a 30 cm de
distancia
8- en el caso de las mujeres con menopausia con un cuello uterino atrofico y que no se visualiza la zona, utilizar un cepillo
o en
su defecto un hisopo, y realizar el frotis con los pasos del caso anterior
9- Al retirar el espejo se debe rotar 90° y visualizar las paredes vaginales
10- El tiempo mínimo de fijación en alcohol es de 15 a 20 minutos después debe dejar secarse y posteriormente ser
enviado a
laboratorio
11- los especímenes histológicos deben acompañar siempre de:
• solicitud estudio
• Datos clínicos de la paciente
• Historial citológico de biopsias
• Hallazgos macroscópicos
Si la elaboración a sido correcta el frotis mostrará una capa delgada de elementos celulares
fijados de manera correcta y que con la atención adquirirá una coloración adecuada Siempre
monitorearse todos estos pasos con el objeto de obtener especímenes útiles y confiables
INFORMA DEL ESTUDIO CITOPATOLÓGICO DEL
CUELLO UTERINO
La NOM - 014 Señala lineamientos para el reporte del estudio citopatológico debe utilizarse la
nomenclatura del sistema Bethesda
El doctor Papanicolaou ideo una nomenclatura aunque ya obsoleta a veces sigue empleándose
Está constituida por cinco clases (desde la clase I, normal, hasta la clase V, cáncer invasor).
Después la OMS propuso una nomenclatura acorde con la terminología histológica (displasias:
leve, moderada y grave; carcinoma in situ y cáncer invasor).
El uniformar a nomenclatura fue de normatividad pues impulsó el esclarecimiento de la historia
natural del cáncer cervical
Más tarde Richart, basado en estudios multidisciplinarios, acuñó el término “neoplasia
intraepitelial cervical” con tres grados de nomenclaturas, han quedado ya en la historia, pues no
sustentaron algunas razones válidas para identificar de manera correcta las lesiones
La nomenclatura del sistema Bethesda está basada en la historia natural y aporta ventajas como las siguientes:
1. Propiciacomunicacióndedifusiónuniversal.
2. Puedecorrelacionarseconeldiagnósticohistopatológico.
3. Evalúa la calidad del espécimen.
4. El diagnóstico es predictivo.
5. La identificación de las lesiones a través de esta terminología binaria proporciona elevadas cifras de con- cordancia
interobservadores e intraobservadores.
Se trata de una nomenclatura fundamentada en descubrimiento científicos considera eventos tanto moleculares como
celulares bien establecidos. Toma en cuenta la historia natural de la
enfermedad y es utilidad clínica al tener gran predictibilidad además señala un pronóstico que ayuda a planear el
tratamiento y favorece la reproducibilidad
Tal nomenclatura separa las lesiones intraepiteliales en dos grados: las de bajo grado (NIC I) y las de alto grado que incluye el
NIC II, NIC III y carcinoma in situ, lesiones que son diferente
Otra de las ventajas es que:
• califica la calidad si el frotis es adecuado para efectuar diagnóstico o no
• el tipo de células presentes del espécimen
• presencia elementos que llegan a oscurecer la evaluación morfológica
El envío del espécimen a laboratorio debe realizarse de manera cuidadosa
La muestra debe de estar acompañada de :
• Solicitud que señale los datos clínicos fundamentales como edad, fecha de última
menstruación, tratamiento hormonal reciente
• Antecedentes de procedimientos quirúrgicos previos
MUESTRA CITOLÓGICAS NO
GINECOLÓGICAS
Muestras de líquidos de diversos orígenes líquidos de derrame pleural acético y pericárdico
Justo después de la obtención del derrame debe enviarse el especial a laboratorio, si la muestra sido obtenida por la
noche el líquido de refrigerarse evitando su congelación se recomienda añadir etanol al 50%.
Hay quienes añaden anticoagulante el cual no interfiere en la coloración habitual pero se produce un fondo indeseable
cuando se utiliza la tinción de Romanowsky.
Los especímenes fijados con alcohol limitan la posibilidad de ser utilizados para estudios de inmunohistoquímica y
algunos otros estudios especiales
Le valuación del aspecto macroscópico es muy importante ya que es un indicio de la naturaleza del derrame, los
derrames hemorrágicos con frecuencia son neoclásicos.
Éstos especímenes contienen abundante sedimento los cuales serán utilizados para efectuar estudios complementarios
como tinciones especiales.
Orina
La orina deberá de ser matutina descartando la orina nocturna, es recomendable que si hay
sospecha clínica de tumor vesical, se obtendrá una descamación importante de las células de la
lesión tumoral

Líquido cefalorraquídeo
Es un espécimen muy escaso se utilizará centrífuga para obtener una muestra que pueda ser
evaluada. Cuando el especímenes turbio proviene de pacientes inmuno deprimidos deberá
realizarse una centrifugación y una evolución en fresco tiñendo el espécimen con una gota de
tinta China negra, esto a fin de descartar una infección por hongos
Material de aspiración con aguja fina
Por lo general ya vienen preparados y fijados sin embargo si se evalúa in situ se debe elaborar
un frotis, se ocupan 3/4 partes de la laminilla depositando las células en sentido longitudinal
monocapa
Cuando la atención es Papanicolaou o hematoxilina y eosina debe fijarse en el alcohol se debe
tomar en cuenta que en especímenes muy abundantes ha de fijarse parte del material en formol
a fin de obtener bloques celulares
Un ejemplo en el estudio de la patología tiroidea se requiere un mínimo de ocho 10 fragmentos
de tejido con 10 o más células
En estudios de patología mamaria no se señalan números absolutos de elementos celulares sino
que los criterios son cualitativos
CARACTERÍSTICAS
MORFOLÓGICAS
DE LOS ESPECÍMENES
Las características de los diversos especímenes varían de acuerdo con el tejido y al
procedimiento a través del cual se obtuvo la muestra, sin embargo, con las técnicas que se
utilizan en la actualidad hay patrones que se presentan en prácticamente todos los especímenes
de citopatología.
Las muestras de líquidos quizá estén constituidas por células solitarias, sobre todo cuando no
hay patología neoplásica y los especímenes obtenidos a través de raspa- dos o utilizando la BAAF
contienen tanto conglomerados como células aisladas.
FONDO
Los especímenes citológicos suelen presentar un fondo que es importante examinar como un
primer paso en el estudio de estas muestras, con esta evaluación se valida el grado de
celularidad, así como algunos rasgos arquitec- turales y, asimismo, la respuesta del tejido a la
biología y agresividad de la lesión en estudio que imprime ciertas características en el fondo de
los especímenes.
TIPOS DE FONDO:
-Fondo limpio
-Fondo hematico
-Fondo inflamatorio
-Fondo necrotico
AGRUPACIONES CELULARES
La agrupación de células es una respuesta a la concentración de glucosa en el medio. La agrupación de las células
detiene la producción de polisacárido. El objetivo del presente trabajo es describir el efecto de la agrupación celular
Ejemplos:
-Sábanas
-Panal
-Ácinos
-Papilas
-Desorganización arquitectural
-Ventanas intercelulares
-Amoldamientos nuclear
-Imagen de una célula dentro de otra
 Cambios celulares en el estudio
citológico
Núcleos y nucleolos
Los núcleos reflejan el nivel de actividad celular (p. ej., normal, reactivo, displásico, neoplásico, etc.), el citoplasma
muestra la diferenciación histológica y funcional de las
células (escamosas, glandulares, secretoras, fagocíticas,
neurales, etc.). Las células normales son uniformes desde el
punto de vista morfológico con características bien conocidas, co
n núcleos de contornos redondeados y lisos, las células transformadas (displásicas o neoplásicas) adquieren
rasgos anormales, “atípicos”, como irregularidad nuclear,
variabilidad en el tamaño o la forma, con aumento del
tamaño nuclear en relación con la cantidad del citoplasma,
lo que constituye un criterio útil para reconocer un crecimiento anormal de la célula.
 Citoplasma

El citoplasma identifi ca el origen de la célula y muestra cambios relacionados con su función, tal como el
citoplasma de las células escamosas que cumplen una función
protectora, las funciones de secreción de células serosas o
mucinosas de las glándulas salivales, etcétera.
Las células pueden sufrir modifi caciones según diversos factores relacionados con su función o en algunos
casos como consecuencia de estímulos hormonales como en el endocérvix; este cambio constituye el
cambio de metaplasia, que es una respuesta adaptativa por la sustitución de un tipo de célula madura por
otra, como en la zona de transformación del cervicouterino en el esófago de Barrett.
CONCEPTOS BÁSICOS EN
CITOPATOLOGÍA
1. Epitelio = Tejido Formado por varias capas de células yuxtapuestas que recubren todas las
superficies libres del organismo y contribuyen al recubrimiento
de las cavidades de la mucosa y glándulas

SEGÚN SU FUNCIÓN
-Revestimiento o Pavimentoso
-Glandular
-Absorbente
Según forma de las células epiteliales:
-Planos o Escamosos
-Epitelios Cúbicos

NUMERO DE CAPAS
Según el número de capas que las células formen:
-Epitelio Simple
-Epitelio Estratificado
2-Metaplasia = Cambio de un Epitelio maduro por otro igualmente maduro que también puede
explicarse como un proceso adaptativo ante condiciones que tengan que
ver con su estadía.
Tipos de Metaplasias, entre otros:
Causas generales
-Pavimentosa del cuello uterino Irritación
-Intestinal de la mucosa gástrica Sustancias Químicas
-Gástrica de la mucosa esófago Estrógenos
-Glandular en epitelio de la vejiga -Déficit de vitamina A
-Ósea en cartílagos de la laringe
3. Displasia = alteración del desarrollo de las células epiteliales acompañada de cambios en el
proceso de maduración de la célula. Es algo que puede ocurrir
En todos los epitelios.
4.Cáncer = las células anormales se multiplican y dan como resultado una invasión a los tejidos,
también llegan a trasladarse a través de otras partes del cuerpo por el torrente sanguíneo.
MUERTE CELULAR
Las células deben morir para preservar lo homeostasis del organismo que construyen, los prog
ramas de muerte celular están codificados en
El genoma y se expresan de manera ubicua
EXISTEN 2 TIPOS DE MUERTE
CELULAR
APOPTISIS
Se define como muerte celular programada es un evento celular natural, en el cual también puede
ser inducido por condiciones patológicas, la apoptosis es un evento controlado, las células se
vuelven más condensas, consistentes con el hecho de que el agua está siendo removida de la
célula.
NECROSIS
Es el resultado final de
la ruptura de la
membrana celular y el
derrame del contenido
celular en el espacio
intersticial, esto trae
como consecuencia una
respuesta afirmativa en
el área que va en
detrimento de las células
que la rodean.