PIRUVATO DESHIDROGENASA

LA MITOCONDRIA

- Es un organelo celular presente en casi la totalidad

de células eucariotas.

- El número de mitocondrias en la célula depende del

estado energético (de 10 a más de 2000).

- Forma variable. Mide entre 0,5-1 um de diámetro

ESTRUCTURA

1. Membrana mitocondrial externa: la membrana mitocondrial externa es

una bicapa lipídica que es altamente permeable permite pasar iones varios,
metabolitos e incluso algunos polipéptidos, es decir, moléculas de un
tamaño relativamente grande para lo que es normalmente el pasaje a
través de una membrana. Tiene muchas copias de unas proteínas llamadas
porinas que como su nombre lo dice forman poros en esa membrana, son
en realidad canales acuosos, o sea, que van a permitir pasar moléculas olubles y que permiten el pasaje de
moléculas que tienen hasta cinco mil tantos de tamaño

2. Espacio intermembrana: composición similar al citosol de la célula. Presencia de algunas enzimas y proteínas
específicas (adenilato quinasa, carnitina, etc)

3. Membrana mitocondrial interna y Crestas: Esta membrana mitocondrial al revés de la externa, es bastante

impermeable o muy impermeable para iones y para la mayoría de las moléculas. Aquellas moléculas que van
a ser intercambiadas entre el espacio intermembrana a la matriz mitocondrial va a ser las que tengan
transportadores específicos para ese intercambio, es decir que es muy selectivo el transporte entre los dos
espacios de la mitocondria, el espacio intermembrana y la matriz mitocondrial. Las crestas que si bien son
partes de la membrana mitocondrial, se plantean como una estructura en sí misma porque allí se encuentran
estos complejos que les decía de la cadena respiratoria y la atp si tasa así como la atp/adp traslocasa y la
traslocasa del fosfato.

4. Matriz: Su composición en iones y metabolitos es distinta al citosol, contiene metabolitos y enzimas de

rutas metanólicas centrales. Contiene ADN, ARN trasnferencia, mensajero y ribosómico.
 MICROGRAFÍAS

En las micrografías electrónicas, podemos ver el citosol y las mitocondrias en una célula
de un ducto de ardilla donde ustedes ven la cantidad de mitocondrias que uno puede
encontrar si toma un sector de la celula, en la siguiente tenemos una mitocondria de
una célula epitelial y en la figura de abajo una mitocondria de músculo esquelético. En
estas 2 micrografías ustedes podrán observar que si bien las dos mitocondrias
presentan crestas, el número de crestas que se ve en la micrografía del músculo
esquelético es muchísimo mayor que las crestas que podemos observar en la
mitocondria de la célula epitelial. Esto va a estar vinculado al rol que cumplen estas
crestas porque la cadena respiratoria y la síntesis de atp, que es una de las funciones
principales de estas mitocondrias, van a estar asociados justamente a las crestas.
Entonces, lo que se puede observar, en las micrografías es que hay células que tienen
necesidad de atp muy altas, como es una célula muscular, va a tener mitocondrias con
mucha mayor cantidad de crestas en su interior. En definitiva para poder sintetizar más
atp.

ROL DE LA MITOCONDRIA

1. Es la fuente de poder de la célula: produce energía najo la forma de ATP mediante la degradación
completa de los compuestos orgánicos a CO2 y H2O en presencia de O2. Oxidación de los nutrientes
celulares: glucosa, ácidos grasos, aminoácidos.

2. Es fuente de precursores biosintéticos, dando precursores para la síntesis de ácidos grasos, glucosa,
aminoácidos, colesterol, grupo hemo.

3. Es el sitio de degradación de los compuestos nitrogenados (ciclo de la urea)

PARTICIPA EN DIVERSOS PROCESOS CELULARES

- Metabolismo del Ca2+

- Rol central en el proceso de muerte celular programada

- Rol central en la señalización celular: formación de especies reactivad del oxígeno y formación del acetil-
CoA que es capaz de acetilar proteínas. Estos mecanismos regulan proliferación celular, diferenciación y
adaptación al estrés.
Tanto las proteínas, como los
polisacáridos, glúcidos y lípidos en su
catabolismo o en su degradación van
convergiendo hacia la formación de un
intermediario central, que es el acétil-
Coa. Esta formación o producción de
acétil-Coa ocurrirá dentro de la
mitocondria, y uno de los precursores
del acetil-Coa es el piruvato. Como ya
hemos visto en el curso, puede provenir
de la glucólisis, o sea, de la oxidación de
los glúcidos. Aunque también puede ser formado a partir de algunos aminoácidos en el catabolismo de los
aminoácidos.

El piruvato o ácido pirúvico, va a ser precursor ya que es transformado en acétil-Coa. Esta reacción es
catalizada por la piruvato deshidrogenasa y ese acetil-Coa es el precursor. Va después a ser parte del ciclo
de Krebs, luego de ocurrido el ciclo de krebs se completa el proceso, con la cadena de transporte de
electrones y fosforilación oxidativa.

El piruvato puede que provenga de la reacción caracterizada por la piruvato quinasa que es el último paso
de la glucólisis. También puede ser formado a partir de lactato por la misma enzima que conocimos que es
la lactato deshidrogenasa esa reacción es una reacción reversible. Puede ser formado a partir de malato por
la enzima málica en el citosol y puede ser formado a partir de alanina por reacción de la alanina transaminasa
o también otros aminoácidos que llamamos glucogénicos como la serina, trionina, lisina, cisteína y
triptófano.
 DESTINOS DEL PIRUVATO CITOSÓLICO
1- Lactaso deshidrogenasa

2- Ingreso del piruvato a la mitocondria:

- Atraviesa membrana mitocondrial externa (porinas)
- Transportes en membrana mitocondrial interna: familia de proteínas
denominadas MPC por “transportador de piruvato mitocondrial”, que
ingresa en simporte con H+

Complejo piruvato deshidrogenasa (PDH)

1- Se elimina el grupo carbozilo formando el primero
CO2
2- Se reduce el NAD+ formando NADH con los
electrones del piruvato.
3- Se transfiere el grupo acetilo a la Coenzima A: se
produce Acetil-CoA
3 enzimas:
- E1 piruvato deshidrogenasa
- E2 dihidrolipoil transacetilasa
- E3 dihidrolipoil deshidrogenasa
5 coenzimas:
- Coenzima A
- Pirofosfato de Tiamina
- Lipoamida (ácido lipoico asociado a lisina de enzima)
- FAD
-NAD+
2 enzimas reguladoras:
- Piruvato deshidrogenasa quinasa: fosforila la enzima E1 y la inhibe
- Piruvato deshidrogenasa fosfatasa: desfosforila la enzima E1 y la activa
1. El priuvato reacciona con pirofosfato de tiamina (TPP) de E1 y se descarbozila (se libera CO2)
2- E1 transfiere el grupo acetilo desde TPP al grupo lipoilo de E2
3- Transeserificación del grupo acetilo entre lipoilo y conezima A ( se forma acetil-CoA)
4- El dihidrolipoico (lipoamida reducida) de E2 cede electrones al FAD de E3, volviendo a su forma oxidada
(lipoamida)
5. El FADH2 transfiere electrones al NAD+, volviendo a su forma oxidada (FAD) y generando NADH
- La enzima quedó intacta. Los productos de la reacción son CO2, Acetil-CoA y NADH
E1 PIRUVATO DESHIDROGENASA
- El piruvato reaccióna con el pirofosfato de tiamina (TPP) unido a E1.
- Se libera CO2 y el acetaldehído queda unido al TPP (hidroxietil-TPP)

E2 dihidrolipoil transacetilasa
El hidroexietil-TPP reacciona con la lipoamida dando lugar a acetil-
lipoamida y TPP.
Hidroexietil-TPP + lipamida → acetil-lipoamida + TPP
E2 también cataliza la reacción entre acetil-lipoamida y la conezima A (Coa-SH). El grupo acetilo se une a la
Co-A formando Acetil-CoA y la lipoamida queda reducida: dihidrolipoamida.
Acetil-lipoamida + CoA-SH→ dihidrolipoamida + Acetil-CoA
 E3 DIHIDROLIPOIL DESHIDROGENASA
La dihidrolipoamida se oxida a lipoamida (se forma el enlace disulfuro) a expensas del DAS asociado a E3.
El FAD es reducido a FADH2
Luego el FADH2 transfiere los electrones al NAD+, generando NADH que es el producto de la reacción.
Dihidrolipoamida+NAD+ → lipoamida + NADH + H+
El estado energético de la célula regula la actividad de esta enzima:
NADH/NAD+: el aumento de esta relación lleva a una inhibición de la PDF tanto por la modulación
alostérica como por la activación de la PDH quinasa.
Acetil-CoA/CoA-SH: el aumento de esta relación lleva a la inhibición de la PDH por modulación alostérica y
por activación de la PDH quinasa.
ATP/ADP: el aumento de esta relación activa la PDH quinasa.
DEFICIENCIA DE ACTIVIDAD PRIUVATO DESHIDROGENASA 1
- La deficiencia se debe a mutaciones en genes que codifican distintas subunidades del complejo. El 80%
son mutaciones en E1 provocando que haya menos proteína o una proteína de muy baja calidad.
- La acumulación de piruvato lleva a un aumento en la formación de lactato. Una característica de esta
enfermedad es la acidosis láctica.
- El cerebro se ve muy afectado en esta condición, lo que se expresa con síntomas neurológicos más o
menos graves según el grado de déficit.

DEFICIENCIA DE ACTIVIDAD PRIUVATO DESHIDROGENASA 2

La intoxicación con arsenito o mercurio que reaccionan con los grupos -SH, así como el déficit en la ingesta
de tiamina conducen a una inactivación de la actividad piruvato deshidrogenasa.
Tiamina o vitamina B1: el déficit de tiamina afecta el metabolismo ya que el pirofosfato de tiamina es
cofactor en varias reacciones de descarboxilación (piruvato deshidrogenasa, a-cetoglutarato
deshidrogenasa)
La patología asociada al déficit de tiamina es conocida como el beriberi, afecta fundamentalmente al
catabolismo de carbohidratos, por lo tanto los órganos o funciones más afectados son el cerebro, la
contracción muscular y la conducción nerviosa.
Se encuentra en casos de malnutrición, alcoholismo. Puede producirse en casos de trastornos en la
absorción intestinal o aumento de la demanda.
Presente en cereales integrales, carnes y legumbres. Se agrega en algunos países a productos generados
con harina reinada. Hay poco en frutas y verduras o lácteos.