MECANISMOS MOLECULARES DE
MUERTE CELULAR: RECOMENDACIONES
DEL COMITÉ DE NOMENCLATURA
SOBRE MUERTE CELULAR 2018
ABSTRACTO
Durante la última década, el Comité de
nomenclatura sobre muerte celular (NCCD)
ha formulado directrices para la definición e
interpretación de la muerte celular desde
perspectivas morfológicas, bioquímicas y
funcionales. Dado que el campo continúa
expandiéndose y se revelan nuevos
mecanismos que orquestan múltiples vías de
muerte celular, proponemos una clasificación
actualizada de las subrutinas de muerte
celular que se centra en aspectos mecánicos
y esenciales (en lugar de correlativos y
dispensables) del proceso. Como
proporcionamos definiciones orientadas
molecularmente de términos que incluyen
apoptosis intrínseca, apoptosis extrínseca,
transición a la permeabilidad mitocondrial
(MPT), necrosis, necroptosis, ferroptosis,
piroptosis, partanatos, muerte celular entótica,
muerte celular NETotic, muerte celular
dependiente de lisosomas, dependiente de la
autofagia muerte celular, muerte celular
inmunógena, senescencia celular y catástrofe
mitótica, discutimos la utilidad de los
neologismos que se refieren a instancias
altamente especializadas de estos procesos.
La misión del NCCD es proporcionar una
nomenclatura ampliamente aceptada sobre la
muerte celular para apoyar el desarrollo
continuo del campo.
INTRODUCCIÓN
Durante mucho tiempo, la muerte celular ha
sido descartada por los biólogos como una
consecuencia inevitable y, por lo tanto,
espuria de la vida celular. Sin embargo, una
gran cantidad de evidencia experimental
acumulada durante las últimas décadas ha
revelado y caracterizado cada vez con mayor
detalle un conjunto de mecanismos
genéticamente codificados para la eliminación
dirigida de células superfluas,
irreversiblemente dañadas y / o el mantenimiento de la homeostasis a nivel de
potencialmente dañinas . Curiosamente, la
muerte celular regulada (RCD) no es exclusiva
de las formas de vida multicelulares, un
entorno en el que RCD tiene una ventaja obvia
para la homeostasis del organismo tanto en
entornos fisiológicos como patológicos , pero
también se encuentra (en variantes
simplificadas) entre eucariotas unicelulares
que viven (al menos durante parte de su ciclo
de vida) en colonias (como varias especies de
levaduras y Dictyostelium discoideum) , y al
menos en algunos procariotas (p. ej.,
Escherichia coli) [16]. En sorprendente
contraste con la muerte celular accidental
(ACD): la desaparición instantánea y
catastrófica de células expuestas a
agresiones físicas graves (p. Ej., Altas
presiones, temperaturas o fuerzas osmóticas),
químicas (p. Ej., Variaciones extremas de pH)
o mecánicas (p. Ej. , shear forces) nature-RCD
se basa en una maquinaria molecular
dedicada, lo que implica que puede ser
modulada (es decir, retardada o acelerado)
por intervenciones farmacológicas o genéticas
Aunque los mecanismos moleculares
subyacentes muestran una superposición
considerable (ver más abajo), el RCD está
involucrado en dos escenarios
diametralmente opuestos. Por un lado, el DCR
puede ocurrir en ausencia de cualquier
perturbación ambiental exógena, y por lo tanto
opera como un efector incorporado de
programas fisiológicos para el desarrollo o la
renovación del tejido.
Estas formas completamente fisiológicas de
RCD se conocen generalmente como muerte
celular programada (PCD). Por otro lado, el
DCR puede originarse a partir de
perturbaciones del microambiente intracelular
o extracelular, cuando tales perturbaciones
son demasiado intensas o prolongadas para
las respuestas adaptativas para hacer frente
al estrés y restaurar la homeostasis celular .
Es importante destacar que el DCR impulsado
por el estrés también constituye una estrategia
para la preservación de un equilibrio biológico,
por lo que se asemeja a las respuestas de
estrés adaptativo. Sin embargo, mientras que
las respuestas de estrés adaptativo operan a
nivel celular (lo cual, por extensión, promueve
organismo o colonia), RCD opera
directamente a nivel del organismo o colonia a
pesar de la homeostasis celular.
Tal función homeostática no solo refleja la
eliminación de células inútiles o para la identificación de células muertas con
potencialmente peligrosas, sino también la
capacidad de las células moribundas para
exponer o liberar moléculas que alertan al
organismo o a la colonia sobre una posible
amenaza. Tales señales de peligro son
comúnmente conocidos como patrones
moleculares asociados al daño (DAMP) o
alarmins . La muerte celular se manifiesta con
alteraciones morfológicas macroscópicas.
Junto con los mecanismos mediante los
cuales se eliminan las células muertas y sus
fragmentos, dichos morfotipos se han
empleado históricamente para clasificar la
muerte celular en tres formas diferentes: (1)
muerte celular o apoptosis, que exhibe
contracción citoplásmica, condensación de
cromatina (picnosis), nuclear fragmentación
(cariorrexis) y formación de ampollas en la
membrana plasmática, que culmina con la
formación de pequeñas vesículas
aparentemente intactas (comúnmente
conocidas como cuerpos apoptóticos) que son
absorbidas de manera eficiente por células
vecinas con actividad fagocítica y degradadas
dentro de los lisosomas; (2) muerte celular o
autofagia de tipo II, que se manifiesta con una
vacuolización citoplásmica extensa y que
culmina de manera similar con la captación
fagocítica y la consecuente degradación
lisosómica; y (3) muerte o necrosis celular de
tipo III, que no muestra características
distintivas de la muerte celular de tipo I o II y
que termina con la eliminación de los
cadáveres celulares en ausencia de
afectación fagocítica y lisosómica evidente .
Es de destacar que esta clasificación
morfológica todavía se emplea ampliamente,
independientemente de las múltiples
limitaciones y advertencias. A partir de 2005,
el Comité de Nomenclatura sobre Muerte
Celular (NCDD) se reunió regularmente (1)
para abordar los problemas relacionados con
el uso de una nomenclatura de muerte celular
basada en motivos morfológicos; (2) definir
con precisión las principales modalidades de
muerte celular sobre una base genética,
bioquímica, farmacológica y funcional (más
que morfológica); (3) para distinguir los
aspectos esenciales (causales) de los
accesorios (correlativos) del proceso de la
muerte; y (4) identificar criterios de consenso
permeabilización irreversible de la membrana
plasmática o fragmentación celular completa .
A medida que el campo continúa avanzando y
las nuevas vías de señalización que orquestan
el RCD todavía se están caracterizando,
proponemos aquí una clasificación
actualizada de las modalidades de muerte
celular centrada en aspectos moleculares y
esenciales del proceso (Figura 1 y Cuadro 1).
Se hará especial hincapié en los módulos de
transducción de señales implicados en la
iniciación, ejecución y propagación de la
muerte celular, así como en la relevancia
fisiopatológica de cada uno de los principales
tipos de RCD.
APOPTOSIS INTRÍNSECA
La apoptosis intrínseca es una forma de RCD
iniciada por una variedad de perturbaciones
microambientales que incluyen (pero no se
limitan a) extracción del factor de crecimiento,
daño al ADN, estrés del retículo endoplásmico
(ER), sobrecarga de especies de oxígeno
reactivo (ROS), estrés de replicación,
alteraciones microtubulares o mitótico
defectos . Las células apoptóticas conservan
la integridad de la membrana plasmática y la
actividad metabólica (hasta cierto punto) a
medida que el proceso avanza, lo que, en
vivo, permite la rápida eliminación de
macrófagos u otras células con actividad
fagocítica (un proceso comúnmente conocido
como eferocitosis) . Es importante destacar
que la apoptosis intrínseca (y extrínseca,
véase a continuación) y la consiguiente
eferocitosis no siempre son
inmunológicamente silenciosas, como se
pensaba anteriormente (véase más adelante).
In vitro, la apoptosis terminal es generalmente
seguido de una ruptura completa de la
membrana plasmática y la adquisición de un
morfotipo necrótico (necrosis secundaria), a
menos que las células cultivadas muestren
actividad fagocítica, un proceso que
recientemente se ha relacionado con la
actividad de la gasdermina E (GSDME).
DFNA5) [39]. El paso crítico para la apoptosis
intrínseca es la permeabilización de la
membrana externa mitocondrial (MOMP)
irreversible y extendida, que está controlada
por miembros proapoptóticos y inducida por phorbol-12-miristato-13-acetato
antiapoptóticos de la familia de proteínas
BCL2, regulador de la apoptosis (BCL2), un
grupo de proteínas que comparten uno a
cuatro dominios de homología BCL2 (BH) (es
decir, BH1, BH2, BH3 y BH4)]. En respuesta a
los estímulos apoptóticos, MOMP está
mediado por BCL2 asociado X, apoptosis
reguladora (BAX) y / o antagonista / asesino
BCL2 1 (BAK1, más conocido como BAK), que
contienen cuatro dominios BH y un dominio
transmembrana conservado . Junto con BOK,
el regulador de apoptosis familiar (BOK) BCL2
BAX y BAK son los únicos miembros de la
familia BCL2 caracterizados hasta ahora en
células de mamífero por su capacidad de
formar poros a través de la membrana
mitocondrial externa (OMM) y posiblemente
otras membranas intracelulares . En
condiciones fisiológicas, BAX continuamente
cicla entre el OMM y el citosol, donde exhibe
una conformación dimérica inactiva o
monomérica quiescente . Por el contrario,
BAK reside constitutivamente en el OMM,
donde se inserta dentro de la bicapa lipídica a
través de su hélice α9 C-terminal hidrófoba al
interactuar con el canal anión dependiente de
voltaje 2 (VDAC2). Es de destacar que se ha
documentado cierto grado de
retrotranslocación de BAK del OMM al citosol
. Tras la inducción de la apoptosis, la
retrotransferencia de BAX cesa a medida que
los grupos mitocondriales de BAX y BAK
experimentan activación directa o indirecta
(ver a continuación) por las proteínas pro-
apoptóticas solo de BH3 .
Estos miembros proapoptóticos de la familia
de proteínas BCL2 (que contienen un solo
dominio BH3) se activan transcripcionalmente
o postraduccionalmente cuando los orgánulos
específicos o los compartimentos celulares
experimentan perturbaciones de la
homeostasis, operando de facto como
transductores celulares de señalización de
estrés [60-63] . Algunas proteínas solo de
BH3, como el componente de unión a BCL2 3
(BBC3, más conocido como modulador de
apoptosis regulado por incremento de p53,
PUMA), BCL2 como 11 (BCL2L11; mejor
conocido como BCL2-mediador interactivo de
la muerte celular, BIM), y la proteína 1
(PMAIP1, más conocida como NOXA) se
activan principalmente por la regulación
positiva transcripcional, mientras que otros,
como BH3 el agonista de muerte del dominio
que interactúa (BID) -la mayoría se somete a
la activación postraduccional . BID, BIM,
PUMA y NOXA comparten la capacidad física
(pero transitoria) de interactuar con el conjunto
mitocondrial de BAX y / o BAK (de ahí que se
los conozca como "activadores") para
promover una serie de cambios
conformacionales que culmina con la
disociación de los dominios central y de
retención de los efectores BCL2 .
La visión actual es que BAX activado y BAK
forman homodímeros (también heterodímeros
en entornos específicos), lo que resulta en la
liberación de proteínas BH3-only y en la
oligomerización de dímeros de dímeros
adicionales . La oligomerización conduce
finalmente al ensamblaje de un poro lipídico
toroidal que altera la permeabilidad
mitocondrial y provoca profundos
reordenamientos de la ultraestructura
mitocondrial . De acuerdo con este modelo,
recientemente se ha demostrado que (1) BAX
puede formar anillos u oligómeros lineales / en
forma de arco que perforan el OMM , y (2)
MOMP continúa con la formación de poros
(que inciden en Estrés de curvatura OMM),
que puede variar en tamaño dependiendo del
número de dímeros de BAX reclutados .
MOMP es antagonizado por miembros
antiapoptóticos de la familia BCL2, incluido
BCL2 en sí, BCL2 como 1 (BCL2L1; más
conocido como BCL-XL), MCL1, regulador de
la apoptosis de la familia BCL2 (MCL1), BCL2
como 2 (BCL2L2, más conocido como BCL-
W) y proteína BCL2 relacionada (BCL2A1;
más conocido en humanos como BFL-1 ).
Estas proteínas de prosurvival contienen los
cuatro dominios BH, generalmente se insertan
en la membrana OMM o ER a través de su
hélice α9 y ejercen principalmente funciones
antiapoptóticas al unirse directamente a los
miembros proapoptóticos de la familia BCL2,
una actividad que generalmente no siempre
depende de un surco de unión hidrofóbico
formado por los dominios BH1, BH2 y BH3 .
Además, algunos miembros de la familia de
BCL2 anti-apoptóticos se han propuesto para
promover la supervivencia celular mediante:
(1) la regulación de la homeostasis de Ca2 +
en la sala de emergencias ; (2) promover el
metabolismo bioenergético tras la interacción
con la F1FO ATP sintasa; y (3) contribuir a la
regulación de la homeostasis redox .
Sin embargo, la importancia de estas
funciones ha sido desafiada por la generación
de líneas celulares que carecen de todos los
principales miembros de la familia de BCL2
antiapoptóticos y proapoptóticos . Por lo tanto,
la mayoría de los miembros de la familia
prosurvival BCL2 inhiben BAX y BAK al evitar
su oligomerización y actividad de formación de
poros directamente, tras el secuestro físico en
el OMM, o indirectamente, después de la
secuestración de activadores de BH3. Es de
destacar que, en condiciones fisiológicas,
algunas proteínas BCL2 anti-apoptóticas,
como BCL-XL, ejercen un papel protector al
promover la retrotranslocación de BAX y (en
menor grado) BAK de las mitocondrias al
citoplasma, lo que limita su conjunto
mitocondrial .
de transducción de señales que finalmente
conducen a su desaparición. Cada uno de
dichos modos de muerte celular regulada
(RCD) se inicia y se propaga por mecanismos
moleculares que exhiben un grado
considerable de interconectividad. Además,
cada tipo de RCD se puede manifestar con un
espectro completo de características
morfológicas que van desde totalmente
necrótico hasta totalmente apoptótico, y un
perfil inmunomodulador que varía desde
antiinflamatorio y tolerogénico a
proinflamatorio e inmunogénico. ADCD:
muerte celular dependiente de autofagia, ICD:
muerte celular inmunogénica, LDCD: muerte
celular dependiente de lisosoma, MPT:
transición de permeabilidad mitocondrial.
CUADRO 1 DEFINICIONES
OPERACIONALES
Muerte celular accidental (ACD). Una forma
prácticamente instantánea e incontrolable de
muerte celular que corresponde al
desensamblaje físico de la membrana
plasmática causado por señales físicas,
químicas o mecánicas extremas.
Anoikis. Variante específica de la apoptosis
intrínseca iniciada por la pérdida de anclaje
dependiente de integrina

Muerte celular dependiente de la autofagia.

Una forma de RCD que depende
mecánicamente de la maquinaria autofágica
(o sus componentes).

Autosis. Una instancia específica de muerte

celular dependiente de autofagia que se basa
críticamente en la membrana plasmática Na +
/ K + -ATPasa.

Muerte celular Degeneración irreversible

de las funciones celulares vitales
(especialmente la producción de ATP y la
preservación de la homeostasis redox) que
culmina en la pérdida de la integridad celular
Fig. 1 Principales subrutinas de muerte (permeabilización permanente de la
celular. Las células de mamíferos expuestas a membrana plasmática o fragmentación
perturbaciones irrecuperables del celular).
microambiente intracelular o extracelular
Senescencia celular. Pérdida irreversible de
pueden activar una de las muchas cascadas
potencial proliferativo asociado con
características morfológicas y bioquímicas
específicas, incluido el fenotipo de secreción
asociado a la senescencia (SASP). La
senescencia celular no constituye una forma
de RCD.
Efferocitosis. Mecanismo mediante el cual
las células muertas y sus fragmentos son
absorbidos por los fagocitos y eliminados.
Muerte celular entótica. Un tipo de RCD que
se origina a partir de la internalización célula-
en-celda dependiente de actomiosina
(entosis) y es ejecutada por lisosomas.
Apoptosis extrínseca Variante específica de
RCD iniciada por perturbaciones del
microambiente extracelular detectadas por los
receptores de la membrana plasmática,
propagadas por CASP8 y precipitadas por
verdugo caspasas, principalmente CASP3.
Ferroptosis. Una forma de RCD iniciada por
perturbaciones oxidativas del microambiente
intracelular que está bajo control constitutivo
por GPX4 y puede ser inhibida por los
quelantes de hierro y antioxidantes lipófilos.
Muerte celular inmunogénica. Una forma de
RCD que es suficiente para activar una
respuesta inmune adaptativa en huéspedes
inmunocompetentes.
Apoptosis intrínseca Tipo de RCD iniciado
por perturbaciones del microambiente
extracelular o intracelular, demarcado por
MOMP, y precipitado por verdugo caspasas,
principalmente CASP3.
Muerte celular dependiente de lisosomas.
Un tipo de RCD demarcado por LMP primaria
y precipitado por catepsinas, con la
participación opcional de MOMP y caspasas.
Necrosis impulsada por la transición de
permeabilidad mitocondrial (MPT). Forma
específica de RCD desencadenada por
perturbaciones del microambiente intracelular
y dependiente de CYPD.
Catástrofe mitótica Mecanismo
oncosupresor para el control de células
incompetentes de mitosis por RCD o
senescencia celular. Per se, la catástrofe
mitótica no constituye una forma o RCD.
Muerte mitótica. Variante específica de RCD
(más a menudo, apoptosis intrínseca)
impulsada por catástrofes mitóticas.
Necroptosis. Una modalidad de RCD
desencadenada por perturbaciones de la
homeostasis extracelular o intracelular que
depende críticamente de MLKL, RIPK3 y (al
menos en algunos entornos) de la actividad de
la quinasa de RIPK1.
Muerte celular neta Una modalidad de RCD
dependiente de ROS restringida a células de
derivación hematopoyética y asociada a
extrusión de NET.
Parthanatos. Una modalidad de RCD iniciada
por la hiperactivación de PARP1 y precipitada
por la consiguiente catástrofe bioenergética
acoplada a la degradación de ADN
dependiente de AIF y MIF.
Muerte celular programada (PCD). Forma
particular de RCD que ocurre en escenarios
estrictamente fisiológicos, es decir, no se
relaciona con perturbaciones de la
homeostasis y, por lo tanto, no ocurre en el
contexto de una adaptación fallida al estrés.
Pyroptosis. Un tipo de RCD que depende
críticamente de la formación de poros de la
membrana plasmática por miembros de la
familia de la proteína gasdermin, a menudo
(pero no siempre) como consecuencia de la
activación inflamatoria de las caspasas.
Muerte celular regulada (RCD). Forma de
muerte celular que resulta de la activación de
uno o más módulos de transducción de señal
y, por lo tanto, puede ser modulada
farmacológica o genéticamente (al menos
cinéticamente y hasta cierto punto).
La evidencia de las células T y las plaquetas
sugiere que dicha retrotranslocación ocurre in
vivo, lo que resulta en la inhibición fisiológica
de BAK por BCL-XL. Es importante destacar
que algunas proteínas solo BH3, incluido el
agonista asociado a BCL2 de muerte celular
(BAD), factor modificante Bcl2 (BMF) o
harakiri, proteína interactiva BCL2 (HRK)
promueven MOMP en ausencia de una
interacción física con BAX o BAK. Estas
proteínas solo BH3, que a veces se
denominan "sensibilizadores" o células sea profundamente resistente a
"inactivadores" se unen a los miembros de la
familia de BCL2 antiapoptóticos y, por lo tanto,
limitan su disponibilidad para secuestrar
activadores BAX, BAK o BH3 únicamente.
Se ha sugerido que diferentes proteínas BH3
solo se unen preferencialmente a miembros
específicos de la familia de BCL2
antiapoptóticos (por ejemplo, BID, BIM y
PUMA se unen potentemente a todos los
miembros de la familia de BCL2
antiapoptóticos; BAD interactúa
preferentemente con BCL2, BCL-XL y BCL-W;
NOXA inhibe preferentemente MCL1; y HRK
preferentemente inhibe BCL-XL). Los
resultados in vitro sugieren que la distinción
entre sensibilizadores y activadores puede ser
mucho menos rígida de lo que se pensaba
anteriormente. Sin embargo, la
sobreexpresión de sensibilizadores solo BH3
induce una apoptosis mínima en células que
carecen de BID, BIM, PUMA y NOXA, lo que
sugiere que los activadores solo de BH3
funcionan en sentido descendente de los
sensibilizadores solo BH3. Es de destacar que
la interacción entre los miembros de la familia
de BCL2 antiapoptóticos y proapoptóticos
tiene implicaciones terapéuticas importantes,
con BCL2 que representa el objetivo
farmacológico de venetoclax mimético de BH3
aprobado por la FDA (también conocido como
ABT-199) y otras moléculas con un
mecanismo similar de acción que están
actualmente en desarrollo (p. ej., el inhibidor
de MCL1 S63845). De hecho, el venetoclax
mata a las células de la leucemia linfocítica
crónica (CLL) al imitar la actividad de las
proteínas solo BH3.
Recientemente, un mecanismo de resistencia
a BH3 miméticos se ha atribuido a la estrecha
asociación entre BCL-XL y BH3-solo
activadores en las membranas subcelulares .
Sin embargo, queda por dilucidar la relevancia
de este mecanismo para los pacientes con
LLC bajo tratamiento con Venetoclax.
Confirmando el papel esencial de los
miembros de la familia BCL2 para MOMP y el
alto grado de superposición entre las
maquinarias responsables de RCD con estrés
y PCD, la co-eliminación de Bax y Bak1 no
solo hace que un gran panel de tipos de
diversas estímulos, un fenotipo que en
algunos casos puede agravarse por la co-
deleción de Bok, pero también causa letalidad
perinatal en ratones como consecuencia de
graves defectos de desarrollo. De forma
similar, los ratones Bcl2l11 - / - Bmf - / - y Bid
- / - Bcl2l11 - / - Bbc3 - / - mueren
prematuramente o muestran defectos severos
del desarrollo, respectivamente.
Sin embargo, las células transformadas que
carecen de todos los principales activadores
de BH3 (es decir, BID, BIM, PUMA y NOXA)
pueden sufrir apoptosis en respuesta a
agentes que dañan el ADN o una regulación
negativa de BCL2, BCL-XL y MCL1. Esta
observación está en línea con la noción de
que BAX y BAK pueden autoactivarse en
ausencia de miembros de la familia de BCL2
antiapoptóticos y proteínas proapoptóticas
BH3 (de acuerdo con una cinética
relativamente lenta).
Quizás, BAX y BAK incluso se pueden activar
independientemente de proteínas BH3 solo
por la acción concertada de la prolil isomerasa
peptidilprolil cis / trans isomerasa, NIMA-1
(PIN1) y cualquiera de las proteínas tumorales
p53 (TP53; mejor conocido como p53) o ATR
serina / treonina quinasa (ATR) [129, 130],
varias proteínas que contienen motivos
similares a BH [131], así como por
detergentes, calor, cambios de pH o
anticuerpos monoclonales específicos. Dicho
esto, la relevancia fisiopatológica real de la
activación no canónica de BAX y BAK aún no
se ha establecido formalmente. Ambas
proteínas BCL2 anti-apoptóticas y pro-
apoptóticas también están sujetas a una
estricta regulación transcripcional y
postraduccional, que implica (pero no se limita
a) la degradación proteosómica, la
fosforilación y la (re) localización subcelular .
Finalmente, cada vez es más evidente que el
tamaño y la forma mitocondrial así como la
composición lipídica pueden influir en la
probabilidad de que las mitocondrias
experimenten MOMP irreversible. Estas
observaciones ejemplifican la cantidad de
factores implicados en MOMP a nivel de
mitocondrias únicas. Es de destacar que los
BAX activos y los BAK también se han
propuesto para (1) permeabilizar las
membranas ER, especialmente en respuesta
al estrés reticular, lo que lleva a la liberación
de chaperonas ER luminales en el citosol ; y
(2) favorecen la activación de los receptores
de trisfosfato de inositol de tipo 1 en el ER, lo
que resulta en la fuga citosólica de los iones
de Ca2 + y la consiguiente captación
mitocondrial de Ca2 + . Sin embargo, la
relevancia real de la permeabilización ER para
la apoptosis intrínseca aún no se ha
dilucidado. Dicho esto, los sitios de contacto
entre las mitocondrias y la ER (que
comúnmente se conocen como membranas
de ER asociadas a mitocondrias) parecen
regular una gran cantidad de procesos
celulares que influyen en RCD o sus
consecuencias inmunológicas, que incluyen
(pero no se limitan a) señalización de estrés
ER, la transferencia de iones Ca2 + desde el
ER a las mitocondrias y las reacciones
inflamatorias . En cuanto a BOK, se ha
propuesto que esta proteína BCL2 contribuye
a la regulación de la homeostasis ER, como lo
demuestra su localización prominente en la
membrana ER y la respuesta apoptótica
defectuosa de células Bok - / - a algunos
estresores ER Además, recientemente se ha
demostrado que BOK induce MOMP en
ausencia de BAX y BAK
independientemente de otros miembros de la
familia BCL2 . En particular, BOK parece ser
constitutivamente activo y ser antagonizado
por una vía de degradación asociada a ER en
lugar de por proteínas antiapoptóticas BCL2 .
BOK también está regulado por un
mecanismo que implica la unión a receptores
de inositol 1,4,5-trisfosfato (IP3), que según
los informes limita su degradación
proteasomal . Cabe destacar que los ratones
Bok - / -, Bax - / - Bok - / - y Bak1 - / - Bok - / -
no muestran anormalidades obvias (a
excepción de la persistencia de ovocitos
foliculares primarios en Bax envejecido - / -
Bok - / - mujeres) , lo que implica que las
funciones fisiológicas de BOK pueden ser
compensadas por BAK y / o BAX.
MOMP promueve directamente la liberación
citosólica de factores apoptogénicos que
normalmente residen en el espacio
intermembrana mitocondrial . Estas proteínas
mitocondriales incluyen (pero no se limitan a)
citocromo c, somático (CYCS), que
generalmente funciona como un transportador
de electrones en la cadena respiratoria
mitocondrial, y la proteína mitocondrial
vinculante de diablo IAP (DIABLO, también
conocida como segundo activador
mitocondrial de caspasas, SMAC). La
liberación de CYCS y SMAC al citosol se ve
favorecida por la remodelación de crestas
mitocondriales , que se basa en la
oligomerización y activación de OPA1,
dinamina mitocondrial como GTPasa (OPA1),
posiblemente precedida por BAX-dependiente
y BAK- activación dependiente de OMA1 zinc
metalopeptidasa (OMA1) , y / o dynamin 1
como (DNM1L, más conocido como DRP1) .
En consecuencia, se ha demostrado que el
óxido nítrico (NO) precipita la liberación de
factores apoptogénicos de las mitocondrias
tras la nitrosilación directa de DRP1 (al menos
en algunos entornos). El conjunto citosólico
de CYCS se une al factor 1 activador de la
peptidasa apoptótica (APAF1) y a la
procaspasa 9 (CASP9) de manera
dependiente de desoxiAtP para formar el
complejo supramolecular conocido como
apoptosoma, que es responsable de la
activación de CASP9. Recientemente, la
e estructura del apoptosoma de múltiples
organismos, incluidos los humanos, se ha
caracterizado por su resolución atómica.
Estos estudios revelaron que la maduración
autocatalítica de CASP9 dentro del
apoptosoma se produce mediante la
generación de homodímeros CASP9 y
heterodímeros / multímeros CASP9 APAF1
tras la asociación de sus respectivos dominios
de reclutamiento de caspasas (CARD) .
El CASP9 activado puede catalizar la
activación proteolítica de CASP3 y CASP7,
que se perciben ampliamente como las
enzimas responsables de la demolición
celular durante la apoptosis intrínseca (y
extrínseca, véase a continuación) en células
de mamíferos (y por lo tanto se conocen
comúnmente como caspasas verdugo)
Citosólico SMAC precipita la apoptosis
mediante la asociación con miembros del
inhibidor de la familia de la proteína de la
apoptosis (IAP), incluido el X- ligado inhibidor
de la apoptosis (XIAP).
Para adquirir actividad apoptogénica, SMAC
debe someterse a un paso de maduración
proteolítica que desencadena su dominio de
unión a IAP latente, que es catalizado por el
complejo de peptidasa de membrana interna
(IMP) y quizás por la membrana mitocondrial
interna (IMM) asociada a presenilina romboide
como (PARL). XIAP es el único miembro de la
familia de proteínas IAP que contrarresta la
cascada apoptótica al unirse establemente y
por lo tanto bloquear físicamente las caspasas
. Por el contrario, la repetición baculoviral IAP
que contiene 2 (BIRC2, más conocida como c-
IAP1) y BIRC3 (más conocida como c-IAP2) lo
hacen principalmente ya que (1) impulsan la
regulación positiva de potentes factores
antiapoptóticos como CASP8 y FADD
regulador de apoptosis (CFLAR, más
conocido como c-FLIP); (2) promueven la
inactivación de caspasa en virtud de su
actividad E3 ubiquitina ligasa; (3) serina /
treonina cinasa 1 que interactúa con el
receptor de ubiquitinato (RIPK1) y, por lo
tanto, desencadena la señalización de NF-κB
pro supervivencia ; y (4) quizás promover la
degradación de SMAC en las mitocondrias a
través de un mecanismo que depende de las
proteínas BCL2 . Es de destacar que MOMP
finalmente conduce a la disipación del
potencial transmembrana mitocondrial (Δψm),
principalmente como consecuencia del
deterioro respiratorio impuesto por la pérdida
de CYCS y, por lo tanto, al cese de las
funciones mitocondriales dependientes de
Δψm (incluida la síntesis de ATP y algunos
formas de importación de proteínas).
Curiosamente, BAK y BAX pueden no ser
siempre necesarios para que los estímulos
proapoptóticos promuevan la liberación de
CYTC y la consiguiente activación de
caspasas, incluso en condiciones en las que
la transición de permeabilidad mitocondrial
(MPT, ver a continuación) está desactivada .
Esto puede sugerir la existencia de otro
mecanismo, actualmente no identificado, para
MOMP, que posiblemente involucre lípidos
específicos como la ceramida]. La relevancia
fisiopatológica real de este mecanismo
potencial sigue siendo oscura.
La actividad catalítica de las caspasas del
verdugo precipita la muerte celular y es
responsable de muchos de los correlatos
morfológicos y bioquímicos de la apoptosis,
incluida la fragmentación del ADN , la
exposición a fosfatidilserina (PS) y la
formación de cuerpos apoptóticos . CASP3
favorece la fragmentación del ADN al catalizar
la inactivación proteolítica de la subunidad alfa
del factor de fragmentación del ADN (DFFA,
más conocida como ICAD), desencadenando
así la actividad catalítica de DFFB (mejor
conocido como CAD). La evidencia
experimental reciente demuestra que CASP3
promueve la exposición a PS activando
proteínas involucradas en la externalización
de PS, como las scramblasas de fosfolípidos
o factores de inactivación que median la
internalización de PS, como las flippasas de
fosfolípidos. Por lo tanto, en respuesta a
estímulos apoptóticos, CASP3 activa escinde
(1) proteína relacionada con XK 8 (XKR8), que
interactúa con basigina (BSG) o neuroplastina
(NPTN) para formar un complejo de cifrado de
fosfolípidos responsable de la exposición a
PS, y (2) ATPasa fosfolípido transportando
11A (ATP11A) y ATP11C, lo que resulta en la
inhibición de su actividad flipasa y exposición
PS, como se demuestra por la translocación
PS ausente o reducida en la superficie celular
de células que expresan un ATP11C no
escindible o eritrocitos en desarrollo de
Atp11a - / - ratones. Dicho esto, la exposición
a PS puede no acompañar universalmente a
la apoptosis intrínseca (y extrínseca) .
Es de destacar que una gran cantidad de
evidencia sugiere que las caspasas del
verdugo precipitan la apoptosis intrínseca,
una vez que se ha traspasado un punto de no
retorno hasta ahora definido, pero no son
esenciales para ello. En consecuencia,
bloqueando la activación de la caspasa post-
mitocondrial por medios genéticos o con
inhibidores farmacológicos específicos, como
N-benciloxicarbonil-Val-Ala-Asp (O-Me)
fluorometilcetona (Z-VAD-fmk) y (3S) -5- 2,6-
difluor-ophenoxy) -3 - [[(2S) -3 metil-1-oxo-2 -
[(2-quinolinilcarbonil) amino] butil] amino] -4-
oxo-pentanoico hidrato de ácido (Q-VD -OPh),
generalmente retrasa (pero no previene) la
apoptosis intrínseca in vitro e in vivo (al menos
en el sistema de mamíferos), ya que
promueve un cambio a otros tipos de RCD .
Además, cuando MOMP afecta a un número
limitado de mitocondrias, la consecuente
activación subletal de las caspasas no
precipita el RCD, pero promueve la
inestabilidad genómica . Finalmente, al menos
algunas células expuestas a estímulos
apoptóticos transitorios parecen sobrevivir a
MOMP que afecta a un número limitado de
mitocondrias y la activación parcial de las
caspasas verdugo mediante un proceso hasta
ahora mal caracterizado llamado anástasis (lo
que probablemente constituya una respuesta
adaptativa robusta aguas arriba del límite
entre células vida y muerte) . En conjunto,
estas observaciones sugieren que CASP3 y
CASP7 median un rol facilitador, más que
indispensable, en RCD (para una discusión
extensa sobre este tema, por favor refiérase a
la referencia ). Dicho esto, las caspasas
verdugo pueden regular positiva o la cadena ligera de dineína LC8 tipo 1
negativamente la emisión de múltiples DAMP
de células moribundas, incluidos factores
inmunoestimuladores e inmunosupresores .
Por lo tanto, los agentes farmacológicos que
se dirigen a las caspasas del verdugo pueden
ser incapaces de mediar en la citoprotección
de buena fe, pero pueden Conmutar
eficientemente la modalidad RCD.
Curiosamente, aunque CASP6 ha sido
considerado como una caspasa verdugo en
base a su homología con CASP3 y CASP7,
los datos recientes sobre la especificidad del
sustrato sugieren que CASP6 puede estar
involucrado en la iniciación del DCR . Se
requiere una investigación adicional para
dilucidar la función de CASP6 en células de
mamíferos.
Una variante específica de la apoptosis
intrínseca provocada por la pérdida de la
unión dependiente de integrinas a la matriz
extracelular se conoce comúnmente como
anoikis . Como tal, anoikis es demarcado por
MOMP y precipitado por la activación de
caspasas verdugo, notablemente CASP3 . Al
menos en algunos entornos, el
desprendimiento de la matriz extracelular
desencadena MOMP tras la activación de las
proteínas BIM y BMF solo en BH3. Dado que
anoikis previene la proliferación independiente
de anclaje y el apego a una matriz impropia,
en general se considera como un proceso
oncosupresivo . En consecuencia, las células
cancerosas necesitan adquirir al menos cierto
grado de resistencia a los anoikis para iniciar
y progresar a través de la llamada "cascada
metastásica" . Las células neoplásicas
pueden evadir anoikis tras la activación de la
proteína quinasa 1 activada por mitógeno
(MAPK1, más conocida como ERK2) causada
por la agregación celular y la consiguiente
estabilización del receptor del factor de
crecimiento epidérmico (EGFR) mediado por
tirosina cinasa 2 erb-b2 (ERBB2) , o la
degradación del regulador ERK2 negativo
proteína asociada a BRCA1 (BRAP), que se
ve favorecida por el dominio de la espiral en
espiral que contiene 178 (CCDC178)]. Una
vez activado, se informa que ERK2 apoya la
resistencia a anoikis promoviendo el
secuestro citosólico de BIM en complejo con
(DYNLL1; mejor conocido como LC8) y beclin
1 (BECN1), o la transactivación de la
subunidad alfa 6 de la integrina (ITGA6) a
través de un mecanismo dependiente de
KRAS .
Las estrategias adicionales que limitan la
sensibilidad de las células malignas a anoikis
abarcan (pero no se limitan a): (1) activación
de proteínas BCL2 antiapoptóticas, incluida la
estabilización de MCL1 inducida por insulina
derivada de fibroblastos como proteínas de
unión al factor de crecimiento (IGFBP) y
aumento en los niveles de expresión de BCL2
impuesta por la proteína del virus de la
hepatitis B ; (2) silenciamiento epigenético de
genes relacionados con la adhesión, como la
proteína SHC 1 (SHC1) tras la sobreexpresión
del dedo 3 de zinc de la familia IKAROS del
factor de transcripción hematopoyético
(IKZF3, también conocido como AIOLOS) ; (3)
perturbación de la señalización de ITG-
proteína tirosina quinasa 2 (PTK2, más
conocida como FAK), que generalmente
suprime anoikis ; (4) activación de la llamada
"transición epitelial a mesénquima" (EMT),
que está asociada con la transducción de
señales múltiples y módulos metabólicos para
resistencia a RCD ; (5) direccionamiento de la
proteína 1 asociada a Sí (YAP1) por miR-200a
o mediante un mecanismo dependiente de
plaquetas; (6) aumento de las respuestas
antioxidantes impulsadas por activación del
factor de transcripción 4 (ATF4) mediada por
la regulación ascendente de la
hemooxigenasa 1 (HMOX1) ; (7) activación de
autofagia ; (8) regulación al alza de la
chaperona molecular cristalina alfa B
(CRYAB, también conocida como HSPB5) ;
(9) señalización a través de AMPK y la
proteína adaptadora de proliferación y
apoptosis 15 (PEA15), que favorece el
crecimiento celular independiente del anclaje ;
(10) regulación positiva de las
metalopeptidasas de la matriz (MMP)
mediante un mecanismo que implica la
producción autocrina de angiopoyetina como
4 (ANGPTL4) impulsada por el factor de
crecimiento epidérmico (EGF) ; (11) expresión
y fosforilación del transductor de señal y
activador de la transcripción 3 (STAT3) ; y (12)
reconfiguración del metabolismo central del
carbono hacia la síntesis de NAPDH, lo que
da como resultado una mejor homeostasis
redox. Dicho esto, se ha hecho evidente que
la adaptación de las células cancerígenas a la
pérdida de la unión implica múltiples procesos
más allá de (pero presumiblemente altamente
interconectados) la resistencia al anoikis, lo
que sugiere que se deben superar múltiples
barreras para la cascada metastásica ser
iniciado.
El NCCD propone definir la apoptosis
intrínseca como una forma de RCD iniciada
por perturbaciones del microambiente
intracelular o extracelular, demarcada por
MOMP y precipitada por verdugo caspasas,
principalmente CASP3 (Cuadro 1).
APOPTOSIS EXTRÍNSECA
La apoptosis extrínseca es una modalidad de
RCD iniciada por perturbaciones del
microambiente extracelular. La apoptosis
extrínseca es impulsada principalmente por
cualquiera de los dos tipos de receptores de la
membrana plasmática: (1) receptores de
muerte, cuya activación depende de la unión
del ligando afín, y (2) receptores de
dependencia, cuya activación ocurre cuando
los niveles de su gota específica del ligando
debajo de un umbral específico .
Los receptores de muerte incluyen (pero no se
limitan a): receptor de muerte de superficie
celular Fas (FAS, también conocido como
CD95 o APO-1) y miembro de la superfamilia
de receptor de TNF 1A (TNFRSF1A, mejor
conocido como TNFR1), 10a (TNFRSF10A;
como TRAILR1 o DR4) y 10b (TNFRSF10B;
más conocido como TRAILR2 o DR5) . Como
regla general, la ligación del receptor de
muerte permite el ensamblaje de un complejo
multiproteico dinámico en la cola intracelular
del receptor, como el denominado "complejo
de señalización inductor de muerte" (DISC),
"complejo I" y "complejo II". ", Que operan
como plataformas moleculares para regular la
activación y las funciones de CASP8 (o
CASP10, en un número limitado de
configuraciones). En el caso de FAS y
TRAILR, los ligandos afines -a saber, ligando
FAS (FASLG, también conocido como CD95L
o APO-1L) y miembro de la superfamilia TNF
10 (TNFSF10, mejor conocido como TRAIL),
respectivamente-estabilizan los receptores de
homotrímeros preformados para inducir un
cambio conformacional en sus colas
intracelulares que permite la asociación
dependiente del dominio de la muerte (DD) del
adaptador Fas asociado al dominio de la
muerte (FADD) . A su vez, FADD dirige el
ensamblaje de DISC promoviendo el
reclutamiento de CASP8 (o CASP10)
dependiente del dominio de ejecución de la
muerte (DED) y múltiples isoformas de c-FLIP.
Por el contrario, la señalización de TNFR1
implica la asociación de TNFRSF1A asociada
mediante DD (TRADD), que actúa como un
adaptador para el ensamblaje del complejo I,
que generalmente consiste en el factor 2
asociado al receptor de TNF (TRAF2), TRAF5,
c-IAP1, c-IAP2 , RIPK1, y el complejo de
ensamblaje de cadena de ubiquitina lineal
(LUBAC), una entidad supramolecular que
consiste en un interaccionador de dominio RH
asociado a SHANK (SHARPIN), tipo RANBP2
y dedo de cinc de tipo C3HC4 que contiene 1
(RBCK1; mejor conocido como HOIL-1) y la
proteína del dedo anular 31 (RNF31, más
conocida como HOIP) . Es de destacar que
se ha demostrado que el estado de
glicosilación de algunos receptores de la
muerte (por ejemplo, FAS) tiene un impacto
sobre la sensibilidad de los linfocitos T a la
apoptosis extrínseca, lo que influye en la
terminación de las respuestas inflamatorias .
La relevancia de la glicosilación del receptor
de muerte para la apoptosis extrínseca en
otros tipos de células no se ha investigado en
detalle. Los mecanismos moleculares que
regulan la actividad de CASP8 después de la
estimulación del receptor de muerte se han
investigado extensamente. En particular, la
maduración de CASP8 implica una cascada
de eventos iniciados por la unión de CASP8 a
FADD en el DISC. Esta interacción permite el
ensamblaje de un filamento lineal de
moléculas de CASP8 (dependiendo de sus
DED) que facilita la homodimerización y la
consiguiente activación por escisión
autoproteolítica.
Un papel clave en esta configuración está
mediado por c-FLIP, que es un pariente
cercano catalíticamente inactivo de CASP8 .
Una evidencia convincente indica que la
variante corta de c-FLIP (c-FLIPS) y su
contraparte larga (c-FLIPL) inhiben y activan
CASP8, respectivamente, al modular la
oligomerización de CASP8 . Se informa que
CASP8 activo escinde c-FLIPL [302] y los
complejos heterodiméricos de CASP8 con c-
FLIPL (pero no c-FLIPS) están dotados de
actividad enzimática limitada que favorece la
oligomerización de CASP8 y la consiguiente
activación . Las isoformas c-FLIP y CASP8
parecen reclutadas en el DISC a niveles
comparables [303], lo que apoya la idea de
que los niveles elevados de expresión de c-
FLIPL inhiben, más que activan, la apoptosis
extrínseca posiblemente interrumpiendo la
maduración de CASP8. Es de destacar que
CFLAR (el gen que codifica c-FLIP) está bajo
control transcripcional directo por NF-κB, que
contribuye en gran medida a la señalización
TNFR1 pro-supervivencia en circunstancias
específicas (véase más adelante). La
actividad enzimática de CASP8 parece estar
controlada por mecanismos
postraduccionales adicionales, que incluyen
(pero no se limitan a): (1) fosforilación en
Y380, que inhibe la actividad autoproteolítica
de CASP8 tras la activación de FAS. (2)
fosforilación en T273, que es catalizada por
polo como quinasa 3 (PLK3) en el DISC y
promueve funciones apoptóticas CASP8 y (3)
desubiquitinación, que disminuye la actividad
de CASP8 e interrumpe la apoptosis
extrínseca . La ejecución de la apoptosis
extrínseca impulsada por receptores de la
muerte sigue dos vías distintas. En las
llamadas "células tipo I" (por ejemplo,
timocitos y linfocitos maduros), la maduración
proteolítica dependiente de CASP8 del
verdugo CASP3 y CASP7 es suficiente para
conducir RCD, que no puede ser inhibida por
la sobreexpresión de proteínas BCL2 anti-
apoptóticas. la co-eliminación de Bax y Bak1,
o la pérdida de BID. Por el contrario, en
"células tipo II" (p. Ej., Hepatocitos, células β
pancreáticas y la mayoría de las células
cancerosas), en las que la activación de
CASP3 y CASP7 está restringida por XIAP
[310], la apoptosis extrínseca requiere la
escisión proteolítica de BID por CASP8 . Esto
conduce a la generación de una forma
truncada de BID (tBID), que se transloca al
OMM a través de un mecanismo que, al
menos después de la estimulación con FAS,
depende de la unión del modulador de
apoptosis 1 (MOAP1) a el supuesto receptor
BID portador mitocondrial 2 (MTCH2). En el
OMM, tBID funciona como un activador solo
BH3 para activar el RCD accionado por
MOMP dependiente de BAX / BAK y
consecuente. Aunque CASP10 humano
comparte cierto grado de especificidad de
sustrato con CASP8 y posiblemente
contribuye a la apoptosis extrínseca en células
T primarias, los roedores que incluyen ratones
y ratas carecen de un gen Casp10 funcional y
el papel preciso de esta caspasa en
receptores de muerte la apoptosis inducida en
humanos y otras especies con dominio de
CASP10 sigue siendo motivo de controversia.
Un estudio reciente muestra que, después de
la activación de FAS, CASP10 causa la
disociación de CASP8 del DISC, promoviendo
así la supervivencia celular. La cadherina
atípica FAT 1 (FAT1) parece mediar una
función anti apoptótica similar al limitar la
asociación de CASP8 con el DISC .
Un gran cuerpo de evidencia demuestra que
la ligación del receptor de la muerte no
culmina necesariamente en RCD. En
particular, la activación de TNFR1 puede tener
diversos resultados dependiendo de múltiples
variables, como el estado de modificación
postraduccional de RIPK1, que tiene un
impacto directo en el ensamblaje de
complejos de señalización pro-supervivencia
frente a muerte . Por lo tanto, después de la
estimulación del factor de necrosis tumoral
(TNF), RIPK1 se recluta en el complejo I de
una manera independiente de TRADD,
seguida de poliubiquitinación RIPK1 por c-
IAP1, c-IAP2 y LUBAC . Polyubiquitinated
RIPK1 promueve la supervivencia celular y la
inflamación al actuar como un andamio para
el reclutamiento secuencial de proteína
quinasa 1 / MAP3K7 activada por TGF-beta 2
(TAB2), TAB3 y proteína quinasa quinasa 7
activada por mitógenos (MAP3K7; más
conocida como TAK1), que puede conducir
activado por mitógenos señalización de
proteína quinasa (MAPK) o activación de NF-
κB dependiente de IκB quinasa (IKK).
Además, la fosforilación de RIPK1 por parte
de TAK1, el complejo IKK o la proteína
quinasa 2 activada por proteína quinasa
activada por mitógeno (MAPKAPK2, más
conocida como MK2) parece alterar su
capacidad para interactuar con FADD y
CASP8, evitando así las variantes de RCD
inducido por TNF que depende de la actividad
de la quinasa RIPK1 y que favorece la
apoptosis inducida por RIPK1 independiente
de TRADD, FADD y CASP8. Por el contrario,
en presencia de los llamados "miméticos de
SMAC" (que operan de facto como inhibidores
de IAP), RIPK1 es desubiquitinado por CYLD
lisina 63 deubiquitinasa (CYLD), favoreciendo
su liberación del complejo I y su asociación
con FADD y CASP8 en el citosol para formar
el complejo II, que impulsa la apoptosis
extrínseca . La formación del complejo II
también requiere la ubiquitinación de TRAF2
por el dominio HECT y la repetición de
anquirina que contiene la proteína ligasa 1
ubiquitina E3 (HACE1) . Para agregar una
capa adicional de complejidad, la degradación
proteasomal de TRAF2 parece ser evitada (al
menos en hepatocitos) por RIPK1,
independientemente de su actividad quinasa.
Es de destacar que TNFR1 también puede
activar modalidades alternativas de RCD,
como la necroptosis (ver a continuación).
La señalización del receptor de la muerte
también puede conducir a la activación de NF-
κB, que generalmente da como resultado una
supervivencia celular asociada con una
respuesta inflamatoria robusta . La capacidad
de algunos receptores de muerte incluyendo
TNFR1 para promover la activación de NF-κB
sobre la activación de CASP8 parece
depender del grado de oligomerización del
receptor (es decir, trimerización frente a
multimerización de orden superior) , el
andamiaje (es decir, no enzimático) funciones
de CASP8, y el consiguiente ensamblaje de
complejos de tipo TNFR1 que contienen
RIPK1 y LUBAC. Tras la activación de
TRAILR, LUBAC supuestamente ubiquitina
tanto CASP8 como RIPK1 mientras promueve
el reclutamiento de IKK al complejo I, lo que
también explica el requerimiento de LUBAC
para la inhibición de la muerte celular inducida
por TNF. De acuerdo con esta noción, la
proteína 3 inducida por TNF alfa (TNFAIP3,
más conocida como A20) inhibe la activación
de CASP8 corriente abajo de TRAILR en las
células de glioblastoma, debido a su
capacidad de polubiquitinate RIPK1 . Un
estudio reciente sugiere que la capacidad de
TRAILR2 para despachar señales pro-
supervivencia en lugar de pro-apoptóticas
puede depender de su localización
preferencial fuera de las balsas lipídicas .
Queda por demostrar si lo mismo se aplica a
otros receptores de muerte.
La familia de receptores de dependencia
consta de aproximadamente 20 miembros,
que incluyen: (1) los receptores netrin 1
(NTN1) receptor DCC netrin 1 (DCC), unc-
5receptor de netrina A (UNC5A), UNC5B,
UNC5C y UNC5D; (2) el receptor de
neurotrofina neurotrófico receptor tirosina
quinasa 3 (NTRK3); y (3) el receptor sonic
hedgehog (SHH) parchado 1.
Curiosamente, los receptores de dependencia
promueven la supervivencia, proliferación y
diferenciación celular en condiciones
fisiológicas (cuando sus ligandos afines están
normalmente disponibles), pero activan
cascadas de señalización letales distintas (y
no completamente elucidadas) (generalmente
afectan a la activación de caspasas) una vez
que la disponibilidad del ligando cae por
debajo de un específico nivel de umbral. Por
lo tanto, en ausencia de sus respectivos
ligandos: (1) DCC es escindido por CASP3 y
esto promueve su asociación con la proteína
adaptadora, la fosfo-tirosina que interactúa
con el dominio PH y la cremallera de leucina 1
(APPL1) y CASP9, dando como resultado la
activación del Cascada CASP9-CASP3; (2)
PTCH1 interactúa con el adaptador citosólico
de cuatro dominios y medio LIM 2 (FHL2,
mejor conocido como DRAL), lo que favorece
el ensamblaje de un complejo activador de
CASP9 que consiste en el miembro 8 de la
familia del dominio de reclutamiento de
caspasa (CARD8; también conocido como
TUCAN) y células precursoras neuronales
expresadas, reguladas por disminución en el
desarrollo 4, E3 ubiquitina proteína ligasa
(NEDD4) ; (3) UNC5B permite la
desfosforilación de activación de proteína
fosfatasa 2 (PP2A) mediada por muerte
asociada a proteína quinasa 1 (DAPK1), que
se sabe que promueve el RCD dependiente
de p53 ; y (4) UNC5D y NTRK3 se someten a
escisión de CASP3 que genera fragmentos
intracelulares que se desplazan al núcleo para
desencadenar la expresión de genes
proapoptóticos (como en el caso de UNC5D)
o mitocondrias del factor de transcripción E2F
(E2F1). para activar CASP9 en MOMP (como
en el caso de NTRK3) . El RCD dependiente
del receptor de la dependencia ha estado
involucrado en múltiples situaciones
fisiopatológicas y ejerce funciones
oncosupresoras robustas . En consecuencia,
las células neoplásicas a menudo escapan del
RCD mediado por el receptor de dependencia
al (1) regular positivamente la expresión de
sus ligandos afines, tales como NTN1 ; (2) gen
(es) inactivado, inhibidor (downregulating) o
que pierde (n) la codificación de receptores de
dependencia específicos, incluidos DCC,
UNC5C y NTRK3; o (3) transductores de señal
de silenciamiento que operan aguas abajo de
receptores de dependencia, tales como
DAPK1, a través de mecanismos epigenéticos
[370]. Dicho esto, si la relevancia
fisiopatológica real de la señalización del
receptor de dependencia proviene de la
iniciación de la apoptosis extrínseca aún no se
ha establecido formalmente. Cabe destacar
que, en tipos de células específicos, también
se ha sugerido que algunos miembros de la
familia de proteínas del receptor Toll-like
(TLR), que incluyen el receptor tipo 3 (TLR3)
desencadenan el RCD mediante un
mecanismo que implica la molécula
adaptadora 1 del receptor similar (TICAM1;
mejor conocido como TRIF), y finalmente
incide en la activación de CASP8 [371, 372].
Sin embargo, no está claro si TLR3 y otros
TLR en realidad inician un programa de RCD
privado que involucra directamente a CASP8,
o si promueven RCD tras la activación de una
ruta de señalización autocrina / paracrina
dependiente de NF-κB que implica TNF.
Proponemos definir la apoptosis extrínseca
como un tipo de RCD iniciado por
perturbaciones de las microcapas
extracelulares medio ambiente que se
detectan mediante la recepción de la
membrana plasmática tors, propagado por
CASP8 (con la participación opcional de
MOMP), y precipitado por verdugo caspasas,
principalmente CASP3
NECROSIS IMPULSADA POR MPT
La necrosis impulsada por MPT es una forma
de RCD iniciada por perturbaciones del
microambiente intracelular como estrés
oxidativo severo y sobrecarga citosólica de
Ca2 +, que generalmente se manifiesta con un
morfotipo necrótico. El término MPT se refiere
a una pérdida abrupta de la impermeabilidad
del IMM a los solutos pequeños, lo que da
como resultado una dispersión rápida de Δψm
si pación, ruptura osmótica de ambos
miembros mitocondriales branas y RCD A
nivel bioquímico, la necrosis inducida por MPT
ha sido propuso seguir la apertura de la
llamada "permeabilidad" complejo de poro de
transición "(PTPC), un complejo
supramolecular ensamblado en las uniones
entre el IMM y OMM. La composición,
regulación y mecanismo preciso de acción del
PTPC aún se encuentran bajo intensa
investigación y cuestión de un debate vivo.
Hasta la fecha, peptidilprolilo isomerasa F
(PPIF, más conocida como ciclofilina D,
CYPD) es la única proteína cuyo requisito in
vivo para la inducción de MPT se ha validado
formalmente con herramientas genéticas
robustas (aunque hay consenso en torno a la
idea de que CYPD no constituye la unidad de
formación de poros del PTPC). Por
consiguiente, inhibidores farmacológicos de
CYPD incluyendo cyclosporin A (CsA),
sanglifehrin A (SfA) y JW47 limitan la necrosis
impulsada por MPT y confieren protección en
múltiples modelos de roedores de la
enfermedad en qué estrés oxidativo y
sobrecarga citosólica de Ca2 + constituyen
principales determinantes etiológicos (p. ej.,
neuronal, cardíaco y isquemia renal /
reperfusión). En líneas similares, la
degradación de CYPD a través de un
mecanismo iniciado por el expresión de la
proteína X-1 asociada a HCLS1 (HAX1)
suprime la necrosis inducida por MPT y limita
la desaparición de los cardiomiocitos que
experimentan isquemia / reperfusión in vivo
No obstante, un estudio clínico aleatorizado
grande completado en 2015 (el ensayo
CIRCUS) no pudo confirmar hallazgos previos
de 2008 sobre los efectos cardioprotectores
de la ciclosporina administrada antes de la
intervención coronaria percutánea a pacientes
con infarto agudo de miocardio. Aunque se
pueden invocar múltiples advertencias
relacionadas con los métodos empleados
para medir el tamaño del infarto y el uso de
una formulación farmacológica CsA específica
para explicar los resultados negativos del
ensayo CIRCUS, la interconectividad elevada
de las subrutinas RCD (especialmente la
apoptosis intrínseca y la necrosis inducida por
MPT ) puede haber jugado un papel clave en
esta configuración.
En desacuerdo con CYPD, varias otras
proteínas que previamente habían sido
hipotetizadas para mediar un rol no
redundante dentro del PTPC resultaron ser
prescindibles para MPT in vivo, en base a
modelos genéticos relativamente robustos.
Por lo tanto, una deleción específica de
cardiomiocitos inducible de la familia de
portadores de soluto 25 miembro 3 (Slc25a3,
que codifica el portador de fosfato inorgánico)
en ratones no afecta la capacidad de las
mitocondrias para someterse a MPT in vitro,
ya que establece la desensibilización parcial
de PTPC en células mitiga levemente la lesión
cardíaca tras la isquemia / reperfusión in vivo
(~ 10% de reducción en el área isquémica
sobre el área de riesgo) Se obtuvieron
hallazgos similares para isoformas distintas
del translocador de nucleótido de adenina de
proteína integral (ANT) de IMM y la proteína
VDAC de OMM. En particular, el knock-out
simultáneo de Slc25a4 y Slc25a5, que codifica
ANT1 y ANT2, respectivamente, o el de
Vdac1, Vdac2 y Vdac3 no evita la inducción
de MPT por estrés oxidativo o Ca2 +
sobrecarga. Sin embargo, las mitocondrias
aisladas de Slc25a4 - / - Slc25a5 - / - hígados
de ratón se insensibilizaron a MPT conducido
por Ca2 + en un grado similar que las
mitocondrias expuestas a CsA [390]. Además,
Slc25a31 codifica otra isoforma ANT (es decir,
ANT4), que (al menos en algunos tejidos de
ratón) puede compensar la ausencia de ANT1
y ANT2. Estos resultados reflejan un grado
constante de redundancia genética y funcional
entre los componentes de la maquinaria
molecular para MPT.
Varias líneas de evidencia sugieren que la
ATPasa F1FO mitocondrial media un papel no
redundante dentro de la PTPC. Inicialmente,
se ha propuesto que el anillo c de la F1FO
ATPasa, así como los dímeros de la F1FO
ATPasa, constituyen la unidad formadora de
poros PTPC buscada desde hace mucho
tiempo. Una interacción específica entre
CYPD y el tallo lateral de la F1FO ATPasa, así
como la capacidad de los iones Ca2 + (que
son potentes inductores de MPT) para unirse
a ATP sintasa, transporte de H +, complejo F1
mitocondrial, polipéptido beta (ATP5B),
otorgan más apoyo a esta interpretación Sin
embargo, hallazgos muy recientes parecen
excluir la posibilidad de que la F1FO ATPasa
constituya el componente formador de poros
del PTPC. En primer lugar, parece poco
probable que los anillos c (que existen como
poros en el IMM) pierdan sus tapones lipídicos
en condiciones relativamente fisiológicas.
Segundo, las mitocondrias de células
humanas que carecen de todos los genes que
codifican la subunidad c de la F1FO ATP
sintasa, es decir ATP sintasa, transporte de H
+, la subunidad C1 del complejo mitocondrial
(subunidad 9; ATP5G1), la subunidad C2
(subunidad 9; ATP5G2) y la subunidad C3
(subunidad 9; ATP5G3) mantienen la
capacidad de someterse a MPT en respuesta
a la sobrecarga de Ca2 +. Finalmente, las
células que carecen de ATP sintasa,
transportador H +, complejo F1 mitocondrial,
subunidad O (ATP5O, mejor conocido como
OSCP) o el dominio de membrana de la
subunidad b de la ATP sintetasa F1FO
(codificada por ATP5F1) parecen conservar la
actividad normal de PTPC.
Dicho esto, la implicación de la ATPasa F1FO
o sus componentes en la necrosis inducida
por MPT sigue siendo una cuestión de intensa
investigación. Un análisis basado en la
interferencia de ARN (ARNi) identificó SPG7,
subunidad de peptidasa de AAA de la matriz
de paraplejina (SPG7) como un componente
esencial del PTPC que actúa como parte de
heterooligómeros que contienen VDAC y que
contienen CYPD. A pesar de la disponibilidad
de ratones Spg7 - / -, la participación real de
SPG7 en la necrosis derivada de MPT in vivo
aún no se ha validado.
Se ha demostrado que varios interactores
PTPC físicos o funcionales regulan la necrosis
inducida por MPT. Estos incluyen: (1)
miembros de la familia BCL2 pro y anti
apoptóticos tales como BAX, BAK y BID, así
como BCL2 y BCL-XL; (2) DRP1, que parece
promover la apertura de PTPC en respuesta a
la estimulación del receptor adrenérgico β
crónico, a través de un mecanismo que
depende de la fosforilación de DRP1 por la
proteína quinasa II dependiente de calcio /
calmodulina (CAMK2G, más conocida como
CaMKII); y (3) p53, que participa en la
necrosis impulsada por MPT tras la
interacción física con CYPD. La última
interacción se ha demostrado que participa en
la patogénesis del accidente cerebrovascular
isquémico en ratones. Sin embargo, su
relevancia fisiopatológica en los seres
humanos aún no se ha dilucidado. Los
hallazgos recientes respaldan la relevancia de
la homeostasis ajustada de Ca2 + en el nivel
mitocondrial para la aptitud celular y
organismal. Por lo tanto, perturbar la actividad
del uniporter IMM Ca2 +, que consta de uni
portador de calcio mitocondrial (MCU),
proteína de membrana de un solo paso con
cola rica en aspartato (SMDT1, también
conocida como EMRE), absorción de calcio
mitocondrial 1 (MICU1) y Según los informes,
la MICU2 afecta la supervivencia del ratón y la
regeneración hepática después de la
hepatectomía parcial al promover la
sobrecarga mitocondrial de Ca2 + y la
necrosis inducida por MPT. En líneas
similares, la pérdida de proteasas m-AAA
mitocondriales del IMM, que regulan el
ensamblaje del IMM Ca2 + unidor, induce
sobrecarga mitocondrial de Ca2 +, apertura de
PTPC y muerte celular neuronal. Los ratones
adultos sometidos a la deleción de Mcu
específica de miocardiocitos están protegidos
contra la isquemia / reperfusión cardíaca
como consecuencia de la inhibición de MTP.
Además, la deleción específica inducible de
cardiomiocitos de la familia de portadores de
soluto 8 miembro B1 (Slc8b1, que codifica un
intercambiador de sodio / calcio mitocondrial
dependiente de potasio) en ratones provoca
reacción repentina debida a insuficiencia
cardíaca impuesta por necrosis regulada por
MTP sobre sobrecarga mitocondrial de Ca2 +
Finalmente, el factor 3 de intercambio de
nucleótido de guanina de rap (RAPGEF3,
mejor conocido como EPAC1) parece
desencadenar la apertura de PTPC al
aumentar los niveles de Ca2 + mitocondriales
mediante la interacción con VDAC1, miembro
de la familia de proteínas de choque térmico
(HSP70) 9 (HSPA9; ), y el receptor de inositol
1,4,5-trisfosfato tipo 1 (ITPR1, más conocido
como IP3R1), y el knock out de Rapgef3
protege a los ratones contra la isquemia
miocárdica/lesión por reperfusión. Sin
embargo, la activación de EPAC1 con
bicarbonato reduce la captación mitocondrial
de Ca2 +, estimula la producción de ATP e
inhibe múltiples formas de RCD, incluida la
necrosis inducida por MPT en cardiomiocitos
de rata. Las razones precisas que subyacen a
esta aparente discrepancia aún no se han
dilucidado. Proponemos definir la necrosis
inducida por MPT como una forma de RCD
desencadenada por perturbaciones del
microambiente intracelular y que depende del
CYPD (cuadro 1).
NECROPTOSIS
La necroptosis es una forma de RCD iniciada
por perturbaciones del microambiente
extracelular o intracelular detectadas por
receptores de muerte específicos, que
incluyen (pero no se limitan a) FAS y TNFR1,
o receptores de reconocimiento de patógenos
(PRR), que incluyen TLR3, TLR4 y unión de
Z-DNA Proteína 1 (ZBP1, también conocida
como DAI) Ahora está claro que la necroptosis
(que generalmente se manifiesta con un
morfotipo necrótico) no solo media las
funciones adaptativas cuando fallan las
respuestas al estrés, sino que también
participa en programas de salvaguardia del
desarrollo (para asegurar la eliminación de
organismos potencialmente defectuosos
antes del parto), así como en el
mantenimiento de la homeostasis de células T
adultas (de hecho, sirve como una subrutina
PCD, al menos en entornos específicos)
A nivel molecular, la necroptosis depende
críticamente de la activación secuencial de
RIPK3 y del dominio de la quinasa mixta como
pseudoquinasa (MLKL). Tras la iniciación de
necroptosis por TNFR1, RIPK3 se activa por
RIPK1 (siempre que CASP8 esté inactivo, ver
más abajo) a través de un mecanismo que
implica la interacción física entre sus
respectivos dominios de interacción
homotípica RIP (RHIM) y actividad catalítica
RIPK1. Por lo tanto, inhibidores químicos de
RIPK1 incluyendo necrostatina-1 (Nec-1) y
derivados (p. ej., Nec-1s) inhiben fuertemente
la necroptosis inducida por TNFR1, in vitro e
in vivo. Alternativamente, RIPK3 se puede
activar siguiendo la interacción dependiente
de RHIM con TRIF después de la activación
de TLR3 por duplicado -tranded RNA (dsRNA)
dentro de endosomes, o TLR4 activación por
lipopolysaccharide (LPS) o varios DAMPs en
la membrana plasmática; o ZBP1, que
funciona como un sensor para el ADN
citosólico que promueve la síntesis de
interferón tipo I (IFN) y la activación de NF-κB.
Active RIPK3 cataliza la fosforilación de
MLKL, lo que resulta en la formación de
oligómeros de MLKL (muy probablemente
trímeros o tetrámeros) que se trasladan a la
membrana plasmática, donde se unen a
especies específicas de fosfatidilinositol
fosfato mediante un mecanismo de
transferencia y, por lo tanto, desencadenar la
permeabilización de la membrana plasmática.
Aunque la contribución esencial de MLKL a la
necroptosis ha sido confirmada por estudios
genéticos y por intervenciones farmacológicas
(es decir, inhibición de MLKL con
necrosulfonamida, NSA), el mecanismo
preciso a través del cual MLKL ejecuta la
necroptosis no se comprende completamente.
Estudios recientes adscriben a la proteína de
choque térmico 90 kDa clase alfa clase A
miembro 1 (HSP90AA1; mejor conocido como
HSP90) un papel específico y no redundante
en la oligomerización y translocación de
MLKL. Además, también se ha informado que
la oligomerización de MLKL promueve una
cascada de eventos intracelulares que
involucran Ca2 + influjo, que está mediado
presumiblemente por el subgrupo M de la
subfamilia del canal catiónico potencial del
receptor transitorio objetivo MLKL (TRPM7); y
exposición de PS, que parece ser
directamente operado por MLKL.Esto es
seguido por la formación de burbujas de
membrana plasmática que expresan PS, cuya
ruptura y liberación está negativamente
regulada -en condiciones de activación de
MLKL limitada- por la actividad antagonista de
el complejo de clasificación endosomal
requerido para maquinaria de transporte
(ESCRT) –III. Una vez localizado en la
membrana plasmática, MLKL activa las
proteasas de la superficie celular de la familia
ADAM, que pueden promover el
desprendimiento de proteínas asociadas a la
membrana plasmática, o formar canales Mg2
+ por significados. Es de destacar que MLKL
activo también parece translocarse al núcleo,
pero la relevancia de este fenómeno para la
necroptosis aún no se ha investigado. Datos
previos que apoyan la participación del
miembro de la familia PGAM 5, serina /
treonina proteína fosfatasa, mitocondrial
(PGAM5) - y La fragmentación mitocondrial
inducida por DRP1 en la necroptosis ha sido
invalidada de manera concluyente, lo que
confirma que la señalización necróptica puede
proceder normalmente de manera
independiente de las mitocondrias. De nota,
los componentes básicos de necroptosis
están mal conservadas a través del animal
king-dom, ya que algunas especies carecen
RIPK3 y / o MLKL Por otra parte, unos pocos
casos no canónicos de RCD pseudone-
croptotic implican MLKL (pero no RIPK3) o
RIPK3 ( pero no MLKL) han sido descritos.
Estas observaciones refuerzan la noción de
que las vías de señalización que conducen al
RCD muestran un grado de interconectividad
hasta ahora no completamente comprendido.
complejo de señalización comúnmente
conocido como necrosoma, donde primero
RIPK1 y luego RIPK3 experimentan una serie
de eventos de fosforilación trans o de
fosforilación que son necesarios para el
reclutamiento de MLKL y la activación de
necroptosis. Los reguladores negativos
mayores del necrosoma incluyen: homología
de STIP1 y proteína que contiene U-box 1
(STUB1, también conocido como CHIP), que
promueve la ubiquitinación RIPK1 y RIPK3
seguida de degradación lisosómica.A20, que
inhibe el ensamblaje de necrosomas mediante
la desubiquitinación de la proteína fosfatasa
RIPK3, Mg2 + / Mn2 + dependiente de 1B
(PPM1B), que impide el reclutamiento de
MLKL al necrosoma mediante desfosforilando
RIPK3; y aurora quinasa A (AURKA), que
media la función inhibidora sobre la
interacción física con RIPK1 y RIPK3. La
activación de RIPK3 también depende de su
asociación física con un complejo de co-
chaperona que contiene HSP90 y un ciclo de
división celular 37 (CDC37) [477]. Además, el
ensamblaje del necrosoma tras la
estimulación con TNFR1 afecta dos
condiciones: (1) inactivación farmacológica o
genética de CASP8 y la fosforilación
dependiente de la desubiquitinación RIPK1 (al
menos en algunos entornos), que puede
favorecerse de forma exógena. Los miméticos
de SMAC aseguran la liberación de RIPK1 del
complejo I (ver arriba).
En cuanto a la primera condición, los
hallazgos experimentales convincentes
demuestran que la actividad concertada de
CASP8, FADD y c-FLIPL inhibe tónicamente
la necroptosis. Por lo tanto, la letalidad
embrionaria impuesta a ratones por la pérdida
de Casp8 o Fadd puede ser rescatada por la
ablación concurrente de Ripk3 o Mlkl, aunque
estos animales de doble inactivación
generalmente muestran trastornos
autoinmunes linfoproliferativos y / o sistémicos
como adultos. Es de destacar que los ratones
Cflar - / - requieren el knockout concomitante
de Ripk3 y Fadd para desarrollarse hasta la
edad adulta, lo que subraya el papel inhibidor
de c-FLIP tanto en la necroptosis como en la
apoptosis extrínseca informada
anteriormente. En líneas similares, la
eliminación simultánea de Ripk3 evita las
perturbaciones de la homeostasis cutánea e
intestinal impuesta por la ablación específica
de tejido de Fadd o Casp8. Además, los
defectos proliferativos de células T Asp8 - / - o
Fadd - / - se pueden rescatar mediante la
administración del inhibidor de RIPK1 Nec-1 o
la ablación concomitante de Ripk3. La
necroptosis también es inhibida tónicamente
por c-IAP, debido a su capacidad de
ubiquitinate RIPK1. En consecuencia, la
necroptosis se basa en la actividad
deubiquitinating de CYLD, que también es un
objetivo proteolítico de CASP8.
Finalmente, algunos componentes de la
cascada de señalización de TNFR1 regulan la
necroptosis de manera negativa, catalizando
la fosforilación inhibidora de RIPK1 (por
ejemplo, el complejo IKK y MK2) y
interactuando con stitutively (y así evitando
elactivación de) MLKL (por ejemplo, TRAF2) o
de manera positiva, favoreciendo la
fosforilación activadora de RIPK1 o RIPK3 tras
la activación prolongada (por ejemplo, TAK1).
En este contexto, CYLD también contribuye a
la necroptosis mediante la desubiquitinación
y, por lo tanto, la supresión de la actividad anti-
necroptótica de-TRAF2.
Dicho esto, cada vez más pruebas indican que
la necroptosis causada por varios estímulos,
en algunas circunstancias incluso la
activación de TNFR1, no depende
necesariamente de RIPK1. Por lo tanto, a
diferencia de Ripk3 - / - ratones que son
viables y fértiles, el genotipo Ripk1 - / - causa
letalidad perinatal, que no puede prevenirse
mediante la ablación de Ripk3, Casp8 o Fadd
solos, pero puede ser rescatada por la co-
deleción de Ripk3 y Casp8, Fadd o Tnfrsf1a
Además, las células Ripk1 - / - muestran una
mayor sensibilidad a la necroptosis y / o
apoptosis extrínseca inducida por un conjunto
de estímulos inmunes innatos. Los modelos
condicional de mouse knockout demuestran el
papel clave de RIPK1 para la preservación de
la homeostasis y la supervivencia intestinal y
cutánea. En particular, los ratones que
carecen de Ripk1 en las células epiteliales
intestinales muestran tasas aumentadas de
apoptosis espontánea dirigida por CASP8 y
desarrollan lesiones inflamatorias graves que
conducen a la muerte prematura, una
deficiencia fenotipo mental que se puede
prevenir mediante la co-eliminación de Fadd o
(en menor grado) Tnfrsf1a. Del mismo modo,
la ausencia de Ripk1 de los queratinocitos
promueve la necroptosis espontánea y la
consiguiente inflamación cutánea, que se
puede prevenir mediante la deleción conjunta
de Ripk3, Mlkl o Zbp1, pero no Fadd.
Colectivamente, estos resultados sugieren
que (al menos en algunos entornos) RIPK1
puede inhibir (en lugar de activar) la
necroptosis dependiente de RIPK3 y / o la
apoptosis extrínseca dependiente de CASP8.
Al menos en algunos contextos, esto refleja el
papel principal de RIPK1 en la activación de
NF-κB.
Curiosamente, el papel pro-supervivencia de
RIPK1 en el desarrollo parece ser
independiente tanto de su actividad quinasa
como de la unión a RIPK3, como lo demuestra
el hecho de que los ratones genéticamente
modificados para expresar una variante
muerta de quinasa de RIPK1 (p. Ej.,
RIPK1K45A) viables y fértiles Además,
recientemente se ha informado que el receptor
autofágico optineurin (OPTN) regula
activamente el recambio proteasómico de
RIPK1, ya que la pérdida de OPTN induce la
degeneración axonal a través de la
necroptosis dependiente de RIPK1 Inhibidor
de la subunidad gamma del factor nuclear
kappa B kinase gamma (IKBKG, más
conocido como NEMO) también previene la
inflamación intestinal impulsada por RIPK1 y
la muerte de células epiteliales, aunque los
mecanismos moleculares subyacentes siguen
siendo poco conocidos [511] Finalmente,
cuando catalíticamente inactivos o inhibidos
por agentes farmacológicos específicos como
Nec-1, Se informa que RIPK1 (y, al menos en
ciertas circunstancias, RIPK3) contribuye a
formas específicas de apoptosis dependiente
de CASP8 (véase más arriba). La vista actual
como ibes los roles opuestos de RIPK1 (y-a
menos en parte, RIPK3) para promover o
inhibir el RCD a su dependiente de quinasa
frente a quinasa independiente (es decir,
andamiaje) funciones, respectivamente.
Como se mencionó anteriormente, RIPK3
puede ser activado por proteínas involucradas
en la inmunidad innata a patógenos invasores
incluyendo TRIF y ZBP1. Por lo tanto, en
ausencia de actividad CASP8, la estimulación
de TLR3 o TLR4 por sus respectivos ligandos
promueve la necroptosis sobre la interacción
entre TRIF y RIPK3 y la consiguiente
activación de MLKL. De acuerdo con ello, el
ligando de TLR3 sintético ácido poliinosínico-
policitidílico (polyI: C) o la co-administración
de LPS en dosis bajas y el inhibidor de
caspasa Z- VAD-fmk necroptosis gatillo en
células dendríticas (DC) o células de la
microglía, respectivamente. En este contexto,
la subunidad IFN alfa y beta del receptor 1
(IFNAR1) y el receptor IFN gamma 1
(IFNGR1) también parecen tener funciones
pro-necroptóticas. Por lo tanto, Ifnar1 - / -
macro-fagos son resistentes al RCD inducido
por LPS o poliI: C en el contexto de la
inhibición de la caspasa, que de otro modo
desencadenaría un proceso necrotótico
basado en TRIF y señalización del factor 3
genético estimulado por IFN tónico (ISGF3).
Los estudios genéticos demuestran que la
letalidad impuesta a los ratones por el
genotipo Ripk1 - / - Tnfrsf1a - / - se retrasa
(pero no se previene) mediante la deleción
conjunta de Ticam1 o Ifnar1. Además, las
células Ripk1 - / - son más sensibles a la
necroptosis inducida por poliI: C o tipo I IFN.
Sin embargo, los ratones Tnfrsf1a - / - Ripk1 -
/ - Ripk3 - / - se convierten en adultos,
sugiriendo la existencia de activadores
adicionales de RIPK3.
Recientemente, se ha elucidado el
mecanismo que subyace a la necroptosis
mediada por ZBP1 y su regulación por RIPK1.
ZBP1 actúa en los pasos iniciales de la
necroptosis mediante la activación secuencial
de RIPK3 y MLKL. Además, los ratones que
expresan una variante de RIPK1 mutada en el
dominio RHIM mueren perinatalmente, un
fenotipo que puede ser rescatado por deleción
concurrente de Ripk3, Mlkl o Zbp1 (pero no
Ticam1), así como por el efecto de RIPK3
catalíticamente inactivo o RIPK3 mutado en el
dominio RHIM. Esto sugiere que el RHIM de
RIPK1 actúa como un inhibidor de la
necroptosis inducida por ZBP1, muy
probablemente porque impide la interacción
entre ZBP1 y RIPK3. Se requiere más
investigación para aclarar los mecanismos de
activación de ZBP1 en este contexto y su
relevancia para el desarrollo y la regulación
del tejido homeostático. Es importante
destacar que los múltiples componentes de la
maquinaria molecular para la necroptosis, que
incluyen ZBP1, RIPK3, MLKL y TNFR1
(principalmente a través de NF-κB), influyen
en el control del llamado "inflamasoma", una
plataforma supramolecular para la activación
de CASP1 y la consiguiente secreción de
interleucina 1 beta madura (IL1B, más
conocida como IL-1β) e IL18. Discutir en
detalle estos enlaces -que ejemplifican la
compleja interconexión entre la señalización
de RCD y las respuestas inflamatorias- va
más allá del alcance de esta revisión.
En resumen, proponemos definir la
necroptosis como un tipo de RCD
desencadenada por perturbaciones de
extracelular o homeostasis intracelular que
depende críticamente de MLKL, RIPK3 y (al
menos en algunos entornos) sobre la actividad
de quinasa de RIPK1 (Cuadro 1).
FERROPTOSIS
La ferroptosis es una forma de RCD iniciada
por perturbaciones específicas del
microambiente intracelular, especialmente la
peroxidación lipídica severa, que depende de
la generación de ROS y la disponibilidad de
hierro. Los mecanismos moleculares que
precipitan la ferroptosis han comenzado a
surgir, y (hasta ahora) el RCD ferroptótico se
ha relacionado con la acumulación de
peróxido de lípidos tóxicos. La ferroptosis
ocurre independientemente de caspasas,
componentes necrosómicos y CYPD, y la
maquinaria molecular para la autofagia se
manifiesta con un morfotipo necrótico (con
predominio de alteraciones mitocondriales
que abarcan contracción, ultraestructura de
densidad de electrones, crestas reducidas /
desaparecidas y OMM roto). , y está
potencialmente asociado con una liberación
constante de DAMP inmunoestimuladores.
Curiosamente, se ha sugerido que BCL2 limita
la desaparición fisiológica de los progenitores
neuronales que no se diferencian a través de
un mecanismo que no depende de BAX y
caspasas, y puede ser suprimido por
inhibidores de la ferroptosis. La implicación
real de BCL2 en la regulación de la ferroptosis,
sin embargo, queda por establecer
firmemente.
Algunos de los circuitos moleculares que
regulan los pasos iniciales de ferroptosis se
han revelado recientemente empleando
agentes inductores de ferroptosis específicos,
incluyendo erastina, RSL3 y FIN56, y agentes
inhibidores de ferroptosis específicos,
incluyendo ferroestadinas y liproxstatinas. En
particular, la glutatión-enzima dependiente del
glutatión (GSH) glutatión peroxidasa 4
(GPX4), que está directamente dirigida por
RSL3, se ha convertido en el principal
inhibidor endógeno de la ferroptosis en virtud
de su capacidad para limitar la peroxidación
lipídica catalizando la reducción dependiente
de GSH de hidroperóxidos de lípidos a
alcoholes lipídicos. En línea con esta noción,
la erastina desencadena la ferroptosis al
afectar (indirectamente) el ciclo catalítico de
GPX4 a través de un mecanismo que implica
la inhibición del sistema antiportador cistina /
glutamato xc y la consiguiente disminución de
cisteína intracelular (que se deriva de la
reducción de cistina en el citoplasma) y GSH
(que se sintetiza a partir de cisteína). En
consecuencia, la reducción de GSH con L-
butionina sulfoximina (BSO) -un inhibidor del
complejo glutamato-cisteína ligasa- puede
inducir RCD ferroptótico (al menos en algunos
casos). Además, la toxicidad del glutamato
extracelular alto puede depender (al menos en
parte) de la activación de ferroptosis a través
del desequilibrio de cisteína. De relevancia
para la terapia del cáncer, la pronunciada
adicción del carcinoma de mama triple
negativo a la glutamina se relaciona (al menos
en parte) con su capacidad para conducir la
captación de cistina a través de xc, lo que
implica que xc puede constituir un objetivo
terapéutico en este contexto. Además, el
inhibidor de la tirosina cinasa aprobado por la
FDA sorafenib puede desencadenar
ferroptosis en modelos celulares distintos al
reducir el GSH sobre la inhibición del sistema
xc, mientras que la altretamina (un agente
alquilante aprobado por la FDA) ha sido
identificado recientemente como un inhibidor
potencial de GPX4 por un regulador estrategia
del sistema de genoma de red. Por lo tanto,
los efectos antineoplásicos de sorafenib y
altretamina pueden derivarse parcialmente de
la activación de la ferroptosis. Notablemente,
la desaparición de neuronas causada por la
inhibición de xc se denominó inicialmente
oxitosis, toxicidad por glutamato oxidativo o
excitotoxicidad y se relacionó con alteraciones
en la homeostasis de Ca2 + intracelular. No
está claro en qué medida la oxitosis puede ser
discriminada mecánicamente de la ferroptosis
y la necrosis inducida por MPT en diversos
contextos celulares.
La evidencia reciente indica que la ferroptosis
implica la oxidación preferencial de ácidos
grasos poliinsaturados (PUFA) que contienen
fosfatidiletanolamina específicos, como el
ácido araquidónico y el ácido adrenico. En
línea con un requisito crítico para PUFA
oxidables, la inhibición genética y / o
farmacológica del miembro de la familia de
cadena larga acil-CoA sintetasa 4 (ACSL4) y
la lisofosfatidilcolina aciltransferasa 3 capacidad de este metal pesado para
(LPCAT3), ambos involucrados en la
incorporación de PUFA largos en las
membranas celulares, protege las células
contra la ferroptosis (al menos en algunos
entornos). Los hidroperóxidos lipídicos se
pueden formar por autoxidación o por
reacciones enzimáticas catalizadas por
lipoxigenasas (LOX) o ciclooxigenasas (COX).
En el contexto de la ferroptosis, la
peroxidación de PUFA parece estar regulada
principalmente por la actividad mutuamente
antagónica de LOX (que catalizan
directamente la peroxidación de lípidos) y
GPX4 (que indirectamente lo inhibe). Aunque
inicialmente se pensó que el araquidonato 15-
lipoxigenasa (ALOX15) desempeñaba un
papel importante en este contexto, la deleción
de Alox15 no logra rescatar el fenotipo renal
impuesto por el genotipo Gpx4 - / - (lo que
sugiere más adelante), lo que sugiere que los
LOX múltiples involucrado en la peroxidación
de PUFA y ferroptosis consecutiva en algunos
tejidos de ratón. Por consiguiente, los PUFA
oxidados se acumulan tras la inactivación de
GPX4 y esto puede dar como resultado la
fragmentación de PUFA y la ferroptosis. Esta
cascada letal se puede prevenir con agentes
antioxidantes como ferrostatina-1 (Fer-1),
liproxstatina-1 (Lip-1), así como con vitamina
E, coenzima Q10 y sus análogos, que limitan
eficazmente la peroxidación de lípidos al
funcionar como Carroñeros de ROS. Es de
destacar que los sitios catalíticos de LOX
contienen centros de hierro di. Esto puede
explicar: el efecto inhibidor de la ferroptosis
del agotamiento del hierro por los quelantes o
la anulación de la subunidad catalítica de la
fosforilasa quinasa (PHKG2) y el efecto
promotor de la ferroptosis del aumento de la
disponibilidad de hierro intracelular como
consecuencia de la transferencia del ferrita
transportador de hierro circulante (TF).
degradación de la ferritina (un complejo de
almacenamiento de hierro celular) por un
mecanismo autofágico específico conocido
como ferriorinofagia, alteración de la
homeostasis del hierro inducida por
nanopartículas, o administración de una forma
de hierro biodisponible. Alternativamente, la
dependencia crítica de la ferroptosis en el
hierro también se puede atribuir a la
promover la oxidación lipídica no enzimática a
través de reacciones lisosomales de Fenton.
Los reguladores de ferroptosis adicionales
descritos hasta ahora incluyen: (1) el
componente de la ruta del mevalonato
farnesil-difosfato farnesiltransferasa 1
(FDFT1, más conocido como SQS); la enzima
de la ruta de transulfuración cisteinil-ARNt
sintetasa (CARS); la familia B de proteínas de
choque térmico (pequeño) miembro 1
(HSPB1, más conocido como HSP27) y el
miembro 5 de la familia de proteínas de
choque térmico (Hsp70) (HSPA5);
componentes de glutaminólisis de la ruta de
señalización MAPK; el factor nuclear,
erythroid 2 como 2 (NFE2L2; NRF2 más
conocido) vía de señalización metalotioneína
1G; dipeptidil peptidasa 4 DPP4); Grupo de
complementación de anemia de Fanconi D2
(FANCD2); y (10) dominio de sulfuro de hierro
CDGSH 1 (CISD1, también conocido como
mitoNEET). Elucidar el papel preciso de estas
proteínas o vías de señalización en la
ferroptosis requiere una mayor investigación.
La acumulación de evidencia demuestra que
las funciones pro-supervivencia de GPX4
contribuyen al desarrollo y al mantenimiento
del tejido homeostático. Los ratones Gpx4 - / -
muestran letalidad embrionaria con
penetrancia completa. Además, la ablación
inducible o específica de tejido de Gpx4 en
ratones provoca una variedad de afecciones
patológicas, que incluyen lesión renal o
hepática aguda, neurodegeneración e
inmunidad defectuosa a la infección, todo lo
cual puede prevenirse o mitigarse mediante
estrategias inhibidoras de la ferroptosis. . Se
observa un efecto protector similar en los
modelos independientes de GPX4 de daño
renal isquémico o tóxico, enfermedad de
Parkinson y otras patologías humanas.
Además, la ferroptosis parece funcionar como
un mecanismo oncosupresor de buena fe. Se
ha propuesto -pero aún no se ha establecido
formalmente- que parte de las funciones
oncosupresoras multipronadas de p53 puede
derivarse de la regulación por disminución
transcripcional de los componentes del
sistema xc, lo que afectaría modificaciones
específicas postraduccionales de p53. De
acuerdo con esto, la capacidad de ATF4 para
regular al alza el sistema xc- y estabilizar
GPX4 (tras la transactivación de HSPA5) está
causalmente implicada en algunos modelos
de oncogénesis y hemoresistance a la
inducción de ferroptosis. En una línea similar,
parte de los efectos oncogénicos de la
activación de NRF2 inducida por mutaciones
asociadas al cáncer en kelch como la proteína
asociada a ECH 1 (KEAP1) puede derivar de
la regulación positiva del sistema xc-. Por el
contrario, parece que p53 inhibe la ferroptosis
en células de cáncer colorrectal, al menos en
parte inhibiendo la actividad de DPP4 de una
manera independiente de la transcripción. Es
de destacar que las células malignas con un
fenotipo mesenquimatoso (que generalmente
son más resistentes al tratamiento) adquieren,
según los informes, una dependencia
acumulada de la actividad de GPX4, que
puede explotarse terapéuticamente.
Recientemente, se ha descrito una subrutina
RCD similar a la ferroptosis en plantas que
responden a un estrés calórico moderado, lo
que apoya cierto grado de conservación
evolutiva y la relevancia de la ferroptosis para
la homeostasis del organismo. En este
contexto, vale la pena señalar que la inhibición
farmacológica de la ferroptosis, pero no la
necroptosis o la apoptosis, protege los tejidos
tales como los túbulos renales de la lesión por
isquemia / reperfusión. El papel exacto de la
ferroptosis en el desarrollo y la homeostasis
tisular, sin embargo, aún no se ha dilucidado
por completo.
Proponemos definir la ferroptosis como una
forma de RCD iniciada por perturbaciones
oxidativas del microambiente intracelular que
está bajo control constitutivo por GPX4 y
puede ser inhibida por los quelantes de hierro
y los antioxidantes lipofílicos (Cuadro 1).
PYROPTOSIS
La piroptosis es una forma de RCD
desencadenada por perturbaciones de la
homeostasis extracelular o intracelular
relacionadas con la inmunidad innata (por
ejemplo, invasión de patógenos) que se
manifiestan con características morfológicas
específicas. Estos incluyen una forma peculiar
de condensación de cromatina que difiere de
su contraparte apoptótica, así como una
hinchazón celular que culmina con la
permeabilización de la membrana plasmática.
El término piroptosis fue originalmente
acuñado por Cookson y Brennan para definir
un tipo particular de RCD que se asemeja
parcialmente a la apoptosis pero dependiente
de CASP1 inflamatorio (y por lo tanto
relacionado con la pirexia), y se han
introducido varios nombres que incluyen
pironecrosis para definir programas
parcialmente relacionados Cesses.
Inicialmente, se pensó que la piroptosis era
relevante solo para la desaparición de
monocitos o macrófagos sometidos a
activación canónica de CASP1. Sin embargo,
los hallazgos recientes indican que la
piroptosis (1) también puede estar impulsada
por otras caspasas, incluyendo CASP3
también puede ocurrir en tipos celulares
distintos de las células del linaje monocítico
tienen un papel principal en la inmunidad
innata contra patógenos intracelulares y están
etiológicamente involucradas en afecciones
patológicas tales como el choque séptico letal
(al menos como lo inducen los LPS). A nivel
molecular, la piroptosis generalmente
depende de la activación de una o más
caspasas, incluyendo CASP1, CASP3,
CASP11 murino y sus homólogos humanos
CASP4 y CASP5, dependiendo del estímulo
iniciador. Por lo tanto, la piroptosis a menudo
(si no siempre) está asociada con la secreción
de IL-1β e IL18, y por lo tanto media efectos
robustos proinflamatorios. Un gran cuerpo de
evidencia indica que el LPS citosólico de
bacterias Gram negativas invasoras es un
desencadenante importante de la piroptosis.
En particular, se ha demostrado que CASP11
es responsable de la muerte independiente de
CASP1 de los macrófagos que responden a la
infección bacteriana Gram-negativa. Además,
la deleción de Casp11 protege a los ratones
frente a un desafío con bacterias invasoras del
citosol, así como también contra la
administración sistémica de LPS y el
consiguiente choque endotóxico dependiente
de la piroposis. Otras observaciones
experimentales confirmaron que CASP11,
CASP4 y CASP5 desencadenan piroptosis al
detectar LPS citosólico, tanto en monocitos
como en otros tipos de células. En particular,
la piroptosis inducida por LPS implica la
interacción física de LPS (o su resto lipídico)
con el dominio CARD de CASP11, CASP4 o
CASP5, una unión altamente específica que
da como resultado la oligomerización de
caspasa y la consiguiente activación. Por lo
tanto, CASP11, CASP4 y CASP5 actúan
como PRR de buena fe para LPS citosólico.
Una vez que se activan más allá de un umbral
específico, las caspas inflamatorias precipitan
la piroptosis catalizando la división proteolítica
de GSDMD. Sin embargo, al menos en
algunos tipos de células, incluidas las CD, la
activación de CASP11 puede conducir a la
secreción de IL-1β en ausencia de muerte
celular.
En línea con un papel crítico de GSDMD,
Gsdmd - / - mac-rophages son resistentes a la
piroptosis inducida por bacterias inducidas por
LPS y Gram-negativas, y los ratones Gsdmd -
/ - sobreviven dosis de LPS que inducen shock
endotóxico letal en su hábitat natural. escriba
contrapartes. Hallazgos recientes demuestran
que GSDMD está constitucionalmente
autoinhibido por la unión de su dominio
represor C-terminal (GSDMD-C o RD) a su
dominio formador de poros N-terminal
(GSDMD-N o PFD). En la inducción de
piroptosis, las caspasas inflamatorias alivian
esta nhibición al catalizar la división
proteolítica del bucle interdominio, que
promueve la liberación del inductor pirotípico
GSDMD-N. GSDMD-N escindido adquiere la
capacidad de translocarse a la valva interna
de la membrana plasmática (o la membrana
plasmática bacteriana), donde se une con alta
especificidad a los fosfoinosítidos
seleccionados (o ardiolipina). El objetivo de
membranas permite la oligomerización de
GSDMD-N, generando un poro que es
responsable de la permeabilización rápida de
la membrana plasmática. Es de destacar que
el poro GSDMD se ha caracterizado
recientemente en el nivel ultraestructural, que
consta de 16 protómeros yimétricos con un
diámetro interior de ~ 10-14 nm.
El CASP1 activo también puede escindir
GSDMD, lo que sugiere que los patrones
moleculares asociados a microbios (MAMP)
distintos de los LPS citosólicos, así como los
DAMP generalmente estimulantesla
señalización inflamamasome canónica puede
iniciar piroptosis. La piroptosis inducida por
CASP1 limita la propagación de bacterias
intracelulares al (1) matar la célula huésped y
generar las llamadas "trampas intracelulares
inducidas por poros" (PIT), que son
esencialmente acrófagos muertos que pueden
eliminarse de forma eficiente (en conjunto con
las bacterias vivas atrapan) por ferocytosis.
Respaldando el papel crítico de la piroptosis
dirigida por CASP1 para las respuestas
inmunes innatas contra las bacterias
invasoras, los ratones Nlrc4 - / - (que son
incapaces de activar normalmente CASP1)
sucumben a bajas cantidades de oportunistas
ambientales inocuos (por ejemplo,
Chromobacterium violaceum). También se
han informado casos de RCD dependiente de
CASP1 pero independiente de GSDMD,
incluida la desaparición de los macrófagos
que experimentan una activación
inflamamasome canónica prolongada. Es de
destacar que se ha hipotetizado que sustratos
adicionales de caspasas inflamatorias
participan en piropostas. Los experimentos
con ratones knockout sugieren que el choque
endotóxico causado por la administración
sistémica de LPS implica la división
dependiente de CASP11 no solo de GSDMD,
sino también de los canales pannexin 1
(PANX1), que conducen a la liberación de
ATP en el espacio extracelular y a la
activación concomitante de purinérgico
receptor P2X 7 (P2RX7), que además incide
en el colapso de los gradientes iónicos y la
señalización inflamasome. Sin embargo, lo
más probable es que estos hallazgos reflejen
la presencia de una mutación pasante
inactivadora en Casp11 que afecta
específicamente a los ratones transgénicos
generados a partir de células madre
embrionarias derivadas de 129 / Sv [641].
Además, se ha propuesto que CASP1
conduce la piropostas al causar daño
mitocondrial tras la escisión de la proteína
ligasa ubiquitina RBR E3 parkin (PRKN, más
conocida como PARKIN). Sin embargo, se
han informado observaciones contrastantes, y
la relevancia fisiopatológica real de este último
mecanismo aún no se ha establecido.
La acumulación de pruebas indica que los
dominios N-terminales (compartidos) de otros
miembros de la familia gasdermin, incluidos
GSDMA, GSDMB, GSDMC, GSDME /DFNA5
y GSDMA3 (que está codificado por el ratón,
pero no el genoma humano), se asemejan a
los de GSDMD ya que muestran la actividad
pirógena y de formación de poros. Aunque los
mecanismos subyacentes a la activación de
GSDMA permanecen desconocidos, dos
estudios recientes demuestran la existencia
de un caso de RCD piropéptico dependiente
de GSDME-N / DFNA5-N que puede ser
provocado por múltiples desafíos, incluyendo
TNF, diversos agentes quimioterapéuticos
que dañan el ADN. y / o infección con el virus
de la estomatitis vesicular. En este contexto,
CASP3 es responsable de la segmentación
proteolítica de GSDME / DFNA5, que precipita
en piroptosis en lugar de apoptosis. Como
GSDME / DFNA5 a menudo se silencia en
células malignas pero se expresa por sus
contrapartes normales, la activación de
GSDME / DFNA5 por CASP3 contribuye a los
efectos secundarios de múltiples
quimioterapéuticos, al menos en ratones.
Curiosamente, GSDME / DFNA5 también ha
estado involucrado en la adquisición de un
fenotipo necrótico por células sometidas a
apoptosis dirigida por CASP3 in vitro (en
ausencia de fagocitosis profiláctica), lo que
demuestra aún más el elevado grado de
interconectividad que existe entre los distintos
tipos de RCD. La identificación de múltiples
miembros de la familia de gasdermin como
factores clave en los últimos pasos de la
piroptosis, así como la caracterización de
CASP3 como activador de GSDME / DFNA5,
amplió la relevancia de esta forma de RCD (y
su definición, ver más abajo) mucho más allá
ajustes inflamatorios. Cabe destacar que el
IFN de tipo I y el IFN gamma (IFNG) también
contribuyen a la piroptosis promoviendo: (1) la
transactivación de CASP11, a través de un
mecanismo dependiente de IFNAR1 o
dependiente de IFNGR1 iniciado por
señalización de TLR4 o IL18; TLR7, GMP-
AMP sintasa cíclica (CGAS), proteína
transmembrana 173 (TMEM173, mejor
conocida como STING), DExD / H-box
helicasa 58 (DDX58, más conocida como RIG-
I) o proteína de señalización antiviral
mitocondrial (MAVS) ) señalización tras una
infección bacteriana o viral; o la expresión de
proteínas de unión a guanilato y una GTPasa
inducible por IFN comúnmente conocida como
IRGB10 (nombre oficial Gm12250), que
aumentan los niveles de LPS citosólico
mediando la lisis de vacuolas que contienen
bacterias Gram-negativas. Además de
subrayar la complejidad de la interacción entre
la inflamación y la piroptosis, CASP11 también
puede ser regulada positivamente por una
cascada de complemento dependiente de la
carboxipeptidasa B1 (CPB1) que actúa
cadena abajo de la activación de TLR4 e
IFNAR1. Además, el LPS citosólico promueve
la secreción de citocinas inflamatorias
mediante un mecanismo que involucra la
activación de CASP11, seguido de la escisión
por GSDMD, la pérdida de iones K + y la
consiguiente activación de CASP1 por el
dominio de pirin de la familia NLR que
contiene 3 inflamamida (NLRP3). vitro (pero
quizás no in vivo).
Proponemos definir la piroptosis como una
forma de RCD que depende críticamente de la
formación de los poros de la membrana
plasmática por los miembros de la familia de
la proteína gasdermin, a menudo (pero no
siempre) como consecuencia de la activación
inflamatoria de las caspasas. El NCCD
desalienta el uso de términos alternativos,
incluida la pironecrosis (cuadro 1).
PARTHANATOS
Parthanatos es una forma de RCD impulsada
por la hiperactivación de un componente
específico de la maquinaria de respuesta al
daño del ADN (DDR), a saber, poli (ADP-
ribosa) polimerasa 1 (PARP1). Notablemente,
parece que los parthanatos ocurren no solo
como consecuencia del daño del ADN
alquilante severo / prolongado, sino también
en respuesta al estrés oxidativo, hipoxia,
hipoglucemia o señales inflamatorias. En este
contexto, las especies de nitrógeno reactivo
(RNS), incluido el NO, se destacan como
desencadenantes principales de la
hiperactivación de PARP1, especialmente en
las neuronas. La hiperactivación de PARP1
media los efectos citotóxicos ya que causa (1)
depleción de NAD + y ATP, que finalmente da
como resultado un colapso bioenergético y
redox, y (2) la acumulación de polímeros de
poli (ADP-ribosa) y proteínas poli (ADP-ribosil)
a mitocondrias, causando finalmente la
disipación de Δψm y MOMP.
Uno de los procesos clave de parthanatos es
la unión de polímeros de poli (ADP-ribosa) a
la mitocondria asociada al factor inductor de
apoptosis 1 (AIFM1, más conocida como AIF).
Esto promueve la liberación de AIF en el
citosol y su translocación al núcleo. donde
media la fragmentación del ADN a gran escala
y la condensación de la cromatina. Además,
corroborando un papel clave para la poli
(ADP-ribosil) ación en parthanatos, la proteína
de degradación de poli (ADP-ribosa) ADP-
ribosilhidrolasa como 2 (ADPRHL2, también
conocida como ARH3) y la poli (ADP-ribosa) -
la proteína del dedo del anillo de proteína de
unión 146 (RNF146, más conocida como
IDUNA) previene la liberación de AIF y el
consiguiente RCD, ya que disminuyen los
niveles de poli (ADP-ribosa) y la
disponibilidad, respectivamente. Además, los
inhibidores farmacológicos específicos de
PARP1 retrasan eficazmente parthanatos en
múltiples tipos de células, in vitro e in vivo. La
fragmentación partanatótica del ADN se
produce independientemente de las caspasas
apoptóticas y la endonucleasa G (ENDOG),
una nucleasa mitocondrial que precipita el
RCD por un mecanismo que implica su
liberación seguido de translocación al núcleo
(al menos en Sac- charomyces cerevisiae,
Caenorhabditis elegans y Dro- sophila
melanogaster). De hecho, la contribución real
de ENDOG al RCD en mamíferos ha sido
cuestionada por la eneración de ratones
Endog - / -, cuyas células muestran
sensibilidad normal a múltiples
desencadenantes letales. Dicho esto, parece
que la actividad catalítica de CPS-6 (el
homólogo de ENDOG en C. elegans) se
potencia con la interacción con WAH-1 (el
homólogo gusano de AIF).
El factor inhibidor de la migración de
macrófagos (FOMIN) se ha convertido en la
principal nucleasa que precipita parthanatos
en una detección reciente de proteínas de
unión a AIF. Por lo tanto, el FIA citosólico
promueve la translocación de FOMIN al
núcleo, donde el FOMIN precipita partanatos
catalizando la escisión del ADN. Por
consiguiente, la depleción de MIF o las
mutaciones específicas en su dominio de
nucleasa confieren protección contra
partanatos in vitro e in vivo (en un modelo
experimental de isquemia cerebral focal). Otra
proteína involucrada en parthanatos es la
hexoquinasa 1 (HK1), cuya unión a polímeros
de poli (ADP-ribosa) inhibe la glucólisis para
causar un colapso bioenergético que precipita
el RCD. Recientemente, una instancia no
canónica, independiente de AIF de
parthanatos, presumiblemente centrada en la
alteración del metabolismo energético, se ha
propuesto para contribuir a la desaparición de
las células epiteliales de la retina y la
consecuente degeneración de la retina.
Interesantemente, algunos autores sugieren
un cierto grado de interconexión entre las
maquinarias partanatóticas y las
necroptóticas. Por lo tanto, tras la inducción de
necroptosis por TRAIL o β lapachona (una orto
naftoquinona con actividad antineoplásica),
RIPK1 y RIPK3 activados parecen estimular la
actividad enzimática de PARP1 y, por lo tanto,
promover el agotamiento de ATP y / o la
liberación de AIF. Esta interpretación puede
no ser cierta en todos los escenarios
experimentales.
Según los informes, Parthanatos contribuye a
diversas afecciones patológicas, que incluyen
algunos trastornos cardiovasculares y
renales, diabetes, isquemia cerebral y
neurodegeneración. De acuerdo con esto, la
inhibición de PARP1 por intervenciones
farmacológicas o genéticas media efectos
robustos citoprotectores en modelos animales
múltiples de la enfermedad. Sin embargo, se
requieren más experimentos para aclarar el
papel real de parthanatos en la etiología de
estas (y otras posibles) patologías y los
verdaderos beneficios terapéuticos de los
inhibidores de partanatos. El NCCD propone
definir parthanatos como una forma de RCD
iniciada por hiperactivación de PARP1. y
precipitado por la consecuente catástrofe
bioenergética acoplada a la degradación del
ADN dependiente de AIF y dependiente de
MIF (Cuadro 1).
MUERTE CELULAR ENTÓTICA
La entosis es una forma de canibalismo
celular que se produce en tejidos de
mamíferos sanos y malignos, que implica el
engolfamiento de células viables por células
no fagocíticas del mismo tipo (homotípicas) o
diferentes (heterotípicas). A menudo (pero no
siempre), la internalización es seguida por la
desaparición de las células internalizadas
(que comúnmente se conocen como "células
entóticas").
La entosis se desencadena principalmente
por el desprendimiento de células epi-thelial
de la matriz extracelular y la consiguiente
pérdida de señalización de integrina, aunque
se han informado mecanismos alternativos.
Estos incluyen: (1) la expresión desregulada
de miosinas durante la formación de contactos
de célula a célula; y (2) diferencias en las
propiedades mecánicas o respuestas al estrés
metabólico de las células cancerosas que
compiten por la proliferación. Además, un
estudio reciente sugiere la existencia de una
forma específica de entosis en las células
cancerígenas durante la mitosis (mitosis
entótica), que se desencadena por un
redondeo mitótico aberrante (y por lo tanto
una adhesión reducida) en condiciones de
depleción del ciclo de división celular 42
(CDC42) o después de la exposición a
agentes antimitóticos.
El modelo actual propone que la
internalización de las células entóticas ocurre
a través de la invasión celular en lugar de la
fagocitosis. Por consiguiente, la captación de
células entóticas es un proceso independiente
de integrinas promovido por la formación de
uniones entre células envolventes y entóticas
que implican las proteínas de adhesión
cadherina 1 (CDH1, también conocida como
E-cadherina) y catenina alfa 1 (CTNNA1), Las
cadenas de actomiosina se acumulan en la
corteza de las células internalizadoras (en el
polo opuesto al sitio de contacto célula a
célula), a través de un mecanismo que
depende de la actividad localizada del
miembro A de la familia de homólogos ras
(RHOA). la proteína quinasa 1 (ROCK1),
ROCK2 y la formina 1 relacionada con la
diáfana (DIAPH1), y da como resultado una
contracción que promueve el atrapamiento. La
actina impulsa la entosis promoviendo la
formación de ampicones de la membrana
plasmática cortical proinvasiva (no apoptótica)
tras la activación de una vía de señalización
que implica un factor de transcripción
relacionado con miocardina (MRTF) y un
factor de respuesta sérica (SRF) que culmina
con ezrin (EZR) upregulation [702]. A la
regulación de la dinámica de los microtúbulos
por AURKA también se le ha atribuido un
papel en la invasión celular, pero la relevancia
de la señalización de AURKA para la entosis
espera confirmación experimental. En línea
con el modelo de invasión de célula en célula
dependiente de actomiosina, la administración
de CDH1 exógeno promueve la entosis entre
células de cáncer de mama con deficiencia de
CDH1, mientras que la sobreexpresión
forzada de RHOA o ROCK1 más ROCK2
permite la internalización de células entóticas
por expresión de CDH1 epitelial células [701].
Además, la hiperactivación de la miosina
contráctil induce la invasión entótica de
células en células a través de un mecanismo
que implica la activación de RHOA, ROCK1, y
ROCK2. Curiosamente, la competencia en el
sistema tumoral puede ocurrir a través de un
proceso entótico cuyo resultado está dictado
por la activación del protooncogén KRAS,
GTPasa (KRAS) y la señalización de la
pequeña familia Rac GTPasa 1 (RAC1), que
confiere una ventaja a las células envolventes
favoreciendo la regulación a la baja de la
miosina. En este contexto, recientemente se
ha demostrado que, en condiciones de
abstinencia de la glucosa, las células que
muestran actividad elevada de la proteína
quinasa activada por AMP (AMPK) sucumben
a la entosis, lo que subraya una posible
función de este proceso para la recuperación
de nutrientes por células con actividad AMPK
comparativamente más baja (que a priori son
metabólicamente más ajustadas).
Una vez englobadas, las células entóticas a
menudo se eliminan mediante una subrutina
RCD que se produce independientemente de
las proteínas y caspasas de BCL2, pero
depende (al menos en parte) de un proceso
específico autofagia conocido comúnmente
como fagocitosis asociada a LC3 (LAP). En
este contexto, algunos (pero no todos) los
componentes del aparato de macro-autofagia,
incluida la proteína 1 asociada a microtúbulos
de cadena ligera 3 beta (MAP1LC3B, más
conocida como LC3), 5 relacionados con la
autofagia (ATG5), ATG7 y fosfatidlinositol 3 -
la subunidad catalítica de la quinasa tipo 3
(PIK3C3, más conocida como VPS34) se
reclutan en el lado citosólico de las vesículas
entoticas que contienen células y promueven
su fusión con los lisosomas (en ausencia de
formación de autofagosomas de buena fe).
Eventualmente, la degradación lisosómica de
las células entóticas internalizadas genera
nutrientes que se recuperan al envolver las
células, a través de un mecanismo que, según
los informes, involucra fosfoinosítido cinasa,
dedo de zinc tipo FYVE que contiene
(PIKFYVE)
La muerte celular entótica se ha documentado
en varios neoplasmas humanos,
presumiblemente operando como un
mecanismo oncosupresor. Por lo tanto, la
abrogación de la entosis por un inhibidor
químico de ROCK favorece el crecimiento
independiente de anclaje de las células
malignas. Sin embargo, la invasión entótica
también se ha sugerido para favorecer la
aneuploidización y la poliploidización (que
promueven la progresión tumoral) a través de
un mecanismo que implica la falla de la
citocinesis de las células envolventes.
Recientemente se ha propuesto un papel
potencial para la entosis en el desarrollo y la
homeostasis tisular. Por lo tanto, en el curso
de la implantación de embriones de
mamíferos, las células del trofoblasto
supuestamente eliminan las células epiteliales
luminales uterinas tras la entosis. Además, los
espermatozoides de la tortuga china de
caparazón blando hibernando parecen estar
degradados dentro de la célula de Sertoli por
la muerte celular entótica. Se requieren
experimentos adicionales para dilucidar el
papel real de la entosis en la fisiopatología de
los organismos de mamíferos. Es importante
destacar que la entosis no siempre conduce a
la muerte de las células invasoras dentro del
lisosoma. Por lo tanto, al menos en algunas
circunstancias, las células entióticas
permanecen viables e incluso proliferan
dentro de las células huésped o al escapar.
Sobre la base de esta consideración,
proponemos definir la muerte celular entótica
como una forma de RCD que se origina a
partir de la internalización célula-en-celda
dependiente de actomiosina y que es
ejecutada por los lisosomas (Cuadro 1). En
ausencia de una determinación experimental
precisa del destino de la célula terminal, se
recomendó usar el término entosis para
referirse al proceso de internalización
solamente.
MUERTE CELULAR NETÓTICA
El término "muerte celular NETotic" se refiere
a un tipo de DCR bastante con troversial
inicialmente caracterizado en neutrófilos por
estar asociado con la extrusión de una malla
de fibras que contienen cromatina y histonas
unidas a proteínas granulares y citoplásmicas
conocidas como trampas extracelulares de
neutrófilos. (NET), un proceso comúnmente
denominado NETosis. Los NET, que se
producen en respuesta a diversos activadores
microbianos y estériles o tras la estimulación
de receptores específicos que incluyen (pero
no se limitan a) TLR, constituyen de facto una
plataforma extracelular estable para atrapar y
degradar microbios. Varios informes
demuestran que una fracción considerable de
los ácidos nucleicos contenidos en NET son
de origen mitocondrial, en lugar de nuclear.
Además de tener efectos antimicrobianos, los
NET contribuyen a la etiología de algunas
patologías humanas, como la diabetes y el
cáncer. Es de destacar que las estructuras
similares a NET pueden ser liberadas por
células distintas de los neutrófilos, incluidos
los mastocitos, los eosinófilos y los basófilos.
Es importante destacar que la extrusión de
NET per se no necesariamente da como
resultado la lisis celular.
Aunque los mecanismos moleculares precisos
que subyacen a la generación de NET no
están completamente dilucidados, tanto la
muerte celular de NETotic como la extrusión
de NET en ausencia de RCD parecen
depender de la actividad de las oxidasas de
NADPH. Se ha sugerido que la muerte celular
neta es el resultado de una vía de señalización
que involucra al protooncogén Raf-1, la serina
/ treonina quinasa (RAF1), las proteína
quinasas quinasas activadas por mitógeno
(MAP2K) y ERK2, culminando con la
activación de NADPH oxidasa y las
consiguientes ROS generación.De acuerdo
con este modelo, las ROS intracelulares
conducirían la muerte celular NETotic (1)
desencadenando la liberación de elastasa,
expresión de neutrófilos (ELANE) y
mieloperoxidasa (MPO) de los gránulos de
neutrófilos al citosol, seguido de su
translocación al núcleo, y (2) promoviendo la
actividad proteolítica dependiente de MPO de
ELANE. Una vez activado, el conjunto
citosólico de ELANE catalizaría la proteolisis
de la F-actina, seguido de un deterioro de la
dinámica del citoesqueleto. En paralelo, la
reserva nuclear de ELANE promovería la
degradación de las histonas (y posiblemente
de la envoltura nuclear) y, junto con la MPO,
la descondensación de la cromatina. Esto
culminaría con la extrusión de fibras de
cromatina entremezcladas con componentes
citoplasmáticos y nucleares, lo que finalmente
conduciría a la rotura de la membrana
plasmática y al RCD [736]. Dicho esto, los
hallazgos recientes indican que ROS conduce
la extrusión de NET por un mecanismo que
requiere un citoesqueleto intacto. Además,
ELANE es prescindible para la formación de
NET en el curso de la trombosis venosa
profunda (en ratones). La peptidil arginina
deiminasa 4 (PADI4, también conocida como
PAD4) también se ha propuesto para
participar en la dispersión de cromatina, pero
su participación real sigue siendo un tema de
debate y parece depender del estímulo
iniciador. Finalmente, se ha propuesto que la
muerte celular por NETotic dependa (al menos
en parte) en componentes del aparato
necróptico, basado en el hecho de que la
administración de inhibidores químicos RIPK1
o MLKL (es decir, Nec-1 o NSA,
respectivamente), así como el genotipo Ripk3
- / - parecía inhibir NET extrusión y lisis de
neutrófilos. Sin embargo, Ripk3 - / - neutrófilos
y neutrófilos expuestos a la NSA fueron
completamente competentes en la formación
de NET en otro estudio. Estos hallazgos
aparentemente contradictorios requieren
estudios adicionales para abordar la
contribución precisa de la necroptosis a la
extrusión de NET y la muerte celular NETotic.
Proponemos definir la muerte celular NETotic
como una modalidad dependiente de ROS de
RCD restringida a células de derivación
hematopoiética y asociada a la extrusión de
NET (Cuadro 1). Dicho esto, está claro que
NET puede formarse y extruirse mediante
neutrófilos, eosinófilos y basófilos
completamente viables. Por lo tanto, el NCCD
recomienda evitar el uso del término NETosis
cuando no hay evidencia experimental en
apoyo de la muerte celular (frente a extrusión
NET solamente). Además, desaconsejamos el
uso de términos alternativos posó para
describir este proceso, incluido ETosis.
MUERTE CELULAR DEPENDIENTE DE
LISOSOMA
La muerte celular dependiente de lisosomas
es una subrutina de RCD iniciada por
perturbaciones de la homeostasis intracelular
y demarcada por la permeabilización de las
membranas lisosomales. La muerte celular
dependiente de lisosomas es relevante para
varias afecciones fisiopatológicas, que
incluyen inflamación, remodelación tisular (por
ejemplo, involución de la glándula mamaria
después de la lactancia), envejecimiento,
neurodegeneración, trastornos
cardiovasculares y respuesta de patógenos
intracelulares. Además, un tipo de RCD que
recuerda mucho a la muerte celular
dependiente de lisosomas, que se ha
denominado "muerte de células germinales",
parece desempeñar un papel crítico en la
eliminación fisiológica de una fracción de
células germinales masculinas emergentes (al
menos en D Melanogaster).
A nivel bioquímico, la muerte celular
dependiente de lisosomas continúa con la
permeabilización de la membrana lisosómica
(LMP), lo que da como resultado la liberación
de los contenidos lisosomales, incluidas las
enzimas proteolíticas de la familia de la
catepsina, al citoplasma. Los mecanismos
moleculares que operan aguas arriba de LMP
no están completamente dilucidados. En
algunas circunstancias, la LMP parece
producirse corriente abajo de MOMP como
resultado de la señalización apoptótica,
constituyendo de facto un epifenómeno de la
apoptosis intrínseca. Sin embargo, en otros
contextos experimentales, los lisosomas se
permeabilizan antes de las mitocondrias, a
través de un mecanismo que implica
opcionalmente el reclutamiento de BAX a la
membrana lisosómica seguida de la
activación de su actividad de formación de
poros. Más comúnmente, los ROS
desempeñan un papel causal prominente en
LMP, no solo porque la producción luminal de
radicales hidroxilo impulsada por H2O2 por las
reacciones de Fenton desestabiliza la
membrana lisosómica tras la peroxidación
lipídica, sino también porque las ROS
favorecen la activación de los canales de Ca2
+ lisosómicos. La LMP primaria se ha
documentado in vitro en células que
responden a estímulos proapoptóticos
específicos, incluida la administración de
agentes lisosomotrópicos tales como L-leucil-
L-leucina metil éster, ciprofloxacina e
hidroxicloroquina, señalización TRAIL e
infección viral, así como en un animal modelo
de la enfermedad de Parkinso. The p53
effector DNA damage regulated autophagy
modulator 1 (DRAM1) provides a major
contribution to lysosome-dependent cell death
in HIV1-infected T cells by linking LMP to
MOMP. Additional LMP triggers include
lysosomotropic agents (e.g., sphingosine),
calpains, and ROS. Además, STAT3
promueve la muerte celular dependiente de
lisosomas durante la involución de la glándula
mamaria después de la lactancia, ya que
regula positivamente la expresión de
catepsina B (CTSB) y CTSL, mientras que
regula negativamente su inhibidor endógeno
inhibidor de peptidasa de serina (o cisteína),
clado A, miembro 3G (SERPINA3G; más
conocido como SPI2A)
Las catepsinas citosólicas usualmente
precipitan el RCD al catalizar la activación
proteolítica o inactivación de varios sustratos,
incluyendo BID, BAX, miembros de la familia
BCL2 antiapoptóticos y XIAP, por lo tanto
activan un circuito de amplificación de avance
de la cascada letal que involucra MOMP y
caspasas. Las catepsinas citosólicas
usualmente precipitan el RCD al catalizar la
activación proteolítica o inactivación de varios
sustratos, incluyendo BID, BAX, miembros de
la familia BCL2 antiapoptóticos y XIAP, por lo
tanto activan un circuito de amplificación de
avance de la cascada letal que involucra
MOMP y caspasas. En los neutrófilos
envejecidos, LMP también permite la
liberación de proteínasa 3 (PRTN3) a partir de
gránulos citotóxicos, donde promueve RCD
catalizando la activación proteolítica de
CASP3. Es de destacar que la muerte celular
dependiente de lisosomas no implica
necesariamente MOMP y caspasas, y no se
manifiesta necesariamente con un morfo tipo
apoptótico. Por otra parte, CTSL parece
desempeñar un papel clave en la regulación
de la adaptación autofágica vs RCD en las
células que responden a la LMP inducer
resveratrol. Estas observaciones sugieren que
LMP y muerte celular dependiente de
lisosomas están íntimamente interconectadas
con respuestas adaptativas al estrés y otras
subrutinas RCD.
La muerte celular dependiente de lisosomas
puede retrasarse in vitro e in vivo al inhibir la
LMP o bloquear la actividad de la catepsina a
través de medios farmacológicos o genéticos.
Las moléculas dirigidas a catepsina
comúnmente empleadas incluyen inhibidores
de proteasa endógenos (cistatinas y
serpinas), así como diversos agentes
farmacológicos específicos para catepsinas
de cisteína (por ejemplo, E64D y Ca-074-Me)
o catepsinas de aspartilo (por ejemplo,
pepstatina A). Además, en condiciones
fisiológicas, las membranas lisosómicas
pueden estabilizarse alterando el contenido
de colesterol lisosomal o potenciando la
actividad endógena del miembro 1A de la
familia de proteínas de choque térmico
(Hsp70) (HSPA1A, mejor conocido como
HSP70). De acuerdo con esta idea, la
administración de HSP70 recombinante o del
agente inductor de HSP70 arimiclomol
revierte las anomalías lisosómicas en células
así como en modelos murinos de diversos
trastornos de almacenamiento lisosómico. De
relevancia para la terapia del cáncer, las
células cancerosas pueden presentar una
mayor sensibilidad a los agentes
lisosomotrópicos y generalmente son
vulnerables a la LMP, lo que respalda el
desarrollo clínico de los agentes inductores de
LCD.
Proponemos definir la muerte celular
dependiente de lisosoma como una forma de
DCR demarcada por LMP primaria y
precipitada por catepsinas, con la
participación opcional de MOMP y caspasas
verdugo (cuadro 1).
MUERTE CELULAR DEPENDIENTE DE LA
AUTOFAGIA
La muerte celular dependiente de la autofagia
es un tipo de RCD que depende de la
maquinaria autofágica o sus componentes.
Las respuestas autofágicas competentes (que
se encuentran bajo una estricta regulación
transcripcional y postraduccional) con mayor
frecuencia operan en el centro de la
adaptación al estrés, por lo tanto, mediando
efectos citoprotectores (en lugar de
citotóxicos). Por lo tanto, bloquear la autofagia
con intervenciones farmacológicas o
genéticas generalmente acelera (en lugar de
retrasar) la desaparición de las células que
responden al estrés, y los defectos endógenos
permanentes o transitorios en la autofagia se
han asociado con letalidad embrionaria,
defectos del desarrollo y múltiples trastornos
patológicos, incluyendo (pero no limitado a)
neurodegeneración, cáncer y trastornos
cardiovasculares. Sin embargo, en una serie
de entornos de desarrollo y fisiopatológicos, la
maquinaria molecular para la autofagia
contribuye etiológicamente a la muerte
celular. Por lo tanto, el término muerte celular
dependiente de autofagia no se refiere a
configuraciones en las que el aparato
autofágico (o sus componentes) se activa
junto con RCD (en lugar de precipitarlo) o
favorece el acoplamiento de otras
modalidades de RCD, como (1) ferroptosis,
que se promueve por la degradación
autofágica de la ferritina (ferritinophagy); (2)
apoptosis extrínseca impulsada por FAS, que
se ve potenciada por la degradación
autofágica de la proteína tirosina fosfatasa, no
receptor tipo 13 (PTPN13); mejor conocido
como (FAP1), y (3) necroptosis, que se ve
favorecida por una función de andamiaje de
necrosomas del aparato de autofagia, así
como por la degradación autofágica de c-IAP1
y c-IAP2.
La importancia genética y fisiopatológica de la
muerte celular dependiente de la autofagia
está ahora bien establecida. Por lo tanto,
mientras que la inactivación genética de las
caspasas en el intestino medio del desarrollo
de D. melanogaster no tiene consecuencias,
las mutaciones o deleciones en los genes
esenciales relacionados con la autofagia (Atg)
suprimen la degradación del tejido del
intestino medio. De manera similar, la
eliminación completa de las glándulas
salivales larvales de las larvas de D.
melanogaster que experimentan
metamorfosis requiere la maquinaria tanto
apoptótica como autofágica. En ambos
escenarios de desarrollo, la muerte celular
dependiente de autofagia está precedida por
detención del crecimiento y está controlada
por ecdisona, una hormona esteroidea que se
requiere críticamente en Drosophila para
experimentar la transición de larva a pupa y
metamorfosis posterior en una mosca adulta.
La maquinaria autofágica también precipita
RCD de neuronas de células germinales y
ventrales durante el desarrollo de C. elegans,
y quizás contribuye al desarrollo embrionario
en mamíferos, como sugiere el hecho de que
la ablación Atg5 en ratones con deficiencia de
apoptosis (es decir, Bax - / - Bak - / -) retrasa
aún más el aclaramiento interdigital de la red,
agrava las anormalidades cerebrales (al
menos en C57BL / 6 antecedentes), deteriora
la selección negativa de timocitos
autorreactivos y aumenta la resistencia de
algunos tipos de células a múltiples factores
de estrés.
Es de destacar que la maquinaria molecular
de la muerte celular autofagia dependiente y
la autofagia adaptativa presentan algunas
diferencias (al menos en D. melanogaster).
Por ejemplo, la degradación dependiente de la
autofagia del tejido del intestino medio
procede independientemente de Atg7, Atg3 y
de otros muchos genes Atg necesarios para la
autofagia inducida por la inanición en el
cuerpo graso, pero depende de la enzima 1
que activa la ubiquitina (Uba1). Además, la
degradación del desarrollo de las glándulas
salivales de Drosophila por autofagia requiere
la actividad de: (1) Utx histona desmetilasa
(Utx), que contribuye a la regulación
transcripcional de la apoptosis y genes de
autofagia; (2) miR-14, que activa
específicamente la muerte celular
dependiente de la autofagia mediante la
modulación de múltiples rutas de señalización
dirigidas por IP3 al dirigirse a inositol 1,4,5-
trifosfato quinasa (IP3K2); (3) proteína tipo A
Ras (Rala), que enciende la muerte celular
dependiente de autofagia tras la activación de
Notch; (4) Draper (Drpr), que se cree que
promueve la absorción de las células de las
glándulas salivales moribundas; y (5)
macroglobulina relacionada con el
complemento (Mcr), que promueve la muerte
celular dependiente de autofagia, al menos en
parte, al desencadenar la señalización de
Drpr. Es de destacar que los mecanismos
apoptóticos y autofágicos están altamente
interconectado durante la muerte celular del
desarrollo. Por lo tanto, durante la
oosogénesis de Drosophila, las proteínas
apoptóticas, incluidas las caspasas efectoras,
regulan la muerte celular dependiente de la
autofagia, mientras que el aparato autofágico
actúa aguas arriba de la fragmentación del
ADN promoviendo la degradación de la IAP y
la activación de la caspasa. En este contexto,
el aparato autofágico también impulsa la
eliminación del desarrollo de las células
apoptóticas.
La muerte celular dependiente de la autofagia
también parece contribuir a la patogénesis de
algunos trastornos humanos. La deleción
neuronal específica de Atg7 confiere
neuroprotección robusta en un modelo murino
de hipoxiaisquemia neonatal severa mediante
la prevención de RCD neuronal. En líneas
similares, abolir la autofagia por medios
farmacológicos o agotar genéticamente ATG5
o BECN1, previene la neurotoxicidad de la
cocaína en las neuronas cultivadas.
Recientemente, una pantalla basada en RNAi
de todo el signaloma identificó a la
glucosilceramidasa beta (GBA) como un
regulador positivo de la muerte celular
dependiente de autofagia en células
humanas, presumiblemente relacionado con
la capacidad de GBA para convertir la
glucosilceramida en ceramida (y glucosa). Sin
embargo, se requiere una investigación
adicional para dilucidar los mecanismos
moleculares por los que GBA conduce la
muerte celular dependiente de autofagia.
Finalmente, el largo factor no promotor de la
autofagia del ARN (APF) no codificante ha
sido implicado en la patogénesis del infarto de
miocardio debido a su capacidad de promover
indirectamente la expresión de ATG7. La
autosis es una variante específica de la
muerte celular dependiente de la autofagia
que depende de la membrana plasmática Na
+ / K + -ATPasa. Corroborando la relevancia
fisiológica de este proceso, la administración
de inhibidores de Na + / K + -ATPasa tales
como glucósidos cardíacos, confiere
neuroprotección en un modelo de hipoxia-
isquemia en ratas.
En resumen, la muerte celular dependiente de
autofagia se puede definir como una forma de
RCD que depende de la maquinaria
autofágica (o sus componentes) (Recuadro 1).
Para evitar confusiones, este término debe
evitarse consistentemente (1) en ausencia de
pruebas experimentales robustas que unan
mecánicamente el RCD a (idealmente más de
uno) componentes del aparato de autofagia,
así como (2) cuando las manipulaciones
farmacológicas o genéticas de la molécula
maquinaria para el impacto de la autofagia en
otras subrutinas RCD.
MUERTE CELULAR INMUNOGÉNICA
La muerte celular inmunogénica (ICD) es una
forma funcionalmente peculiar de RCD que es
suficiente para activar una respuesta inmune
adaptativa específica para antígenos
endógenos (celulares) o exógenos (virales)
expresados por células moribundas. El ICD
puede iniciarse mediante un conjunto
relativamente restringido de estímulos, que
incluyen infección viral, algunos productos
quimioterapéuticos aprobados por la FDA (p.
Ej., Antraciclinas, bortezomib), formas
específicas de radioterapia y terapia
fotodinámica basada en hipericina. Estos
agentes son capaces de estimular la
liberación oportuna de una serie de DAMP,
cuyo reconocimiento por PRR expresados por
componentes innatos y adaptativos del
sistema inmune advierte al organismo de una
situación de peligro, dando como resultado la
provocación de una respuesta inmune
generalmente asociada con el establecimiento
de memoria inmunológica. Hasta el momento,
seis DAMP se han relacionado
mecánicamente con la percepción de RCD
como inmunogénica: (1) calreticulina (CALR),
(2) ATP, (3) caja de grupo de alta movilidad 1
(HMGB1), (4) tipo IFN, (5) ácidos nucleicos
derivados de células cancerígenas, y (6)
anexina A1 (ANXA1).
En el transcurso del ICD, CALR se traslada del
ER, donde está involucrado en el
mantenimiento de la homeostasis del Ca2 +,
al folíolo externo de la membrana plasmática.
La translocación de CAL se produce como un
evento asociado temprano de ICD, es decir,
ocurre antes de la exposición a PS y está
mediado (al menos en el caso de ICD dirigido
por quimioterapia) por tres módulos de
transducción de señales secuenciales: (1) un
módulo de estrés de ER, que implica la
fosforilación de la subunidad alfa 2 del factor
de iniciación de la traducción eucariota
(EIF2S1; se lo conoce como eIF2α) por el
factor 2 de iniciación de la traducción
eucariótico (EIF2AK3, mejor conocido como
PERK) acoplado a un bloque en la síntesis de
proteínas; (2) un módulo apoptótico, que
implica la escisión dependiente de CASP8 de
la proteína 31 asociada al receptor de células
B (BCAP31), BAX y BAK; y (3) un módulo de
exocitosis, que implica el transporte
anterógrado de CALR desde el RE a la
membrana plasmática a través del aparato de
Golgi en función de la proteína de membrana
asociada a vesículas 1 (VAMP1) y la proteína
asociada a sinaptosomas 25 (SNAP25).
Los defectos en cualquier nivel de esta
cascada comprometen la inmunogenicidad de
RCD in vivo. En la mayoría de los casos de
ICD, CALR se transloca a la superficie de la
célula junto con la proteína disulfuro
isomerasa, miembro de la familia A 3 (PDIA3,
más conocido como ERp57). Las funciones
CALR expuestas a la superficie celular (1)
como una señal de "comerme" para la
fagocitosis por macrófagos, neutrófilos y DC,
que se requiere para la posterior presentación
cruzada de antígenos a las células T
citotóxicas; y (2) como desencadenante del
cebado de células TH17. En línea con un
papel clave de CALR en la inmunogenicidad
de RCD, la caída mediada por RNAi de CALR
así como los defectos naturales en la vía de
exposición CALR anulan la capacidad de las
células cancerígenas moribundas
sucumbiendo a antraciclinas para establecer
inmunidad protectora en ratones, mientras
que la provisión exógena de CALR
recombinante confiere propiedades
inmunogénicas a variantes de RCD no
inmunogénicas. Es de destacar que en
algunas instancias preclínicas y clínicas, la
actividad de CALR expuesta a la superficie es
antagonizada por CD47, que funciona como
una señal de "no comerme" ya que inhibe la
fagocitosis por DC y macrófagos tras la
interacción con la proteína reguladora de
señal alfa (SIRPA). En consecuencia,
mientras que la exposición CALR tiene un
valor pronóstico positivo en pacientes con
leucemia mieloide linda (AML), el aumento de
los niveles de CD47 en la superficie de las
células malignas se correlaciona con un
pronóstico sombrío en sujetos con AML,
carcinoma esofágico y cáncer varían. Dicho
esto, parece ser necesario CD47 para la
captación fagocítica eficaz de algunas líneas
de células murinas sometidas a RCD. Las
razones que subyacen a esta aparente
discrepancia aún no se han dilucidado.
El ATP extracelular no solo funciona como una
señal "find-me" para macrófagos y motivo CXC ligando de quimiocina 10
precursores de DC al unirse a receptor P
purinérgico P2Y acoplado a proteína G
(P2RY2), sino que también media efectos
inmunoestimuladores activando el
inflamasoma canónico al unirse a P2RX7. En
el contexto del ICD, el ATP se libera a través
de una cascada de eventos que ocurren
después de la activación de las caspasas y
que involucran: (1) la acumulación autofagia
de ATP dentro de los autolysosomes (los
orgánulos que se forman por la fusión de
autophagosomes o amphisomes con
lysosomes), ( 2) la relocalización de la
proteína 1 de membrana asociada a
lisosomas (LAMP1) a la membrana
plasmática, (3) la formación de ampollas
celulares dependientes de ROCK1 y (4) la
apertura de los canales PANX1. En
consecuencia, se requiere la autofagia
premortem para la liberación óptima de ATP
en el curso de ICD, y por lo tanto para la
muerte celular inducida por varios (pero no
todos) los inductores de ICD para ser
percibidos como inmunogénicos. Además, la
sobreexpresión de ectoenzimas ecténicos
trifosfato difosfohidrolasa 1 (ENTPD1, mejor
conocido como CD39) y 5 'nucleotidasa, ecto
(NT5E, más conocido como CD73) reduce de
forma eficiente los niveles de ATP extracelular
a favor de la acumulación de adenosina,
aboliendo así la inmunogenicidad de la muerte
celular. El CD39 se expresa a altos niveles en
la superficie de las células inmunes dotadas
de propiedades inmunosupresoras, incluidas
las células reguladoras T (TREG) CD4 +
CD25 + FOXP3 +, y esto promueve la
progresión y propagación del tumor.
El IFN tipo I es producido por células
cancerígenas que sucumben a ICD por un
mecanismo que implica la detección de
dsRNA endógeno por TLR3, o ADN
bicatenario (dsDNA) por Cgas. Además de
mediar amplios efectos inmunoestimuladores
sobre las células inmunes que expresan
IFNAR1, el IFN tipo I activa una vía de
señalización autocrina / paracrina en células
malignas, que culmina con la expresión de un
espectro de genes estimulados con IFN (ISG)
que incluye el quimioatrayente para células T
(CXCL10). Por consiguiente, los defectos en
la detección de dsRNA o dsDNA se imponen
mediante intervenciones genéticas, incluido el
genotipo Tlr3 - / - y la sobreexpresión guiada
por transgén de la exonucleasa 1 reparadora
principal (TREX1), así como la eliminación de
Ifnar1 del cáncer o células huésped, abolir la
inmunogenicidad de la muerte celular
desencadenada por varios inductores de DAI.
Es de destacar que los ácidos nucleicos
derivados de células cancerígenas no median
en las funciones inmunoestimuladoras solo
por circuitos autocrinos / paracrinos. Más bien,
las células cancerígenas que sucumben a ICD
liberan moléculas de dsDNA y RNA que
pueden ser absorbidas eficientemente por
DC, neutrófilos y macrófagos, dando como
resultado la activación de una potente
respuesta de IFN de tipo I impulsada por
múltiples TLR y la vía GASSTING. De acuerdo
con esta noción, la degradación enzimática de
los ácidos nucleicos extracelulares limita
considerablemente la inmunogenicidad de los
RCD. Los mecanismos moleculares
subyacentes a la liberación asociada a ICD de
HMGB1 y ANXA1 aún no se han dilucidado
por completo. Una vez secretada, la proteína
HMGB1 de unión a cromatina que no es
histona media potentes efectos
proinflamatorios al unirse a TLR2, TLR4 y
receptor específico de glicosilación del
producto final (AGER, más conocido como
RAGE), aunque TLR4 parece ser el único
receptor HMGB1 relevante percibir la muerte
celular como inmunogénica. En particular, la
ligación de HGMB1 a TLR4 en las CD
promueve el procesamiento de antígenos y la
presentación cruzada, pero no induce la
maduración de DC, que es principalmente
timulada por RAGE. Dicho esto, debe tenerse
en cuenta que las actividades biológicas de
HMGB1 pueden cambiar de proinflamatorias a
antiinflamatorias dependiendo de múltiples
variables, incluido su estado de oxidación.
ANXA1 extracelular actúa según se informa
como un DAMP y apoya la activación de las
respuestas inmunes adaptativas mediante la
participación del receptor peptídico de formilo
1 (FPR1) en las CD. De acuerdo con estas
observaciones, el RCD no se percibe como
inmunogénico cuando las células cancerosas
se agotan de HMGB1 o ANXA1, así como
cuando el huésped carece de TLR4 o FPR1.
Cabe destacar que la inmunogenicidad de los
RCD está fuertemente suprimida por algunas
caspasas, especialmente CASP8 y CASP3,
por una variedad de mecanismos. Estos
incluyen: (1) la capacidad prominente de
CASP8 para inhibir la necroptosis (ver arriba),
que generalmente se asocia con el
establecimiento de respuestas inflamatorias
robustas relacionadas con la activación de
NF-κB; (2) la capacidad de CASP3 para
conducir la exposición al PS (ver arriba), que
generalmente respalda la eliminación
fagocítica de las células muertas y muertas
mientras proporciona señales
antiinflamatorias a los macrófagos y los CD (3)
la capacidad del CASP3 para estimular la
secreción de prostaglandinas E2 de células
moribundas, que tiene fuertes efectos
inmunosupresores; y (4) la inhibición
dependiente de CASP3 de la señalización de
IFN de tipo I provocada por la liberación de
ADN mitocondrial en MOMP. Estas
observaciones sugieren que los inhibidores de
caspasa específicos pueden aprovecharse
para potenciar de manera potente la
inmunogenicidad de RCD.
El NCCD propone definir ICD como un tipo de
RCD que es suficiente para activar una
respuesta inmune adaptativa en huéspedes
inmunocompetentes (Cuadro 1).
PROCESOS NO LETALES
La maquinaria molecular para RCD está
involucrada en varios procesos que han sido
considerados erróneamente como casos bona
fide de muerte celular en las últimas décadas,
incluyendo senescencia celular, catástrofe
mitótica y múltiples casos de diferenciación
terminal.
SENESCENCIA CELULAR
El término "senescencia celular" se refiere a
un proceso fisiopatológico por el cual las
células pierden permanentemente su
capacidad proliferativa mientras permanecen
viables y metabólicamente activas. Las
células senescentes exhiben rasgos
morfológicos específicos que incluyen
aplanamiento, vacuolización intracelular,
agrandamiento celular / nuclear y estructura
de cromatina alterada. A nivel bioquímico, la
senescencia celular a menudo se caracteriza
por: (1) aumento de la actividad lisosomal
galactosidasa beta 1 (GLB1); (2) inhibición de
múltiples quinasas dependientes de ciclina
(CDK) y la desfosforilación consiguiente de
varios miembros de la familia de proteínas del
retinoblastoma (RB), incluido el correpresor
transcripcional RB 1 (RB1), correpresor
transcripcional RB como 1 (RB1L, más
conocido como p107) y RB2L (mejor conocido
como p130): regulación al alza inmediata del
inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina
1A (CDKN1A, más conocido como p21) [936]
y / o los productos CDKN2A p16 (un potente
inhibidor de CDK4 y CDK6) y ARF (un
activador de p53 ); (3) ausencia de
marcadores de proliferación, tales como
marcador de proliferación Ki-67 (MKI67); (4)
activación de la maquinaria DDR,
generalmente como consecuencia de la
erosión de los telómeros; y (5) presencia de
los llamados "focos heterocromáticos
asociados a la senescencia" (SAHF). Las
células senescentes secretan una variedad de
citoquinas inmunomoduladoras y mitogénicas,
quimiocinas, crecimiento y MMP. Aunque
dicho fenotipo secretor asociado a la
senescencia (SASP) parece estar involucrado
en la eliminación inmunológica de células
senescentes, también afecta la biología de las
células vecinas con un potencial proliferativo
intacto (y esto tiene implicaciones importantes
para los agentes anticancerígenos inductores
de la senescencia).
Las ondas de senescencia celular (seguidas
por RCD) parecen contribuir a la
embriogénesis del desarrollo (aunque de
manera no precisa) así como a múltiples
procesos fisiopatológicos en el adulto, incluida
la reparación de tejidos y regeneración,
inmunidad, preservación del compartimento
de células madre y oncosupresión. En
particular, esta senescencia celular a prueba
de fallas se produce según se informa en
respuesta a (1) eventos potencialmente
carcinogénicos, incluida la activación de
oncogenes o la inactivación del gen
oncosupresor; y (2) varios insultos celulares
subletales, que incluyen acortamiento de los
telómeros, daño en el ADN, disfunción
mitocondrial, replicación defectuosa
estancada del ADN y desafíos epigenéticos,
lisosómicos, mecánicos, metabólicos,
mitóticos, oxidativos o proteotóxicos. La
evidencia de montaje, sin embargo, indica que
las células senescentes se acumulan durante
el envejecimiento del organismo debido a su
mayor generación unida a la depuración
ineficiente. En consecuencia, la senescencia
celular crónica ha estado involucrada en el
envejecimiento natural, el acortamiento de la
vida, el deterioro del tejido y la etiología de
múltiples enfermedades relacionadas con la
edad, que incluyen la aterosclerosis y la
osteoartritis. Además, las células senescentes
se han visto implicadas en los efectos
adversos de algunos regímenes
quimioterapéuticos, así como en la
recurrencia de neoplasmas específicos, al
menos en ratones. Por lo tanto, la
senescencia se destaca como un objetivo
terapéutico atractivo para prolongar la vida
sana. En este contexto, un régimen senolítico
prometedor se basa en la elevada
vulnerabilidad de las células senescentes a
los inhibidores de los miembros de la familia
prosurvival BCL2 (en particular BCL-XL), lo
que refleja la dependencia elevada de las
células senescentes en estas proteínas para
la supervivencia. El papel de la senescencia
celular aguda en múltiples procesos
fisiológicos, sin embargo, arroja dudas sobre
la factibilidad real de este enfoque.
Por estas razones, la senescencia celular no
se puede considerar como una forma de RCD
(cuadro 1).
CATÁSTROFE MITÓTICA
La catástrofe mitótica es un mecanismo
oncosupresor regulado que impide la
proliferación y / o supervivencia de células que
no pueden completar la mitosis debido a un
daño extenso del ADN, problemas con la
maquinaria mitótica y / o falla de los puntos de
control mitótico. La catástrofe mitótica se
define morfológicamente por cambios
nucleares únicos, que incluyen
multinucleación y macronucleación (dos
posibles consecuencias de la mala
segregación cromosómica), así como
micronucleación (tal vez como resultado de la
/ persistencia de cromosomas retrasados o
excéntricos).
Los defectos mitóticos pueden derivarse de:
(1) fuentes exógenas, que incluyen un gran
panel de xenobióticos que alteran la
replicación del ADN, los puntos de control del
ciclo celular, la segregación cromosómica y /
o la dinámica microtubular; o (2) fuentes
endógenas, como altos niveles de estrés de
replicación del ADN o estrés mitótico causado
por una ploidía aberrante o por actividad de
expresión desregulada de factores implicados
en la replicación del ADN o la segregación
cromosómica. Las alteraciones primarias que
conducen las mitosis catastróficas pueden
originarse en otras fases de los ciclos
celulares, incluida la Fase (por ejemplo, una
entrada prematura en la mitosis causada por
la falla del punto de control de la fase intra-S).
Los mecanismos moleculares precisos a
través de los cuales se detectan las
alteraciones mitóticas y desencadenan una
cascada de catástrofes mitóticas no están
claros, pero presumiblemente implican p53 (al
menos en muchos tipos de células). Un gran
cuerpo de evidencia experimental sugiere
que, al menos en escenarios experimentales
específicos, la catástrofe mitótica se precipita
por una señal de transducción. La cascada
que depende de la activación de CASP2, a
menudo (pero no siempre) desencadenando
una variante de la apoptosis intrínseca
regulada por la familia de proteínas BCL2 y
demarcado por MOMP. En línea con un rol
clave para CASP2 en el control del dominio
mitótico, la médula ósea de los ratones Casp2
- / - acumula células aneuploides con el
envejecimiento, y las células malignas Casp2
- / - exhiben niveles aumentados de
aneuploidía en comparación con sus
contrapartes de tipo salvaje. Por otra parte, los
ratones Casp2 - / - son más susceptibles que
sus compañeros de camada de tipo salvaje a
la oncogénesis en una variedad de entornos
experimentales. Sin embargo, en ausencia de
p53, los defectos mitóticos parecen conducir
una variante necrótica de RCD
independientemente de la señalización de
CASP2 (al menos en algunos ajustes).
Cabe destacar que el destino final de las
células que sufren catástrofes mitóticas
parece estar dictado (al menos en parte) por
el tiempo pasado bajo arresto mitótico y su
capacidad para salirse de mitosis aberrantes.
Así, mientras que las células detenidas en
mitosis aberrantes durante períodos
prolongados a menudo sufren apoptosis
intrínseca, las células que escapan del
bloqueo mitótico y alcanzan una fase
intermedia pueden experimentar un destino
similar, entrar en senescencia celular
activando puntos de control específicos del
ciclo celular mediados por p53 y / o
señalización Hippo o simplemente ser
superado por sus contrapartes en
proliferación.
Es importante destacar que la abrogación de
la catástrofe mitótica es un evento clave
durante la transformación y progresión
neoplásica, principalmente porque permite la
generación y / o supervivencia de células
poliploides y aneuploides, mientras que las
células cancerosas muestran una mayor
sensibilidad a los defectos mitóticos. Sin
embargo, la catástrofe mitótica parece
constituir un importante mecanismo de acción
de los agentes quimioterapéuticos contra el
cáncer, reflejando principalmente la mayor
resistencia de las células neoplásicas a la
inducción de la apoptosis intrínseca.
Además, los datos recientes indican que las
células cancerosas que escapan de la
catástrofe mitótica promueven de manera
eficiente la secreción de IFN tipo I después de
la detección del ADN citosólico por c GAS, lo
que puede dar lugar a su eliminación por
mecanismos inmunológica.
La última observación presta más apoyo a la
noción de que la homeostasis extracelular en
organismos mamíferos se conserva mediante
una plétora de mecanismos que se inician en
el nivel intrínseco de la célula, pero solo opere
una vez que la homeostasis celular se vea
comprometida. Dado que la catástrofe
mitótica no siempre resulta en RCD (pero
también puede conducir a la senescencia
celular), no puede considerarse como una
forma de RCD per se. Proponemos el uso del
término muerte mitótica para indicar la
variante específica de DCR (la apoptosis
intrínseca más frecuente) impulsada por
cataratas mitóticas. Estrofa (Cuadro 1).
DIFERENCIACIÓN TERMINAL Y OTROS
Múltiples componentes de las cascadas de
transducción de señales que regulan o
precipitan RCD están involucradas en la
diferenciación terminal de una variedad de
tipos de células, que incluyen (pero
presumiblemente no se limitan a) neuronas,
granulocitos, megacariocitos, eritroblastos ,
osteoclastos, espermatozoides células,
miocitos esqueléticos, células de lente y el
epitelio queratinizado . El último proceso, que
se conoce comúnmente como cornificación (o
queratinización) y se basa críticamente en
CASP14] y múltiple las isoformas de
transglutaminasas , se han considerado
durante mucho tiempo como una forma de
PCD . Sin embargo, el NCCD sugiere
mantener la PCD y la diferenciación terminal
conceptualmente bien discriminadas entre sí.
De hecho, las células muertas se eliminan (y
por lo tanto dejan de tener una función) en el
curso de la PCD. Por el contrario, cuando la
diferenciación terminal implica la muerte
celular, como en el caso de la cornificación,
las células muertas se convierten en parte
integral de un tejido (y por lo tanto median en
una función fisiológica específica).
En líneas similares, el NCCD desalienta el uso
del término eryptosis, que se ha acuñado para
indicar la desaparición de los eritrocitos
expuestos al estrés. Independientemente de
la relevancia incuestionable de este proceso
para la fisiopatología humana], es
extremadamente complejo desde el punto de
vista conceptual definir la muerte de entidades
que en condiciones fisiológicas existen en un
estado discutible entre la vida y la muerte
(como los eritrocitos y virus).
OBSERVACIONES FINALES
Como se ha discutido anteriormente, el RCD
juega un papel importante en el desarrollo, la
homeostasis tisular, la inflamación, la
inmunidad y múltiples afecciones
fisiopatológicas. Por un lado, el RCD
constituye una etiología primaria determinante
en enfermedades asociadas con la pérdida
irreversible de tejidos posmitóticos (por
ejemplo, infarto de miocardio,
neurodegeneración).
Por otro lado, los defectos en las cascadas de
señalización que precipitan los DCR se
asocian con patologías caracterizadas por la
expansión o acumulación celular no
controlada (p. Ej., trastornos autoinmunes,
cáncer). Por lo tanto, RCD se destaca como
un importante objetivo terapéutico para el
tratamiento de trastornos humanos múltiples.
En las últimas dos décadas se han realizado
enormes esfuerzos dedicado al desarrollo de
estrategias citoprotectoras destinadas a
interrumpir la señalización de RCD después
del inicio del proceso (un escenario
clínicamente relevante para la mayoría de
isquemia, trastornos), con resultados
relativamente engañosos (a pesar de los
múltiples ensayos clínicos, ningún fármaco
basado en este concepto ha sido aprobado
para su uso en seres humanos por agencias
reguladoras).
¿Por qué la activación específica de RCD (que
no debe confundirse con la alteración de las
funciones celulares normales, aunque esto
también puede conducir a RCD) aparece
como un objetivo clínico mucho más simple
que su inhibición?
Además de los problemas potenciales
relacionados con la farmacocinética y
farmacodinámica de los compuestos
probados hasta ahora, esta discrepancia
probablemente refleja la alta interconectividad
de los módulos de señalización implicados en
el control de RCD en organismos mamíferos
(que ha comenzado a surgir recientemente).
Por lo tanto, al inclinar la balanza hacia RCD
aparece como una tarea relativamente fácil,
bloqueándola una vez que se ha pasado un
punto de no retorno hasta ahora mal definido
puede requerir la inhibición simultánea de
varios módulos de transducción de señales, y
por lo tanto puede ser difícilmente alcanzable
(figura 2). Por otra parte, la comunidad se ha
centrado durante mucho tiempo en enzimas
específicas que se pensaba que tienen un
papel causal clave en la ejecución de RCD,
pero en una mayoría de escenarios solo
parece acelerar (en lugar de determinar
causalmente) el fallecimiento celular (por
ejemplo, caspasas).

Por el contrario, el inhibidor de BCL2

venetoclax está actualmente disponible para
el tratamiento de pacientes con LLC que no
obtienen beneficio clínico de terapias
convencionales [1046], y varias otras
moléculas con un similar el mecanismo de
acción se encuentra actualmente en
desarrollo clínico (fuente
https://clinicaltrials.gov/).
Fig 2. Interconectividad de la muerte
celular desde una perspectiva terapéutica.
Sobre la base del supuesto de que cada
subrutina de muerte celular regulada (RCD)
funcionaría de manera prácticamente aislada
(a), se han dedicado considerables esfuerzos
al desarrollo de agentes farmacológicos que
interrumpirían el RCD operando en un único
módulo de transducción de señales (b).Ahora
está claro que los mecanismos moleculares
subyacentes a distintas modalidades de RCD
muestran un grado considerable de
interconectividad (c). Esto implica que no se
puede lograr una citoprotección robusta
dirigiendo una sola subrutina RCD, sino solo
con la inhibición simultánea de múltiples
módulos de transducción de señales
(asumiendo que estos módulos son la causa
real de muerte celular, y no simples
epifenómenos de señalización RCD (d).
De hecho, la muerte celular en todas sus
formas (incluida la ACD) está asociada
finalmente con una crisis bioenergética y
redox que puede constituir su causa real. En
este escenario, la verdadera citoprotección
solo puede lograrse mediante intervenciones
que contrarrestan dicha crisis o las causas (en
lugar de los epifenómenos) de la misma.
Curiosamente, una de las consecuencias más
rápidas de la depleción de ATP
potencialmente letal en él disco es una
desorganización nucleolar abrupta acoplado a
un bloqueo irreversible en el ARN ribosomal y
la síntesis de ADN.
Un proceso similar también ha sido observado
en células de mamíferos y plantas que se
dirigen a múltiples formas de RCD, lo que tal
vez sugiere que el estrés nucleolar juega un
papel clave en la ejecución de RCD a través
de diferentes especie. Esta posibilidad, sin
embargo, queda por abordar formalmente.
Recientemente, ha quedado claro que la
modalidad a través de la cual una célula
individual sucumbe al estrés puede tener un
impacto importante sobre cómo el RCD afecta
el microambiente local y sistémico.
Esto abrió una perspectiva terapéutica
completamente nueva para el campo,
involucrando dos enfoques principales: (1) el
desarrollo de enfoques dirigidos a cambiar la
modalidad de RCD, en lugar de aumentar o
limitar la incidencia de RCD (que puede ser
problemático en ambas direcciones); y (2) el
desarrollo de agentes que interceptan DAMP
o regulan las vías de señalización
dependientes de DAMP [20 1057-1059]. En
este contexto, ACD también puede constituir
un objetivo terapéutico.
De hecho, aunque la ACD ocurre en un
número limitado de trastornos humanos (por
ejemplo, traumatismos, quemaduras graves) y
no puede ser inhibida farmacológicamente
(por definición), las moléculas liberadas por
las células sometidas a ACD pueden
bloquearse (al menos teóricamente) con
intervenciones específicas, esto puede tener
un impacto positivo en el resultado de la
enfermedad a largo plazo.
Estas observaciones ejemplifican la
complejidad de dirigir el RCD primario o ACD
(la muerte de células que sucumben a
perturbaciones ambientales primarias), RCD
secundaria (la muerte de células que
sucumben a las condiciones
microambientales establecidas, directa o
indirectamente, por células vecinas sometidas
a RCD primario o ACD) y señalización DAMP
impulsada por RCD o ACD para fines
terapéuticos (Fig 3).
Fig. 3 Aspectos causales vs. accesorios de
la muerte celular desde una perspectiva
terapéutica.
Las células expuestas a condiciones
ambientales muy duras se desmontan de
manera prácticamente instantánea e eventos que siguen a la muerte celular
incontrolable, un proceso que se conoce como
muerte celular accidental (ACD). Por el
contrario, las perturbaciones relativamente
leves de origen exógeno o endógeno
promueven respuestas de estrés adaptativo
dirigidas a la restauración de la homeostasis
celular. Si tales respuestas fallan, las células
generalmente activan uno o más de múltiples
módulos de transducción de señales
altamente interconectados que precipitan la
muerte celular regulada (RCD). La ACD no
puede retrasarse mediante intervenciones
farmacológicas o genéticas, y la mayoría (si
no todas) las estrategias concebidas hasta
ahora para bloquear el RCD en organismos
mamíferos no lo hacen eficientemente, al
menos en parte debido a la elevada
interconectividad del proceso.
Por el contrario, algunos agentes que
promueven de hecho el RCD centrándose
principalmente en la maquinaria molecular
subyacente (en lugar de enfocarse en las
funciones celulares normales) ya están
disponibles para su uso en la clínica. Los
primaria -incluyendo una onda secundaria de
RCD en células vecinas establecidas (directa
o indirectamente) por moléculas liberadas de
las células que sucumben al insulto primario,
así como también por señalización del patrón
molecular asociado al peligro (DAMP) también
pueden ser objetivos para intervenciones
farmacológicas. Finalmente, aunque la
alteración cuantitativa del porcentaje de
células que sucumben al RCD primario sigue
siendo difícil (especialmente cuando se ha
traspasado un punto de no retorno del proceso
hasta ahora mal definido), favorecer el uso de
módulos de señalización específicos sobre
otros puede tener efectos prominentes en el
resultado de la enfermedad a largo plazo.
En conclusión, el objetivo del RCD es muy
prometedor para el tratamiento de varios
trastornos humanos y se están haciendo
esfuerzos considerables para generar
moduladores de RCD para uso clínico, pero se
requieren estudios adicionales para idear las
estrategias más eficientes en ese sentido.
Confiamos en que un uso correcto pero
flexible de los términos relacionados con el
RCD definidos en este documento respaldará
firmemente el progreso del campo hacia un
objetivo tan ambicioso.
Para evitar confusiones, será importante
incorporar neologismos en la literatura
científica solo para subrutinas RCD
novedosas que dependan claramente de
módulos de transducción de señales y
mecanismos efectores que muestran poca o
ninguna superposición con tipos conocidos de
RCD. En esta línea, creemos que los términos
que se refieren principalmente a las
características morfológicas de la
desaparición celular y / o que indican una
superposición mecanística considerable con
formas de DCR bien establecidas, como
autosquisis, deben descartarse. El NCCD
conjetura que esta es la única manera para
que los nuevos términos relacionados con la
muerte celular adquieran una utilidad genuina
y sean ampliamente adoptados por la
comunidad científica.