249293205. BIOQUIMICA CLINICA Y PATOLOGIA MOLECULAR.

Prácticas Laboratorio. Sesión 1ª

Práctica 1ª: ELABORACIÓN DE UN CONTROL DE GLUCOSA DENTRO

DEL PROGRAMA DE CALIDAD INTERNA DE UN LABORATORIO

Fundamento de la actividad:

Toda medida analítica está sujeta a cierta variabilidad debido a factores que la apartan
de su valor verdadero. Las principales causas de variabilidad analítica son los errores
sistemáticos (se deben a factores instrumentales, al método o a la operación), y los
errores aleatorios (lecturas incorrectas de los instrumentos, los cálculos equivocados,
el cambio de especímenes y el uso de reactivos o estándares preparados de forma
inadecuada) cometidos durante la cuantificación de la magnitud bioquímica.

Los resultados analíticos obtenidos en un laboratorio clínico han de ser fiables y

reproducibles. Es esencial valorar de forma objetiva la calidad de un método analítico
ya que los datos obtenidos van a influir en decisiones clínicas. El control de la calidad
analítica se lleva a cabo de dos formas: control de calidad interno y externo. Ambos
emplean los llamados “controles de calidad”, muestras de concentración conocida que
se valoran diariamente (control interno) o de concentración desconocida que se
evalúan en intervalos de tiempo más largo (control externo), evaluación antes o
simultáneamente con las muestras de pacientes.

Gracias a la evaluación diaria de los valores del control para diferentes magnitudes
bioquímicas, podemos asegurar la fiabilidad de los resultados en especímenes de los
pacientes. Una forma fácil de evaluar los controles de calidad es mediante métodos
gráficos. Estos muestran los sucesivos resultados del control de calidad en relación con
una media y desviación estándar (DE). El método grafico más empleado es el de Levey-
Jennings y se suele instalar en el sistema informático de muchos autoanalizadores. Se
realiza una gráfica para el control de cada magnitud bioquímica, situando en
ordenadas los valores del control en términos de la media y la desviación estándar de
un conjunto de al menos 20 determinaciones. A lo largo del eje de abscisas se
representa el tiempo, en días, en el que se va evaluando la calidad interna.

La elaboración de un control de calidad de una cierta magnitud bioquímica implica:

- Determinación de la magnitud bioquímica durante al menos 20 días diferentes.

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- Tratamiento estadístico de los resultados.

- Cálculo de los valores que adopta la magnitud bioquímica en un 95% de los casos
(media ± 2DE).

- Construcción del gráfico de Levey-Jennings para el control.

Desarrollo de la Actividad:
Determinar diez veces la concentración de glucosa en el mismo espécimen de suero
problema. Se necesitan además 3 viales eppendorf adicionales: blanco, calibrador y
control Ral.

TUBOS Agua Suero Suero Suero Reactivo

destilada Calibrador Control problema
Ral

Blanco 10 μl 1 ml

Calibrador 10 μl 1 ml

Control Ral 10 𝞵𝞵l 1ml

Muestra 10 μl 1ml
problema

Agitar suavemente e incubar 10 min a 37ºC. Leer A500nm frente al

blanco.

El suero problema es el que se va a caracterizar como “suero control”. El “control Ral”

se usa para asegurar la fiabilidad del procedimiento de medida utilizado.

Leer atentamente el Protocolo de determinación de Glucosa colgado junto a este

documento en el aula virtual.

1. Calcular la concentración de glucosa de cada una de las 10 repeticiones empleando

la fórmula siguiente:

[Glu]problema = (A500 nm muestra problema / A500 nm calibrador) x [Glu]calibrador

La [Glu]calibrador (lote BIO161001) es 194 mg/dl

Elaborar una tabla con los valores de absorbancia y concentración.

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ESPÉCIMEN Absorbancia a 500 nm [Glucosa] (mg/dL)

Suero Calibrador

Suero Control Ral

Muestra problema: - -

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

2. Calcular los valores de la media, desviación estándar (DE) y el coeficiente de

variación (CV) para el conjunto de valores de concentración de glucosa.

3. Calcular el intervalo de valores del control de glucosa.

4. ¿Cómo y para qué se usará este control en un laboratorio de bioquímica clínica?

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5. Construir en papel milimetrado un gráfico de Levey-Jennings.

6. ¿Cuál será la utilidad de esta gráfica en la práctica diaria de un laboratorio de

bioquímica clínica?