Manual de Práctica de Química

PRÁCTICA N° 6
DETERMINACIÓN DE pH Y pOH – SOLUCIONES
AMORTIGUADORAS

I. Introducción
El pH es una expresión usada para indicar la concentración de iones hidrógeno (H+). Es
especialmente útil para expresar cuantitativamente la acidez o alcalinidad (basicidad) en los
sistemas biológicos.

La acidez o basicidad se expresa en una escala en que la neutralidad es pH 7. Los valores de

pH por debajo de 7 son ácidos y los mayores a 7 son alcalinos o básicos. Es importante
recordar que el pH es una función logarítmica, un cambio en una unidad de pH representa 10
veces el cambio en la concentración de hidrogeniones o iones hidrógeno.

Los amortiguadores conocidos como tampones o buffers son soluciones que se caracterizan
por impedir cambios brusco de pH; dichos cambios se deben a la adición de iones hidrógeno
(ácidos) o por adicción de iones hidróxido (bases). Las soluciones amortiguadoras están
formadas por un ácido o una base débil y su sal conjugada. Todos los ácidos débiles en
presencia de sus bases conjugadas constituyen soluciones amortiguadoras y son sumamente
importantes en la zona próxima a la neutralidad que es donde se desarrollan la mayoría de las
funciones de las células vivas.

Al finalizar la sesión, el estudiante determina la concentración de iones [H+] y [OH-] a partir

de datos de pH. Asimismo, calcula el pH de soluciones amortiguadoras usando la ecuación
de Henderson Hasselbach correctamente.

II. Competencias
 Utilizar el pH de una solución para calcular la concentración de iones hidrógeno e iones
hidroxilo.
 Preparar soluciones amortiguadoras determinando el valor del pH experimental.
 Comprobar experimentalmente la eficiencia de una solución amortiguadora frente a los
cambios de pH por adición de ácidos o bases.

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III. Fundamento teórico

Dado que las concentraciones de los iones H+ y OH- con frecuencia son números muy
pequeños y, por lo tanto, es difícil trabajar con ellos, Soren Sorensen propuso, en 1909, una
medida más práctica denominada pH.

Comúnmente, las bases y los ácidos se catalogan fuertes o débiles dependiendo sí reaccionan
en su totalidad o parcialmente para la formación de iones hidronio (H3O+) u oxidrilo (OH-).
No obstante, algunos compuestos reaccionan tan completamente que es sencillo
considerarlos fuertes y por viceversa otro comportamiento como débil.

Estos electrolitos débiles están sometidos al equilibrio químico y cumplen la ley de acción
de masas. El H2O es un electrolito débil y se disocia de acuerdo a la siguiente reacción:

𝑯𝟐 𝑶 + 𝑯𝟐 𝑶 𝑯𝟑 𝑶+ + 𝑶𝑯−
Ácido Base

Donde la constante de equilibrio es:

[𝑯𝟑 𝑶+ ] [𝑶𝑯− ]
𝑲𝒆 =
[𝑯𝟐 𝑶]

Como el agua es un denominador grande, se considera constante, matemáticamente se

domina: El producto de dos constantes es igual a una tercera conocida como producto iónico
del H2O “Kw” y a 25°C tiene el siguiente valor:

𝑲𝒘 = [𝑯𝟑 𝑶+ ][𝑶𝑯] = 𝟏, 𝟎 𝒙 𝟏𝟎−𝟏𝟒 𝒂 𝟐𝟓°𝑪

En donde, se calcula el pH del H2O:

 pH = - log [H3O+] = - log 1 x 10-7 = 7
 pOH = - log [OH] = - log 1 x 10-7 = 7
 Siendo de esta manera: pH + pOH = 14

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Definiendo el pH (potencial de hidrógeno) como el grado de alcalinidad o acidez que

presenta una sustancia en una solución. El pH de una solución se define como el logaritmo
negativo de la concentración del ion hidrógeno (en mol/L):

𝟏
𝒑𝑯 = − 𝐥𝐨𝐠 𝑯𝟑 𝑶 = 𝐥𝐨𝐠
𝑯𝟑 𝑶

Como se conoce la disociación de bases y ácidos débiles están expresados como iones OH-
e H+, una vez que se encuentran en un equilibrio químico la velocidad de una reacción está
dirigida por la constante de equilibrio que presentan valores exponenciales. Por ejemplo:

 Kw del CH3COOH = 1.8 x 10-5

 Kw triptófano = 4.7 x 10-10 y 4.5 x 10-3
 Kw del agua = 1.0 x 10-14

El bioquímico Sorensen, planteó un sistema para prevenir trabajar con cantidades

exponenciales y transformar estos valores en datos positivos que avancen en progresión
aritmética y estableció el valor encontrado para la disociación del agua, mediante una escala
de pH que va del cero al catorce.

Figura 6.1 Escala de pH

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Así, a una concentración de ion hidrógeno de 1 x 10-1 le corresponde un pH de 1 y a una

concentración de ion hidrógeno de 1 x 10-13 un pH de 13. Estos números que van de 0 o 1
hasta quizá 13 o 14, se grafican con comodidad en las curvas de titulación.

La concentración de iones hidrógeno tiene mucha importancia para todos los organismos
vivos en todos los procesos fisiológicos, de esta manera, es que se determina la acidez activa
del medio en que se verifican unos u otros procesos bioquímicos, como sangre, tejido tisular,
contenido del protoplasma celular y para los organismos protozoarios. Cualquier variación
en el medio ambiente que los rodea produce serios trastornos fisiológicos causando incluso
la muerte.

Cuadro 6.1: pH de soluciones cotidianas

SOLUCIÓN pH SOLUCIÓN pH
Saliva humana durante
Jugo gástrico 1,0 7,2
comidas
Limón 2,3 Sangre 7,4
Vinagre 3,0 Huevo fresco 7,8

Jugo de naranja 4,1 Bicarbonato de sodio 8,4

Cerveza 5,2 Dentífrico 9,9

Leche 6,0 Leche de magnesia 11,5

Agua pura 7,0 Soda caustica 14

 Métodos para determinar el pH

Existen 2 métodos para poder determinar el pH de una solución, de manera experimental.
Estos son:

1. Método colorimétrico
Consiste en el empleo de indicadores que son alcalinos o ácidos débiles de poca
disociación que cambian de color según el pH de la solución, así:

[𝐼𝑛− ]
𝐻𝑖𝑛 = 𝑝𝐾𝑖𝑛𝑑 + 𝑙𝑜𝑔 → 𝑝𝐾𝑖𝑛𝑑 = −𝑙𝑜𝑔𝐾𝑖𝑛𝑑
[𝐻𝑖𝑛]

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Cuadro 6.2: Indicadores ácido – base y rango de acción

INDICADOR ÁCIDO - COLOR
INTERVALO DE pH
BASE En medio ácido En medio básico
Rojo de metilo Rojo Amarillo 4,2 – 6,3

Azul de bromotimol Amarillo Azul 6,0 – 7,6

Fenolftaleína Incoloro Rosa intenso 8,3 – 10,0

2. Método potenciométrico
Consiste en la medición de las fuerzas electromotrices (f.e.m.) de las pilas voltaicas
elaboradas de una muestra problema y de electrodos especiales de vidrio, calomel, etc.

 Pila voltaica: Aparato donde la energía química se convierte en energía eléctrica.

 Fuerza electromotriz: Máxima diferencia de potencial entre los electrodos de una
pila voltaica en las condiciones reversibles de su trabajo. Una condición necesaria
para los electrodos de la pila es la posibilidad de verificarse en su superficie el
proceso REDOX. Con el fin de la determinación de potenciales de electrodo o la
concentración de los iones en la solución, se emplea los electrodos estándar con
una magnitud conocida de potencial de electrodo, se usan electrodos de hidrógeno,
de calomelano, quinhidrona, etc.

 Soluciones amortiguadoras
El poder amortiguador de los cambios de pH en un determinado sistema es una expresión
simple de reacciones fundamentales reversibles que se establecen en el equilibrio y que
se basan en la teoría ácido – base. Nuestro organismo cuenta con un sistema amortiguador
intracelular y un sistema amortiguador extracelular.

El sistema amortiguador dentro de las células es el fosfato, está formado por el par de
iones (H2PO4)1- y (HPO4)1- es la especie química de este par que tiene mayor capacidad
de neutralizar la base. Cualquier adición de (OH)1- la neutraliza el (H2PO4)1- evitando
que el pH se incremente.

( )
𝑎𝑐
(𝐻2 𝑃𝑂4 )1− (𝑎𝑐) + (𝑂𝐻)1−. (𝑎𝑐) → (𝐻𝑃𝑂4 )2− (𝑎𝑐) + 𝐻2 𝑂

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El receptor de protón o base en el fosfato es la base conjugada del (H2PO4)1-, el ion

(HPO4)1-. Este puede neutralizar (H)1+ y de este modo evitar que el pH disminuya.

(𝐻𝑃𝑂4 )2− (𝑎𝑐) + (𝐻)1+ ((𝑎𝑐)

𝑎𝑐) → (𝐻𝑃𝑂4 )1− (𝑎𝑐)

El sistema amortiguador extracelular es el carbonato, está formado por el par conjugado,

H2CO3 y (HCO3)1-, el ácido carbónico y el ion bicarbonato. En realidad, el ácido
carbónico en la sangre casi enteramente en la forma de CO2 (ac). Pero cualquier demanda
de H2CO3 (ac) la satisface casi instantáneamente la capacidad de la anhidrasa carbónica
para desplazar el equilibrio; dicha enzima cataliza las reacciones directa e inversa en el
siguiente equilibrio:

𝐶𝑂2 (𝑎𝑐) + 𝐻2(𝑎𝑐

𝑂) → 𝐻2 𝐶𝑂3 (𝑎𝑐)

El ácido carbónico del amortiguador carbonato de la sangre neutraliza el (OH)1-, y así

evita el incremento del pH. Si se tuviera algún problema metabólico o respiratorio
tendiente a aumentar el nivel de (OH)1- de la sangre, el H2CO3 neutraliza el (OH)1- y
así evitaría la alcalosis.

(𝐻𝐶𝑂3 )1− (𝑎𝑐) + (𝐻)1+

(𝑎𝑐(𝑎𝑐)
) → 𝐻2 𝐶𝑂3 (𝑎𝑐)

Las soluciones amortiguadoras son muy importantes, se usan:

- Preparación de soluciones estándar (determinación potenciométrica del pH).
- Mantenimiento una concentración de H+ necesaria para la actividad óptima de una
reacción química o bioquímica, Esta función es importante en la acción de las enzimas,
tanto in vivo como in vitro.

Ecuación de Henderson – Hasselbach

La ecuación de Henderson – Hasselbach, ha sido derivada de la Ley de acción de masas
de Gulberg y Waage, del concepto de constante de equilibrio y de la ionización de ácidos

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y bases débiles. Se utiliza para calcular el pH teórico de una mezcla de ácidos débiles y
sus sales.

Para el siguiente sistema en equilibrio:

𝐻𝐴(𝑎𝑐) → (𝐻)1+ 𝑓(𝑎𝑐) + 𝐴1− (𝑎𝑐) ; 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝐻𝐴 = á𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑑é𝑏𝑖𝑙, 𝐵

= 𝑏𝑎𝑠𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑗𝑢𝑔𝑎𝑑𝑎

Calculando Ka para el ácido débil, HA:

𝐻1 𝐴1
𝐾𝑎 = (𝑎𝑐)
𝐻𝐴

Despejando la concentración iones hidrógeno se tiene:

𝐻𝐴 𝑥 𝐾𝑎
𝐻1 = (𝑎𝑐1−
)
𝐴

Aplicando logaritmo y multiplicando por (-1), se obtiene:

𝐻𝐴
𝑙𝑜𝑔𝐻1 = −𝑙𝑜𝑔𝐾𝑎
(𝑎𝑐) (−𝑙𝑜𝑔 )
𝐴1−

Reemplazando:

𝐴1
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎(𝑎𝑐
+) log
𝐻𝐴

Expresión conocida como ecuación de Henderson – Hasselbach para un ácido débil.

Las soluciones amortiguadoras son muy importantes, se usan:

- Preparación de soluciones estándar (determinación potenciométrica del pH).

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- Mantenimiento una concentración de H+ necesaria para la actividad óptima de una

reacción química o bioquímica, Esta función es importante en la acción de las enzimas,
tanto in vivo como in vitro.

Tampones biológicos
Es un sistema endógeno (producido por un organismo vivo) capaz de contrarrestar un
cambio violento de en el pH corporal, el cual está dado por la [H+] en los líquidos
corporales pH = 7,3 unidades.

Como se mencionó, la potencia máxima de un tampón es cuando el pH coincide con el

pH del medio y la capacidad amortiguadora se mantiene hasta +2 unidades de pH, después
de la cual el tampón pierde su capacidad.

Tipos de amortiguadores biológicos:

- Sistema amortiguador bicarbonato

𝐻𝐶𝑂3
𝑝𝐾𝑎
(𝑎𝑐 ) = 6,1
𝐻2 𝐶𝑂3

- Sistema amortiguador fosfato

𝐻𝑃𝑂4
(𝑝𝐾𝑎
𝑎𝑐) = 7,4
𝐻2 𝑃𝑂4

- Sistema amortiguador hemoglobina – proteínas plasmáticas

IV. Materiales

Materiales en mesa de estudiantes

 01 gradilla
 06 tubos de ensayo 13 x 100 mm
 04 tubos de ensayo 15 x 150 mm
 02 beaker 100 mL
 02 pipetas graduadas de 10 mL

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 02 Propipetas
 01 piseta con agua destilada

Reactivos en mesa de estudiantes

 01 azul de bromotimol gotero 25mL
 01 rojo de metilo gotero 25mL
 01 fenolftaleína gotero 25mL
 01 hidróxido de sodio ~ NaOH 0.1M gotero 25mL
 01 ácido clorhídrico ~ HCl 0.1M gotero 25mL

Materiales en mesa central de profesor

 01 pH – metro
 01 caja de papel tisuee
 01 caja de tiras indicadoras de pH
 01 Piseta con agua destilada
 01 beaker 500 mL
 acetato de sodio ~ CH3COONa 0.1M frasco 500 mL
 ácido acético ~ CH3COOH 0.1M frasco 500 mL
 ácido clorhídrico ~ HCl 0.1M frasco 50 mL
 Hidróxido de sodio ~ NaOH 0.1M frasco 50 mL
 Hidróxido de amonio ~ NH4OH 0.1M frasco 50 mL
 zumo de limón frasco 50 mL
 leche de magnesia frasco 50 mL
 sal de Andrews sobre 100 g
 coca – cola frasco 50 mL
 piseta con agua destilda
 beaker 50 Ml (rotulados con: CH3COOH 0.1 M, HCl 0.1 M, NaOH 0.1 M, NH4OH
0.1 M, agua destilada, agua potable, saliva, zumo de limón, sal de Andrews, coca-
cola y leche de magnesia)

V. Parte experimental

 Determinación del pH de diferentes muestras

Prepare las muestras de acuerdo a las indicaciones del profesor y completar el cuadro 6.3.
Medir el pH con el potenciómetro, con las tiras del papel indicador universal y completar
el cuadro 6.3.

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Para los cálculos proceda de la siguiente manera:

- Muestra 01 (ácido fuerte): pH = - log [H+]
- Muestra 02 (ácido débil): pH = ½ pKa – ½ log [H+]
- Muestra 03 (base fuerte): pOH = - log [OH-]
- Muestra 04 (base débil): pH = pKw – ½ pKb + ½ log [OH-]
- Para: [H+] = 10- pH
[OH-] = 10- pOH

 Viraje de indicadores dentro de un rango de pH conocido

- Disponer de 6 tubos de ensayo .
- Agregar a 3 tubos 2 mL de HCl y a los otros 3, 2 mL de NaOH.
- Adicionar 1 gota de indicador: rojo de metilo, azul de bromotimol y fenolftaleína.
- Observar los cambios de color y anotarlos en el cuadro 6.4.

 Preparación del Buffer acetato

- Disponer de 4 tubos de ensayo, preparar los bufferes teniendo en cuanta los volúmenes
que se indica en el cuadro 6.5. Mida pH con ayuda delas tiras indicadores de Ph o el
potenciómetro.

VI. Datos y resultados

Cuadro 6.3: Determinación del pH de las muestras

pH CON
pH con pH -
[] PAPEL [OH-] [H+]
MUESTRA METRO
INDICADOR
1 HCl 0.1M

2 CH3COOH 0.1M

3 NaOH 0.1M

4 NH4OH 0.1M

5 Agua destilada -

6 Agua potable -

7 Saliva -

8 Zumo de limón -

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9 Sal de Andrews -

10 Coca - cola -

11 Leche de magnesia -

INDICADOR
MUESTRA
Rojo de metilo Azul de bromotimol Fenolftaleína

HCl 0.1M
NaOH 0.1M
Cuadro 6.4: Viraje de indicadores dentro de un rango de pH conocido

Cuadro 6.5: Preparación del Buffer acetato

H2O
CH3COOH CH3COONa pH
TUBO DEST. pH PRÁCTICO
0.1M (mL) 0.1M (mL) TEÓRICO
(mL)
1 9,00 1,00 -
2 5,00 5,00 -
3 1,00 9,00 -
4 - - 10

VII. Referencias bibliográficas

1. Chang, R. (2010). Química. McGraw Hill. México DF. México.
2. Brown, T., LeMay Jr. H.; Busten, B. & Burdge, J. (2009). Química. La ciencia Central. Pearson
Educación. México DF. México.
3. McMurry, J. & Fay, R. (2009). Química general. Editorial Pearson. Nueva York. EE.UU.
4. Bloomfielf, M. (2001). Química de los organismos vivos. LIMUSA NORIEGA Editores.
México DF. México.
5. Atkins, P. & Jones, L. (1998). Química. Moléculas. Materia y cambio. Ediciones OMEGA
S.A. Barcelona. España.
6. Blanco, A. (2006). Química biológica. Editorial El Ateneo. Buenos Aires. Argentina.
7. Harris, D. (2007). Análisis químico cuantitativo. Editorial REVERTE. Barcelona. España.

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CUESTIONARIO
1. ¿Qué es un indicador ácido – base, dar un ejemplo, mencionando el cambio de color
correspondiente al pH respectivo.
2. Explicar cómo se logra el mantenimiento del pH de la sangre humana. ¿Qué buffers
intervienen?
3. ¿Cuál es el tipo de amortiguador predominante en el sistema intracelular?
4. Calcule la concentración de [OH-] para cada una de las siguientes disoluciones e
indique si es una disolución ácida, básica o neutra.

a. [H+] = 0.0045M
b. [H+] = 1.5x10-9 M
c. Una disolución en la cual la [H+] es 10 veces la [OH-]

5. La constante de disociación ácida del ácido hipocloroso (HClO) es 3x10-8 M. Calcule el

pH de la solución sabiendo que la concentración inicial de HClO es 0.010 M.

6. Una disolución amortiguadora se prepara añadiendo 20.0 g de ácido acético (CH3COOH)

y 20.0 g de acetato de sodio (CH3COONa) a suficiente agua papa formar 2.00 L de
disolución. Calcule el pH.

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