REPUBLICA DE COLOMBIA UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD ESTUDIOS DE PREGRADO ASIGNATURA: BIOQUIMICA PROFESOR: MARTIN

NUEZ

TITULACION POTENCIOMETRICA DE AMINOACIDOS REALIZADO POR: Kendrys Aileth Ruiz Mayorga Eugenia Castilla Karen Gonzlez Jess Quintero

Valledupar-septiembre-09-2013

OBJETIVO Determinar el pH de algunas sustancias utilizadas y consumidas en nuestro diario vivir, tomando como instrumento principal el potencimetro.

Mirar en que tiempo y en que parte se produce la titulacin como neutralizacin.

MATERIALES Y REACTIVOS Probeta Bureta Soporte universal Erlenmeyer Potencimetro Beacker Gotero Fenolftalena HCL al 0,1 N NaOH al 0,1 N Vinagre Jugo ctrico Yogurt Leche Energizante Coca cola Limn

MARCO TEORICO

El pH es una medida de la acidez o alcalinidad de una solucin. El pH indica la concentracin de iones hidronio [H3O+] presentes en determinadas sustancias. Este trmino fue acuado por el qumico dans Srensen, quien lo defini como el logaritmo negativo de base 10 de la actividad de los iones hidrgeno.

Desde entonces, el trmino "pH" se ha utilizado universalmente por lo prctico que resulta para evitar el manejo de cifras largas y complejas. En disoluciones diluidas, en lugar de utilizar la actividad del ion hidrgeno, se le puede aproximar empleando la concentracin molar del ion hidrgeno.

ESCALA DE PH

Los cidos y las bases tienen una caracterstica que nos deja poder medirlos, es la concentracin de los iones de hidrgeno. Los cidos fuertes tienen altas concentraciones de iones de hidrgeno y los cidos dbiles tienen concentraciones bajas. El pH entonces es un valor numrico que expresa la concentracin de iones de hidrgeno. La naturaleza de las sustancias es una de los temas ms estudiados por la qumica, ya que de acuerdo a sta, estn determinados los tipos de reacciones que se presentan de acuerdo a los reactivos en un proceso. La titulacin es un mtodo para determinar la cantidad de una sustancia presente en solucin. Una solucin de concentracin conocida, llamada solucin valorada, se agrega con una bureta a la solucin que se analiza. En el caso ideal, la adicin se detiene cuando se ha agregado la cantidad de reactivo determinada en funcin de un cambio de coloracin en el caso de utilizar un indicador interno. En trminos generales la reaccin entre cantidades equivalentes de cidos y bases se llama neutralizacin o reaccin de neutralizacin, la caracterstica de una reaccin de neutralizacin es siempre la combinacin de hidrogeniones que proceden del cido, con hidroxiliones procedentes de la base para dar molculas de agua sin disociar, con liberacin de energa calorfica como calor de neutralizacin y formacin de una sal.

En una expresin como la siguiente expresin: cido + Base Sal + Agua As pues, la titulacin es un proceso en el cual la solucin estndar (del patrn primario) se combina con una solucin de concentracin desconocida para determinar dicha concentracin, la curva de titulacin es la grfica que indica como el pH de la solucin cambia durante el transcurso de la misma (el pH se grfica contra el volumen de base o cido agregado). Entonces podra entenderse como final de la titulacin al momento en que el pH llegase a 7, sin embargo, esto est en funcin de la fuerza del cido o la base que se estn titulando.

PROCEDIMIENTO

Colocamos aproximadamente 20 ml de las siguientes sustancias vinagre, una bebida energizante, leche, yogurt, jugo ctrico, coca cola y limn cada una en un beacker. Se sumergi en electrodo del potencimetro en cada una de las sustancias, cuidando de lavar el electrodo con agua destilada despus de cada determinacin del pH. Luego se hizo el registro de valores, respectivamente.

Para la curva de valoracin (titulacin acido fuerte HCL y base fuerte NaOH). Se adiciono a una bureta aproximadamente 30 ml de NaOH al 0,1 N Se coloco en un soporte universal. Luego, en un beacker limpio y seco se agrego aproximadamente 20 ml de HCL al 0,1 N. Se registro el valor del pH de la solucin de HCL con el potencimetro. Se coloco el beacker debajo de la bureta, y se le adicionaron 3 gotas de fenolftalena y se le fueron agregando diferentes volmenes de NaOH a 0,1 N en ml. Se determinaba el pH de la solucin despus de cada adicin. Se observo cuidadosamente el pH al cual cambio el color de solucin acida por efecto del indicador fenolftalena (Es un indicador de pH que en soluciones cidas permanece incoloro, pero en presencia de bases se torna rosa o violeta).

ANALISIS DE RESULTADOS Al tomar como muestras sustancias conocidas y consumidas diariamente para determinar el nivel de acidez o basicidad, es decir, su pH; en este caso se hizo tomando como base las siguientes sustancias: SUSTANCIA Energizante Coco cola Vinagre pH 3.26 2.49 2.67

Jugo ctrico Leche Limn

2.81 6.4 2.1

Se determina o se concluye que la mayora de estas contiene una acidez extremadamente alta, casi proporcional a la del HCL, y que pueden causar problemas gstricos e intestinales. En el procedimiento siguiente se realiza la titulacin de un acido fuerte (HCL) y base fuerte (NaOH) a una misma concentracin, es decir, a 0,1 N; aqu se tuvo en cuenta los valores de pH a medida que se iba aadiendo la sustancia bsica a la acida y se determinaba su pH, hasta su punto de neutralizacin. V (ml de NaOH 0,1 pH (HCL 0,1 N) N) 0 2.15 3 11.27 Punto neutralizacin

de

Sabiendo esto, se hace la curva de valorizacin, tomando como base los valores antes mencionados.

CUESTIONARIO 1. Teniendo en cuenta el pH de cada solucin se calcula la [ ] de hidrogeniones [H+] e hidroxilo [OH-] para cada sustancia. Recordando que: [H+] = 10-pH= Anti log (-pH) [H+]. [OH-] = 1x10-14

Energizante 3.26

PH= log[ =[ =[ =[ ]+ [

]= 10-3 ]= 1*10-4 ][ ]=1*10-14 = 1*10-14 * 1*10+3 = 1*10-11

]= 1*10-14 1*10-3

Coco cola

2.49

PH= log[ =[ =[ =[ ]+ [

]= 10-2 ]= 1*10-4 ][ ]=1*10-14 = 1*10-14 * 1*10+2 = 1*10-12

]= 1*10-14 1*10-2

Vinagre

2.67

PH= log[ =[ =[ =[ ]+ [

]= 10-2 ]= 1*10-4 ][ ]=1*10-14 = 1*10-14 * 1*10+2 = 1*10-12

]= 1*10-14 1*10-2

Jugo ctrico 2.81

PH= log[ =[ =[ =[ ]+ [

]= 10-2 ]= 1*10-4 ][ ]=1*10-14 = 1*10-14 * 1*10+2 = 1*10-12

]= 1*10-14 1*10-2

Limn

2.1

PH= log[ =[ =[ =[ ]+ [

]= 10-2 ]= 1*10-4 ][ ]=1*10-14 = 1*10-14 + 1*10+2 = 1*10-12

]= 1*10-14 1*10-2

2. Calcular el pH de las siguientes soluciones: a. HNO3 a 0,000023 M PH= log[ = log [ ] ]

= log 2.3 + log 10-5 = 0.36 (-5) = -0.36 +5= 4.64 M/L

b. KOH a 0,00046 M PH= log[ = log [ ] ]

= log 4.6 + log 10-4 = 0.66 (-4) = -0.66 +4 = 3.34 M/L

3. Qu importancia tiene el pH en los microorganismos y en el hombre? Es determinante en las reacciones qumicas de degradacin de la materia orgnica. Si el pH es muy bajo o muy alto desnaturaliza las protenas que conforman al ser vivo y adems aunque las variaciones sean muy pequeas alteran el equilibrio homeosttico y pueden provocar secuelas. Generalmente una ligera variacin de pH indica una alteracin metablica o bien puede ser el factor determinante para la proliferacin de un hongo, virus o bacteria. 4. Cul es la importancia del pH en los procesos biolgicos de los organismos animales? Casi todos los procesos biolgicos son dependientes de un pH. Un pequeo cambio en el pH lleva a un gran cambio en la velocidad de un proceso, lo anterior es cierto no solo para aquellas reacciones en donde est involucrado directamente el ion H+, sino tambin para aquellas en donde aparentemente no est involucrado directamente. Por ejemplo, es muy importante en la nutricin humana ya que el jugo gstrico es de 1.0 y 2.0, es decir, es muy acido; lo cual tiene como principal objetivo disminuir el pH en el bolo alimenticio (acta como solucin amortiguadora) y activar enzimas como la pepsina para que estas acten sobre los alimentos, en nutricin hay una dieta alcalina y consiste en el equilibrio del pH, pues de lo contrario esto generara gastritis y otras enfermedades.

5. Cules son los amortiguadores utilizados en biologa? Los que se usan en investigacin pueden ser muy variados ya que existen innumerables amortiguadores para uso en el laboratorio. El que se use debe ser aquel que regule el pH al valor que uno est interesado. En soluciones equimolares de un acido o una base conjugada, por ejemplo: acido actico y acetato de sodio, o acido fosfrico y fosfato de sodio. 6. Explique el mtodo de titulacin de un acido fuerte con una base fuerte. Los cidos y bases fuertes se disocian completamente, por lo tanto, al final de la disolucin no quedar nada del cido (o de la base) y de acuerdo con la estequiometria de la reaccin es fcil calcular la concentracin de iones H3O+ (o de OH-) y a partir de ah su pH. - Reacciones de neutralizacin entre cido fuerte (HCl) y base fuerte (NaOH). El pH en el punto de equivalencia es 7 ya que todos los iones hidronio han sido neutralizados por los iones hidroxilo, para dar H2O

El resto de los iones no reaccionan con el agua ya que:

El Cl procede de un cido fuerte (es una base dbil frente al agua): no se hidroliza.

El Na+ procede de una base fuerte (es un cido muy dbil frente al agua): no se hidroliza

7. Cules son mamferos? -

los

principales

sistemas

amortiguadores

en

Amortiguador protena: las protenas intracelulares con sus grupos ionizables constituyen de forma importante en el mantenimiento del pH, mediante el intercambio de3 H+ por los otros iones (Na+ y K+)

que se desplazan n medio extracelular para mantener la neutralidad elctrica.

La hemoglobina es el principal amortiguador de este tipo, es la protena ms abundante de la sangre. En el interior del hemate, el CO2 se va a convertir en acido carbnico que se disocia dando un H+ que rpidamente ser tamponado por la hemoglobina, y bicarbonato que saldr fuera del hemate en intercambio de iones cloro.

Amortiguador fosfato: ejerce su accin fundamentalmente a nivel intracelular, ya que es all donde existe una mayor [ ] de fosfatos.

Amortiguacin osea: el hueso interviene en la amortiguacin de la carga acida captando los H+ en exceso liberando carbonato a la sangre por disolucin del hueso mineral.

Amortiguador carbnico/bicarbonato: presente en medios tanto intracelulares como extracelulares.

8. Por qu la hemoglobina se comporta como sustancia buffer o amortiguadora en la sangre? Las caractersticas de la hemoglobina como amortiguador estn ntimamente vinculadas a la capacidad de disociacin del grupo imidazlico del aminocido histidina unido al hierro que contiene el grupo hemo. Propiedad de modificarse en funcin de la molcula de Hb este unida al oxigeno (HbO2) o no (Hb). La oxihemoglobina (HbO2) es un acido ms fuerte que la Hb desoxigenada porque su pK es menor. Esta propiedad le confiere una eficacia amortiguadora especial, que se ve favorecida por el hecho de que la Hb es una protena muy abundante en la sangre (el 15% del total de protena). Si consideramos que en el eritrocito el pH interno es 7,3 y aplicamos la ecuacin de Henderson Hasselbach, se puede calcular fcilmente que para la HbO2, el 80% de las molculas estn en forma disociada y el 20% est en la forma acida no disociada.

En cambio, el 80%de la Hb desoxigenada se encuentra sin disociar y el 20% disociada. Esta propiedad especial hace que la Hb un amortiguador extraordinariamente eficaz, puesto que es capaz de modificar el pK liberando O2 y as soportar grandes cambios en la proporcin sal/acido sin que se produzca cambio alguno en el pH. El pK (logaritmo negativo de la constante de disociacin), de este grupo funcional, que es aproximadamente 7, tiene la especial

9. Explique acidosis metablica, acidosis respiratoria, alcalosis metablica y acidosis respiratoria. La forma ms rpida de producir alcalosis respiratoria es mediante una hiperventilacin, es decir, a travs de una respiracin demasiado rpida y profunda. De esta manera se elimina demasiado dixido de carbono, con lo que se desplaza el primer equilibrio hacia la izquierda para contrarrestar la perturbacin externa (principio de Le Chatelier), y el resultado es la disminucin en la [ ] de acido carbnico, y por tanto un aumento en el pH. Al contrario que la alcalosis, la acidosis respiratoria se produce por una hipoventilacin, es decir, cuando la respiracin no es suficientemente profunda. Ahora el pulmn no puede eliminar con la suficiente rapidez el dixido de carbono necesario para mantener el equilibrio primero, que se desplaza hacia la derecha (principio de Le Chatelier). La consecuencia es un aumento en la [ ] de acido carbnico que se traduce en un medio ms acido. La alcalosis metablica se produce por la elevacin de la [ ] de bicarbonato plasmtico relacionado a la perdida de carga acida o a la mayor reabsorcin o regeneracin del mismo. La acidosis metablica es una afeccin en la cual hay demasiado acido en los lquidos corporales y esta ocurre cuando el cuerpo produce demasiado acido o cuando los riones no estn eliminando suficiente acido del cuerpo. Entre esta tenemos: Acidosis diabtica (Cetoacidosis diabtica o CAD), es producida cuando algunas sustancias conocidas como cuerpos cetonicos, que son cidos, se acumulan durante la diabetes tipo 1 no controlada.

Acidosis hiperclormica, es producida por la excesiva perdida de bicarbonato del sodio del cuerpo, como puede suceder con la diarrea intensa. Acidosis lctica, es producida por la acumulacin de acido lctico y puede ser causada por: Alcohol; cncer; ejercicio por mucho tiempo; insuficiencia heptica; bajo azcar en la sangre (hipoglucemia); medicamentos como salicilatos; convulsiones y falta prolongada de oxigeno a causa de shock, insuficiencia cardiaca o anemia grave. Otras causas abarcan: enfermedad renal (acidosis tubular distal y acidosis tubular renal proximal) e intoxicacin con acido acetilsaliclico (aspirin), etilenglicol (anticongelantes) o metanol o por deshidratacin intensa. 10. Cules son los lmites del pH en el plasma sanguneo humano? Los seres vivos no soportan variaciones del pH mayor de unas pocas decimas de unidad, por lo que han desarrollado a lo largo de la evolucin una serie de mecanismos para regular la acidez. El pH del plasma sanguneo est prximo a 7,4 y se mantiene constante gracias a la accin de los aparatos respiratorios y urinario que controlan el mecanismo del sistema regulador HCO3-/H2CO3. 11. Una escala semejante a la escala de pH puede usarse para expresar las concentraciones de ion hidroxilo de las soluciones. El POH se define como logaritmo negativo de la concentracin molar de iones OH. Calcular el pH y POH de la solucin 0,00036 M de KOH ] ]

PH= log[ = log [

= log 3.6 + log 10-4 = 0.55 (-4) = -0.55 +4 = 3.45 M/L POH = ? 3.6 * 10-4 POH= log (OH-) =-log 3.6 +10-4

=log 3.6 + log 10-4 = -0.55 (-4) = 0.66+ 4= 3.34 PH+POH= 14 PH= 14- 3.34= 10.66 M/L

12. Qu es electroforesis y enfoque isoelctrico? La electroforesis es un mtodo de laboratorio en el que se utiliza una corriente elctrica controlada con la finalidad de separar biomolculas segn su tamao y carga elctrica a travs de una matriz gelatinosa. En papel; de alto voltaje; en agarosa; en acetato de celulosa; en gel de almidn; en gel de poliacrilamina; en gel de SDSpoliacrilamina.

El enfoque isoelctrico es una tcnica habitualmente denominada electroenfoque se emplea ampliamente en bioqumica para separar molculas cargadas. Se trata de un tipo de electroforesis y se basa en el desplazamiento de las molculas de un gradiente de pH.

CONCLUSIN El pH es una propiedad que se relaciona con la actividad electroqumica y que es el resultado de la interaccin entre cidos y bases que componen la solucin, adems influye en la actividad amortiguadora de algunas sustancias que hacen parte de nuestro organismo. El pH es algo universal en todas las reas cientficas, pues no solo es importante en qumica orgnica sino que es fundamental en el organismo vivo, es decir, en la bioqumica.

BIBLIOGRAFIA
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