ETAPA 2

Práctica de Laboratorio
Determinación de clorofila por cromatografía en papel
Problema
¿Las plantas tienen varios tipos de fotopigmentos?
Introducción
Los pigmentos fotosintéticos de las plantas superiores están representados por las clorofilas a y b, y
un amplio grupo de sustancias denominadas carotenoides, que se dividen en carotenos y xantófilas.
Las moléculas de clorofila poseen un átomo central de Mg contenido en un anillo de porfirina junto
a un alcohol insaturado llamado fitol. Ambas estructuras sólo difieren en el sustituyente del carbono
C-3. Mientra que la clorofila a, posee un grupo metil (-CH3), la b dispone de un grupo aldehído (-
CHO). Esta sutil diferencia no sólo se traduce en cambios de coloración, un verde azulado para la
clorofila a y verde amarillento para la b, sino además, en una mayor polaridad de esta última con
respecto a la primera.
Los carotenos son hidrocarburos que contienen únicamente hidrógeno y carbono, son solubles en
disolventes no polares, poseen coloraciones que van desde el amarillo hasta el anaranjado y los más
abundantes son el β-caroteno y el α-caroteno. Las xantófilas en cambio, son derivados oxigenados de
los anteriores, solubles en alcohol, con coloraciones generalmente amarillas (Torossi, 2007).
La antocianina o antocianidina es un pigmento rojo azulado que protege a las plantas, sus flores y sus
frutas contra la luz ultravioleta (UV) y —por su propiedad antioxidante— evita la producción
de radicales libres. El término antocianina fue propuesto por Marquart en 1835 para describir el
pigmento azul de la col lombarda (Brassica oleracea). Actualmente las antocianinas engloban a los
pigmentos rojos, violetas y azules de las plantas.
(https://www.quimica.es/enciclopedia/Antocianina.html)
La cromatografía es un método de separación de mezclas como los pigmentos. Todas las técnicas
cromatográficas tienen el mismo fundamento teórico; una fase móvil o eluyente (gas o liquida) que
viaja a través de una fase estacionaria solida o semisólida. La separación ocurre debido a que algunos
componentes son atraídos con mas fuerza que otros hacia la fase estacionaria mientras que otros
tienen más afinidad a la fase móvil.

Una de las aplicaciones más espectaculares es la separación de pigmentos por cromatografía, en el

cual se puede visualizar como diferentes compuestos con diferentes colores se juntan para crear un
pigmento. Los pigmentos vegetales juegan distintos roles. El principal es en la consecución de la
energía para el proceso fotosintético en las hojas de la planta. Todos los pigmentos tienen una
solubilidad distinta en solventes apolares y una distinta afinidad por la fase estacionaria, lo que
permite su separación por cromatografía en papel (quimicafacil.net/manual-de-
laboratorio/cromatografía-en-papel-de-pigmentos-vegetales/).
Material
 Mortero  Papel filtro
 Vasos de precipitado  Etanol 96%
 Embudo  Tijeras
 Muestra de vegetales verdes, púrpura; flores o  Cinta adhesiva
frutos rojos, amarillos o naranjas
 Equipo para tomar fotografía.  Bata de laboratorio

Procedimiento
1. Colocar los vegetales en pedacitos en el mortero.
2. Añadir alcohol y machacar bien las hojas hasta que los pigmentos sean disueltos por el
alcohol.
3. Filtrar el contenido en un embudo con papel filtro en un vaso de precipitado, hasta alcanzar
un centímetro de altura, tapar momentáneamente.
4. Cortar un trozo rectangular de papel filtro, 10cm de alto y 12cm de ancho, doblar por la mitad,
como si fuese un libro. El objetivo es que se sostenga en pie cuando lo coloquemos dentro
del vaso de precipitado.
5. Deja la tira de papel dentro del vaso y espera unos 20 minutos, sacar el pape y observar.

Resultados

Tomando de referencia la siguiente figura, agrega fotografías (a color) y explica lo obtenido en la

práctica.
Análisis y conclusiones
1. ¿Cuáles son las similitudes y diferencias entre las muestras utilizadas?

2. ¿La fotosíntesis ocurre en todas las plantas o en sólo las plantas verdes? Explica tu respuesta.

3. ¿Todos los pigmentos absorben las mismas longitudes de onda de luz? Explica tu respuesta.

4. Conclusión:
Bibliografía
1. Torossi Baudino, Favio Daniel (2007). Una experiencia sencilla con fundamentos complejos:
la separación de pigmentos fotosintéticos mediante cromatografía sobre papel. Aula y
Laboratorio de Química 103(4), 45-51.
2. https://www.quimica.es/enciclopedia/Antocianina.html
3. quimicafacil.net/manual-de-laboratorio/cromatografía-en-papel-de-pigmentos-vegetales/
4. https://inakiresa.wordpress.com/tag/cromatografia-en-papel/
5. microbacterium.es/como-hacer-una-cromatografia-en-papel
6. Del Carmen Boeta, Evelia, Teresa Esquivel, Carlos Lory y Yolanda Zambrano (2018). Temas
selectos de Biología. Pearson Educación 2° Edición. México. Páginas 118-120.

Práctica de laboratorio número . Fecha:

Criterio Cumple Observaciones

Sí No

Asiste puntualmente
con el material
requerido.
Sigue instrucciones y
procedimientos.

Registra los resultados

de acuerdo con las
instrucciones.
Trabaja
colaborativamente y
sigue normas de
seguridad.