GROMATOGRAFIA
Brayan Chitiva, Jonathan Chávez Hurtado,
*Sara Maritza Murcia, Valentina Paque Bonilla,
Facultad de Ciencias Básicas, Programa De Biología, Universidad de la Amazonia,
Florencia Caquetá.
sar.murcia@udla.edu.co
1. INTRODUCCION
Los pigmentos son moléculas químicas que se
encargan de absorber la luz y presentar un color
que va desde el verde, naranja, rojo hasta el
amarillo, todos estos colores dependerán de la
aspiración de luz. En el interior de las células
vegetales, más exactos en los cloroplastos, se
encuentran estos pigmentos. La insolubilidad de
los pigmentos clorofílicos en el agua es alta, pero
pueden ser solubles en la acetona y el alcohol
etílico, el color de algunos pigmentos, van aliados
a las actividades fisiológicas del vegetal.
Existen distintas clases de pigmentos:
Clorofila (a y b): es la encargada de absorber la
luz para realizar fotosíntesis, este es el pigmento
más común, ya que se encuentra en todas las
plantas y actúan como catalizadores.
Carotenos: son de una tonalidad rojiza y
anaranjadas, que están localizados en los
cloroplastos CITA.
Xantofila: este proporciona a las hojas sus colores
amarillentos, esto por su oxidación (MANCILLA,
C. Et al., s.f.).
2. OBETIVOS
 conozca las técnicas generales empleadas en el
proceso de cromatografía.
 aplique las técnicas cromatografías en el
análisis cualitativo de muestras orgánicas e
inorgánicas.
 aprender a interpretar diferentes
cromatografías
3. MARCO TEORICO
La cromatografía es la separación de compuestos
coloridos (colorantes o pigmentos) de un extracto
o mezcla orgánica, el principio fundamental de la
cromatografía es la separación de dos o más
compuestos con propiedades físicas diferentes
que les permite repartirse en dos fases una
estacionaria y otro móvil la fase estacionaria en
papel filtro y la móvil un disolvente como el agua
o el alcohol etílico (etanol). (rodriguez, 2019). La
cromatografía en papel es un proceso utilizado en
laboratorios para realizar análisis cualitativos ya
que al no ser una técnica potente no requiere de
ningún tipo de equipamiento. La fase estacionaria
está constituida por un papel filtro. La muestra se
deposita en un extremo colocando pequeñas gotas
de la disolución y evaporando el disolvente
(mejia, 2007). La fase móvil es la fase que mueve
o arrastra la muestra de compuestos a través de la
fase estacionaria y del sistema cromatógrafo. Esta
fase móvil puede ser un líquido como el alcohol,
o un gas inerte como el helio o el nitrógeno.
Separando los pigmentos que dan color a las
plantas (clorofilas, xantofila y carotenos)
(rodriguez, 2019). La espinaca hace parte de las
verduras verdes, su color verde intenso nos indica
que contienen provitamina A y, sobre todo, una
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buena cantidad de ácido fólico relevante en la
formación del materia genético (Romero, 2017).
Las hojas de espinaca se usan en la cromatografía
para la separación de sustancias que se basa en las
diferentes velocidades que se arrastran cada una
de ellas a través de un medio poroso por un
disolvente en movimiento. En nuestro caso, a
medida que el disolvente sube por el papel filtro,
arrastra consigo los pigmentos que contiene la
hoja de espinaca, como no todos son arrastrados
con la misma velocidad, al cabo de un tiempo se
forman unas franjas de colores que corresponden
a los distintos componentes, entre ellos se
encuentran la clorofila y los carotenoides
(pigmentos fotosintéticos). (Murcia, 2019).
4. METODOLOGIA
Cromatografía de una muestra inorgánica
En un tubo de ensayo se añadieron 2 ml de agua
destilada, seguido se cortó un trozo de papel filtro
un poco más largo que el tubo de ensayo se cortó
una un extremo en forma de punta, seguido de
añadió una gota de tinta utilizando una jeringa,
seguido se dejó secar y se introdujo en el tubo de
ensayo sin que la muestra tuviera contacto con el
agua seguido se dejó en la gravilla a la espera de
los resultados.
Cromatografía en hojas de espinacas
En un mortero se trozaron hojas de espinaca
previamente cortadas, seguido se añadieron 10ml
de éter-petróleo y 10 ml de acetona, seguido
maceramos lo mejor posible la muestra hasta
obtener un verde intenso, seguido se filtró la
muestra a través de una capa de gasa y un
embudo hasta obtener solo la muestra liquida en
un vaso de precipitados obteniendo así una
mezcla heterogénea, seguido pasamos la muestra
a un embudo de decantación para separar la
muestra de clorofila de los reactivos, seguido se
tomó nuevamente un trozo de papel filtro para
añadir gotas de la clorofila a 1cm del borde del
papel, para ser llevado a la cámara gas.
5. ANÁLISIS DE LOS
RESULTADOS
Debido a que no se dieron los resultados
esperados en la práctica de laboratorio de
cromatografía por clorofila, se puede decir que se
presentaron errores personales en el momento que
se utilizó la espinaca con el reactivo (acetona), es
por eso que, para analizar estos resultados, se
tendrá en cuenta el método científico aplicado en
el laboratorio de biología:
5.1 Observación
Durante la macerada de la espinada con la
acetona – cloroformo, no hubo cambio de
coloración, es por eso que, en el momento de la
de la extracción del líquido de la clorofila, la cual
contiene el pigmento, dio un color verde claro, y
en el momento de teñir el papel filtro, para ser
colocado en la cámara de gas, se observó un color
verde aún más clarito, como se evidencia en la
figura 1.
Figura 1. Tintinticion de clorofila (espinaca), en un papel
filtro.

5.2. HIPOTESIS
En el momento de la observación surgieron
algunos interrogantes como:
 ¿por qué la cromatografía de la espinaca, no
se obtienen los mismos resultados, que la de
las hojas verdes?
 ¿Qué clase de pigmentación contiene la
espinaca, y si esa pigmentación tiene que ver
con los resultados en la cromatografía?
5.3 EXPERIMENTACION
En el momento de realizar la practica con la
espinaca, podemos afirmar que, si dio un color
verde claro en la tinción, y al colocar en la
cámara de gas, por unos minutos, se observó un
desprendimiento de color verde amarillento
claro, como se evidencia en la Figura 2.
Figura 2. Muestra cromatografía de espica en la cámara de
gas.
5.4 RESULTADOS
En la cromatografía de la espinaca no se vio
evidencia los colores que normalmente se dan en
la cromatografía de las hojas verdes (Clorofila a y
b, xantofila y carotenos), como se evidencia en la
figura 3. Debido a que la espina cuando se tritura,
hay rompimiento de células, para la obtención de
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la de pigmentación, que hay presente en la
clorofila, es por eso que la espinaca en la
cromatografía contiene un color verde clarito,
debido a que ella presenta mayor cantidad de
clorofila (a y b), y desde mi punto de vista puede
ser que la presencia de la abundancia presencia de
la clorofila se puede dar debido a su
concentración de hierro, al mismo tiempo
presenta una escases de carotenos y xantofila, ya
que no hay presencia de fotosíntesis en estas
hojas, debido a que estas son cortadas, para su
venta y consumó.
Figura 3. Tomada de resultados de pigmentación
CONCLUSIONES
En esta práctica de laboratorio aprendimos
a diferenciar, por medio del método
científico, la cromatografía de hojas verde
y hojas de espicas de acuerdo a su
concentración de la pigmentación
encontrada en la clorofila de estas hojas.
6. BIBLIOGRAFÍA
mejia, C. (2007). tecnicas cromatograficas .
universidad autonoma de mexico .
Murcia, A. (2019). Cromatografia con hojas de
espinaca. wordpress.
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rodriguez, y. g. (2019). cromatografia . Saber Más .

Romero, S. (2017). Beneficios de la espinaca . muy

interesante.