MICROBIOLOGIA RESUMEN

INMUNIDAD ESPECIFICA
 Características de los vertebrados
 Pasa cuando se superan las barreras inespecíficas para proteger el
organismo
 Linfocitos reconocen los antígenos y actú an para eliminarlos, destrucció n
directa seria por las células T (inmunidad celular)
 Inmunidad humoral: son las células B, forman proteínas especializadas
denominadas anticuerpos (inmunoglobulinas)



 los linfocitos Tyo son 1-5% de células T pero mas del 50% en epitelios
 los linfocitos T y B generan su diversidad en forma aleatoria y deben
someterse a controles para evitar que reaccionen con lo propio


 los anticuerpos CMH y TCR/BCR son moléculas de reconocimiento del
sistema inmune adaptivo
 el TCR actú a como receptor de membrana, pertenece al linfocito T, dos
tipos: formados por cadenas “ab” y “yo”. “ab” SOLAMENTE reconoce
péptidos formando complejos con moléculas MHC.
 En el adulto linfocitos; 10 billones de células, 2% de peso corporal total y
25% total de los leucocitos, 6-10 micras.
Dos tipos: pequeñ os: no hay grá nulos, poco citoplasma, nú cleo redondo
Granulares: LGL, muchos grá nulos, mas citoplasma, nú cleo lobulado.
 sub poblaciones: CD4: cooperadores/inductores, ayudan a linfocitos B a
formar anticuerpo ante estimulo antígeno, estimula inmunidad mediada
por células.
CD8: linfocitos T cito tó xicos supresores
  TH2 su target es helminth parasites.
 En el timo se produce especializació n funcional que expresara el
marcador CD4, precursor de los T colaboradores que aparecen en la
sangre periférica. La otra expresa en la superficie de la CD8 y da origen a
los T citotoxicos.
 Las CD4 son reguladoras bá sicas de los T y B y de monocitos mediante
producció n de citosinas y contacto celular directo.
Linfocitos B
 Células B 10-15% de linfocitos sanguíneos periféricos, %0% de los
esplénicos y 10% de los linfocitos de medula ó sea.
 Células B expresan en su superficie moléculas de Ig intramembranosas
que funcionan como receptores de antígenos (BCR)
  Funció n de estas células es producció n de anticuerpos, funcionan como
APC y eficaces en procesamientos de antígenos (por citosinas)


 presentación de antígeno: antígenos proteicos son procesados, generando
un péptido que se une con MHC y dps promueve al linfocito T
Inmunoglobulinas
 producidas por los linfocitos B, se unen a antígenos, son polipeptidicas,
estructuras tridimensional, separació n electroforética (en la fracció n
gamma)
 secretadas por linfocitos B maduros que se han diferenciado a células
plasmá ticas.
 Estructura: formadas por dos cadenas pesadas y dos cadenas livianas (k
o y alrevez)


 conformació n: Monomerica IgG, IgE, IgD (GED)
dimerica: IgA
pentamerica: IgM


 isotipos: dependen de las regiones constantes de CH y CL
 alotipos: diferentes polimorfismos en individuos de misma especie.
Dependen de diferencias de 1 a 4 aminoá cidos en CH y CL
 Idiotipos: cada variantes reconoce un antígeno diferente. Dependen de
porciones VH y VL

 IgG: (75%) 1000 mg/dL. resp secundaria, opsonizacion bacterias,

atraviesa placenta. Fijació n del complemento. 4 subclases. Activa
complemento, induce citoxicidad mediada por células

 IgA: (10-15%) 200 mg/dL secretora, membranas mucosas (saliva,

lagrimas, moco, leche materna. Dos subclases. Dimerica secretoria en
mucosas y monomerica en circulació n.

 IgM: (9%) 120 mg/dL resp primaria, fijació n del complemento, primera
producida por el feto, secretada en forma de pentá mero, se une a
membrana de linfocitos B vírgenes.
  IgE: (0.0004%) 0.05 mg/dL hipersensibilidad, aumenta en alergias,
infecciones por pará sitos. Unida a membrana de basó filos, defensa
antiparasitaria contra helmintos, menor concentració n en plasma.

 IgD: (0,2%) 3 mg/dL superficie de células B, unida a membrana de

linfocitos B vírgenes.

 La IgA predomina en secreciones externas mientras que en líquidos

internos predominan la IgG e IgM.

HIPERSENSIBILIDAD
 Alteraciones de la respuesta inmune: reacciones d hipersensibilidad,
enfermedades auto inmunitarias, síndromes de inmunodeficiencia.
 Reacciones normales: defensa antinfecciosa o antitumoral, tratan de
aniquilar el antígeno con menor efecto lesivo para el organismo.
 Reacciones inmunitarias anormales: hipersensibilidad (por respuesta
excesiva o descontrolada contra antígeno externo), autoinmunidad. (por
falla de autotolerancia y resp inmune contra antígenos propios, Son
capaces de producir dañ o tisular y enfermedad.


 tipo I o inmediata: inducida por sustancias como alérgenos generalmente

inocuas para el organismo. Exposició n puede darse por vía inhalatoria,
digestiva, inyecció n o contacto directo.
1. Alérgeno célula plasmá tica  las IgE s unen al mastocito
 mastocito sensibilizado
2. Alérgeno  mastocito sensibilizado  mastocito
degranulandose.
 Dos fases: INICIAL  mediadores primarios que producen
dilatació n vascular, epasmo musculo liso y secreció n
glandular. 3-6- min
TARDIA  infiltració n por eosinofilos, neutró filos,
basó filos, monocitos linf TCD4 TH2. Intervienen
mediadores secundarios.
  Mediadores lipídicos: leucotrienos C4 y D4, B4.
Prostaglandina D2, Factor activador plaquetario.
 Mediador importante: MASTOCITO

 Histamina: contracció n del musculo liso, aumento de permeabilidad

vascular, aumento de secreció n de moco.
 Enzima: producen lesió n tisular y llevan a generació n de cininas.
 Proteoglucanos: heparina y sulfato de condroitina: para envolver y
almacenar aminas en grá nulos.


 localizada: asma bronquial, rinitis alérgica, conjuntivitis alérgica, fiebre

del heno, alergia cutá nea, gastroenteritis alérgica etc.
 Sistémica: urticaria, eritema cutá neo, bronco-constricció n, hipersecreció n
de moco, edema laríngeo, có lico abdominal, vomito y diarrea, vaso
dilatació n.
 Anafilaxia: sistémica o local mediada por la IgE que se produce en una
persona sensibilizada que recibe el antígeno. La sistémica uede ser por
meter hormonas, enzimas, fá rmacos, aparecen picor, ronchas, eritema
cutá neo, contracció n de bronquiolos, dps puede entraren shock y morir.
Anafilaxis puede ser una picadura de abeja. LOCAL: producida por
alérgenos exó genos como el polen, caspa de animales, polvo, pescado, ej…
urticaria, angioedema, asma, rinitis alérgica, alergia ató pica, fiebre del
heno.

 Tipo II o cito tóxica mediada por Ac:

 Agresió n inmunoló gica sobre estructura sobre la que asienta el alérgeno
 Mediada por las células dependiente de anticuerpos:
NK
 Reacciones dependientes de complemento,
activació n vía clá sica
 Anticuerpos que median son fijadores de
complemento: IgM e IgG
 IIa: por reacciones citoliticas mediadas por.
 la via clá sica: IgM y los isotipos IgG 123
interaccionan con Ag, activan el complemento y
producen lisis celular
 opsosnizacion y fagocitosis
 citotixcidad mediada por células y dependiente de
anticuerpos (ADCC) se produce lisis de células
recubiertas por Ac del tipo IgG por parte de las NK.
 Ejemplos: eritroblastosis fetal, anemia hemolítica,
autoinmunitaria, PTT, dermatitis ampollosas,
reacciones transfusionales.
 IIb: estimulació n o inhibició n por parte de Ac con la funció n de receptores
de la superficie celular.
 Enfermedad de Graves: se producen Ac contra el receptor
TSH que se comportan como la TSH y provoca
hipertiroidismo.
 Miastenia Gravis: se producen anticuerpos contra el
receptor de la acetilcolina que por el contrario bloquean la
transmisió n neuromuscular.
 Cuatro mecanismos de acció n:
o Lesió n: opsonizacion y fagovitis dependientes del
complemento o del receptor Fc. Ejemplos…
reacciones transfuncionales, anemia hemolítica
autoinmune, eritroblastosis fetal, síndrome de
Goodpasture.
o Citotixicidad mediada por células y dependiente de
Ac (ADCC). Unió n con receptor Fc de células no
 sensibilizadas Monocitos, Neutró filos, eosinofilos,
NK. INVOLUCRA IgG
o Inflamació n mediada por complemento o por
receptor FC. Ag de las membranas basales, lesió n
por inflamació n. Ejemplos… Sx goodpasteur,
M.glomerulas y pulmonar. (inflamation and tissue
injury)
o Disfunció n celular mediada por anticuerpos
(anticuerpos anti-receptor). Ejemplos…miastenia
Gravis y enfermedad de graves. (antibody stimulates
receptor without hormone and antibody inhibits
binding of neurotransmitter to receptor)
 Tipo III o inmunocomplejos
 Enfermedades SISTEMICAS por complejos inmunes
 Enfermedad LOCAL por complejos inmunes (reacció n de Arthus)
 Producidas por anitgeno soluble
 Mediada por la IgG y la IgM
 Requiere de Ag como de Ac
 Vía clá sica de activació n del complemento involucrada
 Células fagociticas involucradas
 Formació n de inmunocomplejos TRES: AG + Ac = complejos AgAc
 A: combinació n de infecció n persistente y débil respuesta de
anticuerpos. EJ
o infecciones por estreptococo viridans alfa hemolítico
o endocarditis infecciosas por estafilcoco
o infecciones por plasmodium vivax
o hepatitis virales
 B: secundarimaente a procesos autoinmunes
o Lupus eritematos sistémico
 C: producidas en superficies corporales por estimulació n repetida
de materiales antigénicos
o Alveolitis alérgicas extrínsecas: pulmó n del granjero o del
cuidador de palomas

o En la sangre el Factor ¡ por acció n enzimá tica escinde el

C3b y deja un fragmento C3dg unido a CR1 de la
membrana del GR o plaqueta
 o Estos complejos solubles son eliminados por células
fagociticas portadoras de rFC IgG.
o Los inmunocomplejos grandes son fijados por el
complemento serico y solubilizados a IC mas pequeñ os
que son dps fagocitados por los macró fagos en hígado y
bazo.
 Peristencia de IC: los I que no se unen al complemento ni a las
plaquetas , no son captados por el hígado ni el bazo, sino que se depositan
en tejidos como piel, riñ ó n y musculo donde inician reacciones
inflamatorias.


 Etapas de tipo III
1. Se forman complejos antígeno-anticuerpo en sangre, no
pueden ser completamente eliminados por los
macrófagos
2. Los complejos se depositan en el lecho capilar entre las
células endoteliales y la membrana basal.
3. Complejos activan el sistema complemento por la via
clásica produciendo vasodilatación
4. Las proteínas del complemento y los complejos atraen
leucocitos en el sitio de lesión.
5. Los leucocitos descargan sus mediadores de lisis y
promueven masivamente la inflación local. Esto puede
llegar a producir daño de tejido y hemorragia.
 Tipo IV o hipersensibilidad retardada: mediada por células (T)
 Tarda mas d
 e 12 horas en desarrollarse
 Aparecen frente a bacterias, hongos y pará sitos difíciles de erradicar.
 Sus reacciones se deben a células Th1 efectoras, antígeno-especificas
 Linfocitos t, CD4 y CD8 activan macró fagos e inducen inflamació n
mediante la producció n de IFN-y y TNF
 Linfocitos T CD8 marcan célula blanco directamente
 Las células T responsables de la respuesta tardía deben haber sido
sensibilizadas previamente con el antígeno
 Células T actú an reclutando otros tipos celulares al lugar de la reacció n.
 TCD4 subgrupo Th1 y linfoctios CD* citoliticos secretan citosinas (IFNy)
que activan macró fagos.
 Los linfocitos T pueden ser autoreactivos o específicos para antígeno
externos presentes o unidos en tejidos.
 Macró fagos activados producen dañ o por mediadores inflamatorios y
citosinas proinlfamatorias
 Células endoteliales expresan moléculas de adhesió n y MHC II
 Se produce fibrosis por efecto de las citosinas y factores de desarrollo de
los macró fagos.
 Rechazo de transplante
21-28 semanas o días!!???
 Granulomas: las células de Langerhans internalizan y procesan el
hapteno y se lo presentan a células T antígeno-especificas. Las citosinas
producidas por células de piel inmunocompetentes (queratinocitos,
Langerhans, células T) reclutan la T no-antígeno especificas y macró fagos.
La reacció n granulomatosa lesiona tejidos.

 Tuberculina : etapas…
a. El Ag se inocula subcutá neamente y es procesado
por células presentadoras de AG “locales”
b. Células Th1 efectoras reconocen el Ag y liberan
Citocinas que actú an sobre el endotelio vascular
c. El reclutamiento de células fagocitos, fluido y
proteínas al sitio de entrada del Ag ocasionan la
lesió n visible.
 La reacció n cutá nea a tuberculina es debida a monocitos
o Constituyen 80-90% de infiltrado total
o Macró fago principal célula APC en la reacció n tuberculinica
o Reacció n se resuelve de 5-7 días
o Ú til como prueba diagnostica

 Dermatitis por contacto: dos fases…

o Fase de sensibilización y fase efectora
o Sensibilización: exposició n al antígeno (hepeteno a la proteína)
procesamiento y presentació n del Ag por células de Langerhans
migració n de Langerhans  activació n LT
o Efectora: segundo contacto con el Ag  activació n de linfocitos T
con producció n de citosinas  generació n de infiltrado
inflamatorio
o Características clínica agudas: piel brillante, eritematosa,
edematosa, ampollosa.
o Características clínicas crónicas: fisuras, liquenificacion,
eritema, edema moderado, cambios en pigmentació n.

 Paciente de 7 años con antecedentes de padres alérgicos, luego

de comer chocolate presenta urticaria generalizada, coloración
roja de toda la piel, prurito. Este paciente presenta la liberación de
todas las siguientes sustancias que son los mediadores de la
reacción EXCEPTO

a. Histamina
b. Factores quimiotácticos de eosinófilos
c. TNF
d. Leucotrienos
e. Prostaglandinas
Participan en la reacción del paciente anterior EXCEPTO

a. Basófilos
b. Eosinófilos
c. Linfocitos CD8
d. IgE

Mujer de 16 años con el diagnóstico de Lupus eritematoso Sistémico,

presenta una anemia hemolítica. El mecanismo de su anemia sería por:

a. Unión de la IgG en la superficie del glóbulo rojo

b. Fagocitosis del glóbulo rojo por el macrófago

c. Lisis del glóbulo rojo por activación del complemento (complejo de ataque
a membrana)

d. Solo a y b son correctas

e. Todas son correctas

Que tipo de Hipersensibilidad es?

Paciente con tos crónica, fiebre y pérdida de peso, pensando en

tuberculosis el médico le practica una prueba de tuberculina, a las 48
horas de la inyección, se nota una pápula de 20 mm de coloración roja y
caliente, la célula que participa para la producción de la lesión es:

a. LTh1

b. LT CD8

c. Macrófagos

d. Solo a y b son correctos

e. Todas son correctas

Son enfermedades que se producen por hipersensibilidad tipo IV

Dermatitis de contactoRechazo de transplante

Reacción tuberculínica

Reacción de Arthurs

Dermatitis de contacto

Rechazo de transplante
Reacciones serológicas

o son reacciones antígeno-anticuerpo “in vitro”

 útiles porque permiten estudiar el antígeno disponiendo de anticuerpos
conocidos y vice versa
 emplearse con fines cualitativos (conocer presencia de Ag o Ac) o
cuantitativos (dosificar cantidad)
 se caracteriza por su especificidad y su sensibilidad.
 Prueba de Oro: prueba para definir inequívocamente una
enfermedad. Se parte de una suposición que esta diagnosticara al
100% de casos o que permita hacer diagnósticos perfectos.
 La asociación entre AgAc tiene ligar entre la porción Fab del ac y el
determinante antigénico del Ag (epitopo)


 se distinguen dos fases.
1. La unión del Ag con el Ac formando el inmunocomplejo
2. En las manifestaciones de dicha union, hay agregación de
inmunocomplejos, que es posible por la polivalencia de los
Ags porque los Acs son bivalente MENOs la Igm (10) y la IgA
secretora (4).
 Diagnostico directo: utilización de anticuerpos específicos para
detector el antígeno
 Diagnósticos indirecto: al revés

 Las principales pruebas que se utilizan en el diagnóstico de enfermedades

infecciosas y parasitarias son:
precipitación, electroforesis, inmunodifusión,
contrainmunoelectroforesis, prueba de ELISA (Enzyme-linkey-inmuno-
absorbent-assay/Análisis
Inmunoabsorvente enzimático), hemaglutinación , radioinmunoensayo,
inmovilización, aglutinación, intradermorreacción, transformaciónblastoide y
la reacción de fijación del complemento
 Las reacciones mas importante: aglutinación, precipitación, neutralización,
fijación de complemento, con elementos marcados (cuando la unión no se
traduce en algo visible y se recurren a un marcador: fluorocromos (IF),
enzimas (ELISA O EIA) o a isotopos radioactivos (RIA).

 Aglutinación: donde el Ac (aglutinina) aglutina o conglomera al Ag

(aglutinógeno) especifico. Ag reacciona con su Ac especifico se observa
formación de grumos. En estas reacciones el determinante antigénico esta
sobre la superficie de una partícula (latex) o de una célula (glóbulo rojo)
o Permiten distinguir toxinas, fármacos, antibióticos, y otra sustancias
para medir en el suero de los pacientes.
o Son mas sensibles que las de precipitación
o Ejemplo… con partículas de latex, la detección de antígenos en el LCR
pertenecientes a S, pneumoniae, H. Influenza y N. Meningitiditis
pueden realizarse con esta partículas recubiertas con los Ag
bacterianos específicos.
o Test de coombs directo e indirecto
 Precipitación: se utiliza cuando el Ag esta en forma soluble. Al unirse Ags
con Acs solubles forman agregados insolubles que precipitan, lo que dps
inactiva a los Ags. Para que ocurra esta reacción el Ag y el Ac tienen que estar
en concentraciones optimas, si uno de los dos esta en exceso no se pueden
formar grande agregados de Ag-Ac
o Muy especifica, poco sensible, se necesita mucho Ac para que se
detecte.
o Para identificar antígenos y anticuerpos, toxina, antitoxinas y proteínas
en la sangre
o 2 técnicas: difusión en agar y difusión radial simple
o esta reacción es mas rápida y mas intensa cuando la relación del
complejo es 1/1

 Neutralización: la unión Ag-Ac se pone de manifiesto por la inhibición

de un efecto biológico que posee el Ag, sucede tanto In vivo como in
vitro. La unión del Ac bloque la acción de Ags contra la célula y así los
Ags no se pueden unir a células y ,matarlas.
o si el Ag es una sustancia toxica, la unión con el Ac provoca su
 neutralización, no puede toxificar.
o Se basa en detección de Ac capaz de neutralizar la toxicidad de
la moléculas o infectividad del virus.
o Los Acs se fijan a la molécula toxica en impide el daño.
Pruebas en animales o células in vitro “sistemas indicadores”
o Para detector infecciones virales
o Ejemplos… inhibición de la hemaglutinación: capacidad de
ciertos patógenos. Virus de la influenza para aglutinar glóbulos
rojos de ciertos animales (hemaglutinación)

 Fijación del complemento: complemento actúa junto con los Acs

específicos para llevar varios tipos de reacciones de Ag-Ac que de otra
manera no podrán ocurrir: como lisis de células bacterianas, hemolisis.
o Se desarrolla en dos fases: reacción Ag-Ac especifico en un
medio liquido
adición de complemento + hemolisina dependiente de
complemento + hematíes (GR)
si se produjo la reacción, el complemento queda fijado a este
complejo y no puede activar la hemolisis de los GR. Si Hay
hemolisis sale reacción negativa

 con elementos marcados:

o Inmunofluorescencia IF: incubación de una muestra con
anticuerpo que detecte la moléculas. Los Igs se unen a los
fluorocromos, de modo que cuando se forma el inmunocomlejo
todo se hace fluorescente. Acs conjugados a fluorocromos
(moléculas que al ser excitadas con la energía de una
determinada longitud de onda son capaces de emitir una
energía con mayor longitud de onda. Se aplica en diagnostico
de diversas patologías y en investigación.
 Existen 2 tipos: Directa: el anticuerpo lleva unida una
molécula fluorescente. SE DETECTA EL AG
Indirecta: Ac es reconocido por un segundo anticuerpo
marcado con fluor. SE DETECTA EL AC
IF en sándwich: upara detectar Ac ligados a tejidos, se
añade el Ag especifico y tras lavar, Ac marcados con
fluorocromos. Se necesitan tanto Ac marcados como los
Ags, igual que la IFD. Ej… Ac antinucleares en el LUPUS
o ELISA: análisis inmunoabsorbente enzimático. Revelan
presencia de Ag o Ac mediante reacción Ag-Ac especifica en la
que el complejo forado se mide con una reacción catalizada por
una enzima. Para que sea visible se utiliza una
antinmunoglobulina marcada por una enzima que se combina
con el Ac. Puede ser directo o indirecto. Se BASA EN
DETECCION DE AG INMOVILIZADO SOBRE UNA FASE
SOLIDA MEDIANTE EL AGREGADO DE ACS (los acs están
 unidos a a una fase solida que suele ser una mircoplaca. Dps
se agrega un sustrato que se convierte en cromoforo. SE
CUANTIFICA por espectrofotometría.

En el directo la enzima conjugada suele ser peroxidasa o fosfatasa

alcalina, que se use para detectar el antígeno. En el caso de la
fosfatasa la desfosforilizacion es a responsable de la aparición del
color.

El indirecto es el mas utilizado para la determinación del AC.

Consiste en la inmovilización a la placa de Elisa del Ag del que se
quiera conocer si existe en el suero Acs específicos. Pasos: el
antígeno se pega a la placa se añade el suero problema  se
agrega el conjugado (Ac)  se agrega el sustrato

 RIA radioinmunoanálisis… se puede realizar por competición o por

exceso de Acs. Comprueba la reacción Ag-Ac y la existencia de Acs
en el suero y los cuantifica.
 INMUNOTRANSFERENCIA O WESTERN BLOT: para detectar
proteínas especificas en una muestra determinada. Se recomiendo
para analizar sueros dudosos por otras técnicas (confirma el test de
Elisa para HIV+.
o Electroforesis d ela muestra con las proteínas  transferir
proteínas desde el gel a membrana nitrocelulosa  coloración
de proteínas para confirmar trans  bloqueo de sitios de unión
inespecíficos remanentes en la membrana  incubación con el
anticuerpo primario  lavados del anticuerpo no unido 
detección del anticuerpo utilizando acs conjugados a perroxidas
de rábano picante  revelado con sustrato quimioluminiscente
y detección con placas radiográficas.
o FASE FINAL: se observan aparición de diferentes bandas con
las que ha reacciona el suero problema y control.
 SEROTIPIFICACION: detección e identificación de microorganismos
basado en las característica de moléculas que se encuentran el la
superficie. Se emplea por ejemplo la aglutinación para identificar cepas
bacterianas.
o Hay tres grupos de moléculas que se puede usar para
identificación serológica:
1. Forman parte de la CAPSULA que poseen antígenos K
2. Forman parte de FLAGELOS de bacterias con antígenos
H
3. Forman parte de LIPOPOLISACARIDO de la bacteria
con antígenos O
o Según el tipo de anitgeno cada uno de estos grupos
pertenece a un serotipo.
o ejemplo “la bacteria de la hamburguesa” que causa
problemas intestinales es una escherichia coli
perteneciente al serotipo O157:H7
o ej… para el virus VIH. Métodos directos: cultivo viral,
detección de ácidos nucleicos, antigenemia. Indirectos:
 detección de anticuerpos específicos. Pruebas de
screening (aglutinación)

 INMUNOCROMATOGRAFIA: prueba rápida. Se basa en migración de

una muestra a través de una membrana de nitrocelulosa. Muestra es
añadida a zona del conjugado que contiende el anticuerpo especifico
contra uno de los epitopos a detectar. Si contiene el antígeno
problema, se unirá al conjugado formando un complejo inmune y
migrara a través de la membrana. Si hay rayas son positivas.