UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

(UASLP)
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
INGENIERÍA EN ALIMENTOS

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA No.3
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CARBOHIDRATOS
ESTANDARIZACIÓN DEL REACTIVO DE FEHLING-SOXHLET
Y CUANTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES

LUNES/MIÉRCOLES 13:00 - 15:00

SEMESTRE AGOSTO-DICIEMBRE 2023

EQUIPO 2
▪MORA PÉREZ DANIELA MONSERRAT
▪MENDEZ RODRÍGUEZ PAOLA VIANEY
▪DEL CASTILLO AMBRIS JOSÉ LUIS
 FUNDAMENTOS
Los métodos reducto-métricos determinan la totalidad de los azúcares reductores
presentes en una muestra. Estos métodos se basan en la capacidad reductora de los
distintos azúcares sobre disoluciones salinas de metales pesados (sobre todo cobre). Todos
los monosacáridos se encuentran en forma hemiacetálica, con su grupo lactol libre. En
disolución alcalina la estructura hemiacetálica se rompe y el grupo carbonilo reductor se
libera. Es decir, todos los monosacáridos tienen poder reductor. En el caso de
oligosacáridos, no todos poseen poder reductor. En los oligosacáridos, el enlace entre
monosacáridos (enlace glicosídico), se forma entre el grupo lactol de un monosacárido y un
grupo –OH del otro. Si este grupo hidroxilo corresponde al grupo lactol del segundo
monosacárido, el disacárido resultante carecería de poder reductor, por no tener ningún
grupo lactol libre, como es el caso de la sacarosa. Sin embargo, si el grupo lactol de, al
menos 1 monosacárido queda libre, el oligosacárido resultante sí que presentaría poder
reductor, como sucede en el caso de la maltosa. Para determinar los azúcares
no reductores, deben escindirse primero por hidrólisis ácida o enzimática, a sus
correspondientes monosacáridos, que sí son reductores. Por tanto, mediante los métodos
químicos basados en la reducción del cobre, se pueden determinar solamente azúcares
reductores Si se quieren determinar azúcares reductores y no reductores, es necesario
someter a la muestra previamente a un proceso de hidrólisis y, de esta forma, todos los
azúcares presentes se transformarán en azúcares reductores, pudiendo así
determinar los azúcares totales. La reacción que se da en este tipo de métodos es la que
tiene lugar entre las disoluciones de azúcares y las disoluciones alcalinas de sulfato cúprico a
alta temperatura. Las disoluciones empleadas en estas determinaciones contienen sulfato
cúprico, un álcali y tartrato sódico potásico (sustituido por ácido cítrico en
algunos métodos). Es muy usual utilizar las disoluciones de Fehling. Como se ha comentado
anteriormente, en disolución alcalina la estructura hemiacetálica de los azúcares se rompe y
el grupo carbonilo reductor se libera. Éste se oxida con el ión Cu2+ en disolución alcalina a
temperatura de ebullición y en condiciones de trabajo estrictamente controladas,
reduciéndose el ión Cu2+ a ión Cu+, formándose finalmente un precipitado de óxido cuproso.
Dicho reactivo está formado por dos soluciones acuosas que son: sulfato de
cobre cristalizado y sal seignette o tartrato mixto de potasio y sodio; es importante tener en
cuenta que ambas se guardan separadas hasta el momento en el que vayan a ser
utilizadas para de esa manera evitar la precipitación del hidróxido de cobre.
Su acción se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los aldehídos el cualse
oxida a ácido y se reduce la sal de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formandoun
precipitado de color rojo. El reactivo de Fehling se basa principalmente, en su reacción, la
oxidación de cobre, elpoder reductor de los azúcares, sea este en monosacáridos,
polisacáridos, aldehídos, y en ciertas cetonas.
 TABLAS DE RESULTADOS

a) Estandarización del reactivo F-S (Micrométodo).

Tabla de Datos.
Promedio
Bureta Volumen Inicial de Volumen Gastado (mL) Concentración
(mL) glucosa de glucosa gastados de de glucosa
(mL) (mL) glucosa (1%)

10 0 1.1 1.2 0.01

Título del reactivo de F-S= (mL glucosa 1%) (0.01)

Título del reactivo= (1.1 mL)(0.01)= 0.011 mL

REACCIÓN:

R-CHO + 2 𝑪𝒖𝟐+ R-COOH + 𝑪𝒖𝟐 𝑶

Aldehído Sulfato Cúprico Ácido Óxido Cuproso

b) Determinación de azúcares reductores en % de glucosa anhidra de una muestra de

concentración desconocida.

Tabla de Datos
Volumen
Título de F- Azúcar reductor Volumen Inicial Gastado de %
S de Fructosa Fructosa concentración
(mL) (mL) (mL) teórica de
Fructosa
0.011 Fructosa 0 1.15 1

% de azúcares reductores (glucosa anhidra) = [(Título de F-S) / (mL gastados de

azúcar reductor)] (100)
% de azúcares reductores (glucosa anhidra) = [(0.011 mL) / (1.15 mL)] (100)
% de azúcares reductores (glucosa anhidra) = 0.956%
 TABLAS DE RESULTADOS

a) Estandarización del reactivo F-S (Micrométodo).

Volumen Gastado de glucosa Título de F-S

(mL) (mL)
1.1 0.011

b) Determinación de azúcares reductores en % de glucosa anhidra de una muestra de

concentración desconocida.

Tabla de Resultados
Volumen Gastado de Fructosa % de azúcares reductores
(mL)
1.15 0.956

DISCUSIÓN E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Mediante los cálculos realizados se pudo cuantificar la cantidad de Título del reactivo de Fehling-
Soxhlet, en donde obtuvimos solo fue necesario utilizar 0.011 mL, lo cuál nos indica que nuestra
estandarización fue casi perfectamente realizada, al solo pasar por 0.1 mL de glucosa al 1% más del
promedio utilizado por otros compañeros.
Por otro lado, el cálculo de la determinación de azúcares reductores en porcentaje de glucosa
anhidra de una muestra de concentración desconocida nos arrojó un valor de 0.956%, que al ser
comparado con el valor teórico de 1%, nos acercamos demasiado al objetivo, y llegando a concluir
que el porcentaje faltante se debió por alguna gota del titulante que se haya agregado como extra
después de cuantificar el volumen gastado.
 CONCLUSIONES

Los azúcares reductores son de gran importancia pues están presentes en los
alimentos y compuestos orgánicos en general. Hay distintos métodos para la
identificación y cuantificación de los mismos, el reactivo de Fehling-Soxhlet es ideal para la
cuantificación pues en su presencia el cobre se reduce y precipita, para cuantificar se lleva a
cabo por medio de la estandarización del reactivo de F-S, y así mismo este se lleva a cabo a través
de una titulación en donde la presencia de un cambio de color es esencial para obtener el punto final
de la misma, dicha reacción se lleva a cabo a altas temperaturas debido a que el azul de metileno
solo señala el punto final en calor, esto se pudo corroborar al enfriarse las soluciones estandarizadas
y tituladas, cambiaban a color morado. Finalmente podemos decir que los objetivos establecidos se
cumplieron con éxito ya que se logró la estandarización y posteriormente la
cuantificación de azucares reductoras mediante la titulación; también se analizó que nuestra
fructosa estuvo preparada adecuadamente ya que no presento un margen de error muy grande, esto
se le puede atribuir a el peso no exacto de la muestra, el mal aforo y el margen de error de cada
aparato, instrumento y material a utilizar.
En esta práctica realizamos la estandarización del reactivo de Fehling-Soxhlet, al momento de
realizar el procedimiento, utilizamos como estándar la glucosa al 1%, nos percatamos de que la
titulación fuera a temperatura de ebullición, comenzamos a titular observando al principio un color
azul en la muestra, pero después al agregar un volumen final de 1.1 ml de glucosa, observamos
como el vire cambió, dándonos como resultado un color rojo ladrillo, por otro lado al realizar la
determinación de azúcares reductores, se aforó la bureta con el azúcar reductor que como equipo
escogimos, el cual fue la Fructosa (ya que esta dio como resultado positivo en la prueba de Benedict),
agregamos al matraz 1 ml tanto de solución A como de B y 5 ml de agua destilada con 1 gota del
indicador óxido-reducción (azul de metileno), igualmente a temperatura de ebullición titulamos,
obteniendo como resultado un vire de color rojo ladrillo. Al momento de realizar los cálculos,
obtuvimos un rango de título de F-S de 0.011, cuando el indicado debió haber sido 0.09, puedo
concluir que algunos factores que afectaron a este resultado pudieron haber sido al momento de
realizar la titulación se nos pudo ir alguna gota de más o alguna burbuja interfirió en la titulación,
alterando el volumen.
Con base a los objetivos de la práctica y al análisis de resultados de esta, es posible concluir que se
realizó la estandarización de reactivo de Fehling-Soxhlet y mediante su cálculo respectivo, utilizamos
0.011 mL del Reactivo de F-S, pasándonos un poco de la cantidad utilizada normalmente.
Y para la cuantificación de estándares reductores en una muestra de concentración desconocida,
obtuvimos un porcentaje de 0.956%, el cuál es un valor bastante aceptable para nuestra parte
experimental, y llevándonos a concluir que el porcentaje faltante para completar el 1% fue
probablemente por una sola gota de titulante que cayó en nuestro matraz después de terminar la
titulación.
 BIBLIOGRAFÍA

• Colombia, U. N. (Noviembre de 2013). Recuperado el 05 de septiembre del 2023, de

http://www.seguridadalimentarianarino.unal.edu.co/sites/default/files/pdf-
eventos/EC_2013-11_Cong.Nal_Fitomejoramiento_Azucares.reductores.papa-
Diana.Duarte.pdf2.
• Moreno, M. (01 de Septiembre de 2016). Foro Actico.Com. Recuperado el24 de
Febrero de 2017, de http://bioquimicaii.foroblog.net/t25-que-es-un-azucar-reducto
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