DERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES Y TOTALES POR EL MÉTODO DE

LANE- EYNON

DERMINATION OF SUGAR AND TOTAL SUGARS BY THE LANE- EYNON METHOD

Erney Contreras, María Carvajal, Miguel Castro
1
Estudiantes Universidad de Córdoba, Facultad de Ingenierías, Programa de Ingeniería de
Alimentos, Análisis de Alimentos, Sede Berastegui-2019 II

RESUMEN
En el presente informe se determine la concentración de azucares reductores y azucares
totales por el método de Lane-Eynon, en este método se utilizó solución de felhing. La
muestra (disolución de jugo comercial en agua destilada) se titularon. Y al final se calculó
una concentración de azucares totales de 24.6% y para azucares reductores de 15%.
Considerándose el contenido de azucares totales muy alejado de la concentración real.
KEY WORDS: azucares reductores, azucares tolales, Lane-Eynon.

ABSTRACT
In this report the concentration of reducing sugars and total sugars is determined by the
Lane-Eynon method, in this method felhing solution was used. The sample (commercial
juice solution in distilled water) was titrated. And in the end a concentration of total sugars
of 24.6% and for reducing sugars of 15% was calculated. Considering the total sugar
content very far from the real concentration.
KEY WORDS: reducing sugars, tolar sugars, Lane-Eynon.

INTRODUCCIÓN
Existen diversos métodos de cuantificación de carbohidratos basados en la capacidad
reductora de los azúcares que tienen libre el grupo carbonilo. Estos carbohidratos son
capaces de reducir elementos como el cobre (Cu+2), el hierro (Fe+3) o el yodo.
En el caso específico del cobre, este es reducido desde Cu+2 a Cu+1. De igual forma, el
análisis de azúcares totales como reductores por el método de Lane y Eynon, aprovecha
la propiedad del poder reductor que tienen los azúcares para su cuantificación; en este
sentido, en el método de Lane y Eynon (1923) se hace reaccionar sulfato cúprico con
azúcar reductor en medio alcalino, formándose oxido cuproso, el cual forma un
precipitado rojo ladrillo. Este método utiliza azul de metileno como indicador, el cual es
decolorado una vez que todo el cobre ha sido reducido, lo que indica el fin de la titulación
(HERNÁNDEZ, L. y GONZÁLEZ, C. Introducción al análisis instrumental)
Reacciones que intervienen en el proceso:
1. CuSO4 + NaOH Cu (OH)2 + Na2SO4
Se obtiene el hidróxido cúprico a través de una reacción de doble descomposición. Este
hidróxido cúprico debe solubilizarse. Esto se logra al hacerlo reaccionar con el tartrato
doble de sodio y potasio.
2. Cu (OH)2 + complejo de tartrato Cu (OH)2 soluble
Como se observa, la solución de Fehling proporciona:
a) La alcalinidad para que las moléculas de azúcar sean hidrolizadas. (Guías de lb de
análisis de alimento, departamento de ingeniería, universidad de córdoba).
Este método es aplicable para los siguientes productos: leche evaporada y condensada,
Productos lácteos, néctares, jugos, mermeladas, cajetas, dulces, moles, jarabes y mieles.

OBJETIVOS
Objetivo general:
Determinar azúcares reductores y totales en muestras de alimentos mediante el método
de Lane y Eynon.
Objetivos específicos:
Cuantificar el porcentaje de azúcar reductor y azúcar total en una muestra de alimento
(jugo high ),teniendo en cuenta los cálculos correspondientes.
Afianzar conocimientos sobre el método de Lane y Eynon para la determinación de
azucares reductores y totales

MATERIALES
 Solución de Fehling:
 Solución A: 34,65 g de sulfato de cobre (CuSO4. 5 H2O) por 500 mL de agua
destilada. Se filtra.
 Solución B: 173 g sal de Rochelle (KNaC4H4O6 - 4 H2O), tartrato doble de sodio y
potasio + 50 g de NaOH por 500 mL. Se filtra.
 Solución de azul de metileno al 1%
 Solución de glucosa anhidra al 0,5%.
 Solución de HCl 1:1.
 Solución de NaOH 6N aproximado.
 Oxalato de sodio en polvo (se utiliza acetato básico o neutro de plomo).
 Se puede usar cualquiera de las siguientes soluciones clarificantes: Ferrocianuro
de zinc, crema de alúmina, acetato básico de plomo, acetato neutro de plomo,
wolfromato de sodio o carbón activado.
 4 erlenmeyers de 250 mL.
 Pipetas de 5 mL
 2 buretas de 50 mL.
 1 matraz aforado de 250 mL
 2 matraces aforados de 50 y de 100 mL.
 PROCEDIMIENTOS

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Se pesó la muestra de tal forma que la concentración de azúcares reductores en
la solución final clarificara estuviera entre 2 – 5 mg/mL, Luego se homogeneizo la
muestra con 50 mL de agua destilada y se traspasó cuantitativamente a un matraz
aforado de 250 mL; se aforo, igualmente se mezcló bien.
ESTIMACIÓN DEL TÍTULO DE LA SOLUCIÓN DE FEHLING
Titulación preliminar de la solución Felhing
En una bureta de 50 mL se colocó una solución de glucosa al 0,5%, igualmente en un
erlenmeyer de 250 mL se adiciono 2,5 mL de solución Fehling A, y 2,5 mL de solución
Fehling B, además 20 mL de agua destilada y algunas perlas de vidrio. Luego se colocó el
erlenmeyer en una plancha de calentamiento y se dejó caer desde la bureta 4 mL de
solución de glucosa. Cuando el fluido erbio este se dejó calentar durante 2 minutos.
Pasados los dos minutos, se agregó 2 gotas de azul de metileno y en calentamiento
constante se continuó agregando pequeñas cantidades de solución de glucosa hasta que
el líquido que se encontraban sobre el precipitado rojo, se volviera incoloro. Por último se
anotó el número de mL de la solución glucosa totales necesaria para reducir 5mL de
reactivo de Fehling (de 10 - 15 mL).

Titulación final de la solución Fehling

En un erlenmeyer de 250 mL se adiciono 2,5 mL de solución Fehling A, y 2,5 mL de
solución Fehling Además 20 mL de agua destilada y algunas perlas de vidrio. Después se
coloque el erlenmeyer en una plancha de calentamiento, luego se dejó caer desde la
bureta 0,5 a 1 mL menos de lo gastado en la titulación preliminar. Se Llevó a ebullición.
Cuando el fluido erbio se dejó que calentara durante 2 minutos. Pasados los dos minutos,
se le agrego 2 gotas de azul de metileno, luego en calentamiento constante agregaron
pequeñas cantidades de solución de glucosa hasta que el líquido que se encuentra sobre
el precipitado rojo, fue se prácticamente incoloro. Igualmente se anotaron el número de
mL de la solución glucosa totales necesaria para reducir 5 mL de reactivo de Fehling (de
10 - 15 mL).
DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES
Titulación Preliminar de la muestra
En una bureta de 50 mL se colocó una solución problema (muestra previamente
preparada).después en un erlenmeyer de 250 mL se adiciono 2,5 mL de solución Fehling
A, y 2,5 mL de solución Fehling B, además 20 mL de agua destilada y algunas perlas de
vidrio, luego se colocó el erlenmeyer en una plancha de calentamiento y se llevó a
ebullición; una vez alcanzado el punto de ebullición, se vertió rápidamente la solución
azucarada desde la bureta. A medida que la coloración (azul) cúprica se debilita indica
que la titulación está llegando a su punto final. Después de debilitado el color se
agregaron 2 de azul de metileno y en calentamiento constante se continuo agregando
pequeñas cantidades de solución problema hasta que el líquido que se encontraba sobre
el precipitado rojo, fue se prácticamente incoloro. Igualmente se anotó el volumen
gastado de la solución azucarada.
Titulación final de la muestra
Se repitió la titulación como lo indicaba el anterior ítem (titulación preliminar de la
muestra), sin embargo antes de que calentáramos se vertió de 1 a 1,5 mL, menos de la
cantidad que se gastó en dicha titulación, luego se Llevó a ebullición durante 2 minutos.
Y se Agregaron 2 gotas de azul de metileno, luego se vertió gota a gota la solución
azucarada, hasta la decoloración del indicador.
DETERMINACIÓN DE AZÚCARES TOTALES
Se midieron 25 mL de solución clarificada con una pipeta y se colocó en un matraz
aforado de 100 mL. Después Añadimos 5 mL de HCl 1:1 y calentamos a 70 °C durante
5 minutos. Además se dejó enfriar a temperatura ambiente. Luego se adicionaron 2 de
fenolftaleína y seguidamente se tituló lentamente con la solución de hidróxido de sodio
hasta el cambio de viraje del indicador, luego se añadió gota a gota HCl (1:1) hasta la
desaparición del color rosado y se aforo con agua destilada.

RESULTADOS Y DISCUSION

 Volumen gastado en la titulación de Fehling: 9 mL

 Volumen gastado titulación de azúcares reductores: 25 mL
 Volumen gastado titulación de azúcares totales: 27 mL
 % Azúcares reductores: 15%
 %Azúcares totales: 24.6%

El contenido de azucares totales del jugo Hit es de 25 g, según la tabla nutricional que
esta presenta en su envase, comparando con los resultados obtenidos donde el
porcentaje de azucares totales fue de 24.6 g se puede afirmar que el valor obtenido
corresponde y se acerca al valor reportado en la tabla nutricional (resultado a-tipico;
generalmente los valores obtenidos en el laboratorio no corresponden con lo reportado en
la tabla nutricional de la muestra), bien sea debido a errores cometidos en el desarrollo de
los procedimientos para el análisis de la muestra. Tal parece que este no fue el caso en
esta ocasión.

CONCLUSIONES

Se puede concluir que la determinación de azucares totales por el método de Lane-Eynon

fue de 24.6% y para azucares reductores de 15%. Considerándose el contenido de
azucares totales bastante cercano al de la concentración real.

INVESTIGACION
Otros métodos para la determinación de azúcares reductores
Método ácido dinitrosalicílico (DNS) En disolución alcalina el azúcar se hidroliza
produciendo un compuesto que se reduce a un grupo nitro del DNS, para dar el producto
monoamino correspondiente. Esta reacción da un producto colorido en solución alcalina.
El original procedimiento de Dahlquist ha sido modificado en un proceso automatizado
para análisis de azucares totales producidos por la hidrólisis de polisacáridos que no
contengan almidón. Para este se requiere tener estándares similares a la muestra.
(Southgate, 1991)
Método de Fehling Cuando un azúcar reductor se calienta en condiciones básicas se
degrada y algunos de los productos de degradación reducen los iones cúpricos para
formar oxido cuproso. (Pomeranz y Meloan, 2000)
Una amplia variedad de métodos se han utilizado para determinar azucares reductores,
todos estos han sido variaciones del método de Fehling. Estas variaciones han sido para
cada tipo de alimento, en cualquier caso el principal logro de modificaciones ha sido
mejorar la precisión de reducción y eliminar cualquier factor que interfiera con la
producción de óxido de cobre, de los factores estudiados, la alcalinidad del reactivo, la
proporción, el tiempo de calentamiento, la concentración del azúcar, parecen ser los más
importantes. A partir de esto, diferentes técnicas han sido utilizadas para determinar el
óxido cuproso que se forma y se han obtenido datos de calibración; de estos métodos los
más usados son el método de Lane-Eynon y el método Munson y Walker. En el método
Lane-Eynon se titula con el reactivo de Fehling caliente en dos etapas, primero se añade
una cantidad de reactivo de Fehling tal que se lleve a cabo la total reducción y después se
determina el punto final con azul de metileno por goteo, es necesario un control de la
temperatura y se sugieren dos titulaciones (Pomeranz y Meloan 2000).

BIBLIOGRAFÍA
Chávez, A. C., Díaz, L. E., & Lopez, G. A. (2013). Tratamiento hidrolítico de Luffa
Cylindrica (LC) para la obtención de azúcares reductores. AVANCES Investigación en
Ingeniería Vol. 10Miller G. L., Anal. 1959. Chem. p31, 426.
FISCHER H. J. y HART, F. L. Análisis Moderno de los Alimentos. España: Editorial
Acribia, 1971.
NELSON, DL; COX. 2014. MM Principios de bioquímica de Lehninger.
POMERANZ Y. y Meloan C. E.; Food Analysis Theory and Practice Third Edition;
Chapman & Hall, USA 2000.
SOUTHGATE, D.A.T.; Determination of Food Carbohydrates Second Edition; Elsevier
Applied Science, Nueva York 1991.
LEES, R. Análisis de los Alimentos. Métodos analíticos y de control de calidad. Editorial
Acribia, España, 1982. PEARSON, D. Técnicas de laboratorio para el análisis de
alimentos.