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PRÁCTICA N° 01:
“DETERMINACIÓN DE AZÚCARES
REDUCTORES EN JUGO DE CAÑA DE
AZÚCAR”
1 INTRODUCCIÓN
Los azucares son esenciales para la producción de energía en todos los seres vivos.
Aunque se asocia más comúnmente con la sacarosa que se encuentra en los alimentos de
sabor dulce, también los encontramos en la mayoría de las frutas y en casi todos los
aperitivos, alimentos procesados o bebidas con sabor.
Hay muchos tipos diferentes de azúcares. Algunos azúcares son azúcares simples con una
estructura simple. Se les conoce como monosacáridos. Algunos ejemplos comunes de
monosacáridos incluyen glucosa, fructosa y galactosa. Algunos azúcares se forman por la
unión de dos monosacáridos. Se les conoce como disacáridos. Algunos disacáridos
comunes son la sacarosa, la maltosa y la lactosa. Lo que usamos como azúcar de mesa se
obtiene de plantas como la caña de azúcar. Los azúcares se pueden dividir en dos grupos
según sus comportamientos químicos: azúcares reductores y azúcares no reductores. La
principal diferencia entre reducir y no reducir el azúcar es que los azúcares reductores
tienen grupos aldehído o cetona libres mientras que los azúcares no reductores no tienen
grupos aldehído o cetona libres.
2 OBJETIVOS
Establecer la determinación de % de azúcares reductores en el jugo de caña.
Conocer los fundamentos de azúcares reductores.
3 REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
3.1 Azúcar reductor
Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo
funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar con otras moléculas.
Existen además algunas variantes de este método, que usan los reactivos de Nelson
Somogyi y Benedict, se utilizan todavía para determinar azúcares reductores en alimentos u
otros materiales biológicos.
En el proceso de oxidación del grupo aldehído de una aldosa a la sal del grupo ácido
carboxílico, el agente oxidante es a su vez reducido, por lo que a las aldosas se les conoce
también como azúcares reductores. Las cetosas también son azúcares reductores, puesto
que son isomerizadas a sus correspondientes aldosas bajo las condiciones alcalinas de la
reacción de Fehling. El reactivo de Benedict que no es alcalino, reacciona sólo con las
aldosas y no con las cetosas. Un método sencillo y específico para la oxidación cuantitativa
de la D-glucosa a ácido D-glucónico hace uso de la enzima glucosa oxidasa, que da lugar a
la formación intermedia de la lactona-1,5 del ácido. La reacción es utilizada comúnmente
para medir la concentración de glucosa en alimentos y otros materiales biológicos, incluida
la sangre (Fenema, 2000).
Link: https://www.youtube.com/watch?v=1hNvDhbk0Ag
por segundo
- Cuando el reactivo cambie de azúl a celeste pasado 1 minuto y medio, agregar 3
gotas de azul de metileno.
- Titular a razón de 1 gota cada 3 segundos, hasta que pase de azúl a amarillo (no
debe superar el minuto)
- Se observa el gasto de la probeta, debe estar cerca a 8,2. Si la muestra tiene mucha
cantidad de azucares se realiza diluciones para que el gasto sea cercano a ese
valor.
Link: https://www.youtube.com/watch?v=d0d1fh_YvRg
Materiales: 8 tubos de ensayo, gradilla, baño María, pinza para tubos de ensayo, tripié
Procedimiento:
- Marcar los tubos del 1 al 8: los primeros 4 se usarán para la prueba de Fehling y los
demás para la prueba de lugol
- Adicionar a cada tubo (1-4) cada uno de las soluciones problema y agregar 2 ml de
reactivo de Fehling y agitar.
- Llevar los tubos a baño maría por 5 minutos
- La reacción es positiva al aparecer una coloración naranja o rojiza o precipitado rojo
que indica la presencia de azucares reductores. El tubo con glucosa y fructosa
reaccionaron positivo a la prueba, los tubos con sacarosa y almidón no
reaccionaron.
- Para la prueba de lugol adicionar 1 ml de solución problema (5-8)
- Agregar 2 gotas de lugol. El tubo con almidón fue el único en cambiar su coloración
(positivo a la prueba), esta prueba determina la presencia de almidón.
Video 3: Prueba de Fehling
Link: https://www.youtube.com/watch?v=Loaa_agy5WU
- Las aldosas son azucares reductores, las aldosas son azucares no reductores
- Los azucares reductors son los que tienen un grupo oH libre, en esta practica se
determinara si la muestra contiene azucares reductores o no reductores
- Reactivo de benedict, agitador, balanza, probeta, baño maria
- Preparacion de la muestra: fructosa, glucosa, maltosa sacaraosa
- 0,1 g de las muestras, disolver con 10 ml (en un probeta), pasar a un biker, rotular,
realizar con cada muestra
- El reactivod de benedict esta formado con ion cuprico
- |-2mlebenedict a baño maria por 5 -10 minuto
- El reactivo de benedict es un agente oxidante y el azucar es un agente reductor, el
oxido cuproso es lo que se forma de color rojo.
Reactivos:
6 PROCEDIMIENTO
Determinación del título de Fehling
0,25 ×9,6
x= =0,048
50
V 1× f
%A :R ≔ x 100
V 2× P
Donde:
Resultado:
100 ×0,048
%A : R ≔ x 100
8,2× 4
%A :R ≔ 0,15
8 CONCLUSIONES
Para la determinación de azucares reductores se requiere de clarificar la muestra de jugo de
caña para eliminar las impurezas y sedimentos que se puede hacer mediante la adición de
acetato de plomo y carbón para su filtración
Los métodos de determinación de azucares reductores se puede realizar con los reactivos
de Fehling, Benedict, Tollens, Schiff
Un azúcar reductor es todo azúcar con un grupo carbonilo en su estructura, el cual puede
funcionar como aldehído o cetona según su ubicación en dicha estructura. Se llaman
azúcares reductores porque poseen la capacidad de reducir otros compuestos gracias a la
alta reactividad del doble enlace del oxígeno.
9 CUESTIONARIO
a) Investigue la técnica de determinar un azúcar invertido
El azúcar invertido se forma por una reacción química de hidrólisis ácida o inversión
enzimática, en donde lo que ocurre es que se rompe la sacarosa en los elementos
básicos que la componen: glucosa y fructosa. Por lo que el azúcar invertido es
esencialmente un producto que puede ser obtenido involuntariamente o bien de
forma provocada por una reacción química
Se obtiene a partir del hidrólisis del azúcar común (sacarosa). Esta hidrólisis puede
llevarse a cabo mediante tres métodos:
- Por enzima invertasa.
- Por acción de un ácido a temperatura elevada (esto sucede
espontáneamente durante el almacenamiento de jugos de fruta). Se prepara
un almíbar (jarabe de sacarosa) y se acidifica utilizando ácido cítrico, como
resultado se elimina un punete de oxígeno transformando la solución acuosa
de sacarosa en una solución acuosa de glucosa+fructosa.
La hidrólisis ácida de sacarosa es el método en el que se basa la producción
de jarabes de azúcar invertido, sin embargo, este método puede producir
caramelización, “off flavored” y colores en el azúcar invertido (Catana et al.,
2005).
- Pasando la solución por resinas sulfónicas.
b) Investigue acerca de la obtención de jarabes invertidos por vía enzimática.
La hidrólisis enzimática se emplea frecuentemente para azúcares que contienen
gran cantidad de cenizas, pues se necesitaría mucho ácido para vencer el efecto
amortiguador de esas sales. Esta inversión se efectúa mediante la acción de las
hidrolasas invertasa o invertina, las cuales generalmente son preparados
comerciales que se obtienen de levaduras, generalmente a partir de una cepa de
Saccharamyces cerevisae.
La hidrólisis enzimática de la sacarosa proporciona una herramienta adecuada para
superar los problemas de caramelización, y producción de “off flavoreds” y colores
en el azúcar invertido, ya que el proceso se realiza en condiciones moderadas de pH
(4-5) y temperatura (35-50 °C) en comparación con las utilizadas en la hidrólisis
ácida pH de 2 y 75 °C (Catana et al., 2005). En la hidrólisis enzimática de la
sacarosa con invertasa se evita la producción de compuestos coloreados generados
por la oxidación y no requieren de tratamientos de decoloración (Combes y Monsan,
1983), también se evita la formación de sabores indeseables resultado de la
hidrólisis ácida (Kotwal y Shankar, 2009).
c) Elabore una lista nutrida de los jarabes invertidos en la industria de alimentos
y la función que cumplen en cada caso
El azúcar líquido invertido tiene mayor poder endulzante que el azúcar común,
aproximadamente un 30% más.
- En la elaboración de alimentos o repostería como tortas, tartas, budines, etc.,
se debe reemplazar la cantidad de azúcar que dice la receta por 40% de
azúcar blanca y un 60% de azúcar invertido.
- El azúcar invertido es uno de los ingredientes solicitados en algunas recetas
de repostería, panadería, confitería y jarabes entre otras, es más dulce que el
azúcar común o sacarosa y ayuda a mantener el sabor dulce y la humedad
de los productos en los que se aplica.
- El azúcar invertido también es utilizado en la heladería por su poder
anticongelante, es decir, evita la recristalización, como la glucosa o la
dextrosa, proporcionando al helado una textura maleable, suave y cremosa.
Fennema, O.R. 2000. Química de los alimentos. 2 ed. Zaragoza España. Edit. Acribia S.A
Clarke, M. A.; Blanco, R. S.; y Godshall, M. A. 1986a. Colorant in raw sugars. Proceedings.
Intern. Soc. Sugar Cane Technol. (ISSCT) 2:670-682.