“Año de la unidad, la paz y el desarrollo”

Práctica de Laboratorio N°11

Alumna: Hurtado Díaz, Marita Verónica

Docente: Cecilia Bardales Vásquez
Curso: Bioquímica y Nutrición Humana
NRC: 8008
 SEMANA N° 11
LABORATORIO N° 10
DETERMINACIÓN DEL PERFIL LIPÍDICO
INTRODUCCIÓN
La determinación del perfil lipídico incluye la medición sérica de:
● colesterol total
● triglicéridos
● HDL colesterol
● LDL colesterol
Se indica para despistaje, diagnóstico y monitoreo de las dislipidemias. Se consideran
como tales a las alteraciones del perfil lipídico sea aumento o disminución de alguno
de sus componentes. Como etiología puede ser primarias (como el
hipercolesterolemia familiar, hiperlipidemia familiar combinada, etc) o secundarias a
obesidad, diabetes, etc. El hipercolesterolemia, la hipertrigliceridemia, el aumento de
LDL y la disminución de HDL se asocian a mayor riesgo coronario.
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL
INTRODUCCIÓN
El colesterol es una molécula lipídica, base de síntesis de los demás esteroides como
las hormonas masculinas, femeninas, gluco y mineralocorticoides, así como las sales
biliares y la vitamina D, con ellas comparte el núcleo ciclopentano perhidrofenantreno.
Forma parte de las biomembranas regulando su fluidez. Tiene origen endógeno por
síntesis a nivel hepático, intestino y otros tejidos; y exógeno de la dieta (de origen
animal como la yema de huevo, carnes etc.). Se considera importante su participación
en la aterogénesis unida a la Lipoproteína de baja densidad o LDL, por ello su
determinación aislada o como parte del perfil lipídico es muy importante para evaluar
el riesgo coronario.
FUNDAMENTO
La secuencia reaccional es la siguiente:
CHE
ésteres del colesterol ----------------- colesterol + ácidos grasos
CHOD
colesterol + O2 -------------------colesten 3-ona + H2 O2
POD
H2 O2 + 4-AF + aceptor ------------------quinonimina roja
Siendo CHE: colesterol esterasa; CHOD: colesterol oxidasa; POD:
peroxidasa
4 AF: aminofenazona Aceptor: fenol
MATERIALES Y REACTIVOS
Toma de muestra: agujas o jeringas, ligadura, tubos
Tubos
Centrífuga
Espectrofotómetro.
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes indicados.
Puntas
Baño maría a 37 °C
Cronómetro.
Standard de colesterol: 200 mg/dl
Reactivo Apara colesterol: con CHE, CHOD, POD, AF, fenol
MUESTRA: suero
PROCEDIMIENTO
Armar el siguiente sistema

Incubar 5 minutos en BM a 37 °C Leer en espectrofotómetro a 505 nm llevando a cero

con el blanco.
Estable 30 minutos
CÁLCULOS
Colesterol mg/dl = D x factor FACTOR= 200 mg/dl S
VALORES DE REFERENCIA, según ATP III (Panel de expertos NCEP)
Deseable: < 200 mg/dl
Moderadamente alto: 200 a 239 mg/dl
Alto: >=240 mg/dl Se habla de hipercolesterolemia :>= 200 mg/dl
RESULTADOS
Blanco: 0.0448
Estándar: 1.4723
Desconocido: 691.1

INTERPRETACIÓN
Valores de referencia, según ATP III (Panel de expertos NCEP)
Alto : >=240 mg/dl
Se habla de hipercolesterolemia :>= 200 mg/dl
 CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la estructura del colesterol?
La fórmula química del colesterol se representa de dos formas: C27H46O
/C27H45OH. Es un lípido esteroide, derivado del
ciclopentanoperhidrofenantreno (o esterano), constituido por cuatro
carbociclos condensados o fusionados, denominados A, B, C y D, que
presentan varias sustituciones:
● Dos radicales metilo en las posiciones C-10 y C-13.
● Una cadena alifática ramificada de 8 carbonos en la posición C-17.
● Un grupo hidroxilo en la posición C-3.
● Una insaturación entre los carbonos C-5 y C-6.
En la molécula de colesterol se puede distinguir una cabeza polar
constituida por el grupo hidroxilo y una cola o porción apolar formada por el
carbociclo de núcleos condensados y los sustituyentes alifáticos. Así, el
colesterol es una molécula tan hidrófoba que la solubilidad de colesterol libre
en agua es de 10−8 M y, al igual que los otros lípidos, es bastante soluble en
disolventes apolares como el cloroformo (CHCl3).

2. ¿Cuál es la importancia del colesterol?

El colesterol es una molécula esencial que forma parte del grupo de los lípidos
o grasas, de las membranas de nuestras células y necesario para la formación
de hormonas, metabolismo de la vitamina D, imprescindible para la absorción
de calcio y ácidos biliares. El colesterol está presente en el cerebro, el hígado,
los nervios, la sangre y la bilis tanto en los humanos como en los animales, por
eso se dice que para reducir los niveles de colesterol debemos evitar alimentos
de origen animal. El hígado es capaz de sintetizar colesterol y el organismo
puede obtenerlo de los alimentos ya que se encuentra en mayor proporción en
huevos, carnes y productos lácteos. El colesterol LDL (lipoproteína de baja
densidad) es el que comúnmente se llama “colesterol malo” cuya función es
transportar colesterol a los tejidos pero, cuando hay en exceso puede
acumularse en las paredes de venas y arterias provocando aterosclerosis. Una
concentración elevada de colesterol malo en el cuerpo tiene un impacto
negativo en la salud ya que aumenta el riesgo de padecer cardiopatías y
accidentes cerebrovasculares, mientras el colesterol HDL conocido como
“colesterol bueno” al circular a través del torrente sanguíneo es capaz
de recolectar el colesterol malo transportarlo al hígado y evitar su
acumulación en las paredes de venas y arterias. Esa es la importancia de
 mantener niveles elevados de este tipo de colesterol mediante una dieta
saludable y cambios en el estilo de vida como mantener realizar actividad física
diaria. Es necesario, además, consultar al médico para recibir orientación y
tratamiento, en su caso.

3. ¿Cuál es la enzima de regulación de la síntesis del colesterol?

HMG - CoA reductasa, (3 hidroxi - 3 metilglutaril - CoA reductasa). Es la
enzima encargada de la regulación alostérica de la síntesis del colesterol, se
encuentra catalizando la reacción de la síntesis de mevalonato.

4. ¿Cuáles son los alimentos ricos en colesterol?

Es abundante principalmente en comida de origen animal especialmente en
alimentos como son la yema del huevo, la carne, el hígado y también el
cerebro.
 5. ¿Cuáles son las causas de hipercolesterolemia primarias y secundarias?
Causas de la hipercolesterolemia primaria:
● Problemas en los sistemas metabólicos del colesterol.
● Padres con hipercolesterolemia.
Causas de la hipercolesterolemia secundaria:
● Enfermedades crónicas (diabetes mellitus, hipotiroidismo).
● Enfermedades renales (síndrome nefrótico o insuficiencia renal crónica).
● Fármacos que aumentan el LDL.

6. ¿Cuál es la frecuencia de hipercolesterolemia a nivel nacional y local?

En el Perú, la prevalencia de hipercolesterolemia se presenta casi en la quinta
parte (19,6%) de la población peruana mayor de 20 años; mientras que
altos niveles de triglicéridos y LDL afectan aproximadamente al 15% y
13% respectivamente.

7. ¿Cuál es la base molecular del tratamiento de la hipercolesterolemia?

Este documento recomienda un objetivo en cLDL plasmático < 100 mg/dl

en adultos con al menos un FRCV y < 70 mg/dl si existe enfermedad coronaria,
DM2 o la presencia de enfermedad ateroesclerótica subclínica significativa. En
el resto de los pacientes (varones < 30 años y mujeres < 40 años) que no
tienen otro FRCV, un cLDL < 130 mg/dl se podría considerar aceptable.
Sin embargo, debido a la dificultad de conseguir este objetivo en la
mayoría de los pacientes, una reducción del cLDL ≥ 50% puede
considerarse como un objetivo secundario más realista.

CONCLUSIÓN

 El perfil lipídico mínimo sirve para diagnosticar el tipo de riesgo de enfermedad

vascular periférica de los miembros inferiores. Existe una fuerte asociación de
dicha enfermedad con la presencia de hiperlipemia.
 Seria importante controlar en pacientes el perfil lipídico periódicamente además
de inducir cambios en su estilo de vida, como lo es la actividad física, ingesta
de proteínas
 DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
INTRODUCCIÓN
Los triglicéridos son lípidos simples formados por esteres de glicerol con tres ácidos
grasos. Estos pueden ser saturados, monoinsaturados o poliinsaturados. SegúnATPIII
son considerados factores de riesgo coronario; asimismo es un constituyente del
síndrome metabólico (>= 150 mg/dl). Pueden tener origen exógeno (dieta) o endógeno
(síntesis en hígado, tejido adiposo u otros tejidos). Las hipertrigliceridemias (>=200
mg/dl) pueden ser primarias o secundarias (obesidad, diabetes)
FUNDAMENTO
El esquema de reacción es el siguiente: lipoprotein lipasa triglicéridos ---------------------
-------glicerol + ácidos grasos glicerol kinasa glicerol + ATP ---------------------------
glicerol-1-P + ADP GPO
glicerol-1-fosfato + O2 ---------------- H2 O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD
2 H2 O2 + 4-AF + clorofenol--------------- quinonimina roja
GPO: glicerolfosfato oxidasa
POD: peroxidasa
4-AF: 4 aminofenazona
MATERIALES Y REACTIVOS
Toma de muestra: agujas o jeringas, ligadura, tubos
Tubos
Centrífuga
Espectrofotómetro.
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes indicados.
Baño maría a 37 °C
Cronómetro.
Puntas
Standard de triglicéridos: 200 mg/dl
Reactivo A para triglicéridos AA
MUESTRA: suero
PROCEDIMIENTO
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente frente a
sueros lechosos. Armar el siguiente sistema:
Mezclar, incubar 5 minutos a 37o C o 20 minutos a temperatura ambiente (18-25oC).
Enfriar y leer en espectrofotómetro a 505 nm llevando el aparato a cero con agua
destilada.
VALORES DE REFERENCIA (ATPIII, NCEP)
Normales: menos de 150 mg/dl
Límite alto de la normalidad: entre 150 y 199 mg/dl.
Elevados: entre 200 y 499 mg/dl. (Hipertrigliceridemia moderada)
Muy elevados: igual o superior a 500 mg/dl. (Hipertrigliceridemia
severa)
RESULTADOS
Blanco: 0.0866
Estándar: 0.3151
Desconocido: 201.5

INTERPRETACIÓN
Elevados: entre 200 y 499 mg/dl. (Hipertrigliceridemia moderada)
 CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la estructura de un triglicérido? ¿De qué depende su estado físico?
En el caso de los triglicéridos, los tres ácidos grasos que lo conforman
pueden ser todos idénticos o, por el contrario, todos diferentes. Cuando
una grasa o un aceite tiene mayoritariamente ácidos grasos saturados
(sin dobles enlaces) en sus triglicéridos, su estado será sólido a temperatura
ambiente.
Clasifican según su estado físico:
- Aceites: Liquidos a temperatura ambiente, son de tipo
insaturados y de cadena corta, además, de origen vegetal.
- Grasas: Son solidas a temperatura ambiente, pues los acidos
grasos presentes en el lípido son de tipo saturados y de
cadena larga, además, son de origen animal.

2. ¿Cuáles son las principales fuentes de triglicéridos en la dieta?

Se encuentra en grandes cantidades en los alimentos de origen animal como
carnes rojas, vísceras y derivados (embutidos, patés, manteca, tocino),
productos lácteos enteros, nata y mantequilla, así como en algunos aceites
vegetales como los de coco y palma.

3. ¿Cuáles son las vías de síntesis de triglicéridos?

 Vías de síntesis de triglicéridos: Triglicéridos (triglicéridos) son
sintetizados por prácticamente todas las células. Los principales tejidos
para la síntesis de TAG son el intestino delgado, el hígado y los
adipocitos. Excepto por el intestino y los adipocitos, la síntesis de TAG
comienza con glicerol. El glicerol se fosforilada por primera vez por
glicerol quinasa y ácidos grasos activados a continuación (acil-CoA)
sirven como sustratos para la adición de ácidos grasos generar
ácido fosfatídico. A continuación, se elimina el grupo fosfato y se
añade el último ácido graso. En el intestino delgado, TAG’s
dietéticos son hidrolizados a ácidos grasos libres y
monoacilglicéridos (MAG) antes de la absorción por los enterocitos. El
serv MAG’s enterocitos como sustratos para la acilación en un proceso
de dos etapas que producen un TAG. Dentro del tejido adiposo no hay
expresión del glicerol quinasa por lo que el bloque de construcción para
TAG en este tejido es la glicólisis, dihidroxiacetona fosfato intermedio,
DHAP. El DHAP se reduce a glicerol-3-fosfato deshidrogenasa de
 glicerol-3-fosfato citosólica y la reacción restante de la síntesis de
TAG son los mismos que para todos los otros tejidos.
 La vía de segunda reacción utiliza la enzima peroxisomal DHAP
aciltransferasa a DHAP acilato grasos acil-DHAP que se reduce por la
enzima que requiere NADPH acil-DHAP reductasa. Una característica
interesante de la última vía es que DHAP aciltransferasa es uno de
sólo unas pocas enzimas que están dirigidos a los peroxisomas a
través del reconocimiento de una secuencia de peroxisoma objetivo 2
(PTS2) motivo de la enzima. La mayoría de las enzimas peroxisomal
contienen un motivo PTS1.

4. ¿Qué es el hígado graso?

La enfermedad del hígado graso no alcohólico es un tipo de hígado graso que
no está relacionada con el consumo de alcohol. Existen dos tipos:
● Hígado graso simple: Hay grasa en el hígado, pero poca o ninguna
inflamación o daño en las células del hígado. En general, el hígado graso
simple no es demasiado serio como para causar daño o complicaciones
al hígado
● Esteatosis hepática no alcohólica: Existe inflamación y daños en las
células del hígado, y grasa. La inflamación y el daño de las células del
hígado pueden causar fibrosis o cicatrización del hígado. La esteatosis
puede causar cirrosis o cáncer de hígado

5. ¿Cuáles son las causas de hipertrigliceridemia primarias y secundaria?

La hipertrigliceridemia suele deberse a una combinación de causas
genéticas y de causas ambientales:
● Causas genéticas (hipertrigliceridemias primarias): Se han identificado
numerosos genes responsables del aumento de los triglicéridos en sangre. En
general estos genes fabrican proteínas que están encargadas de la
destrucción de los triglicéridos. Si los genes están alterados no se
fabrican adecuadamente las proteínas encargadas de la destrucción de los
triglicéridos y éstos aumentan en sangre. Algunos de estos defectos genéticos
se acompañan de cifras muy elevadas de triglicéridos en sangre y suelen
diagnosticarse en la infancia porque los niños desarrollan inflamaciones del
páncreas (pancreatitis) de forma repetida. A estas elevaciones muy marcadas
 de los triglicéridos (con frecuencia con valores por encima de 5.000 o 10.000
mg/dL) se las denomina síndrome de hiperquilomicronemia. Sin embargo,
la mayoría de alteraciones genéticas producen elevaciones pequeñas de
los triglicéridos, que pueden alcanzar elevaciones mucho más importantes
solo si se ven favorecidas por causas ambientales.
● Causas ambientales. (hipertrigliceridemias secundarias): Los factores
ambientales son una importante causa de hipertrigliceridemia. En general se
asocian con alteraciones genéticas, lo cual favorece su desarrollo. Los
factores ambientales que favorecen el aumento de los triglicéridos son: o
Obesidad. Sobre todo, la obesidad de predominio abdominal. o Diabetes. o
Consumo exagerado de alcohol. o Utilización de determinados medicamentos.
o Hipotiroidismo.

6. ¿La hipertrigliceridemia se considera factor de riesgo coronario?

La enfermedad coronaria es causada a menudo por la acumulación de
placa, una sustancia cerosa, dentro del revestimiento de las arterias
coronarias más grandes. Esta acumulación puede bloquear parcial o
totalmente el flujo sanguíneo en las arterias grandes del corazón.
¿Es un factor de riesgo? Si bien existen estudios en los que los niveles altos
de TG pueden predecir el riesgo de cardiopatía coronaria, la importancia
clínica no está bien definida. Además, en la actualidad no hay
demostración de que el tratamiento hipertrigliceridémico aislado reduzca la
morbilidad o la mortalidad.
 7. ¿Cuál es la prevalencia de la hipertrigliceridemia nacionales o/i local?
En Perú, estudios poblacionales evidencian que la prevalencia de sobrepeso u
obesidad asciende a 7,6% en jóvenes y 19,8% en adultos, mientras que la
prevalencia de colesterol total es de 19,6 %, la hipertrigliceridemias de 15,0% y
LDL-C elevado de 13% en adultos peruanos.

DISCUSIÓN
Cuando comes, el cuerpo convierte todas las calorías que no necesites usar de
inmediato en triglicéridos. Los triglicéridos se almacenan en las células grasas. Más
tarde, las hormonas liberan triglicéridos para obtener energía entre las comidas, por
otro lado, los triglicéridos son transportados a todo el organismo para dar energía o
bien para ser almacenados como grasa. Por eso, la prueba de triglicéridos es un
análisis que se utiliza para determinar el nivel de estos en la sangre, así como
también para evaluar la función hepática y un posible riesgo cardiovascular, ya que
niveles elevados de los triglicéridos significan un elevado posible riesgo de padecer
otras enfermedades relacionadas con el incremento de los triglicéridos.
CONCLUSIONES

 Los triglicéridos son un tipo de grasa (lípidos) que se encuentran en la sangre.

 Cuando comes, el cuerpo convierte todas las calorías que no necesites usar de
inmediato en triglicéridos. Los triglicéridos se almacenan en las células grasas.
Más tarde, las hormonas liberan triglicéridos para obtener energía entre las
comidas
 La prueba de triglicéridos es un análisis que se utiliza para determinar el nivel
de estos en la sangre, así como también para evaluar la función hepática y un
posible riesgo cardiovascular

REFERENCIAS

 Harper, Bioquímica ilustrada, 30 ed, 2016

 Vademecum Wiener Lab , Rosario, Argentina
 Miguel Soca PE. Dislipidemias. Acmed. 2009; 20 (6): 265–73