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Hindawi  
Mediators  of  Inflammation  
Volumen  2019,  artículo  ID  1567179,  8  
páginas  https://doi.org/10.1155/2019/1567179

Artículo  de  investigación

Irisin  atenúa  la  neuroinflamación  y  previene  la
Memoria  y  deterioro  cognitivo  inducido  por  estreptozotocina
Ratones  diabéticos

2 5
Kexin  Wang,  1  Feng  Song, Kai  Xu,  1,3  Zhi  Liu,  1  Shuhong  Han,  4  Fangna  Li,  3,5  y  Yu  Sun
1
Departamento  de  Cirugía  General,  Hospital  Qilu  de  la  Universidad  de  Shandong,  Jinan,  Shandong,  China
2
Departamento  de  Ortopedia,  Hospital  Municipal  de  Qingdao,  Qingdao,  Shandong,  China
3
Facultad  de  Medicina  Cheeloo,  Universidad  de  Shandong,  Jinan,  Shandong,  China
4
Departamento  de  Medicina,  División  de  Reumatología  e  Inmunología  Clínica,  Universidad  de  Florida,  Gainesville,  FL,  EE.  UU.
5
Departamento  de  Endocrinología,  Hospital  Qilu  de  la  Universidad  de  Shandong,  Jinan,  Shandong  250012,  China

La  correspondencia  debe  dirigirse  a  Yu  Sun;  sunyujinan@gmail.com

Recibido  el  1  de  febrero  de  2019;  Revisado  el  30  de  marzo  de  2019;  Aceptado  el  13  de  mayo  de  2019;  Publicado  el  9  de  junio  de  2019

Editor  invitado:  Sun­Young  Hwang

Copyright  ©  2019  Kexin  Wang  et  al.  Este  es  un  artículo  de  acceso  abierto  distribuido  bajo  la  Licencia  Creative  Commons  Attribution,  que  permite  
el  uso,  distribución  y  reproducción  sin  restricciones  en  cualquier  medio,  siempre  que  se  cite  adecuadamente  la  obra  original.

Los  pacientes  con  diabetes  mellitus  (DM)  experimentan  déficits  cognitivos  y  de  memoria.  Los  mecanismos  subyacentes  a  esta  disfunción  en  el  
cerebro  de  los  pacientes  con  DM  no  se  comprenden  completamente  y,  por  lo  tanto,  hasta  el  momento  no  se  ha  establecido  una  estrategia  
terapéutica  optimizada.  El  objetivo  del  presente  estudio  fue  evaluar  si  la  irisina  era  capaz  de  mejorar  la  memoria  y  el  rendimiento  cognitivo  en  un  
modelo  de  ratón  diabético  inducido  por  estreptozotocina.  Se  estableció  un  modelo  de  ratón  diabético  y  se  realizaron  pruebas  de  comportamiento.
También  configuramos  cultivos  primarios  para  estudios  de  mecanismos.  Se  utilizaron  transferencias  Western  y  EMSA  para  estudios  moleculares.  
Se  observó  un  deterioro  significativo  de  la  cognición  y  la  memoria  en  estos  ratones  DM,  que  podría  prevenirse  eficazmente  con  el  cotratamiento  
con  irisina.  También  encontramos  niveles  aumentados  de  proteína  GFAP,  expresión  reducida  de  proteínas  sinápticas  y  niveles  elevados  de  
interleucina­1β  (IL­1β)  e  interleucina­6  (IL­6)  en  el  cerebro;  sin  embargo,  la  irisina  atenuó  significativamente  estas  respuestas  celulares.
Mientras  tanto,  nuestros  resultados  demostraron  que  la  irisina  inhibía  la  activación  de  las  proteínas  P38,  STAT3  y  NFκB  de  ratones  DM.
Además,  nuestros  resultados  sugirieron  que  la  irisina  podría  regular  la  función  de  P38,  STAT3  y  NFκB  en  los  tejidos  del  hipocampo  de  ratones  
DM.  En  conjunto,  la  irisina  inhibió  la  neuroinflamación  en  ratones  con  DM  inducida  por  STZ  al  inhibir  la  liberación  de  citoquinas  y  mejorar  su  
función  cognitiva.  Nuestros  hallazgos  revelaron  el  mecanismo  del  efecto  antiinflamatorio  de  la  irisina  en  el  SNC.

1.  Introducción Disfunción  cognitiva  en  la  DM.  Los  estudios  clínicos  también  han  
revelado  que  muchos  pacientes  pediátricos  y  adultos  jóvenes  con  DM  
La  diabetes  es  un  trastorno  metabólico  crónico  y  se  está  convirtiendo   manifestaron  menor  atención  y  funciones  ejecutivas  comprometidas  
en  un  problema  de  salud  pública  mundial.  Da  lugar  a  un  aumento   [4].  Además,  el  control  deficiente  de  la  glucemia  en  la  DM  aceleró  la  
significativo  de  la  morbilidad  y  la  mortalidad,  lo  que  supone  pesadas   tasa  de  deterioro  cognitivo  con  el  tiempo,  mientras  que  la  mejora  del  
cargas  económicas  para  las  familias  y  los  sistemas  de  atención   control  metabólico  podría  mejorar  el  deterioro  [5].
sanitaria  [1].  Existe  evidencia  sólida  de  que  la  DM  aumenta  el  riesgo   Mientras  tanto,  alrededor  del  70%­80%  de  los  pacientes  con  enfermedad  
de  deterioro  cognitivo  y  de  la  memoria  [2].  Tanto  la  diabetes  como  el   de  Alzheimer  (EA)  pueden  tener  diabetes  o  un  metabolismo  anormal  
deterioro  cognitivo  y  de  la  memoria  ocurren  con  mayor  frecuencia  en   de  la  glucosa  [6].  En  un  informe  anterior  se  observó  el  rápido  deterioro  
personas  de  edad  avanzada.  En  la  DM,  uno  de  los  cambios  patológicos   de  la  cognición  en  pacientes  diabéticos  en  comparación  con  el  de  
más  destacados  es  la  hiperglucemia  que  resulta  del  aumento  de  la   pacientes  no  diabéticos  [7].  Estos  hallazgos  implicaron  especialmente  
producción  de  glucosa  en  el  hígado  pero  de  la  disminución  de  la   que  las  consecuencias  de  los  cambios  en  el  sistema  nervioso  central  
(SNC)  dae  
producción  de  insulina  en  el  páncreas  [3].  Es  probable  que  tales  déficits  contribuyan   DM,  
  la  m como  
y la  memoria  y  la  cognición
emoria  
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2 Mediadores  de  la  inflamación

disfunción,  se  debieron  significativamente  a  la  glucosa  a  largo  plazo 2.2.  Prueba  del  laberinto  Y.  La  memoria  de  trabajo  espacial  fue  evaluada  por
anomalía.  Por  lo  tanto,  es  crucial  descifrar  el  mecanismo  y  desarrollar  nuevas   la  prueba  del  laberinto  en  Y  como  se  describió  anteriormente  [14].  El  aparato  
estrategias  para  reducir  el  daño. experimental  constaba  de  3  brazos  (35  cm  de  largo,  25  cm  de  alto,
Irisin,  también  conocida  como  FNDC5,  es  una  mioquina  que  puede y  10  cm  de  ancho,  etiquetados  A,  B  o  C)  divergiendo  a  120°  desde
aumentar  el  gasto  energético  acelerando  el  “oscurecimiento” el  punto  central.  El  aparato  se  colocó  a  40  cm  por  encima  del
de  tejido  adiposo  blanco  [8].  Irisin  se  escinde  de  su  precursor piso  en  una  habitación  con  poca  luz.  Colocamos  ratones  individualmente.
Proteína  5  que  contiene  el  dominio  fibronectina  tipo  III  y  se  asocia  con  una   al  final  del  brazo  de  inicio  y  les  permitió  moverse  libremente
mejor  homeostasis  de  la  glucosa  al  atenuar  la  insulina. a  través  del  laberinto  durante  una  sesión  de  8  minutos.  Un  ratón
resistencia  [8].  Los  resultados  de  algunos  estudios  han  sugerido  que Se  consideró  que  había  entrado  en  un  brazo  cuando  las  4  patas  estaban
La  irisina  podría  ser  una  opción  de  tratamiento  para  la  obesidad  y  sus  enfermedades  asociadas. colocado  en  la  pista  del  brazo.  La  secuencia  de  entradas  del  brazo.
enfermedades  como  la  DM  tipo  2  [9].  Más  importante  aún,  reciente y  el  número  total  de  entradas  durante  un  período  de  8  minutos  fueron
Los  estudios  demostraron  que  el  tratamiento  con  irisina  mejoró  la  disfunción   grabado.  El  porcentaje  de  alternancia  se  definió  como  el
endotelial  en  ratones  diabéticos  inducidos  por  la  dieta  [10].  La  disfunción   número  de  tripletes  secuenciales  que  contienen  entradas  en  los  tres
endotelial  es  un  posible  mecanismo  subyacente  por brazos  (ABC  y  ACB  constituían  un  triplete  secuencial,
qué  deterioro  de  la  memoria  y  la  cognición  se  precipita mientras  que  ACA  o  ABA  no  lo  hicieron)  durante  la  sesión  como  proporción  
en  animales  DM  [11].  Por  lo  tanto,  la  irisina  es  un  candidato  prometedor  para   de  la  máxima  alternancia  posible  equivalente  a
prevenir  el  deterioro  de  la  memoria  y  la  cognición  en  pacientes  diabéticos. el  número  total  de  entradas  de  brazos  menos  −  2  ×  100  [14].  Ratones
cuyo  número  total  de  entradas  sea  inferior  a  15  veces  durante
Los  astrocitos,  la  célula  más  abundante  del  SNC,  apoyan la  prueba  no  se  tuvo  en  cuenta  en  los  datos  finales.
neuronas  vecinas  y  constituyen  las  sinapsis  tripartitas.
[12].  La  acumulación  de  evidencias  ha  implicado  que  los  astrocitos 2.3.  Reconocimiento  de  objetos  novedosos.  La  memoria  no  espacial  se  midió  
Desempeñan  un  papel  importante  en  la  memoria  y  la  función  cognitiva. mediante  la  prueba  de  reconocimiento  de  objetos  novedosos  (NOR),  como  se  
[12].  Un  informe  reciente  demostró  que  reparar  daños describió  anteriormente  [15].  La  prueba  se  realizó  en  un  plexiglás.
Los  astrocitos  podrían  mejorar  el  deterioro  cognitivo  de caja  de  actividades  (40  cm  ×  40  cm  ×  22  cm).  A  los  ratones  se  les  dieron  15
Ratones  diabéticos  STZ  [13].  Por  lo  tanto,  es  razonable  postular  que  la  irisina   min  diario  para  explorar  la  caja  vacía  durante  3  días  consecutivos
ejerce  efectos  beneficiosos  en  ratones  DM  al  actuar antes  de  la  prueba  de  comportamiento.  Al  cuarto  día,  a  los  ratones  se  les  
sobre  astrocitos. presentaron  dos  objetos  idénticos  (A1  y  A2)  durante  un  período  de
El  objetivo  del  presente  estudio  es  evaluar  (a)  si 10  minutos.  Después  de  1  hora,  los  ratones  se  volvieron  a  colocar  en  la  caja  y
La  irisina  puede  ejercer  efectos  beneficiosos  sobre  el  sistema  neuropatológico. expuesto  a  dos  objetos  durante  5  min,  en  el  que  uno  de  los  familiares
cambios  en  ratones  DM,  específicamente  para  la  activación  de  astrocitos, objetos  (A2)  fue  reemplazado  por  un  nuevo  objeto  B.  Actividad  animal
neuroinflamación  y  pérdida  de  proteínas  sinápticas;  (b)  si Se  consideró  exploración  de  objetos  si  la  nariz  de  los  ratones  tocaba
el  astrocito  es  una  de  las  dianas  terapéuticas  de  la  irisina;  (C) el  objeto  o  si  los  ratones  estaban  frente  al  objeto  a  una  distancia  de  
si  la  irisina  es  capaz  de  mejorar  la  memoria  y  el  rendimiento  cognitivo  y   aproximadamente  2  cm  del  objeto  [15].
proteger  las  neuronas  contra  el  daño  neuronal  mediado  por  astrocitos;  y  (d)  si  
la  irisina  puede 2.4.  Recolección  de  muestras  de  líquido  cefalorraquídeo  (LCR).  LCR
Regular  las  vías  de  señalización  que  desencadenan  la  cascada  de  inflamación   fue  recolectado  de  la  cisterna  magna,  como  se  informó  anteriormente
de  las  neuroínas. con  modificaciones  menores  [12].  Después  de  la  anestesia  con  isoflurano,  
realizamos  una  incisión  sagital  en  la  línea  inferior  de
el  occipucio.  Luego,  separamos  el  tejido  subcutáneo.
2.  Materiales  y  métodos y  músculos  en  el  área  circundante  para  exponer  claramente  el
meninges.  Podríamos  recolectar  alrededor  de  3­4  μl  de  LCR  en  el
2.1.  Animales  y  drogas.  Utilizamos  un  macho  C57BL/6J  de  8  semanas  de  edad. tubo  de  vidrio  después  de  penetrar  un  tubo  capilar  en  las  meninges  translúcidas.
ratones  para  este  estudio  con  animales.  Todos  los  ratones  estuvieron  en  un  programa  de  12  h.
luz:  ciclo  de  oscuridad  de  12  h  con  libre  acceso  a  comida  y  agua.
Los  ratones  fueron  tratados  según  las  pautas  establecidas. 2.5.  Análisis  de  Western  Blot.  Se  hirvieron  muestras  de  proteínas  y
por  el  Consejo  Chino  sobre  Cuidado  Animal  y  todos  los  procedimientos ejecutar  en  geles  SDS­PAGE,  seguido  de  electroforéticamente
fueron  aprobados  por  el  Comité  de  Cuidado  Animal  de  Qingdao transfiriendo  a  membranas  de  nitrocelulosa.  Luego  se  bloquearon  las  
Hospital  Municipal,  China  y  Hospital  Qilu  de  Shandong membranas  de  nitrocelulosa  con  5%  de  grasa  seca  sin  grasa.
Universidad,  China. leche  en  tampón  TBST.  Las  membranas  bloqueadas  se  incubaron  con  un  

Los  ratones  se  agruparon  aleatoriamente  en  4  grupos:  control,  control   anticuerpo  contra  la  proteína  ácida  fibrilar  glial.
más  irisina  (0,5  mg/kg/día),  STZ  (150  mg/kg)  y  STZ. (GFAP)  (1:  4000;  Millipore  Corp.,  MA,  EE.  UU.),  sinaptofisina
más  irisina  (0,5  mg/kg/día).  Se  compraron  tanto  STZ  como  irisin. (SYP)  (1:  4000,  Abcam,  Cambridge,  Reino  Unido),  p38
de  Sigma­Aldrich  (MO,  EE.  UU.).  Se  disolvió  STZ  en  tampón  de  citrato  de   MAPK  (1:  1000;  New  England  Biolabs,  Beverly,  MA),
sodio  destilado  de  0,1  mmol/l  (pH  4,5)  y  se  prepararon  dosis  experimentales   fosfo­p38  MAPK  (1:  1000;  New  England  Biolabs,  Beverly,  MA)  y  p­Stat3  (1:  
de  irisina  en  solución  salina  normal. 1000;  Cell  Signaling  Technology,
Administramos  una  dosis  única  de  STZ  por  vía  intraperitoneal  a Danvers,  MA)  y  Stat  3  (1:1000;  Cell  Signaling  Technology,  Danvers,  MA)  en  
Establecer  un  modelo  de  ratón  diabético.  Mientras  tanto,  la  irisina  estaba leche  TBST  durante  la  noche  a  4°  C.  Usamos
también  se  administra  a  ratones  mediante  inyección  intraperitoneal  diaria. β­actina  como  control  de  carga  (1:  5000;  Santa  Cruz  Biotechnology  Inc.,  CA,  
Las  pruebas  de  comportamiento  se  realizaron  3  semanas  después. EE.  UU.).  Los  valores  utilizados  para  el  análisis  estadístico  fueron
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Mediadores  de  la  inflamación 3

expresado  como  la  relación  entre  la  banda  de  cada  proteína  y  la  banda   actuar  con  los  objetos  no  mostró  una  diferencia  significativa  entre  estos  
de  su  control  de  carga. grupos  (Figura  2  (b)).

2.6.  Ensayo  inmunoabsorbente  ligado  a  enzimas  (ELISA).  Medimos   3.2.  La  irisina  inhibió  el  aumento  de  GFAP  y  previene  la  pérdida  de  
las  concentraciones  de  IL­6  e  IL­1β  en  el  presente  estudio  con  un  kit   proteínas  sinápticas  en  ratones  diabéticos.  La  activación  de  los  
ELISA  (eBioscience,  Thermo  Fisher  Scientific).  Cada  muestra  se   astrocitos  está  estrechamente  relacionada  con  la  disfunción  cognitiva  
cargó  por  duplicado  con  diluciones  apropiadas  para  garantizar  que  sus   [12,  17].  Probamos  con  Western  Blot  si  el  marcador  de  activación  de  
unidades  luminiscentes  estuvieran  dentro  del  rango  lineal  de  las  curvas   astrocitos,  GFAP,  estaba  regulado  en  estos  ratones  DM.  Como  se  
estándar.  Los  valores  se  normalizaron  y  expresaron  como  la  proporción   muestra  en  la  Figura  3  (a),  el  tratamiento  con  STZ  indujo  un  aumento  
de  cada  muestra  con  respecto  a  su  proteína  de  carga  total. significativo  de  la  expresión  de  la  proteína  GFAP,  mientras  que  la  irisina  
podría  prevenir  el  nivel  de  proteína  regulado  al  alza.  Un  estudio  previo  
también  sugirió  que  la  pérdida  de  la  proteína  sinaptofisina  de  la  vesícula  
2.7.  Ensayo  de  cambio  de  movilidad  electroforética  (EMSA).  EMSA  se   presináptica  (SYP)  en  el  hipocampo  se  correlaciona  con  el  deterioro  
llevó  a  cabo  según  un  informe  anterior  con  una  modificación  menor   cognitivo  en  pacientes  humanos  [18].  Para  comprender  por  qué  la  
[16].  Se  extrajeron  proteínas  nucleares  de  cerebros  de  ratones.  La   irisina  mejoró  el  comportamiento  de  los  ratones  DM,  se  procesó  y  midió  
proteína  de  cada  muestra  se  sondeó  con  un  exceso  de  oligonucleótidos   tejido  cerebral  con  Western  Blot  para  investigar  si  la  irisina  podría  
marcados  en  el  extremo  32P  con  una  secuencia  consenso  específica   prevenir  la  pérdida  de  proteínas  sinápticas  en  ratones  diabéticos.  
para  NFκB/ADN  (Promega  Corp.,  Madison,  WI). Descubrimos  que  STZ  provocó  una  expresión  reducida  de  SYP  en  
A  continuación  se  fraccionó  la  mezcla  en  un  gel  de  poliacrilamida  al   ratones  DM,  que  podría  atenuarse  eficazmente  mediante  el  
6%  durante  aproximadamente  2  horas  (180  V).  Luego  se  colocó  el  gel   cotratamiento  con  irisina  (Figura  3  (b))
sobre  papel  de  filtro  y  se  secó.  Después  de  eso,  el  gel  se  expuso  a  una  
película  a  270°  C  durante  1,5  horas  seguido  de  autorradiografía. 3.3.  La  irisina  atenuó  los  niveles  de  IL­1β  e  IL­6  en  los  tejidos  del  
hipocampo  y  el  LCR  de  ratones  diabéticos.  Dado  que  descubrimos  que  
2.8.  Análisis  estadístico.  Los  datos  del  presente  estudio  se  expresaron   la  irisina  podía  inhibir  la  activación  de  los  astrocitos  en  ratones  DM  y  
como  la  media  ±  SEM.  Luego,  los  datos  se  analizaron  con  ANOVA   mejorar  la  cognición  y  la  memoria,  postulamos  si  la  neuroinflamación  
unidireccional,  seguido  de  la  prueba  post  hoc  de  Newman­Keuls.  Se   era  una  respuesta  a  la  deficiencia  neuronal  en  estos  ratones  DM.  En  
consideró  estadísticamente  significativo  un  valor  de  p  inferior  a  0,05. primer  lugar,  probamos  la  expresión  de  IL­1β  e  IL­6  en  tejidos  del  
hipocampo  cerebral  de  todos  los  grupos.
Nuestros  resultados  indicaron  que  STZ  causó  un  aumento  obvio  en  los  

3.  Resultados niveles  de  IL­1β  e  IL­6  en  la  DM,  que  podría  prevenirse  con  el  
tratamiento  con  iris  (Figura  4).  En  segundo  lugar,  probamos  el  nivel  de  
3.1.  Irisin  mejoró  la  memoria  y  la  deficiencia  cognitiva  en  ratones   estas  dos  citoquinas  en  el  LCR  de  estos  ratones.  Encontramos  
diabéticos.  Probamos  si  los  ratones  DM  podían  demostrar  deficiencias   resultados  consistentes  de  su  nivel  de  expresión  en  LCR  (Figura  5).  
de  memoria  y  cognición  en  las  pruebas  del  laberinto  Y  y  NOR.  En   Los  resultados  anteriores  sugirieron  que  la  irisina  podría  atenuar  la  
primer  lugar,  se  investigó  la  memoria  espacial  a  corto  plazo  con  el   neuroinflamación  en  ratones  DM  al  reducir  los  niveles  de  IL­1β  e  IL­6  
laberinto  Y.  Como  se  muestra  en  la  Figura  1,  los  ratones  DM  mostraron   en  sus  cerebros.
una  disminución  significativa  del  comportamiento  de  alternancia  en  
comparación  con  los  ratones  de  control  (Figura  1  (a)),  mientras  que  las   3.4.  La  irisina  redujo  la  activación  de  las  proteínas  P38,  STAT3  y  NFκB  
distancias  totales  recorridas  fueron  comparables  entre  estos  dos   en  los  tejidos  cerebrales  del  hipocampo  de  ratones  diabéticos.
grupos  (Figura  1  (b)).  Como  se  muestra  en  la  Figura  1  (a),  el   También  exploramos  el  posible  mecanismo  subyacente  responsable  
tratamiento  conjunto  con  iri  sin  podría  mejorar  significativamente  la   de  los  cambios  neuropatológicos  en  ratones  DM.  La  fosforilación  de  
alternancia  reducida  en  ratones  DM  sin  afectar  las  distancias  totales   P38  y  STAT3  está  estrechamente  implicada  en  la  cascada  de  citocinas  
de  viaje  (Figura  1  (b)).  Estos  resultados  en  el  laberinto  Y  sugirieron  que   [19,  20].  Por  lo  tanto,  probamos  si  la  activación  de  P38  y  STAT3  estaba  
la  memoria  espacial  a  corto  plazo  y  la  alternancia  espontánea  se   implicada  en  la  respuesta  al  tratamiento  con  irisina  en  estos  ratones  
redujeron  significativamente  en  el  modelo  de  ratón  DM  inducido  por   DM.  El  estado  de  fosforilación  de  P38  y  STAT3  se  investigó  con  
STZ.  A  continuación,  se  midió  la  memoria  de  discriminación  visual  no   transferencia  Western.  Descubrimos  que  STZ  provocó  un  aumento  del  
espacial  con  la  prueba  NOR.  La  prueba  NOR  mide  la  capacidad  de  los   nivel  de  proteína  fosforilada  de  P38  en  los  tejidos  del  hipocampo,  que  
ratones  para  distinguir  entre  un  objeto  nuevo  y  un  objeto  familiar.  Para   podría  reducirse  mediante  el  tratamiento  conjunto  con  irisina  (Figura  6  
comparar  el  desempeño  de  los  ratones  en  diferentes  grupos,  se  midió   (a)).  La  fosforilación  de  STAT3  se  midió  en  el  siguiente  estudio  de  
el  tiempo  dedicado  a  interactuar  con  objetos  (novedosos  o  familiares)   transferencia  Western.  Como  se  muestra  en  la  Figura  6  (b),  STZ  solo  
y  se  utilizó  una  relación  de  discriminación  (la  relación  entre  el  tiempo   indujo  el  nivel  de  expresión  aumentado  de  STAT3  fosforilado,  pero  el  
dedicado  a  explorar  el  objeto  nuevo  y  el  tiempo  dedicado  a  explorar   tratamiento  conjunto  impidió  la  regulación  positiva.  Medimos  la  
ambos  objetos).  Los  ratones  tratados  con  STZ  exhibieron  una  tasa  de   activación  de  NFκB  con  EMSA.  Descubrimos  que  la  actividad  de  unión  
discriminación  baja  (Figura  2  (a)).  El  tratamiento  conjunto  con  irisina   de  NFκB  al  ADN  aumentó  significativamente  en  el  tejido  cerebral  de  
previno  los  déficits  de  memoria  inducidos  por  STZ,  mientras  que  la   ratones  DM  (Figura  6  (c)),  lo  que  indica  que  NFκB  estaba  activado.
irisina  sola  no  afectó  el  rendimiento  de  la  memoria  de  los  ratones  
(Figura  2  (a)).  La  diferencia  en  el  desempeño  conductual  no  se  
atribuyó  a  alteraciones  en  la  locomoción,  ya  que  la  distancia  total   El  tratamiento  con  irisina  bloqueó  eficazmente  la  activación  de  la  
recorrida  y  el  tiempo  total  transcurrido  entre actividad  de  unión  de  NFκB/ADN  en  estos  ratones.
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4 Mediadores  de  la  inflamación

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20

0 0
STZ − − + +
STZ − − + +
irisina − + − +
irisina − + − +

(a) (b)

Figura  1:  Irisin  previno  el  deterioro  de  la  memoria  de  trabajo  inducido  por  STZ  en  ratones  DM.  (a)  El  tratamiento  con  STZ  causó  una  disminución  significativa
alternancia  espontánea  de  ratones  DM  en  la  prueba  del  laberinto  Y.  Irisin  podría  prevenir  la  disminución  del  rendimiento  de  la  memoria  de  trabajo  de  DM
ratones.  (b)  Ni  STZ  ni  irisin  pudieron  cambiar  las  entradas  totales  del  brazo  de  estos  ratones.  Todos  los  datos  se  expresan  como  medias  ±  SEM.  norte  =  10.   p  <  0  05
frente  a  STZ  (­)  e  irisina  (­);  p  <  #0,05  vs.  STZ  (+)  e  irisina  (­).

0,75 2000
#

1500
0,50

1000
eP
  ejadtandeec vr oo d
n

asctiecoD(rt
    aaidcinr ra )oltm

0,25
500

0.00 0
STZ − − + + − −
STZ + +
irisina − + − + − + − +
irisina

(a) (b)

Figura  2:  La  irisina  atenuó  la  pérdida  de  memoria  en  ratones  con  DM  inducida  por  STZ.  (a)  Análisis  estadístico  del  efecto  de  la  irisina  sobre  los  déficits  de  memoria  en  la  DM
ratones.  (b)  No  hay  diferencia  estadística  en  la  distancia  total  recorrida  durante  la  prueba  entre  estos  grupos.  Todos  los  datos  se  expresan  como  medias  ±
#
SEM.  n  =  10.   p  <  0  05  vs.  STZ  (­)  e  irisina  (­); p  <  0,05  vs.  STZ  (+)  e  irisina  (­).

4.  Discusión con  la  hipótesis  de  que  la  irisina  podría  ser  un  buen  candidato
para  el  futuro  tratamiento  de  la  DM  ya  que  nuestros  resultados  aquí  también
La  diabetes  tiene  efectos  perjudiciales  sobre  el  funcionamiento  cognitivo. proporcionó  nuevas  evidencias  que  respaldan  los  beneficios  terapéuticos
Estos  efectos  son  particularmente  destacados  para  la  función  de  la  memoria   de  irisina  mejorando  la  memoria  y  la  cognición  en  la  DM
[21].  Sin  embargo,  los  mecanismos  subyacentes  por  los  cuales modelo  de  ratón.

La  DM  afecta  al  SNC  sigue  siendo  en  gran  medida  desconocida.  Y  por  lo  tanto, En  el  SNC,  especialmente  en  el  hipocampo  de  los  diabéticos.
Las  estrategias  terapéuticas  actuales  están  lejos  de  ser  satisfactorias. ratones,  una  respuesta  inflamatoria  mejorada  con  astrocitos
por  la  falta  de  medicamentos  específicos. Se  ha  observado  activación,  que  posiblemente  fue  responsable.
En  este  estudio,  exploramos  la  posible  aplicación  de  iri  sin  en  el   para  el  consiguiente  deterioro  neuronal  [23].  astrocito
tratamiento  de  la  memoria  y  la  disfunción  cognitiva. La  activación  se  observó  en  un  modelo  animal  con  alimentación  rica  en  grasas.
en  DM.  Se  establecieron  ratones  diabéticos  tratándolos  con [24].  Consistentemente,  encontramos  una  expresión  significativamente  mayor  
STZ  y  los  efectos  de  la  irisina  en  el  comportamiento de  la  proteína  marcadora  de  activación  de  astrocitos,  GFAP,  junto  con
se  midieron  con  pruebas  de  laberinto  Y  y  NOR.  Por  el  primero con  un  nivel  significativamente  disminuido  de  la  proteína  presináptica,
tiempo,  nuestros  datos  sugirieron  que  la  irisina  podría  significativamente SYP  (Figura  3).  Estos  resultados  sugirieron  la  activación  de  los  astrocitos.
mejorar  la  memoria  y  la  función  cognitiva  en  ratones  DM y  disfunción  sináptica  en  estos  ratones  DM.  La  suposición
(Figuras  1  y  2).  Aunque  la  irisina  no  es  un  compuesto  aprobado  para  el   fue  respaldado  parcialmente  por  nuestros  datos  ELISA  con  el
tratamiento  de  la  DM,  un  estudio  reciente  ha  proporcionado  evidencia  de  que   expresión  regulada  positivamente  de  dos  citocinas,  IL­1β  e  IL­6,  en
la  irisina  podría  ejercer  un  potencial  terapéutico. tejidos  del  hipocampo  cerebral  y  LCR.  Curiosamente  lo  anterior
en  obesidad  y  DM  tipo  2  estimulando  el  “bronceado” Los  cambios  en  ratones  DM  podrían  prevenirse  eficazmente  mediante
de  tejido  adiposo  blanco  [22].  Nuestros  hallazgos  son  consistentes Cotratamiento  con  irisina.
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Mediadores  de  la  inflamación 5

GFAP SYP

­Actina ­Actina

continuación irisina STZ  STZ+irizin continuación irisina STZ STZ+iricina

2.0 1.5

1.5
1.0 #

1.0 #

leS
  Yxe
a
tp
  nó  iasveirP E
dr
veirA
  nó  iasP a
tp leG
  Fxe E
dr

0,5
0,5

0.0 0.0
continuación irisina STZ  STZ+irizin continuación irisina STZ  STZ+irizin

(a) (b)

Figura  3:  Irisin  atenúa  el  nivel  de  expresión  anormal  de  GFAP  y  SYP  en  ratones  DM  expuestos  a  STZ.  (a)  Imagen  de  mancha  representativa
mostrando  la  expresión  de  la  proteína  GFAP  en  ratones  DM  y  el  gráfico  de  barras  estadístico  que  muestra  los  resultados.  (b)  Imagen  de  mancha  representativa
que  muestra  el  nivel  de  expresión  de  SYP  en  ratones  DM  y  el  gráfico  de  barras  estadístico  que  muestra  los  resultados.  Todos  los  datos  se  expresan  como  medias  ±  SEM.
n  =  5.   p  <  0  05  vs.  Cont;  #p  <  0  05  frente  a  STZ.

2.5
3

2.0

2
1.5 #
lieLN
 v ­e
a
  o v liet6 drI

#
a
t1
  o v lie lieLN
 v ­e drI

1.0
1

0,5

0.0 0
continuación irisina STZ STZ+iricina continuación irisina STZ STZ+iricina

(a) (b)

Figura  4:  La  irisina  mejoró  el  nivel  elevado  de  IL­6  e  IL­1β  en  los  tejidos  del  hipocampo  de  ratones  DM  expuestos  a  STZ.  (a)  Barra  estadística
El  gráfico  que  muestra  que  la  irisina  redujo  el  aumento  del  nivel  de  expresión  de  IL­6  inducido  por  STZ  en  tejidos  del  hipocampo  de  ratones  DM.  (b)  Gráfico  de  barras  estadístico
mostrando  que  la  irisina  redujo  el  aumento  del  nivel  de  expresión  de  IL­1β  inducido  por  STZ  en  tejidos  del  hipocampo  de  ratones  DM.  Todos  los  datos  se  expresan  como
significa  ±  SEM.  n  =  6.   p  <  0  05  vs.  Cont;  #p  <  0  05  frente  a  STZ.

2.0 2.5

2.0
1.5

1.5
1.0 #
#
1.0
 C
a
 ir t6
  nó  ias)veR p eE
lL
 ­xe d(rI
 C
a
 ir t1
  nó  iasv)eR p eE
lL
 x­e d(rI

0,5
0,5

0.0 0.0
continuación irisina STZ  STZ+irizin continuación irisina STZ  STZ+irizin

(a) (b)

Figura  5:  La  irisina  redujo  el  nivel  de  IL­6  e  IL­1β  en  el  LCR  de  ratones  DM  expuestos  a  STZ.  (a)  STZ  aumentó  el  nivel  de  IL­1β  en  el  LCR  de
Ratones  DM,  pero  el  tratamiento  con  irisina  podría  reducir  la  regulación  positiva  de  IL­1β.  (b)  STZ  aumentó  el  nivel  de  IL­6  en  el  LCR  de  ratones  DM  y  la  irisina
El  tratamiento  podría  reducir  la  regulación  positiva  de  IL­6.  Todos  los  datos  se  expresan  como  medias  ±  SEM.  n  =  6.   p  <  0  05  vs.  Cont;  #p  <  0  05  frente  a  STZ.
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6 Mediadores  de  la  inflamación

p­p38
p­STAT3

p38
ESTADÍSTICA  3

­Actina
­Actina
continuación irisina STZ  STZ+irizin irisina
continuación STZ STZ+iricina

2.0 3

1.5
#
2 #

1.0
­N
lie
av3
  o v liet8 pr

 a
t3
  o v lie ­N
lie
  v Te S
A
dr
p
1
0,5

0.0 0
Cont. irisina STZ STZ+iricina Cont. irisina STZ STZ+iricina

(a) (b)

Sonda  Cont  Irisin  STZ  STZ+irizin

Sonda  libre

(C)

Figura  6:  La  irisina  redujo  la  activación  de  las  proteínas  p38,  STAT3  y  NFκB  en  los  tejidos  del  hipocampo  cerebral  de  ratones  DM.  (un  representante
Fotografía  de  transferencia  Western  y  resultados  estadísticos  de  p­p38  y  p38  total  en  tejidos  del  hipocampo  de  todos  los  grupos.  (b)  Western  blot  representativo
Fotografía  y  resultados  estadísticos  de  p­STAT3  y  STAT3  total  en  tejidos  del  hipocampo  de  todos  los  grupos.  (c)  La  actividad  de  unión  de  NFκB/ADN  fue
determinado  por  la  EMSA.  Todos  los  datos  se  expresan  como  medias  ±  SEM.  n  =  5.   p  <  0  05  vs.  Cont;  #p  <  0  05  frente  a  STZ.

Estudios  anteriores  han  establecido  bien  el  papel  de  p38. qué  astrocitos  desempeñan  una  respuesta  proinflamatoria  en  el
y  STAT3  en  neuroinflamación  [25,  26].  En  el  presente SNC  [29].  Nuestros  hallazgos  aquí  resaltaron  aún  más  la  importancia  de  
estudio,  cambios  notables  en  el  nivel  de  fosforilación  de  p38 STAT3  en  la  memoria  y  la  función  cognitiva,  especialmente  en  el  entorno  
y  STAT3  se  mostraron  en  un  estudio  de  transferencia  Western  (Figura  6). patológico,  como  en  pacientes  de  edad  avanzada.
STAT3  es  uno  de  los  factores  clave  implicados  en  muchas  cascadas  de   con  DM.
citocinas,  incluidas  IL­6,  IL­10  y  TNFα  [27].  Y  un  reciente Hasta  donde  sabemos,  el  presente  estudio  proporciona
El  estudio  reveló  que  las  vías  JAK/STAT  y  STAT3 la  primera  evidencia  de  que  la  irisina  previene  la  memoria  y  las  funciones  cognitivas
jugó  un  papel  clave  en  la  inducción  de  depresión  a  largo  plazo   déficits  mediante  la  regulación  de  JAK/STAT  y  STAT3  y  la  consiguiente  
dependiente  del  receptor  NMDA  en  el  hipocampo  [28]. lesión  inflamatoria  en  el  cerebro  de  ratones  DM.  Nosotros
Además,  el  STAT3  en  los  astrocitos  es  un  paso  esencial  para Anticipamos  que  nuestros  hallazgos  aquí  proporcionarán  la  base
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Mediadores  de  la  inflamación 7

para  futuros  ensayos  clínicos  para  determinar  si  la  irisina  puede   [10]  N.  Hou,  G.  Du,  F.  Han,  J.  Zhang,  X.  Jiao  y  X.  Sun,  “La  irisina  regula  el  
prevenir  o  tratar  la  memoria  y  la  disfunción  cognitiva  en  pacientes  con   eje  hemo  oxigenasa­1/adiponectina  en  el  tejido  adiposo  perivascu  lar  
DM  al  tiempo  que  atenúa  la  anomalía  de  la  glucosa. y  mejora  la  disfunción  endotelial  en  la  dieta.  Ratones  obesos  inducidos”,  
Cellular  Physiology  and  Biochemistry,  vol.  42,  núm.  2,  págs.  603– 614,  
2017.
Disponibilidad  de  datos [11]  B.  Sharma  y  N.  Singh,  "La  pitavastatina  y  la  4­hidroxi­3­metoxiacetofenona  
(HMAP)  reducen  la  disfunción  cognitiva  en  la  demencia  vascular  
Los  datos  utilizados  para  respaldar  los  hallazgos  de  este  estudio  están  
durante  la  diabetes  experimental".
disponibles  a  pedido  del  autor  correspondiente.
Investigación  neurovascular  actual,  vol.  7,  núm.  3,  págs.  180­191,  
2010.
Conflictos  de  interés [12]  J.  Qiao,  J.  Wang,  H.  Wang  et  al.,  “La  regulación  de  la  patología  de  los  
astrocitos  mediante  fluoxetina  previene  el  deterioro  de  los  fenotipos  
Todos  los  autores  declaran  que  no  existen  conflictos  de  intereses  en   mer  de  Alzhei  en  un  modelo  de  ratón  APP/PS1”,  Glia,  vol.  64,  núm.  2,  
este  estudio. págs.  240­254,  2016.
[13]  M.  Nakano,  K.  Nagaishi,  N.  Konari  et  al.,  “Las  células  madre  
mesenquimales  derivadas  de  la  médula  ósea  mejoran  el  deterioro  
Expresiones  de  gratitud
cognitivo  inducido  por  la  diabetes  mediante  la  transferencia  de  
Este  estudio  fue  apoyado  financieramente  por  la  Fundación  Nacional  de   exosomas  a  neuronas  y  astrocitos  dañados”,  Scientific  Reports,  vol.  6,  núm.  1,
2016.
Ciencias  Naturales  de  China  (Subvenciones  Nos.  81471020  y  81400770),  
el  Proyecto  de  Desarrollo  de  Tecnología  Médica  y  de  Salud  de  Shandong   [14]  J.  Wang,  S.  Zhu,  H.  Wang  et  al.,  "El  efecto  protector  dependiente  de  
astrocitos  de  la  quetiapina  en  la  neurona  GABAérgica  se  asocia  con  la  
(Subvención  No.  2014WS0148),  Financiamiento  de  Investigación  
prevención  de  conductas  similares  a  la  ansiedad  en  ratones  que  
Científica  Básica  de  la  Universidad  de  Shandong  (Proyecto  de  
envejecen  después  de  un  tratamiento  a  largo  plazo".  Revista  de  
Investigación  Clínica  del  Hospital  Qilu)  (Subvención  No.  2014QLKY21)  
neuroquímica,  vol.  130,  núm.  6,  págs.  780– 789,  2014.
y  Financiamiento  para  Investigación  Científica  del  Hospital  Qilu  de  la  
[15]  J.  Wang,  Y.  Zhang,  H.  Xu  et  al.,  “La  fluoxetina  mejora  el  rendimiento  
Universidad  de  Shandong  (Subvención  No.  2015QLMS32).
conductual  al  suprimir  la  producción  de  β­amiloide  soluble  en  ratones  
APP/PS1”,  Current  Alzheimer  Research,  vol.  11,  núm.  7,  págs.  672–
Referencias 680,  2014.
[16]  HY  Hsiao,  OT  Mak,  CS  Yang,  YP  Liu,  KM  Fang  y  SF  Tzeng,  “La  
[1]  KMV  Narayan,  EW  Gregg,  A.  Fagot­Campagna,  MM expresión  de  iNOS  inducida  por  TNF­α/IFN­γ  aumentó  por  la  
Engelgau  y  F.  Vinicor,  “La  diabetes:  un  problema  de  salud  pública   prostaglandina  E2  en  astrocitos  primarios  de  rata  a  través  de  AMPc/
común,  creciente,  grave,  costoso  y  potencialmente  prevenible”,   PKA  evocada  por  EP2  y  señalización  de  calcio  intracelular  "
Diabetes  Research  and  Clinical  Practice,  vol.  50,  Suplemento  2,  págs.   Glía,  vol.  55,  núm.  2,  págs.  214­223,  2007.
S77­S84,  2000. [17]  G.  Dallérac  y  N.  Rouach,  “Astrocitos  como  nuevos  objetivos  para  mejorar  
[2]  E.  Saedi,  MR  Gheini,  F.  Faiz  y  MA  Arami,  “Diabetes  mellitus  y  deterioros   las  funciones  cognitivas”,  Progress  in  Neurobiology.  vol.  144,  págs.  48  
cognitivos”,  World  Journal  of  Diabe  tes,  vol.  7,  núm.  17,  págs.  412– a  67,  2016.
422,  2016. [18]  C.­I.  Sze,  JC  Troncoso,  C.  Kawas,  P.  Moution,  DL  Price  y  LJ  Martin,  “La  
[3]  DA  Butterfield,  F.  Di  Domenico  y  E.  Barone,  “Riesgo  elevado  de  diabetes   pérdida  de  la  proteína  de  la  vesícula  presináptica  sinapto  fisina  en  el  
tipo  2  para  el  desarrollo  de  la  enfermedad  de  Alzheimer:  un  papel   hipocampo  se  correlaciona  con  el  deterioro  cognitivo  en  la  enfermedad  
clave  para  el  estrés  oxidativo  en  el  cerebro”,  Biochimica  et  Biophy   de  Alzheimer”,  Journal  of  Neuropathology  and  Experi  mental  
sica  Acta  (BBA)  ­  Molecular  Basis  de  Enfermedad,  vol.  1842,  núm.  9,   Neurology.  vol.  56,  núm.  8,  págs.  933– 944,  1997.
págs.  1693­1706,  2014. [19]  Y.  Wang,  AHH  van  Boxel­Dezaire,  H.  Cheon,  J.  Yang  y  GR  Stark,  “La  
[4]  CM  Ryan,  E.  van  Duinkerken  y  C.  Rosano,  “Consecuencias   activación  de  STAT3  en  respuesta  a  la  IL­6  se  prolonga  mediante  la  
neurocognitivas  de  la  diabetes”,  American  Psychologist,  vol.  71,  núm.   unión  del  receptor  de  IL­6  al  receptor  de  EGF”,  Proceedings  de  la  
7,  págs.  563– 576,  2016. Academia  Nacional  de  Ciencias,  vol.  110,  núm.  42,  págs.  16975–
[5]  O.  Ojo  y  J.  Brooke,  “Evaluación  de  la  asociación  entre  diabetes,   16980,  2013.
deterioro  cognitivo  y  demencia”,  Revista  Internacional  de  Investigación   [20]  DC  Underwood,  RR  Osborn,  CJ  Kotzer  et  al.,  “SB  239063,  un  potente  
Ambiental  y  Salud  Pública,  vol.  12,  núm.  7,  págs.  8281– 8294,  2015. inhibidor  de  la  quinasa  p38  MAP,  reduce  la  producción  de  citoquinas  
inflamatorias,  la  infiltración  de  eosinófilos  en  las  vías  respiratorias  y  la  
[6]  J.  Janson,  T.  Laedtke,  JE  Parisi,  P.  O'Brien,  RC  Petersen  y  PC  Butler,   persistencia”,  Journal  of  Pharmacology  and  Experimental  Thera  
“Mayor  riesgo  de  diabetes  tipo  2  en  la  enfermedad  de  Alzheimer”,   peutics,  vol.  293,  núm.  1,  págs.  281– 288,  2000.
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[7]  R.  Ravona­Springer,  X.  Luo,  J.  Schmeidler  et  al.,  “La  diabetes  se  asocia   cuales  el  síndrome  metabólico  y  la  diabetes  perjudican  la  memoria”,  
con  una  mayor  tasa  de  deterioro  cognitivo  en  personas  mayores  con   The  Journals  of  Gerontology  Series  A,  vol.  55,  núm.  5,  págs.  B228­
demencia  en  cuestión”,  Dementia  and  Geriatric  Cognitive  Disorders,   B232,  2000.
vol.  29,  núm.  1,  págs.  68– 74,  2010. [22]  P.  Boström,  J.  Wu,  MP  Jedrychowski  et  al.,  “Una  miocina  dependiente  
[8]  N.  Perakakis,  GA  Triantafyllou,  JM  Fernández­Real  et  al.,  “Fisiología  y   de  PGC1­α  que  impulsa  el  desarrollo  de  grasa  blanca  y  termogénesis  
papel  de  la  irisina  en  la  homeostasis  de  la  glucosa”  Nature  Reviews   similar  a  la  grasa  parda”,  Nature,  vol.  481,  núm.  7382,  págs.  463– 468,  
Endocrinology.  vol.  13,  núm.  6,  págs.  324– 337,  2017. 2012.
[9]  T.  Hofmann,  U.  Elbelt  y  A.  Stengel,  “La  irisina  como  hormona  derivada   [23]  A.  Nagayach,  N.  Patro  e  I.  Patro,  “Respuesta  astrocítica  y  microglial  en  
del  músculo  que  estimula  la  termogénesis:  una  actualización  crítica”,   el  cerebro  de  rata  diabética  inducida  experimentalmente”,  Metabolic  
Peptides,  vol.  54,  págs.  89­100,  2014. Brain  Disease,  vol.  29,  núm.  3,  págs.  747– 761,  2014.
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8 Mediadores  de  la  inflamación.

[24]  LB  Buckman,  MM  Thompson,  RN  Lippert,  TS
Blackwell,  FE  Yull  y  KLJ  Ellacott,  “Evidencia  de  un  nuevo  papel  
funcional  de  los  astrocitos  en  la  respuesta  homeostática  aguda  a  la  
ingesta  de  una  dieta  rica  en  grasas  en  ratones”,  
Molecular  Metabolism.  
vol.  4,  núm.  1,  págs.  58– 63,  2015.
[25]  JP  O'Callaghan,  KA  Kelly,  RL  VanGilder,  MV  Sofroniew  y  DB  Miller,  
“La  activación  temprana  de  STAT3  regula  la  astrogliosis  reactiva  
"
inducida  por  diversas  formas  de  neurotoxicidad,  PLOS  ONE,  vol.  9,  
núm.  7,  artículo  e102003,  2014.
[26]  X.  Guo,  C.  Harada,  K.  Namekata  et  al.,  “Regulación  de  la  gravedad  de  
la  inflamación  y  desmielinización  de  las  neuroínas  por  la  vía  TLR  
ASK1­p38”,  EMBO  Molecular  Medicine.  vol.  2,  núm.  12,  págs.  504  –
515,  2010.
[27]  CF  Lai,  J.  Ripperger,  KK  Morella  et  al.,  “Los  receptores  para  las  
citocinas  de  tipo  inter  leucina  (IL)  ­10  e  IL­6  utilizan  mecanismos  de  
señalización  similares  para  inducir  la  transcripción  a  través  de  
elementos  de  respuesta  de  IL­6”,  Journal  of  Química  biológica,  vol.  
271,  núm.  24,  págs.  13968  – 13975,  1996.
[28]  CS  Nicolas,  S.  Peineau,  M.  Amici  et  al.,  “La  vía  Jak/STAT  está  
implicada  en  la  plasticidad  sináptica”,  Neuron,  vol.  73,  núm.  2,  págs.  
374  – 390,  2012.
[29]  Y.  Lu,  M.  He,  Y.  Zhang  et  al.,  “Las  respuestas  proinflamatorias  
diferenciales  de  astrocitos  y  microglia  implican  la  activación  de  
STAT3  en  respuesta  a  campos  de  radiofrecuencia  de  1800  MHz”,  
PLOS  ONE,  vol.  9,  núm.  10,  artículo  e108318,  2014.