Manual Laboratorio Metodos Instrumentales Analisis 2007 ITSON

DIRECCION DE RECURSOS NATURALES
DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS

ALIMENTARIAS
MANUAL DE LABORATORIO DE
MÉTODOS INSTRUMENTALES DE
ANÁLISIS
M. en C. ROBERTO GARCIA RODRÍGUEZ
CD. OBREGÓN, SONORA. AGOSTO DEL 2007

ÍNDICE
PRÁCTICA No. 1.0 NORMATIVIDAD EN LABORATORIOS ............................................. 1
1.0.1 OBJETIVO ..................................................................................................................... 1
1.0.2 INFORMACIÓN GENERAL ........................................................................................ 1
1.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS .................................................................................. 2
1.0.4 PROCEDIMIENTO ....................................................................................................... 2
PRÁCTICA No. 2.0 DETERMINACIÓN DE LA ACIDEZ DE UN VINAGRE COMERCIAL
MEDIANTE UNA VALORACIÓN ÁCIDO-BASE UTILIZANDO UN INDICADOR
COLOREADO ............................................................................................................................ 5
2.0.1 OBJETIVOS ................................................................................................................... 5
2.0.2 INFORMACION GENERAL ........................................................................................ 5
2.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS ................................................................................... 6
2.0.4 PROCEDIMIENTO ....................................................................................................... 6
2.0.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS .................................................................................... 7
PRÁCTICA No. 2.1 DETERMINACIÓN DE ACIDEZ Y ALCALINIDAD EN AGUAS ....... 8
2.1.1 OBJETIVO ..................................................................................................................... 8
2.1.2 INFORMACIÓN GENERAL ........................................................................................ 8
2.1.3 MATERIALES Y REACTIVOS ................................................................................... 8
2.1.4 PROCEDIMIENTO ....................................................................................................... 8
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA ................................................................................ 8
ACIDEZ .............................................................................................................................. 9
ALCALINIDAD .................................................................................................................. 9
2.1.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS .................................................................................. 10
PRÁCTICA No. 3.0 DETERMINACIÓN DE CLORUROS EN AGUA ................................. 11
3.0.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 11
3.0.2 INFORMACIÓN GENERAL ...................................................................................... 11
3.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS ................................................................................. 11
3.0.4 PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 12
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA .............................................................................. 12
ACONDICIONAMIENTO DE LA MUESTRA ............................................................... 12
VALORACIÓN ................................................................................................................. 12
PRÁCTICA No. 3.1 ANÁLISIS DE DUREZA TOTAL EN AGUAS POR TITULACIÓN
CON EDTA ............................................................................................................................... 14
3.1.1 OBJETIVO .................................................................................................................. 14
3.1.2 INFORMACION GENERAL ..................................................................................... 14
3.1.3 MATERIALES Y REACTIVOS ................................................................................ 16
3.1.4 PROCEDIMIENTO .................................................................................................... 17
3.1.5 CALCULOS Y RESULTADOS ................................................................................. 18
3.1.6 BIBLIOGRAFIA ......................................................................................................... 18
PRÁCTICA No. 4.0 COMPROBACIÓN EXPERIMENTAL DE LA LEY DE BEER CON
ESPECTROFOTÓMETRO ....................................................................................................... 19
4.0.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 19
ii
4.0.4 PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 20
4.0.5 RESULTADOS ............................................................................................................ 20
EJERCICIOS ..................................................................................................................... 21
PREPARACIÓN DE REACTIVOS .................................................................................. 21
PRÁCTICA No. 5.0 DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE LONGITUD DE ONDA
MÁXIMA .................................................................................................................................. 23
5.0.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 23
5.0.4 PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 23
5.0.5 CALCULOS Y RESULTADOS .................................................................................. 24
PRÁCTICA No. 6.0 DETERMINACIÓN DE UN METAL POR ESPECTROMETRÍA DE
ABSORCIÓN ATÓMICA ........................................................................................................ 26
6.0.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 26
6.0.4 PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 26
PRÁCTICA No. 7.0 DETERMINACIÓN DE ALCOHOL ETÍLICO POR
REFRACTOMETRIA ............................................................................................................... 32
7.0.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 32
7.0.4 PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 33
PRÁCTICA No. 7.1 ESTUDIO DE LA INVERSIÓN DE LA SACAROSA POR
POLARIMETRÍA ..................................................................................................................... 35
7.1.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 35
7.1.4 PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 35
PRÁCTICA No. 8.0 DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DEL pH ............... ¡Error!

Marcador no definido.8
8.0.1 OBJETIVO ................................................................ ¡Error! Marcador no definido.8
8.0.2 INFORMACIÓN GENERAL ................................... ¡Error! Marcador no definido.8
8.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS .............................. ¡Error! Marcador no definido.8
8.0.4 CALCULOS Y RESULTADOS ............................... ¡Error! Marcador no definido.9
REPORTE ................................................................ ¡Error! Marcador no definido.9
PRÁCTICA No. 8.1 OPERACIÓN CALIBRACIÓN Y DETERMINACIÓN DE
CONDUCTIVIDAD ELECTRICA EN SISTEMAS ACUOSOS ........................................... 41
8.1.1 OBJETIVO ................................................................................................................... 41
iii
8.1.4 PROCEDIMIENTO .................................................................................................... 42
PRÁCTICA No. 9.0 SEPARACION E IDENTIFICACION DE COLORANTES
ARTIFICIALES EN ALIMENTOS, POR CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA ....... ¡Error!
Marcador no definido.4
9.0.1 OBJETIVO ............................................................... ¡Error! Marcador no definido.4
9.0.2 INFORMACION GENERAL ................................... ¡Error! Marcador no definido.4
9.0.3 MATERIALES Y REACTIVO ................................. ¡Error! Marcador no definido.4
9.0.4 PROCEDIMIENTO .................................................. ¡Error! Marcador no definido.5
9.0.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS ............................... ¡Error! Marcador no definido.6
PRÁCTICA No. 9.1 SEPARACION DE PIGMENTOS VEGETALES POR
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA .................................. ¡Error! Marcador no definido.7
9.1.1 OBJETIVO ................................................................ ¡Error! Marcador no definido.7
9.1.2 INFORMACION GENERAL ................................... ¡Error! Marcador no definido.7
9.1.3 MATERIALES Y REACTIVOS .............................. ¡Error! Marcador no definido.7
9.1.4 PROCEDIMIENTO .................................................. ¡Error! Marcador no definido.8
9.1.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS ............................... ¡Error! Marcador no definido.8
INVESTIGAR: ............................................................... ¡Error! Marcador no definido.8
OPCIONES DE TRABAJO FINAL
TRABAJO FINAL: DETERMINACION DE MICRONUTRIENTES EN SUELOS,

VEGETALES Y AGUAS POR ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA 49
OBJETIVO ............................................................................................................................ 49
INFORMACION GENERAL ............................................................................................... 49
MATERIALES Y REACTIVOS........................................................................................... 50
PROCEDIMIENTO .............................................................................................................. 50
BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................................... 51
TRABAJO FINAL: DETERMINACIÓN POR ESPECTROFOTOMETRIA UV DE
ASPIRINA, FENACETINA Y CAFEINA EN TABLETAS APC Y CONOCER DE SU
COMPOSICIÓN PORCENTUAL .......................................................................................... 482
OBJETIVO ............................................................................................................................ 48
INFORMACIÓN GENERAL ............................................................................................. 482
MATERIALES Y REACTIVOS......................................................................................... 482
PROCEDIMIENTO ............................................................................................................ 483
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1 Requisitos técnicos mínimos de las instalaciones físicas del laboratorio de
Métodos Instrumentales de Análisis ........................................................................................ 3
iv
Manual de Laboratorio de Métodos
Instrumentales de Análisis
PRÁCTICA No. 1.0 NORMATIVIDAD EN LABORATORIOS
1.0.1 OBJETIVO
Realizar una inspección de factores que determinan el desarrollo correcto y confiable
de las prácticas de laboratorio, tales como factores humanos, instalaciones,
condiciones ambientales y equipo.
1.0.2 INFORMACIÓN GENERAL. Norma NMX-17025 Sección 5ta

Esta norma establece los requisitos con los que debe contar un laboratorio, como
son: Instalaciones en general, instrumentos, áreas de trabajo, campanas extractoras
de humos y gases, tuberías…. etc., se les pide que lean el apartado 5t0 de la norma
NMX-17025
Parámetros Ambientales.- Uno de los factores más importantes en un sistema
analítico que afecta directamente a las mediciones y como consecuencia a los
resultados son las instalaciones físicas disponibles en el laboratorio. Se tienen
involucrados dos principios generales, un medio ambiente apropiado para la
operación óptima del equipo e instrumentos y el medio ambiente apropiado para el
desempeño óptimo de los empleados. Dentro de los factores de medio ambiente que
deben considerarse son los siguientes:
a). Temperatura. El laboratorio requiere de condiciones estables de temperatura para
que los instrumentos del laboratorio funcionen de manera adecuada y las mediciones
analíticas que en el laboratorio se realicen no sean afectadas, usualmente se
recomienda que la temperatura se mantenga entre 21-23 ºC
b). Humedad. Los niveles altos de humedad relativa afectan la óptica de ciertos
equipos. Cuando se conjunta la presencia de vapores corrosivos y humedad relativa
alta se acelera la corrosión de la electrónica sensible de los equipos, así mismo,
algunas sustancias higroscópicas absorberán la humedad del medio fácilmente
cuando los niveles de humedad son altos. La baja humedad relativa producirá cargas
estáticas, las cuales son nocivas para el equipo electrónico
c) Servicio Eléctrico
El servicio eléctrico en México es de 127 V AC a 60 Hz. Con un circuito de corriente
de 15 amperes. Para el laboratorio el servicio es comúnmente a 127 y 220 voltios, y
los requisitos de corriente son mucho mayores, de 20 a 30 amperes y 127 V. Algunos
instrumentos necesitarán circuitos exclusivos para éstos, por ejemplo, un horno
grande requiere 50 amperes a 220 voltios.
Los equipos electrónicos necesitan una tierra física verdadera para su estabilidad,
por lo que es recomendable el verificar que la tierra física de los equipos se
encuentre funcionando de manera correcta.
1
d). Calidad del Aire

Las necesidades de ventilación dependerán del tipo de análisis que en el se realicen.
Por ejemplo en el caso de los laboratorios de preparación de muestras se requieren
de 20 a 30 cambios de aire por hora para cumplir con las normas de seguridad, esto
es debido a que los niveles de vapores tóxicos y residuos producidos en ellos
pueden llegar a ser muy altos.
El reciclar el aire en los laboratorios no es conveniente ya que en el se producen
contaminantes y vapores tóxicos los cuales no serán eliminados del medio si el aire
es reciclado y esto producirá un factor de alto riesgo en estos.
e). Consideraciones de Seguridad
La seguridad es una parte muy importante de los laboratorios analíticos debido a que
en ellos el personal que labora se encuentra expuesto a sustancias químicas que
pueden afectar de manera leve o severa la salud del personal, en general los
laboratorios deberán de contar con equipo de seguridad, señalamientos, salidas de
emergencia, regaderas de emergencia, extintores, botiquín de primeros auxilios.
Además; se recomienda que el laboratorio cuente con un programa de residuos
químicos.
Algunas de las normas relacionadas con seguridad son: NOM-009-STPS-1993.
Condiciones de seguridad e higiene para el almacenamiento, transporte y manejo de
sustancias corrosivas, irritantes y tóxicas en los centros de trabajo.
NOM-005-STPS-1993. Condiciones de seguridad en los centros de trabajo para el
almacenamiento, transporte de sustancias inflamables y combustibles.
1.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS

Papel y lápiz
Rotafolio y plumones
Cinta adhesiva
Lectura de la práctica
1.0.4 PROCEDIMIENTO
Una vez leído y comprendido el objetivo e información general, observar por unos
momentos el interior y exterior del laboratorio, tratar de identificar cada objeto,
equipo, instalaciones de tubería de agua, luz, alcantarillas, vacío etc.
Proceder a hacer la verificación del listado de requisitos, siendo estos el 100 %, por
lo tanto, al final del ensayo, calcular el por ciento de requisitos que cumple este
laboratorio. Hacer sus observaciones al respecto y sus conclusiones por cada equipo
de trabajo.
2
Tabla 1 Requisitos técnicos mínimos de las instalaciones físicas del laboratorio de Métodos
Equipo de Seguridad Positivo Negativo Observaciones
Señalamientos de seguridad
Lavaojos
Regadera de emergencia
Botiquín de primeros auxilios
Equipo contra incendios

Equipo para manejo de
derrames químicos
Equipo de protección personal,
tal como:
Guantes
Caretas
Lentes de protección
Zapatos de seguridad y
protectores auditivos
Batas de laboratorio
3
PREGUNTAS Positivo Negativo Observaciones

La regadera de emergencia es
evaluada por lo menos dos
veces al mes?
Los lavaojos son evaluados
regularmente?, por lo menos
dos veces al mes?
El botiquín de primeros auxilios,
tiene vigente el contenido y está
completo?
Existe un programa de manejo
de residuos químicos en el
laboratorio?
Hay áreas definidas para los
equipos de medición?
Área destinada al
almacenamiento de reactivos?
La limpieza de balanzas, mesas,
desecadores y del laboratorio en
general es óptimo?
Los equipos tales como muflas,
campanas de extracción,
balanzas, espectrofotómetros,
etc. Cuentan con registros de
calibración?
Están a la vista las seguridades
en las prácticas de laboratorio?
4
PRÁCTICA No. 2.0 DETERMINACIÓN DE LA ACIDEZ DE UN

VINAGRE COMERCIAL MEDIANTE UNA VALORACIÓN
ÁCIDO-BASE UTILIZANDO UN INDICADOR COLOREADO
2.0.1 OBJETIVOS
Determinar el grado de acidez de un vinagre comercial, mediante una valoración
ácido-base, utilizando un indicador coloreado
2.0.2 INFORMACION GENERAL

El hidróxido de sodio reacciona con el ácido acético del vinagre según la siguiente
reacción:
CH3-COOH + NaOH CH3-COONa + H2O
Las reacciones químicas siempre tienen lugar equivalente a equivalente. Una
reacción química de gran interés es la reacción de neutralización entre un ácido y
una base:
Ácido + Base Sal + Agua
Por tanto en esta reacción se cumplirá:
número de equivalentes-gramo de ácido = número de equivalentes-gramo de base
No. de eq. de soluto
Y como: N = se tiene:
litros de solución
número de equivalentes-gramo = Normalidad x Volumen de disolución en litros
Y por tanto, en nuestra reacción se cumplirá:
N ácido · V ácido = Nbase· Vbase
y si conozco la normalidad y el volumen de base o de ácido necesario para
neutralizar un volumen dado de ácido o de base de concentración desconocida,
puedo determinar la concentración del ácido o base problema.
El punto final de la valoración se pone de manifiesto mediante un indicador
coloreado, que es una sustancia que tiene diferentes estructura con diferentes
colores en medio ácido y en medio básico.
Se utiliza fenolftaleína como indicador, preparar una solución al 0.1 % en etanol (50
mg/50 mL de etanol)
La acidez se expresa en tanto por ciento en masa de ácido acético, lo que se llama
grado del vinagre.
5

Materiales
Base y varilla soporte.
1 Balanza.
I gotero de 60 ml
1 Vidrio de reloj.
1 Cucharilla.
1 Vaso de precipitados de 100 mL.
2 Base y varilla soporte.
2 Nuez doble y pinzas de bureta.
3 Matraz Erlenmeyer de 250 mL.
2 Matraz volumétrico de 250 mL.
2 Tapón de plástico.
1 Pipeta de 5 mL.
2 Bureta de 50 mL.
Reactivos
Agua destilada.
15 ml de Vinagre comercial.
10 g de Hidróxido de sodio.
0.06 g de Fenoftaleína alcohólica al 0.1%
60 ml de alcohol etílico
Ácido clorhídrico
10 g de Biftalato de potasio
2.0.4 PROCEDIMIENTO
1. Prepara 250 mL de disolución de hidróxido de sodio 0.25 M. ( Valorar la solución
de hidróxido de sodio con una solución de biftalato de potasio 0.25 M. Poner a
secar 10 g del biftalato en una estufa a 120 ºC por una hora, dejar enfriar y pesar
la cantidad apropiada para un cuarto de litro)
2. Valorar la solución de hidróxido de sodio con la solución de biftalato, seguir las
instrucciones del Profesor.
3. En un matraz erlenmeyer de 250 mL añade 4.5 mL de vinagre y 20 mL de agua
destilada: si el vinagre tiene todavía mucho color, añade más agua destilada para
que pueda verse bien el cambio de color del indicador. (Hacer esta operación por
triplicado)
4. Añade tres o cuatro gotas de fenolftaleína al Erlenmeyer.
5. Toma una bureta de 50 mL y llénela con hidróxido de sodio 0.25 M.
6. Enrasa la bureta y anota la lectura inicial.
6
7. Añade disolución de hidróxido de sodio de la bureta, agitando a la vez el

erlenmeyer.
8. Cuando se empiece a ver un primer cambio de color en la disolución problema,
añadir más lentamente la disolución de hidróxido sódico.
9. Tras añadir la primera gota que produzca un cambio de color permanente, cerrar
la bureta y anotar la lectura final de la misma.
10. Repite la valoración.
2.0.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS

1. Calcula la cantidad de hidróxido de sodio que necesitas para preparar los 250 mL
de la disolución de hidróxido de sodio 0.25 M.
2. Calcula la cantidad de biftalato de potasio que necesitas para preparar los 250 mL
de la disolución 0.25 M.
1ª valoración 2ª valoración 3ra valoración
Anota la lectura inicial de la bureta
Anota la lectura final de la bureta
Valor medio
3. A partir del volumen de hidróxido de sodio consumido, determina los gramos de

ácido acético contenidos en los 4.5 mL de vinagre valorados.
4. Sabiendo los gramos de ácido acético que hay en 4.5 mL de vinagre, calcula los
que habrá en 100 mL.
5. Halla el grado de acidez de la muestra analizada, es decir, los gramos de ácido
acético que hay en 100 g de vinagre (considera que la densidad del vinagre es
aproximadamente la del agua  = 1 g/mL).
6. ¿Coincide el resultado obtenido con el que aparece en la etiqueta? ¿Qué
conclusiones pueden obtenerse
7
PRÁCTICA No. 2.1 DETERMINACIÓN DE ACIDEZ Y

ALCALINIDAD EN AGUAS
2.1.1OBJETIVO
Aplicar el método de prueba para la determinación de acidez y alcalinidad en agua
potable, pozo, lagos, comerciales; para evaluar su calidad según la norma oficial
mexicana.
2.1.2 INFORMACIÓN GENERAL
La acidez se refiere a la presencia de sustancias disociables en agua y que como
producto de disociación generan el ión hidronio (H3O+), también la presencia de
ciertos cationes metálicos como el Fe+3 y el Al+3 contribuyen a la acidez del medio.
La alcalinidad se refiere a la presencia de sustancias hidrolizables en agua y que
como producto de hidrólisis generan el ión hidroxilo (OH-), contribuyen también en
forma importante a la alcalinidad los carbonatos y fosfatos. La presencia de boratos y
silicatos en concentraciones altas también contribuyen a la alcalinidad del medio.
Una medida de la acidez total del medio es la cantidad de base que es necesario
añadir a una muestra para llevar el pH a un valor predeterminado coincidente con el
vire de la fenolftaleína. Una medida de la alcalinidad total del medio es la cantidad de
ácido fuerte que es necesario añadir a una muestra para llevar el pH a un valor
predeterminado coincidente con el vire del naranja de metilo.

2 soportes 120 ml de alcohol etílico
1 pinzas doble para buretay bureta 0.1 g azul de bromocresol
2 buretas de 20 ml 0.1 g de fenolftaleína
1 pipeta de 10 mL 8 g de NaOH (0.02N)
2 matraces Erlenmeyer de 250 mL 0.98 g de H2SO4 (0.02N)
2 goteros de 60 ml
2.1.3 PROCEDIMIENTO
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
 Recolectar por lo menos 500 mL de muestra en frascos de vidrio, polietileno o

polipropileno. Siempre debe enjuagarse el frasco con una porción de la
muestra.
 Llenar las botellas completamente y tapar herméticamente, ya que las
muestras de aguas residuales pueden estar sujetas a la acción microbiana y a
8
pérdidas o ganancias de CO2 u otros gases cuando se exponen al aire. Evitar

la agitación de la muestra y su exposición prolongada al aire.
 Conservar a una temperatura de 0°C a 4 ºC hasta su análisis.
 El tiempo máximo de almacenamiento previo al análisis es de 24 h.
ACIDEZ (POR TRIPLICADO)
Con azul de bromofenol
 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL)

 Ponerla en un matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad, añadirle 3 gotas
del indicador de azul de bromofenol.
 Si la muestra adquiere un color amarillo, añadir solución valorada de NaOH
0.02 N hasta que la solución vire a un color azul, lo cual indica un pH de 3.7.
 Esta determinación se hace cuando la solución tiene un pH menor de 3.7.
Con Fenolftaleína
 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL), ponerla en

un matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad, añadirle 3 gotas del indicador
de fenolftaleína
 Si la solución permanece incolora, añadir solución valorada de NaOH 0.02 N
hasta el vire de incoloro o rosa tenue, lo cual indica un pH de 8.3. (tomar nota
del volumen de NaOH requerido)
ALCALINIDAD (POR TRIPLICADO)
Con fenolftaleína
 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL) ponerla en un

matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad y añadirle 3 gotas de solución de
fenolftaleína.
 Si la solución se torna rosa adicionar la solución valorada de H 2SO4 0.02 N
hasta un vire de color rosa tenue a incoloro lo cual indica un pH de 8.3.
 Tomar nota del volumen de ácido requerido en la valoración.
Esta determinación se hace cuando la muestra tiene un pH mayor de 8.3.
Con Verde de bromocresol
 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL), ponerla en

un matraz erlenmeyer de 250 mL de capacidad, adicionar 3 gotas de indicador
9
de verde de bromocresol a una muestra tomada en el momento o en la

(muestra donde) que se determinó inicialmente alcalinidad a la fenolftaleína.
 Si la muestra toma un color azul entonces adicionar la solución valorada de
H2SO4 0.02 N hasta que la solución vire de un color azul a un color amarillo, lo
cual indica un pH de 4.5.
 Tomar nota del volumen de ácido gastado en la titulación.
 Realizar los calculos correspondientes de alcalinidad a la fenolftaleína y/o al
Verde de bromocresol y expresarlos como mg/l de CaCO3

1ª valoración 2ª valoración 3ra valoración
Anota la lectura inicial
de la bureta
Anota la lectura final de
la bureta
Valor medio
Acidez y Alcalinidad expresada como CaCO3 en ppm o mg por litro

V: volumen de ácido o álcali consumido N: Normalidad del ácido ó álcali consumido
V * N * meqCaCO3 *106
ppm CaCO3 =
Vm
10
PRÁCTICA No. 3.0 DETERMINACIÓN DE CLORUROS EN

AGUA
3.0.1 OBJETIVO
Determinación de cloruros en aguas, extractos acuosos de suelos; para valorar su
calidad de acuerdo a las normas oficiales de análisis.

El ión cloruro es uno de los iones inorgánicos que se encuentran en mayor cantidad
en aguas naturales, residuales y residuales tratadas, su presencia es necesaria en
aguas potables. En agua potable, el sabor salado producido por la concentración de
cloruros es variable. En algunas aguas conteniendo 25 mg Cl-/litro se puede detectar
el sabor salado si el catión es sodio. Por otra parte, éste puede estar ausente en
aguas conteniendo hasta 1g Cl-/litro cuando los cationes que predominan son calcio
y magnesio.
Un alto contenido de cloruros puede dañar estructuras metálicas y evitar el
crecimiento de plantas. Las altas concentraciones de cloruro en aguas residuales,
cuando éstas son utilizadas para el riego en campos agrícolas deteriora, en forma
importante la calidad del suelo.
Es entonces importante el poder determinar la concentración de cloruros en aguas
naturales, residuales y residuales tratadas en un amplio intervalo de
concentraciones.

2 soportes con pinzas y bureta
2 pinzas para bureta
2 buretas de 20 ml
4 matraces Erlenmeyer de 125 mL
1 pipeta de 10 mL
5 g de cromato de potasio (sol. Al 5%)

4 g de NaOH (0.1N)
4.9 g de H2SO4 (0.1N)
2.4 g AgNO3 (0.014 N)
0.83 g NaCl (0.014 N)
11
3.0.4 PROCEDIMIENTO
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
 Recolectar por lo menos 500 mL de muestra en frascos de vidrio, polietileno o

polipropileno. Siempre debe enjuagarse el frasco con una porción de la
muestra.
 Llenar las botellas completamente y tapar herméticamente, ya que las
muestras de aguas residuales pueden estar sujetas a la acción microbiana y a
pérdidas o ganancias de CO2 u otros gases cuando se exponen al aire. Evitar
la agitación de la muestra y su exposición prolongada al aire.
 Conservar a una temperatura de 0°C a 4 ºC hasta su análisis.
 El tiempo máximo de almacenamiento previo al análisis es de 24 h.
ACONDICIONAMIENTO DE LA MUESTRA
 Utilizar un volumen de muestra de 100 mL. Ajustar el pH entre 7 y 10

utilizando las disoluciones de hidróxido de sodio (0,1N) y/o ácido sulfúrico
(0,1N).
 Si la muestra tiene mucho color, añadir de 3 mL a 5 mL de suspensión de
hidróxido de aluminio antes de acondicionar. Mezclar, dejar sedimentar y filtrar
con papel filtro cualitativo.
VALORACIÓN (POR TRIPLICADO)
 A 100 mL de muestra acondicionada, adicionar 1 mL de disolución indicadora

de cromato de potasio al 5% (ver sección de preparación de reactivos).
Valorar con la disolución patrón de nitrato de plata (ver sección de preparación
de reactivos) hasta el vire de amarillo a naranja rojizo, manteniendo un criterio
constante en el punto final.
 Titular un blanco con las muestras.
Preparación de reactivos
Disolución indicadora de cromato de potasio.

Pesar aproximadamente y con precisión 5,0 g de cromato de potasio y
disolver en 100 mL de agua y añadir disolución patrón de nitrato de plata
hasta que se produzca un precipitado rojo claro. Proteger la disolución de la
luz y dejar estabilizar durante 24 h después de la adición de la disolución de
nitrato de plata. (observar si hubo precipitado, en caso negativo, omitir este
paso, pues hay ausencia de cloruros.)
12
Disolución estándar (patrón) de nitrato de plata (0,014N).

Pesar aproximadamente 5,0 g de cristales de nitrato de plata y secar a 100C
durante 2 h. Pesar aproximadamente y con precisión 2,4 g de los cristales
pulverizados de nitrato de plata disolver y aforar a un litro con agua destilada.
Valorar contra la disolución patrón de cloruro de sodio 0,014N
Disolución patrón de cloruro de sodio (0,014N).
Secar aproximadamente 3,0 g de cloruro de sodio a 140 ºC. Pesar
aproximadamente y con precisión 824,1 mg de la sal seca disolver en agua y
aforar a un litro en un matraz volumétrico. Se acepta el uso de patrón
certificado.

Calcular la concentración de iones Cloruro en la muestra de agua, extracto acuoso
de suelos original en mg/L como sigue: Hacer por triplicado el análisis.
Cl- (ppm) = [(A - B)x N x 35,450]/ vol. de muestra
donde:
A Son los ml. de disolución de nitrato de plata gastados en la valoración de la
muestra;
B Son los mL de disolución de nitrato de plata gastados en la valoración del
blanco, y
N Es la normalidad del nitrato de plata.
Reportar los resultados en Cl- mg/l ó ppm, con la precisión correspondiente.
13
PRÁCTICA No. 3.1 ANÁLISIS DE DUREZA TOTAL EN

AGUAS POR TITULACIÓN CON EDTA
3.1.1 OBJETIVO
Analizar la dureza total en aguas, mediante el método de complejometría, utilizando
EDTA.Na2 , para interpretar a que clasificación le pertenece, en base a su
concentración en ppm y en miliequivalentes por litro

La DUREZA es una característica química del agua que esta determinada por el
contenido de carbonatos, bicarbonatos, cloruros, sulfatos y ocasionalmente nitratos
de calcio y magnesio.
La dureza es indeseable en algunos procesos, tales como el lavado doméstico e
industrial, provocando que se consuma más jabón, al producirse sales insolubles.
En calderas y sistemas enfriados por agua, se producen incrustaciones en las
tuberías y una pérdida en la eficiencia de la transferencia de calor.
Además le da un sabor indeseable al agua potable.
Grandes cantidades de dureza son indeseables por razones antes expuestas y debe
ser removida antes de que el agua tenga uso apropiado para las industrias de
bebidas, lavanderías, acabados metálicos, teñido y textiles.
La mayoría de los suministros de agua potable tienen un promedio de 250 mg/L de
dureza. .
Niveles superiores a 500 mg/L son indeseables para uso doméstico. La dureza es
caracterizada comúnmente por el contenido de calcio y magnesio y expresada como
carbonato de calcio equivalente.
Existen dos tipos de DUREZA:
Dureza Temporal: Esta determinada por el contenido de carbonatos y bicarbonatos
de calcio y magnesio. Puede ser eliminada por ebullición del agua y posterior
eliminación de precipitados formados por filtración, también se le conoce como
"Dureza de Carbonatos".
Dureza Permanente: está determinada por todas las sales de calcio y magnesio
excepto carbonatos y bicarbonatos. No puede ser eliminada por ebullición del agua y
también se le conoce como "Dureza de no. de carbonatos
Interpretación de la dureza:
14
Dureza como CaCO3 Interpretación

0 - 75 agua suave
75 – 150 agua poco dura
150-300 agua dura
> 300 agua muy dura
__________________________________________
En agua potable el límite máximo permisible es de 300 mg/L de dureza.
En agua para calderas el límite es de 0 mg/L de dureza
Almacenaje de la muestra
La muestra puede ser recolectada y almacenada en un recipiente de plástico, bien
tapado.
Campo de aplicación
El análisis de la dureza total en muestras de aguas es utilizado en al industria de
bebidas, lavandería, fabricación de detergentes, acabados metálicos, teñido y
textiles. Además en el agua potable, agua para calderas, etc.
Principios
Este método esta basado en la cuantificación de los iones calcio y magnesio por
titulación con el EDTA y su posterior conversión a Dureza Total expresada como
CaCO3.
La muestra de agua que contiene los iones calcio y magnesio se le añade el buffer
de PH 10, posteriormente, se le agrega el indicador eriocromo negro T (ENT), que
hace que se forme un complejo de color púrpura, enseguida se procede a titular con
EDTA (sal disódica) hasta la aparición de un color azul.
Reacciones:
Ca2+ + Mg2+ + Buffer PH 10  Ca2+ + Mg2+ + ENT [Ca-Mg--ENT]
complejo púrpura
[Ca-Mg--ENT] + EDTA ------------->[Ca-Mg--EDTA] + ENT
color azul
Interferencias
En la tabla se encuentran la lista de la mayor parte de las sustancias que interfieren.
Sí existen más de una sustancia interferentes, los límites dados en la tabla pueden
variar. La turbidez se elimina por filtración.
15
Interferencias Concentración
máx. sin interferir
Aluminio--------------------------20 ppm
Cadmio--------------------------- *
Cobalto-------------------------100 ppm
Cobre--------------------------- 50 ppm
Fierro(+3)-------------------- 50 ppm
Fierro (+2)--------------------- 50 ppm
Plomo-------------------------- *
Manganeso------------------- 1 ppm
Níquel------------------------- 100 ppm
Zinc---------------------------- *
Polifosfatos------------------ 10 ppm
* Si están presentes son titulados como dureza.

2 matraces volumétricos de 1000 mL
1 cápsula de porcelana
1 soporte con pinzas para bureta
2 matraces erlenmeyer de 125 mL
1 pipeta de 10 mL
2 frascos goteros de 100 mL
Preparación de la solución Buffer pH 10
Disolver 6.56 g de NH4Cl y 57 mL de NH4OH en agua destilada y aforar a 100 mL.
Solución De Eriocromo Negro T
Disolver 0.5 g de Eriocromo negro T y 4.5 g de clorhidrato de hidroxilamina en 100
mL de etanol.
Solución De EDTA (sal disódica)
Disolver 2 g de EDTA (sal disódica) mas 0.05 g de MgCl2.6H2O en agua destilada y
aforar a 1000 mL.
16
Solución de CaCl2 0.01 N Disolver 0.5 g de CaCO3 secado a 110 ° centígrados

durante 2 horas y disolverlo en 10 mL de HCl 3N y aforar a 1000 mL con agua
destilada.
Estandarización
La estandarización del EDTA (sal disódica) se hace de la siguiente manera: Colocar
5 mL de solución de CaCl2 en un matraz erlenmayer de 125 mL, se añaden 5 gotas
de solución buffer de pH 10 y 3 gotas de indicador de Eriocromo negro T, aparece un
color púrpura en presencia de iones de calcio y magnesio, y se procede a titular con
la solución de EDTA cuya normalidad se desea conocer, se termina hasta la
aparición de un color azul.
La Normalidad del EDTA se calcula así:
N X V
N2 = 1 1
V
2
Dónde:
N2 = Normalidad del EDTA
V1 = mL de solución de CaCl2
N1 = normalidad de la solución de CaCl2
V2 = mL gastados de EDTA
3.1.4 PROCEDIMIENTO
1. Colocar 5 mL de la muestra de agua en un matraz erlenmeyer de 125 mL
2. Agregar 5 gotas de buffer pH 10
3. Añadir 3 gotas de eriocromo negro T
4. Titular con EDTA (sal disódica) 0.01 N
5. Vire de púrpura a azul
17
3.1.5 CALCULOS Y RESULTADOS
meq/l Ca+2 y Mg+2 = V X N X 1000

mL de muestra
Dónde :
V = mL gastados de EDTA
N = Normalidad del EDTA
Cálculos para Magnesio:
meq/L Mg+2 = [meq/l (Ca+2 y Mg+2)] - (meq/l Ca+2)
Cálculos para Dureza Total: Expresada como ppm de CaCO3
mg/L de Dureza Total = [ meq/l (Ca+2 y Mg+2)]* (50) como
Cálculos para Dureza de Calcio: Expresada como ppm de CaCO3
mg/L Dureza de Calcio = (meq/l Ca+2)* (50)
Cálculos para Dureza de Magnesio: Expresada como ppm de CaCO 3
mg/L Dureza de Magnesio = (meq/l Mg+2)* (50)
NOTA: Este método tiene un error relativo de 1.9% y una desviación estándar
relativa de 9.2 %, tal como se determinaron en un estudio ínter laboratorios.
3.1.6 BIBLIOGRAFIA
American Society for testing and Materials. Annual book of Standards 1994
Determinación de dureza en agua. Método ASTM D 1126-92.
Standard methods for the examination of water and waste water publicado por la
APHA.
Determinación de Dureza en agua Método 2340 C, 1995.
18
PRÁCTICA No. 4 COMPROBACIÓN EXPERIMENTAL DE

LA LEY DE BEER CON ESPECTROFOTÓMETRO
4.0.1 OBJETIVO
El alumno aprenderá el manejo de un espectrofotómetro y obtendrá una gráfica de
calibración (respuesta vs. calibración) de un sistema coloreado para validar el
método de análisis.

La velocidad de desplazamiento de la energía de un haz de energía radiante, se
denota con el símbolo de Po para el rayo incidente y P para la cantidad de energía
que queda si absorber después de haber pasado la muestra o material absorbente.
La relación de poder de radiación transmitido por la muestra al poder de radiación
incidente en la misma es la transmitancia, T:
T = P/Po
El logaritmo (base 10) de la reciproca de la transmitancia en la absorbancia, A:
A = -log10 T=log10(1/T)
La ley fundamental que rige a la fotometría de la absorción se le llama ley de Beer,
aunque otros investigadores hayan contribuido a su desarrollo. Cuando un haz de
luz monocromática que se transmite en planos paralelos, penetra a un medio
absorbente ángulos rectos con las superficies planas y paralelas al medio, la
disminución de su poder de radiación con respecto al trayecto lumínico (espesor de
la cubeta de muestra) b, con la concentración del material absorbente c, (g/l) sigue
una proyección exponencial:
T = 10 -A = 10 -abc
donde a = absortividad de los componentes considerados en la solución.
Una gráfica de la absorbancia en función de la concentración, es una línea recta que
pasa por el origen, tal como se muestra en la figura. Esta relación es mucho más
conveniente que la que existe entre la transmitancia y concentración.
100
80
% 60 Absorbancia
Transmitancia 40
20
concentración (g/L) concentración (g/L)
19

1 tela de asbesto
Materiales
1 mechero Bunsen
1 gradilla
1 papel filtro Watman No. 1
12 tubos de ensayo 18x150 mm
5 tiras de papel indicador
4 pipetas graduadas de 1 mL
1 Espectrofotómetro
1 pipeta graduada de 5 mL
2 celdas de vidrio
1 vaso de precipitado de 250 mL
Reactivos:
0.0702 g sulfato ferroso amoniacal
1 probeta de 50 mL
0.2 mL ácido sulfúrico
1 matraz erlenmeyer de 250 mL
10 g clorhidrato de hidroxilamina ó de
ácido ascórbico
1 matraz volumétrico de 1000 mL
16.5 g acetato de sodio
1 embudo de vidrio
11.5 mL ácido acético glacial
1 agitador de vidrio
0.5 g orto-fenantrolina.
1 espátula
1 mL Hidróxido de amonio (1:10)
1 tripié
4.0.4 PROCEDIMIENTO
A partir de una solución madre de 0.01 mg de ión Fe++/mL, (10 ppm) se prepara para
la dilución con agua destilada una serie de soluciones tipos cuya concentración sea
0, 0.01, 0.02, 0.03, 0.04, 0.05, 0.06, 0.07, 0.08, 0.09, 0.10 mg de ión Fe ++/10 mL. Al
mismo tiempo se trabaja con la muestra problema la cual se prepara de la siguiente
manera: se pesa 0.1 g de la muestra de cal por analizar, se transfieren a un vaso de
precipitado de 150 mL y se le añade con 5 mL de HCl concentrado. Se calienta hasta
sequedad en una campana, se solubiliza el residuo con 40 mL de agua destilada y se
filtra en papel de poro mediano, realizar 3 lavados y agregarlos al filtrado; medir el
pH que debe ser entre 5 y 7 aproximadamente, si no se encuentra dentro de este
rango alcalinizar con hidróxido de amonio diluido (1-10), se afora a 100 mL, transferir
una alícuota de 10 mL a un tubo de ensaye.
La solución obtenida anteriormente y la serie de soluciones tipo se tratan con 0.2 mL
de solución amortiguadora (pH 3), 0.2 mL de solución reductora y 0.2 mL de
solución de fenantrolina 1-10 (ver preparación de reactivos). Se agitan los tubos
después de añadir los reactivos y se dejan reposar 10 minutos. Después se procede
a obtener las lecturas de las soluciones con el espectrofotómetro equipado con filtro
verde, previamente calibrado con la solución de 0 mg de Fe ++ (blanco de reactivos).
4.0.5 RESULTADOS
20
a) Anotar las lecturas en el cuadro y hacer las gráficas correspondientes a (b)

b) Graficar las lecturas obtenidas en absorbancia y % de transmitancia contra
concentración, interpolando la muestra problema.
A = 2 - log%T
%T = Antilog (2-A)
a) Cuadro de observaciones
Tubo Concentración Lectura %T

Observaciones
No. (ppm) Absorbancia transmitancia
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
EJERCICIOS
Calcular las ppm en cada tubo de ensayo

Graficar ppm vs. A
PREPARACIÓN DE REACTIVOS
Solución madre de sulfato ferroso amoniacal (Fe (NH4)2 . (6H2O). Pesar 0.0702 g de
sulfato ferroso amoniacal y colocarlos en un matraz volumétrico de 1000 mL.
Disolver en 500 mL de agua destilada, añadir 0.2 mL de ácido sulfúrico concentrado
y diluir a 1000 mL con agua destilada.
Concentración final 0.01 mg de Fe++/mL.
Solución reductora. Pesar 10 g de clorhidrato de hidroxilamina (o de ácido ascórbico)
y diluir a 100 mL con agua destilada.
Solución Buffer pH 3 . Mezclar 16.5 g de acetato de sodio con 11.5 mL de ácido
acético glacial y diluir a 100 mL.
Solución de 1-10 fenantrolina al 0.5 %. Pesar 0.5 g de orto-fenantrolina y diluir a 100
mL con agua destilada. Calentar para disolver.
21
REPORTE
PRÁCTICA No. 4
COMPROBACIÓN EXPERIMENTAL DE LA LEY
DE LAMBERT-BEER.
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Cálculos y Resultados:
22
PRÁCTICA No. 5 DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE

LONGITUD DE ONDA MÁXIMA
5.0.1 OBJETIVO
El alumno determinará y seleccionará la longitud de onda de máxima absorción y la
absorción a la máxima longitud de onda, para seleccionar las condiciones de trabajo.

Los sistemas de orbitales moleculares, presentan absorciones por medio de los
electrones sigma, pi, neutros (antienlaces) y éstos al absorber la radiación
ultravioleta (200-400 nm); entran a un proceso de transición electrónica, es decir,
pasan en un estado basal a uno excitado de mayor energía. Los sistemas de
orbitales que están conjugados muestran una absorción a mayor longitud de onda,
ejemplo:
O
CH3 CH CH C
H
La olefina está conjugada con el grupo carbonilo, por lo que los electrones, para
lograr un estado excitado requieren menor energía (longitud de onda de radiación)
que los sistemas de electrones sigma o pi aislados.

Materiales: Reactivos:
4 matraces volumétricos de 25 mal 100 mL de cloroformo
1 pipeta de mhor de 10 m 30 mg de cafeína
l perilla 30 mg de acetaminofén (fenacetina)
2 cubetas de cuarzo (cuadradas) 30 mg de ácido acetilsalicílico
Equipo: 1 mL de ácido acético
1 espectrofotómetro UV
5.0.4 PROCEDIMIENTO
23
Se pesa entre 20 y 30 mg de cada sustancia (cafeína, fenacetina y ácido

acetilsalicílico), aforar a 25 mL con cloroformo, grado UV. Disponer de 3 matraces
volumétricos de 25 mL para verter alícuotas de solución madre: 0.5 mL, 1 mL, 1.5
mL, y 2.5mL; después, aforar a 25 mL con el solvente. Con la solución más diluida,
determinar a que longitud de onda máxima presenta cada sustancia absorción,
(graficar longitud de onda versus absorbancia, leer entre el rango 245 nm a 290 nm.
Con intervalos de 5 nm) y una vez determinada, proceder a hacer las mediciones de
sus muestras a la longitud de onda seleccionada y tomar los datos de absorbancia
para diseñar la gráfica A vs. C.
La curva obtenida, será empleada en la práctica siguiente, por lo que es necesario
que cada equipo obtenga una de ellas y se las intercambien.
24
REPORTE
PRÁCTICA No. 5
DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE LONGITUD
DE ONDA MÁXIMA
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Dilución 0.5 1 mL 1.5 mL 2.5 mL
mL
Aspirina  máx
Cafeína  máx
Ac. Acetilsalicílico
 máx
cafeína paracetamol Ac. acetilsalicílico

245
250
277
335
Conclusiones:
25
PRÁCTICA No. 6 DETERMINACIÓN DE UN METAL POR

ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA
6.0.1 OBJETIVO
Emplear el equipo de absorción atómica para la determinación de Zn o Cu.

En el método de absorción atómica, la mezcla por determinar se atomiza y se
mezcla con los gases de la llama, comúnmente tiene la forma de una cola de
pescado, lográndose una trayectoria luminosa larga. En la llama, se evapora el
solvente y la muestra se disocia en átomos. Se pasa a través de la llama la radiación
de resonancia del elemento a determinar, midiéndose la cantidad de luz absorbida
con dispositivos convenientes.

Materiales
Matraz volumétrico de 1000 mL
Matraces volumétricos de 100 mL
1 Piceta 500 mal
1 Equipo instrumental de absorción atómica
1 Vaso de precipitados de 150 mL
Reactivos
0.1 g de zinc en polvo
10 mL de ácido clorhídrico
Opcional: 0.1 g de cobre en polvo y 10 mL de ácido nítrico
6.0.4 PROCEDIMIENTO
Se prepara una solución patrón que contenga 100 ppm de iones Zn ++. Se prepara un
litro de ésta solución, usando Zn en polvo y HCl Q.P. en una cantidad mínima para
disolver el Zn.
Se preparan a partir de esta solución patrón, unas soluciones estándar conteniendo
las siguientes concentraciones (usando matraces volumétricos de 100 mL): 0.25,
0.5, 1.0 y 1.5 ppm (usar HCl 0.1 N para el aforo). Usando el aparato de absorción
atómica se obtiene la lectura para el HCl 0.1 N y, de ser posible, calibrar a cero el
instrumento con el mismo.
26
Se obtiene la lectura de cada solución y se limpia la flama del quemador después de

cada solución. (El instructor indicará el manejo adecuado del instrumento y las
condiciones analíticas.) Se realiza la medición de la solución problema que
proporcionará el instructor.
Hay que hacer una gráfica de la curva de calibración a partir de los datos de la
soluciones estándar. Con esta curva se determina la concentración de la muestra
desconocida.
ENTREGAR: El tabular experimental ( absorción vs. concentración), la curva de
calibración y la concentración de Zn en la muestra desconocida. ¿ cuales son las
condiciones analíticas adecuadas para el Zn ( longitud de onda, concentración
óptima, corriente de la lámpara, etc.)?.
SUGERENCIAS
1. En lugar de Zn, si se desea, se recomienda usar Cu. Seguir el mismo
procedimiento.
Usar cobre en polvo y HNO3 (1:1) en la mínima cantidad para la solución patrón, usar
HNO3 al 1% en lugar de agua destilada para las diluciones y calibración del
instrumento. ¿Cuáles son las condiciones analíticas adecuadas para el cobre?.
2. Determinar el Zn (ó el cobre) contenido en el agua de la llave, agua mineral, vinos,
tequilas, etc.
27
PRÁCTICA No. 7.0 DETERMINACIÓN DE ALCOHOL

ETÍLICO POR REFRACTOMETRIA
7.0.1 OBJETIVO
Construir la gráfica del índice de refracción vs. concentración para el sistema de
alcohol-agua, y cuantificar el alcohol presente en un licor.

Para realizar análisis seguros de mezclas, es necesario que el sistema a cuantificar
presente una curva de composición- índice de refracción casi lineal para los
componentes de interés. Generalmente esta condición se cumple para rangos
pequeños de concentración y para componentes químicamente similares. Sin
embargo, algunos sistemas presentan máximos o mínimos, por ejemplo, el de
etanol- agua tiene un índice de refracción máximo de 1.3633 a 25C a un volumen
de alcohol de 79.3 % aprox. Los componente puros tienen valores de 1.3594 y
1.3325 respectivamente. En este caso un análisis de exactitud de 99% puede
realizarse entre 0-40% de etanol.

1 gradilla 100 mL de alcohol etílico
13 tubos de ensaye con tapón
2 pipetas Pasteur con bulbo
2 vasos de precipitados de 250 mL
1 refractómetro de Abbé
7.0.4 PROCEDIMIENTO
A partir de etanol puro y agua destilada se preparan una serie de soluciones con las
concentraciones siguientes: 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 y 100% en volumen.
Se preparan 10 mL de cada tipo y se colocan en tubos de ensaye con tapón
manteniéndolos bien cerrados. Determinar el índice de refracción de cada solución
tipo y de una muestra problema de preferencia licores sin color: tequila, vodka,
ginebra etc. Nota: para que el método sea aplicable a todos los licores debe
realizarse una destilación de la muestra.
28

Tubo
% de etanol índice de refracción, nD
No.
b) Graficar los valores observados de índice de refracción vs % etanol, interpolar los

valores de las muestras para determinar la concentración alcohólica de licor (hoja
siguiente).
c) Indicar la concentración de alcohol en las muestras.
29
REPORTE
PRÁCTICA No. 7.0
DETERMINACIÓN DE ALCOHOL ETILICO
POR REFRACTOMETRÍA.
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Conclusiones:
30
PRÁCTICA No. 7.1 ESTUDIO DE LA INVERSIÓN DE LA

SACAROSA POR POLARIMETRÍA
7.1.1 OBJETIVO
El alumno aplicará el método polarimétrico para realizar un estudio de la inversión de
catalítica de la sacarosa.

Se denomina azúcar invertida a una mezcla equimolar de glucosa y fructosa. Cuando
se calienta la sacarosa con ácido o con enzima invertasa, la sacarosa se “invierte”
para formar una molécula de glucosa y una fructosa.
CATALIZADOR
C12H22O11 +H2O C6H12O6 +C6H12O6
ácido o enzima
La sacarosa tiene una rotación especifica de + 66.5, la glucosa de +52.5 y la fructosa
de -93. Por lo tanto, la rotación especifica varía de +66.5 a -20.2 en la inversión.
Midiendo el cambio en la rotación después de la inversión, es posible determinar la
sacarosa en presencia de otras sustancias ópticamente activas.

1 matraz volumétrico de 100 mL 40 g de sacarosa
1 vaso de precipitado de 50 mL 10 mL de ácido clorhídrico
1 espátula
1 mechero fisher
1 tripié
1 baño María
1 termómetro
1 polarímetro
2 celdas
7.1.4 PROCEDIMIENTO
31
Pesar 40 g de sacarosa, disolver en agua destilada y aforar a 100 mL. Calentar la

solución a 40C y agregar 10 mL de HCl concentrado, mezclar rápidamente y tomar
la lectura en el polarímetro, anotando el tiempo. Se toma una segunda lectura de la
rotación angular a los 10, 20 y 30 minutos de calentamiento, asegurándose de que la
temperatura permanezca constante y de que el tiempo se tome con cronómetro .

a) Cuadro de Observaciones.
Tiempo Rotación Angular Rotación Especifica
0 minutos
10 minutos
20 minutos
30 minutos
Ecuación para calcular el por ciento de Sacarosa (opcional)

P = 100 X (a – b) /144 – (t/2) X N/W
P = Porciento de sacarosa en la muestra
a = ángulo de rotación en grados Ventzke antes de la hidrólisis 1ºV =0.3466°
b = rotación de la solución después de la hidrólisis en ºV
w =gramos de la muestra de la muestra /100 mL
N =Un peso normal de azúcar 26.026 g/100 mL
144: factor de Clerget
t: temperatura de la solución en ºC.
32
REPORTE
PRÁCTICA No. 7.1
ESTUDIOS DE LA INVERSIÓN DE LA SACAROSA
POR POLARIMETRIA.
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Conclusiones:
33
PRÁCTICA No. 8.0 DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA

DEL pH
8.0.1 OBJETIVO
El alumno aprenderá el manejo del potenciómetro, conocerá los electrodos de trabajo
y determinará el pH de una muestra determinada.

El campo de la química electroanalítica abarca una gran variedad de técnicas
basadas en los diversos fenómenos que tienen lugar dentro de una celda
electroquímica.
Existen dos tipos de celdas electroquímicas, la galvánica (o voltaica) y la electrolítica.
En la primera se efectúan una convención espontánea de energía química y energía
eléctrica, en la segunda es necesario el abastecimiento de energía eléctrica por
medio de una fuente externa.
La potenciometría puede definirse como la medición de la fuerza electromotriz de
una carga galvánica. En química analítica al instalar una celda galvánica
generalmente interesa el potencial de uno de los electrodos. Este potencial estará
relacionado con una propiedad de la solución que desee medir y el electrodo se
designa como electrodo indicador.
Evidentemente el potencial del otro electrodo deberá ser constante y no deberá
depender de las propiedades de la solución que se prueba y se designa como
electrodo de referencia. La manera mas conveniente de hacer lo anterior es aislando
el electrodo de referencia de una solución de prueba mediante un puente salino. Se
determina su potencial únicamente por la solución con la que se encuentra en
contacto, por lo tanto el valor será constante.
Cualquier variación de potencial en el electrodo indicador se refleja por tanto en una
variación igual a la diferencia de potencial entre los dos electrodos (voltaje de celda).
Un electrodo de referencia que se emplea comúnmente es el electrodo saturado de
calomel, y el electrodo de vidrio es sin duda, el electrodo indicador más importante
para el ión hidrógeno.

1 Agitador de vidrio 10 mL solución pH 7
9 vasos de precipitados de 150 mL 10 mL de solución buffer pH 4
1 piceta 1 mL ácido clorhídrico (1%)
34
1 termómetro 1 mL hidróxido de amonio (1%)

1 Potenciómetro
8.0.4 PROCEDIMIENTO
La determinación de pH es la medición de la diferencia de la fuerza electromotriz
(Fem) registrada en una celda de pH, contenida primero un regulador de referencia
(solución buffer) y después de una solución problema. Por lo que una vez visto el
aparato de medición se proceda a calibrarlo sumergiendo los electrodos en la
solución buffer usualmente de pH 7 o pH. Se toma la temperatura de el buffer y se
ajusta a ese valor en el control de temperatura. En el medidor se lee el valor del pH
del buffer en caso de existir diferencia se calibra con el control hasta obtener el valor
del pH especificados se limpia los electrodos con agua destilada, se secan y se
sumergen en la muestra desconocida para obtener el valor del pH.
MUESTRA TEMPERATURA pH pH de la solución buffer TEMPERATURA
35
REPORTE
PRÁCTICA No. 8.0
DETERMINACIÓN POTENCIOMETRICA
DEL PH.
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Conclusiones:
36
PRÁCTICA No. 8.1 OPERACIÓN CALIBRACIÓN Y

DETERMINACIÓN DE CONDUCTIVIDAD ELECTRICA EN
SISTEMAS ACUOSOS
8.1.1 OBJETIVO
Conocer el manejo del conductímetro. Determinar la proporcionalidad entre la
concentración y la conductancia de un sistema electrolítico determinado para aplicar
en el análisis de una muestra de agua.

La conductividad electrolítica es una medida de la capacidad de una solución para
transportar una corriente eléctrica. Las soluciones de electrolitos conducen la
corriente eléctrica por desplazamiento de iones bajo influencia de un campo eléctrico.
Al igual que los conductores metálicos. los electrolitos obedecen a la ley de Ohm. Por
lo tanto, para una fuerza electromotriz E aplicada, mantenida constante por un valor
que excede al voltaje de la descomposición del electrolito. La corriente y fluyendo
entre los electrodos sumergidos en electrolitos, variará inversamente con la
resistencia R de la solución electrolítica. La recíproca de la resistencia 1/R, se le
llama conductancia, y se expresa en ohms recíprocos o mhos. La aplicación de
mediciones de conductancia directas análisis es limitada a causa de la naturaleza no
selectiva de esta propiedad. Los principales usos de las mediciones directas de han
reducido al análisis de mezclas binarias agua-electrolito y a la determinación de
concentración total de electrolitos. Esta ultima medición es particularmente útil como
un criterio de pureza para agua destilada.
12 matraces volumétricos de 100 mL 250 g cloruro de potasio
1 espátula
1 probeta de 25 mL
2 vasos de precipitado de 150 mL
1 pipeta
1 conductímetro
37
8.1.4 PROCEDIMIENTO
A partir de una solución madre de KCl de 250 mg/mL se preparan 100 mL de cada
una de las soluciones tipo como sigue : 0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50,
mg/mL. Se toman las lecturas de conductancia de cada una de las soluciones
anteriores y de la muestra problema. Anotar los valores obtenidos en el cuadro de
observaciones y graficar.

Matraz Concentración (mg/mL) Conductancia
b) Graficar los valores observados de conductancia vs. concentración de KCl e

interpolar el valor de la muestra problema para determinar el contenido de sales.
c) Indicar el contenido de sales de la muestra problema.
Preparación de reactivos
Solución madre de cloruro de potasio. Pesar 250 g de KCl disolver en agua destilada
y aforar a 1000 mL.
38
REPORTE
PRÁCTICA No. 8.1
OPERACIÓN, CALIBRACIÓN Y DETERMINACIÓN DE
CONDUCTIVIDAD ELECTRICA EN SISTEMAS ACUOSOS.
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Conclusiones:
39
PRÁCTICA No. 9.0 SEPARACION E IDENTIFICACION DE

COLORANTES ARTIFICIALES EN ALIMENTOS, POR
CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA
9.0.1 OBJETIVO
Conocer la técnica de separación en capa delgada y aplicarla para separar los
colorantes artificiales presentes en varias gelatinas comerciales.

Existen 18 colorantes sintéticos aprobados para emplearse en alimentos, de los
cuales sólo 7 son los más usados.
Colorante Número
Amarillo tartrazina 5
Amarillo sunset 6
Rojo ponceau 6
Rojo amaranto 2
Rojo carmoicina 5
Rojo eritrocina 3
Azul brillante 1
Este grupo de colorantes sintéticos se emplean más que los naturales y se les
conoce como “colorantes certificados”; todos ellos se derivan del alquitrán de hulla y
pertenecen a los colorantes azoicos, nitrados, tiazinas, antraquinonas, pirazolonas,
etc.
Para la identificación de colorantes se dispone de técnicas muy complicadas. Por
esta razón la cromatografía en capa fina o en papel resulta un método ideal para el
estudio de este grupo de compuestos.
9.0.3 MATERIALES Y REACTIVO

Reactivos
Sílicagel G 60
Metanol
Serie patrón de colorantes(15 mg/10 mL)
Solución de desarrollo. Fenol - agua (70-30), verter dentro de la cubeta de desarrollo
la cantidad necesaria para obtenerse una altura de .5 a 1.0 cm.
40
9.0.4 PROCEDIMIENTO
Se limpia una placa de vidrio de 20 cm por lado de 6-8 mm de espesor, se lava con
agua y se enjuaga con acetona. Se pesan 8* g de sílicagel G y se mezclan con 16
mL de agua destilada. Se agita durante un minuto y se vierte la mezcla anterior sobre
la placa de vidrio (previamente lavada y con dos tiras de “masking tape” sobre dos de
sus extremos). Con una pipeta, tubo o varilla de vidrio, se extiende la mezcla de
sílicagel lo más uniformemente posible. El espesor de la capa será ligeramente
menor que el espesor de la tira de masking tape. (Si se desean espesores mayores,
se superponen varias tiras de masking o se colocan trozos de manguera de hule en
los extremos de la varilla de vidrio, para que se alce lo suficiente y extienda
adecuadamente la pasta.) La placa se deja secar al aire aproximadamente 30
minutos y enseguida se “activa” en una estufa de 105oC durante otra media hora.
Se pesan 5.0 g de la gelatina comercial a examinar y se extracta 3 veces con
porciones de 5, 4 y 3 mL de metanol, respectivamente. Se separa por decantación en
cada extracción y al final se centrifugan los extractos reunidos. (el volumen final será
de aproximadamente 10 mL).
Se concentra la solución anterior por evaporación a baño maría, hasta obtener
aproximadamente 1 mL. Después, se enfría y tapa la muestra para su posterior
aplicación sobre la placa cubierta con sílicagel.
Se prepara una serie estándar de colorantes sintéticos (se pueden conseguir en las
compañías distribuidoras de aditivos para alimentos), por medio de una
concentración de 15 mg/10 mL de metanol. Entonces se divide la placa cubierta de
sílicagel G (preparada previamente) en 8 columnas (con la ayuda de la punta de un
lápiz) y en cada una de ellas se distribuye (sobre la zona de aplicación, parte inferior
de la placa) una porción de cada colorante, mediante un capilar, procurando que
cada mancha no forme un círculo de mas de 5 mm de diámetro. Además se aconseja
que la muestra problema se aplique en la columna central.
Se deja evaporar el solvente de la muestra sobre la placa y se procede a efectuar el
corrimiento, colocando la placa dentro de una cámara de desarrollo previamente
saturada con la solución de fenol-agua. La placa se conserva dentro, hasta que el
líquido llegue a la línea límite de corrimiento (marcada con lápiz desde el principio).
Entonces se retira la placa de la cámara y se deja que escurra el líquido (¡cuidado!
es muy corrosivo a la piel). Una vez seca la placa, se observa el número de
colorantes que presenta la muestra problema, y se mide la distancia recorrida por el
líquido de desarrollo ( 10 cm, aproximadamente) y la recorrida por cada mancha
coloreada ( se toma como referencia el lugar de aplicación de cada mancha). Hay
que calcular el Rf correspondiente a cada mancha.
41

ENTREGAR : Un dibujo que muestre los resultados obtenidos, el número y tipo de
cada colorante presente en la gelatina y el Rf de cada colorante estándar y de los
colorantes que contenga la muestra problema.
INVESTIGAR:
1. La fórmula química y los usos comunes de los siguientes colorantes sintéticos:
 Rojo amaranto, No. 2
 Azul brillante, No.1
 Amarillo tartrazina, No. 5
 Amarillo sunset, No. 6
42
PRÁCTICA No. 9.1 SEPARACION DE PIGMENTOS

VEGETALES POR CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
9.1.1 OBJETIVO
Aprender la técnica de cromatografía en columna y separar los pigmentos contenidos
en un vegetal.

La cromatografía (del griego Kromatos = color, graphos = escritura) fue introducida
por el botánico ruso Tsweet en 1906, quien la aplicó en la separación de los
pigmentos contenidos en las plantas (experimento similar al de está práctica).
A pesar de su antigüedad, la cromatografía se ha desarrollado con mayor auge en
las últimas cuatro décadas. A partir de entonces, se ha ideado una gran variedad
de técnicas, desde los procedimientos más sencillos hasta procesos instrumentales
sumamente sofisticados y costosos.

Materiales:
1 Columna cromatográfica
1 Embudo de separación
2 Vasos de precipitado de 125 mL
1 probeta de 100 mL
1 matraz erlenmeyer 100 mL
1 bomba de vacío
2 tapones horadados
1 pinza MHOR
1 tubo de hule
1 varilla de vidrio de 60 cm
Reactivos:
100 mL de metanol
110 mL éter de petróleo
20 g NaCl
10 g alúmina
5 g CaCO3
30 g sacarosa
0.5 mL n- propanol
10 mL de acetona
43
9.1.4 PROCEDIMIENTO
Se pesan de 8 a 10 gramos de vegetal fresco por examinar (de preferencia alfalfa,
espinaca, acelga, brócoli, etc.) . Se corta el vegetal en pequeños trozos y se agrega
100 mL de metanol. Se deja reposar durante una noche, se decanta el extracto de
metanol (que contiene los pigmentos vegetales) y se transfiere a un embudo de
separación de 250 mL. Se agregan 50 mL de éter de petróleo (60-90 ºC) y, en
seguida, sin agitar y resbalando por las paredes* se adicionan al embudo 50 mL de
agua saturada con NaCl . La capa inferior contiene una mezcla agua - metanol (con
un poco de la clorofila que no paso al éter de petróleo) y la capa superior contiene
éter y extracto. Se elimina la capa inferior y se repite la adición de salmuera (50 mL)
2 ó 3 veces más. Si la capa superior se muestra turbia, hay que reposar la mezcla
algunos minutos más, hasta que los glóbulos de sedimenten.
Se colocan 20 mL del extracto purificado en una columna cromatográfica (2-2.5 cm
de diámetro por 30 - 40 cm de largo) preparada en forma previa con alúmina (5 cm
aproximadamente de altura, CaCO3 (5 cm) y 15 cm de azúcar. Se comprime el
contenido de la columna se une a un sistema de filtración de vacío
*Nota : Esto se hace con el fin de evitar emulsiones.
Se aplica el vacío y se permite que el extracto sea adsorbido en la columna. Se eluye
el extracto con una solución al 0.5% de n-propanol en éter de petróleo y se observa
la coloración y el número de bandas que se forman en cada material.

ENTREGAR: Un diagrama que muestre las coloraciones y el número de bandas
observadas. Además: ¿Qué tipos de compuestos fueron adsorbidos en cada
material? (Nota: resulta útil ayudarse de las coloraciones y polaridades)
INDICACION: Los pigmentos en las plantas se clasifican generalmente en:
Carotenos, Xantofilas y Clorofilas.
INVESTIGAR:
1. ¿Con qué fin se agregó la salmuera?

2. La estabilidad de los pigmentos vegetales a la luz y al calor. Explicar.
44
TRABAJO FINAL: DETERMINACION DE

MICRONUTRIENTES EN SUELOS, VEGETALES Y AGUAS
POR ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA
OBJETIVO
Determinar zinc, cobre, manganeso y fierro por absorción atómica; en suelos, tejido
vegetal y aguas, y aprender el manejo del instrumento.
INFORMACION GENERAL
En el método de absorción atómica, la mezcla por determinar se atomiza y se
mezcla con los gases de la llama; comúnmente tiene la forma de una cola de
pescado, lográndose una trayectoria luminosa larga. En la llama, se evapora el
solvente y la muestra se disocia en átomos. Se pasa a través de la llama la radiación
de resonancia del elemento a determinar, midiéndose la cantidad de luz absorbida
con dispositivos convenientes.
Los micronutrientes en los suelos son muy importantes debido a que su función es el
de catalizar ciertas funciones biológicas en las plantas, su deficiencia en ellas, causa
efectos negativos en el desarrollo del vegetal y frutos, de ahí su importancia de hacer
las determinaciones de estos micronutrientes tanto en el suelo, tejido vegetal y en el
agua, para poder determinar si estos se encuentran en los niveles adecuados, en
caso contrario, añadir aquellos elementos para suplir su deficiencia.
MATERIALES Y REACTIVOS
10 litros de agua desionizada
Elementos para soluciones estándar.(se disuelven en HCl mínima cantidad y se aforan a un litro) Para
todo el grupo
g de zinc en polvo
g de cobre granular o electrolítico
g de fierro en polvo o limaduras
0.1 g de manganeso en polvo o granular
1.249 g Carbonato de calcio
0.1 g de magnesio metálico en polvo o en cinta
200 mL de ácido clorhídrico
Para todo el grupo
14.659 g de trióxido de lantano (disolver en 62.5 mL HCl y aforar a 250 mL)
77.08 g de Acetato de amonio (sol. 1N, ajustar el pH con ácido acético o hidróxido de amonio
5 g de cloruro de potasio
Solución extractora, para suelos (para un litro, en agua desionizada). Para todo el
grupo
45
1.967 g de ácido dietilentriaminopentacético

1.47 g cloruro de calcio dihidratado
14.92 mL de trietanolamina
(ajustar el pH a 7.30 con HCl 6N, antes del aforo a un litro). Guardar en frasco de plástico
Material común para el grupo
matraz volumétrico de 100 mL
1 matraz volumétrico de 250 mL
10 matraces volumétricos de 1000 mL (para todo el grupo)
Material por equipo
6 frascos de extracción de polietileno. Capacidad: 60 mL y tapón con rosca
3 Pipetas de Mhor de 1 mL
1 pipeta de 5 mL
PROCEDIMIENTO
Se preparan soluciones patrón que contengan 1000 ppm de zinc, fierro, manganeso,
cobre, calcio y magnesio. Se prepara un litro de cada solución, usando HCl Q. P.
en una cantidad mínima para disolver cada elemento.
Se preparan a partir de estas soluciones patrón, unas soluciones estándar
conteniendo las siguientes concentraciones (usando matraces volumétricos de 100
mL): 0.25, 0.5, 1.0 y 1.5ppm (usar HCl 0.1 N para el aforo). Usando el aparato de
absorción atómica se obtiene la lectura para el HCl 0.1 N y, de ser posible,
calibrar a cero el instrumento con el mismo. Para las concentraciones de las
soluciones estándar, consultar las recomendaciones del instrumento que se usará.
Hay que hacer una gráfica de cada una de las curvas de calibración a partir de los
datos de la soluciones estándar. Con esta curva se determinan las concentraciones
de cada micronutriente y macronutriente en suelos, plantas y agua.
Se obtiene la lectura de cada solución y se limpia la flama del quemador después de
cada solución. (El instructor indicará el manejo adecuado del instrumento y las
condiciones analíticas.) Se realiza la medición de la solución problema que
previamente el maestro les explicó lo de la extracción de los microelementos del
suelo con las soluciones extractoras y el tiempo de agitación vertical por espacio de 2
horas, filtrar el extracto y hacer las operaciones de preparación de la muestra para
ser medida la concentración en el espectrofotómetro de absorción atómica, y como
hacer para mineralizar el tejido vegetal en la mufla a 500 °C por 4 horas, según
instrucciones del Profesor.
ENTREGAR: Las curvas de calibración y las concentraciones de cada uno de los
micronutrientes en sus muestras. Además, describir cuáles son las condiciones
analíticas adecuadas para cada uno de los elementos que se analizaron? ( longitud
de onda, concentración óptima, corriente de la lámpara, etc.)?.
46
Sugerencias: 1. Usar cobre en polvo y HNO3 (1:1) en la mínima cantidad para la

solución patrón, usar HNO3 al 1% en lugar de agua destilada para las diluciones y
calibración del instrumento. ¿Cuáles son las condiciones analíticas adecuadas para
el cobre?.
Determinar el contenido de estos microelemento en el agua de la llave, agua mineral,
vinos, tequilas, etc.
BIBLIOGRAFÍA
Skoog. Douglas (1984). Análisis Instrumental. Editorial Interamericana. México D.F.
Strobel H.A. (1982). Instrumentación Química. Editorial Limusa. México, D.F.
Willard Merrit D. (1982). Métodos Instrumentales de Análisis. Editorial Continental.
México D.F.
47
TRABAJO FINAL: DETERMINACIÓN POR

ESPECTROFOTOMETRIA UV DE ASPIRINA, FENACETINA Y
CAFEINA EN TABLETAS APC Y CONOCER DE SU
COMPOSICIÓN PORCENTUAL
OBJETIVO
El alumno será capaz de determinar por espectrofometría UV, aspirina, fenacetina y
cafeína a fin de conocer la composición porcentual en tabletas APC.
INFORMACIÓN GENERAL
Las tabletas APC son una mezcla de aspirina, fenacetina y cafeína. Cada una de
estas sustancias tiene una absorción característica en la región UV, con los máximos
principales a 277 nm para la aspirina, 275 nm para la cafeína y 250 nm para la
fenacetina.
MATERIALES Y REACTIVOS
1 mortero con pistilo 180 mL de cloroformo
2 vasos de precipitado de 50 mL 1 g bicarbonato de sodio (diluir con 25 mL
1 pipeta volumétrica de 25 mL de agua). Conc.: 4%
1 embudo de separación de 60 mL 25 mg ácido acetilsalicílico
1 varilla para pH 25 mg cafeína
3 matraces volumétricos de 25 mL 25 mL fenacetina
1 espátula de acero inoxidable 1 mL ácido clorhídrico conc.
2 papel filtro 3 mL ácido sulfúrico 1 M
1 embudo de 12.5 cm
PROCEDIMIENTO
Pesar con exactitud y anotar el peso de una tableta, Esto debe ser equivalente a
aproximadamente 220 mg de aspirina, 160 mg de fenacetina y 30 mg de cafeína.
Para reducir las diluciones necesarias y ahorrar disolventes, cortar la tableta en
cuatro partes y pesar una de ellas para analizarla. Moler en un mortero hasta obtener
un polvo fino. Añadir con agitación 10 mL de cloroformo; después transferir la mezcla
cuantitativamente a un embudo de separación de 60 mL, lavando todas las partículas
con otro poco de cloroformo. Extraer la aspirina de la solución de cloroformo con dos
porciones de 10 mL de bicarbonato de sodio al 4 % muy frío, al cual se habrán
añadido dos gotas de ácido clorhídrico, y después 5 mL de agua, lavar la fase
acuosa combinados con tres porciones de 5 mL de cloroformo y reunir o juntar los
extractos orgánicos de cloroformo. Dejar el extracto acuoso en el embudo de
48
separación. Filtrar la solución de cloroformo a través de papel humedecido

previamente con cloroformo (para eliminar trazas de agua) a un matraz volumétrico
de 25 mL y aforar con cloroformo. Diluir una alícuota de esta solución a 25 mL con
cloroformo en un matraz volumétrico (en caso de ser necesario, es decir, si la
solución anterior está muy concentrada).
Acidificar la solución de bicarbonato (extracto acuoso) que se encuentra en el
embudo de separación, con 3 mL de ácido sulfúrico 1 M. Este paso debe llevarse a
cabo de inmediato para evitar hidrólisis de la aspirina . El ácido debe añadirse
lentamente en pequeñas porciones. Mezclar bien cuando haya cesado casi por
completo el desprendimiento de bióxido de carbono. En este punto, el pH debe ser
de 1 a 2 (con papel pH). Extraer la solución acidificada en dos porciones de 2 mL de
cloroformo, y filtrar a través de un papel humedecido con cloroformo, recibiendo el
filtrado en un matraz volumétrico de 25 mL . Aforar y diluir una porción de 5 mL de
esta solución a 25 mL con cloroformo en un matraz volumétrico (en caso de ser
necesario, si la solución anterior esté muy concentrada).
Con las curvas registradas en la práctica anterior (Absorbancia versus longitud de
onda de las soluciones estándar de 200 a 300 nm.). ¿ Considera que la longitud de
277 nm es la más apropiada para la aspirina? ¿Considera que la longitud de onda de
250 y 275 nm son las más indicadas para medir la absorbancia de la mezcla de
fenacetina y cafeína? Explicar por qué.
Empleando las absorbancias de la solución estándar y el problema de aspirina a 277
nm,
calcular el porcentaje de aspirina en las tabletas de APC y el número de mg de
aspirina por tableta, teniendo en cuenta las diluciones.
Para calcular las concentraciones de fenacetina y cafeína, es necesario leer la
absorbancia de los estándares de fenacetina y cafeína y el extracto de cloroformo de
la muestra a 250 nm.
Empleando estas absorbancias, calcular el porcentaje de fenacetina y cafeína en las
tabletas APC y los mg de cada sustancia en la tableta.
49
REPORTE
TRABAJO FINAL
DETERMINACIÓN POR ESPECTROFOMETR ÍA UV
DE ASPIRINA, FENACETINA Y CAFEÍNA EN TABLETAS
APC Y CONOCER DE SU COMPOSICIÓN PORCENTUAL
Nombre Fecha
Muestra:
Descripción breve:
Conclusiones:
50

Manual Laboratorio Metodos Instrumentales Analisis 2007 ITSON

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Manual Laboratorio Metodos Instrumentales Analisis 2007 ITSON

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

DIRECCION DE RECURSOS NATURALES

DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS

M. en C. ROBERTO GARCIA RODRÍGUEZ

CD. OBREGÓN, SONORA. AGOSTO DEL 2007

PRÁCTICA No. 8.0 DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DEL pH ............... ¡Error!

OPCIONES DE TRABAJO FINAL

TRABAJO FINAL: DETERMINACION DE MICRONUTRIENTES EN SUELOS,

PRÁCTICA No. 1.0 NORMATIVIDAD EN LABORATORIOS

1.0.2 INFORMACIÓN GENERAL. Norma NMX-17025 Sección 5ta

d). Calidad del Aire

1.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS

Botiquín de primeros auxilios

Equipo contra incendios

PREGUNTAS Positivo Negativo Observaciones

PRÁCTICA No. 2.0 DETERMINACIÓN DE LA ACIDEZ DE UN

2.0.2 INFORMACION GENERAL

2.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS

7. Añade disolución de hidróxido de sodio de la bureta, agitando a la vez el

2.0.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS

3. A partir del volumen de hidróxido de sodio consumido, determina los gramos de

PRÁCTICA No. 2.1 DETERMINACIÓN DE ACIDEZ Y

2.1.2 MATERIALES Y REACTIVOS

 Recolectar por lo menos 500 mL de muestra en frascos de vidrio, polietileno o

pérdidas o ganancias de CO2 u otros gases cuando se exponen al aire. Evitar

Con azul de bromofenol

 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL)

 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL), ponerla en

 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL) ponerla en un

 Seleccionar una cantidad de muestra adecuada (de 20 a 50 mL), ponerla en

de verde de bromocresol a una muestra tomada en el momento o en la

2.1.4 CÁLCULOS Y RESULTADOS

Acidez y Alcalinidad expresada como CaCO3 en ppm o mg por litro

PRÁCTICA No. 3.0 DETERMINACIÓN DE CLORUROS EN

3.0.2 INFORMACIÓN GENERAL

3.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS

5 g de cromato de potasio (sol. Al 5%)

 Recolectar por lo menos 500 mL de muestra en frascos de vidrio, polietileno o

 Utilizar un volumen de muestra de 100 mL. Ajustar el pH entre 7 y 10

 A 100 mL de muestra acondicionada, adicionar 1 mL de disolución indicadora

Disolución indicadora de cromato de potasio.

Disolución estándar (patrón) de nitrato de plata (0,014N).

3.0.5 CÁLCULOS Y RESULTADOS

PRÁCTICA No. 3.1 ANÁLISIS DE DUREZA TOTAL EN

3.1.2 INFORMACION GENERAL

Dureza como CaCO3 Interpretación

3.1.3 MATERIALES Y REACTIVOS

Solución de CaCl2 0.01 N Disolver 0.5 g de CaCO3 secado a 110 ° centígrados

3.1.5 CALCULOS Y RESULTADOS

meq/l Ca+2 y Mg+2 = V X N X 1000

PRÁCTICA No. 4 COMPROBACIÓN EXPERIMENTAL DE

4.0.2 INFORMACIÓN GENERAL

4.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS

a) Anotar las lecturas en el cuadro y hacer las gráficas correspondientes a (b)

Tubo Concentración Lectura %T

Calcular las ppm en cada tubo de ensayo

PRÁCTICA No. 5 DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE

5.0.2 INFORMACIÓN GENERAL

5.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS

Se pesa entre 20 y 30 mg de cada sustancia (cafeína, fenacetina y ácido

5.0.5 CALCULOS Y RESULTADOS

cafeína paracetamol Ac. acetilsalicílico

PRÁCTICA No. 6 DETERMINACIÓN DE UN METAL POR

6.0.2 INFORMACIÓN GENERAL

6.0.3 MATERIALES Y REACTIVOS