FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA

MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

 -GUIA PRACTICA N° 07-  

MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO

GASTROINTESTINALPROTOZOARIOS INTESTINALES

ESTUDIANTE:

BAUTISTA ACUÑA Lizeth Analy

CICLO:
V

SECCIÓN:
A2P3

DOCENTE
Dr. FLORES SILVA Carlos Augusto
 
 

TRUJILLO
2022
I. INTRODUCCIÓN
El laboratorio es el lugar ideal para llevar a cabo experiencias y
demostraciones que permitan comprender y complementar lo aprendido en
los conocimientos teóricos, sin embargo, es también un sitio que encierra
una serie de riesgos y peligros tanto para el personal, alumnos y docentes,
por lo tanto, es necesario hacer uso adecuado de los materiales de laboratorio
y obedecer las normas de bioseguridad.

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS

MICROORGANISMOS
- Giardia lamblia: conocido también como Giardia intestinalis, o
duodenalis, es un protozoario intestinal que posee flagelos, es la principal
causa de la diarrea endémica, dentro de su población más afectada, se
encuentran dos grupos: niños de 1-9 años y adultos entre 35 a 45 años de
edad, este microorganismo es recurrente en estaciones como verano y
otoño. Es un parásito pequeño, porque mide entre 10 a 12 um de largo,
consta de dos etapas en su ciclo vital: la etapa infecciosa causado por
quistes y el trofozoíto móvil.
El quiste, es liso, ovalado, de pared delgada, mide 8 – 12 um de longitud,
contiene 4 núcleos, cada quiste da lugar a dos trofozoítos, en una muestra
en fresco se observa la doble pared de la membrana quística, su cápsula
externa es muy rígida, se encarga de proteger al protozoario frente a
situaciones de deshidratación, temperaturas extremas o cloración, los
quistes tienen la capacidad de sobrevivir a la temperatura ambiente asi
también como en el agua fría por varios días o semanas. La ingestión de
10 o 25 quistes pueden causar una infección.
La etapa de trofozoíto, se caracteriza por poseer una morfología
piriforme, mide entre 10 a 20 um, contiene un par de núcleos, el
citoesqueleto está compuesto por microtúbulos y axóstilo, en su cara
ventral se halla dos discos suctores compuestos por tubulina y giardia
que sirve para la adhesión epitelial y para su movilidad consta de cuatro
 pares de flagelos, su reproducción es por fisión binaria. Estos a
diferencia de los quistes no sobreviven al ambiente externo, pero son
resistentes al ácido gástrico. Su hábitat es la porción proximal del
intestino delgado (el duodeno) donde se fijan a los enterocitos.
- Isospora belli. Son quistes que miden entre 20 a 30 um del longitud,
contienen esporoquistes que son acidorresistentes, requieres un
esporulación fuera del humano antes de volverse infeccioso, su
distribución más común son en zonas tropicales, es una causa poco
común para diarrea en niños de países desarrollados. Las infecciones
causadas por Isospora belli originan una enfermedad diarreica
autolimitada, en pacientes inmunocompetentes se presenta la diarrea
acuosa y dolor abdominal, dura 2 a 4 semanas, y en pacientes
inmunodeficientes puede causar una enfermedad prolongada
acompañada de mala absorción, pérdida de peso y diarrea prolongada. Se
sospecha de un caso de Isospora belli si la diarrea dura más de 7 días,
especialmente después de viajes a zonas tropicales. La infección se
asocia con eosinofilia periférica y cristales de Charcot-Leyden en heces,
para el diagnóstico se basa en identificar quistes grandes y ovalados en
muestras fecales concentradas con tinción acidorresistentes.
- Entamoeba coli: es un parásito comensal cuyo hábitat es el intestino
grueso del ser humano, casi siempre su presencia a estado asociado a la
E. coli. El trofozoíto mide entre 15 a 50 um, su movimiento es escaso,
posee seudópodos cortos y no hialinos, su ectoplasma y endoplasma no
se encuentran bien diferenciados, presenta un núcleo que se aprecia su
cariosoma irregular, no compacto, de gran tamaño y excéntrico al ser
teñido. El quiste de entamoeba coli mide entre 12 a 15 um,es de
morfología esférica, su núcleo de divide hasta tres veces, al final de esta
división resulta con 8 núcleos, en su citoplasma se aprecian espículas o
cromátides.
Su patogénesis consiste por vía ano-boca, es decir, la transmisión en
forma de quiste tras ingerir alimentos contaminados. Este
microorganismo no produce síntomas. Para su diagnóstico se realiza un
análisis directo de heces, métodos de concentración o tinciones como la
tricrómica o hematoxilina férrica.
 - Hymenolepis nana: es el cestodo más común en humanos, mide entre
15 a 40 mm y posee escólex, cuello y estróbilo. Las proglótides, se
desprenden se desintegran en el lumen del intestino, se elimina los
huevos con las heces y pueden causar una autoinfección interna. La
característica particular en los huevos es que contienen una oncosfera
con seis ganchos y se rodea por una membrana de los cuales emergen 4 a
8 filamentos.
Este cestodo al igual que todos, requiere dos tipos de hospederos: los
dípteros que son los intermediarios en el que se puede desarrollar la larva
después de la ingestión de los huevos y el huésped definitivo, los
humanos o ratones, que en el intestino delgado se desarrolla el cestodo
adulto. La infección por Hymenolepis nana puede tener impacto
epidemiológico, se puede transmitir de manera directa y por
autoinfección tras ingestión de alimentos contaminados por heces
humanas. Sus manifestaciones clínicas van a depender del número de
parásitos y el estado de salud del individuo. La infección es más
recurrente en niños, puede llegar a producir anorexia, dolor abdominal,
comezón alrededor del ano, irritabilidad y diarrea.
Este cestodo se diagnostica mediante una observación microscópica de
huevos o proglótides en las heces para identificar la presencia de huevos.

DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO
El diagnostico parasitológico tiene como objetivo asociar la enfermedad
expresada con la presencia del parásito. Para ello es necesario contar con
una muestra ya sea de heces, contenido duodenal, esputo o sangre, su
procesamiento se dará por métodos directos o indirectos.
Los métodos directos son aquellos que ponen en evidencia al agente
patógeno o ya sea sus formas evolutivas. Este método se subdivide en:
Simple: se trata de un examen sin enriquecimiento previo, la observación
microscópica se da a partir de material fresco en con solución salina y
Lugol. Técnicas de concentración: se aplica en casos de baja carga
parasitaria, dentro de ello se encuentra la técnica de Willis, Faust,
Ritchie, Baerman, Kato Katz. Las técnicas de coloración o llamadas
también técnicas especiales como la Ziehl Neelsen para coccidios, el
 tricrómico de Weber para microsporidios y Hematoxilina férrica para la
E, histolytica. La técnica de isoenzimas para la detección de patrones
electroforéticos característicos de enzimas, este método sirve para
diferenciar la E. histolytica de la E. dispar. La detección de antígenos se
trata de ensayos inmunocromatográficos. El PCR para la amplificación
de secuencia de ADNr.
Los métodos indirectos sirven para la detección de anticuerpos
específicos, como: el método de aglutinación, IFI, ELISA, Western Blot.

III. DESARROLLO DE PRÁCTICA:

1. MÉTODO DIRECTO: se usa la solución salina y Lugol
Se tiene la lámina portaobjeto, se agrega una gota de solución salina,
luego se agrega una muestra mínima de materia fecal para su posterior
observación.
2. MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN:
Por flotación: las soluciones que tienen mayor densidad, flotan en la
superficie de la solución, se toma la muestra con ayuda de una pipeta.
- M. Willis: o solución salina saturada. Se coloca una parte
de la muestra filtrada al fondo de un vaso, se le agrega
agua hasta el borde sobre el vaso se coloca el portaobjeto,
se retira y se lleva al microscopio para observar los
microorganismos adheridos a la lámina.
- M. Faust: se utiliza la solución saturada de zinc.
Por sedimentación:
- M. Baermann modificado en copa: se utiliza para obtener
las formas móviles de los parásitos, pero también se
obtienen quistes o huevos. El método consiste en colocar
una muestra de heces en un colador con gasa, se deja
reposar por una hora, las formas móviles descienden y se
toma con una pipeta.
- Coloración de Kunyoun o Ziehl Neelsen: es la coloración
acidorresistente para identificar quistes de
Cryptosporidium y Cyclospora
IV. GRÁFICOS:

V. El laboratorio es el lugar ideal para llevar a cabo experiencias y demostraciones

VI.
VII. comprender y
VIII. complementar lo aprendido en los conocimientos teóricos sin embargo es
también
IX.
X. un sitio que encierra una serie de
XI. riesgos y peligros tanto para el personal, los alumnos y
XII.
XIII. los docentes por lo tanto es necesario que aprendamos la manera
XIV. correcta de cómo desarrollar
XV.
XVI. nuestro trabajo a través de la comprensión y aplicación correcta de las
normas de
XVII. bioseguridad
XVIII.
XIX. así como del uso adecuado de los materiales y equipos propios de un
laboratorio.
XX.
XXI. El trabajo en el Laboratorio requiere por lo tanto de la observación y
aplicación de una serie de
XXII.
XXIII. normas de seguridad que
XXIV. eviten posibles accidentes debido al desconocimiento de lo que se está
XXV.
XXVI. haciendo o a una posible negligencia de los alumnos
XXVII. que estén en un momento dado, trabajando
XXVIII.
XXIX. en el Laboratori
ENTAMOEBA COLI: La morfología del quiste en estado maduro posee 8
núcleos, mide entre 12-15 um, posee cuerpos cromatoidales con puntas
filosas en forma de bastón y una vacuola de glucógeno

HYMENOLEPIS NANA: cestodo más pequeño que parasita el intestino

humano, mide entre 30 a 40 mm de longitud por 1 mm de ancho. Tiene
aspecto amarillento, cuenta con una membrana externa y una membrana
interna, esta a su vez muestra dos engrosamientos polares de donde se
desprenden 4 -8 filamentos polares
 GIARDIA LAMBLIA: los quiste de giardia lamblia miden entre 8 – 12 um
tiene aspecto liso, ovalado y de pared delgada, posee 4 núcleos y
filamentos, es la forma infectante del parásito. Sobrevive al ambiente
externo

ISOSPORA BELLI: son ovalados, mide entre 20 a 30 um de longitud,

contienen esporoquistes que son acidorresistentes

V. CONCLUSIONES

 La isospora belli se relaciona con la Cyclospora, su patogenia,

anatomía patológica e inmunología son similares, sin embargo, la
Isospora si puede invadir más allá del epitelio y llega hasta la
lámina propia
 En Giardia lamblia, el trofozoíto es susceptible al ambiente
externo, no puede sobrevivir, pero puede tolerar el ácido gástrico.
 En cuanto al quiste, es la forma infectante del parásito y sí
sobrevive al ambiente externo
 La Hymenolepis nana es un cestodo cosmopolita, común en
humanos, frecuente en climas cálidos y templados.
 La entamoeba coli se relaciona con la entamoeba histolytica, sin
embargo, no produce disentería o amebiasis hepática.
 El diagnóstico de parasitosis se emplea con el fin de identificar
pacientes con infección parasitaria sistémica tisular o
extraintestinal. Sin embargo, se hallan ciertas limitaciones como
el no establecer una medida cuantitativa de la carga parasitaria, la
medida de respuesta inmune no es correlacional a la carga
parasitaria, la sensibilidad y especificidad varían de acuerdo al
método utilizado.
 Se puede confirmar una infección si la etapa en la que se
encuentra el patógeno es diagnosticada, se identifica la carga
parasitaria o características de respuesta inmune ante el
microorganismo, una adecuada toma y procesamiento de muestra,
además de una elección correcta de las pruebas diagnosticas

IV. REFERENCIAS:
1. Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiologia Médica. 9ª
ed. Filadelfia: Elsevier Health Sciences; 2021.

2. Archipia. Shigella spp. [Internet]. Achipia.gob.cl. 2018 [citado el 9 de

octubre de 2022]. Disponible en: https://www.achipia.gob.cl/wp-
content/uploads/2018/11/Ficha-Peligro-09-Shigella-spp-v01.pdf
3. Calva E. Salmonella typhi y la fiebre tifoidea: de la biología molecular a
la salud pública [Internet]. Biblioweb.tic.unam.mx. [citado el 9 de
octubre de 2022]. Disponible en:
http://www.biblioweb.tic.unam.mx/libros/microbios/Cap4
4. Gil M. Agar Salmonella-Shigella: qué es, fundamento, preparación, usos
[Internet]. Lifeder. 2018 [citado el 10 de octubre de 2022]. Disponible
en: https://www.lifeder.com/agar-salmonella-shigella/
5. Gil M. Agar MacConkey: fundamento, preparación y usos [Internet].
Lifeder. 2018 [citado el 10 de octubre de 2022]. Disponible en:
https://www.lifeder.com/agar-macconkey/
6. Gil M. Agar XLD: fundamento, preparación y usos [Internet]. Lifeder.
2018 [citado el 10 de octubre de 2022]. Disponible en:
https://www.lifeder.com/agar-xld/
7. Cercenado E. Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de
microbiología [Internet]. www.seimc.org. 2010 [citado el 10 de octubre
de 2022]. Disponible en:
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimiento
smicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia37.pdf